亞硝酸鹽廣泛存在于人們的日常生活中,由于亞硝酸鹽可以作為食物的發(fā)色劑,因此在加工食物中經(jīng)常使用。隨著人們對身體健康和生活品質(zhì)的重視程度越來越高,亞硝酸鹽已經(jīng)成為人們?nèi)粘I钪凶顬殛P(guān)注的物質(zhì)之一??茖W(xué)研究表明,0.3-0.5g的亞硝酸鹽含量便可使人體中毒,3g的亞硝酸鹽便可致人死亡。世界衛(wèi)生組織公布的致癌物質(zhì)清單中,亞硝酸鹽便位列其中?,F(xiàn)如今,亞硝酸鹽作為食品添加劑被廣泛應(yīng)用于加工食品中,因此,對食品中的亞硝酸鹽含量進(jìn)行測定便顯得非常重要。
目前,國家已經(jīng)制定了各類食品中亞硝酸鹽的檢測標(biāo)準(zhǔn)(如GB5009.33-2016),但是在實際使用過程中仍然存在許多可以優(yōu)化的地方。為了進(jìn)一步規(guī)范測定方法,同時提升亞硝酸鹽的測定效率,本文對肉制品中亞硝酸鹽的含量測定方法進(jìn)行了優(yōu)化研究,探討了亞硝酸鹽檢測方法的優(yōu)化方式。
一、實驗方法
1.實驗材料。實驗過程中,需要的材料為比較具有代表性的熟食火腿腸?;鹜饶c這種食品的均一性較好,因此作為實驗材料,可以有效地保證實驗結(jié)果。
實驗中所采用的儀器為島津紫外分光光度計UV1800,以及其他計算機(jī)軟件,所使用的試劑級別為AR級,實驗過程中使用的蒸餾水為三級。
2.實驗樣品的處理。為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,本實驗首先對實驗樣品進(jìn)行預(yù)處理。對樣品采用四分法的方式進(jìn)行取樣,將樣品用搗碎機(jī)搗碎后采用萬分之一天平進(jìn)行稱量,稱量完成后對其進(jìn)行均勻取樣,取樣樣品放置于容積為250mL的錐形瓶中。
實驗過程中的分析方法和變量控制均采用國家標(biāo)準(zhǔn)GB5009.33-2016中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求,對樣品中的亞硝酸鹽進(jìn)行提取。
3.實驗步驟和結(jié)果分析。分別吸取0、0.1、0.5、1、1.5、2mL的硝酸鈉溶液,將其置于50mL的比色管中。取4g/L的氨基苯磺酸溶液2mL,置于標(biāo)準(zhǔn)管中,將兩者混合均勻后放置5min。然后分別向其中加入1mL的鹽酸萘乙二胺溶液,另外加入蒸餾水至要求的刻度,將其混合均勻,隨后放置15min。最后采用1cm的比色皿儀器,以零管對其進(jìn)行零點的調(diào)整,將其放置在538nm的波長處進(jìn)行吸光測定,然后繪制曲線,并將其和標(biāo)準(zhǔn)的曲線進(jìn)行比對。
實驗完成后,根據(jù)實驗結(jié)果繪制回歸方程,以進(jìn)樣量X作為自變量,吸光度Y作為因變量,利用實驗結(jié)果進(jìn)行回歸計算,得到最終的回歸方程。經(jīng)回歸結(jié)果可知,本實驗回歸方程如下所示:
Y=0.01450X+0.00077
其中,回歸方程的相關(guān)系數(shù)為0.99。
二、變量的控制
本文為了優(yōu)化亞硝酸鹽含量的測定方法,對樣品的質(zhì)量、沸水浴的時間、沉淀時間、顯色劑反應(yīng)時間進(jìn)行變量控制研究。
1.樣品質(zhì)量控制。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB5009.33-2016中的相關(guān)要求,對樣品的質(zhì)量進(jìn)行改變,選取質(zhì)量為2.5g四類,實驗樣品分為四組,同時選擇5g的實驗樣品也分四組,進(jìn)行對比實驗分析。實驗結(jié)果如表1所示。實驗研究表明,在實驗樣品質(zhì)量降低一半的情況下,最終所得到的實驗結(jié)果數(shù)值較高。出現(xiàn)此種現(xiàn)象的原因是火腿腸樣品在處理過程中,因為打樣樣品會聚集成塊狀,若提取時間不充分就會產(chǎn)生偏差。所以在對火腿腸的質(zhì)量進(jìn)行減半后,更容易對硝酸鹽進(jìn)行提取。
2.沸水浴時間控制。仍然采用控制變量法,對沸水浴的時間進(jìn)行控制。對提取過程中所采用的沸水浴時間對亞硝酸鹽進(jìn)行提取,提取過程中所采用的沸水浴時間分別間隔5分鐘,時間分別為10、15、20、25、30min。結(jié)果顯示,亞硝酸鹽的測定每千克含量分別為1.58、1.59、1.9、2.01、2.04mg。同時,隨著沸水浴的時間不斷增加,亞硝酸鹽的提取含量呈現(xiàn)遞增的方式。因此,在使用過程中,采用25min的沸水浴時間更能夠提高亞硝酸鹽的提取效率。
3.沉淀時間控制。蛋白質(zhì)的沉淀時間也是影響亞硝酸鹽測定的一個變量,因此,本實驗也對蛋白質(zhì)的沉淀時間進(jìn)行控制。選擇了編號為7號的樣品進(jìn)行實驗過程中蛋白質(zhì)沉淀時間的控制,進(jìn)行亞硝酸鹽的提取。蛋白質(zhì)的沉淀時間分別選擇30、80、120、240min,經(jīng)實驗測定,每千克食品中亞硝酸鹽的含量分別為1.58、1.67、2.01、2.06mg。根據(jù)實驗結(jié)果可知,隨著蛋白質(zhì)沉淀時間的增加,亞硝酸鹽的提取量明顯增加,分析原因可能是樣品沉淀充分后,在加入沉淀試劑以后會使得樣品的均一性變得比較差,隨著時間的增加,亞硝酸鹽才可以被充分地分離出來。
4.顯色劑反應(yīng)時間控制。顯色劑反應(yīng)時間也是影響亞硝酸鹽含量的主要因素之一。完成樣品的制備后,靜置時間分別為10、15、20、30、60min,隨后進(jìn)行上機(jī)實驗,檢測其含量。經(jīng)實驗測定,每千克食品中,亞硝酸鹽含量分別為1.57、1.58、1.60、1.61、1.63mg。經(jīng)過1小時以后,儀器所吸收的光的數(shù)值未再發(fā)生顯著變化,比較穩(wěn)定。因此,在實驗過程中,顯色時間控制在1h便可有效控制顯色劑對實驗因素的影響。
三、結(jié)論
亞硝酸鹽是現(xiàn)如今影響人體身體健康的主要因素之一,國家從戰(zhàn)略層面對亞硝酸鹽的測定方法進(jìn)行了界定。本文以火腿腸為研究對象,對肉制品中的亞硝酸鹽含量測定方法進(jìn)行了研究,根據(jù)實驗結(jié)果可知,在樣品的均一性比較好的條件下,可以對樣品的質(zhì)量進(jìn)行適當(dāng)降低,并且延長沸水浴(時間建議為25min)。另外,在沸水浴過程中應(yīng)該對樣品采取完全攪拌的方法,規(guī)避樣品發(fā)生結(jié)塊現(xiàn)象而影響實驗結(jié)果。在加入沉淀劑以后,應(yīng)該進(jìn)行均勻震蕩,延長其沉淀的時間(時間建議為2h)。通過以上方法,可以有效提升肉食品中亞硝酸鹽含量的測定效率。
作者簡介:陳友軍(1977-),女,??疲こ處?,研究方向為食品檢驗。