茶葉中聯(lián)苯菊酯方法簡化及簡化后中控樣的濃度回收對比

張利娟 張敏娟 何沖 李媛

摘 要：用氣相色譜測定茶葉中的聯(lián)苯菊酯，該目標化合物用有機溶劑乙腈提取，通過濃縮并凈化得到最終的樣液用1 mL丙酮定容。配制0.05～0.60 ?g/mL一系列濃度梯度，并繪制標準曲線進行測定，用電子俘獲檢測器（ECD）、石英毛細管柱、單檢測器單進樣口來分析處理，鎖定保留時間，外標法定量。

關鍵詞：氣相色譜ECD檢測器;聯(lián)苯菊酯;乙腈;茶葉質控樣

茶葉在我國已有悠久的文化歷史，是我國大眾化的飲品之一[1]。茶葉具有抗癌、清除自由基、防突變、延緩衰老等功效，因而被越來越多的非產茶國家的消費者所接受，成為我國重要出口的經濟作物。但是，茶尺蠖、小綠葉蟬、茶絞象甲等蟲害以及茶餅病、茶樹炭疽病、茶云紋葉枯病等病害對茶葉的危害使得化學農藥在茶園中廣泛使用，成為茶葉質量安全關注的焦點。那么如何利用有效的資源提高工作效率、嚴格控制茶葉中農藥殘留限量標準、滿足茶葉全國各地市場的要求，是農藥殘留檢測人員面臨的共同問題。因此，研究茶葉中多種農藥殘留的分析方法有著極大的應用價值[2]。

常見的農藥殘留包括有機磷農藥、有機氯農藥、氨基甲酸酯類農藥等。其中，有機氯類農藥因其殺蟲效果顯著曾被廣泛使用，具有化學性穩(wěn)定、容易在活物體中儲存、難分解、在環(huán)境中殘留衰減期長等特點，對環(huán)境污染嚴重[3]。

在種植茶葉過程中，有機氯聯(lián)苯菊酯是常用的農藥之一。在國家標準《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）中聯(lián)苯菊酯的最大殘留量為5 mg/kg，是允許有殘留的農藥之一[4-5]。

通常實驗室在做茶葉農殘檢測時用的都是氣相色譜質譜聯(lián)用儀（GC-MS）或者是液質聯(lián)用儀（LC-MS），質譜主要定性效果好，而氣相色譜定量較準確。茶葉農殘檢測通常根據《茶葉中519種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法》（GB/T 23204—2008）進行前處理，但是GB/T 23204—2008中前處理步驟相當煩瑣，耗費大量的時間和試劑耗材，回收率也不是很穩(wěn)定，本文針對此方法進行優(yōu)化，結果發(fā)現(xiàn)，試驗數據相當穩(wěn)定，且回收率高。

1 材料與方法

1.1 材料試劑

乙腈、丙酮、氯化鈉、0.2 ?m濾膜、有機溶劑膜、15 mL鋁盒、標準物質（農業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所）。茶葉中的聯(lián)苯菊酯質控樣品，約50 g;茶葉中的聯(lián)苯菊酯質控樣品，約100 g;茶葉中的聯(lián)苯菊酯質控樣品，約50 g。3份質控樣編號均為QC-TE-702，且均由中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心提供，編號相同，但數據有所不同。試樣于陰涼干燥處保存。

1.2 儀器設備

安捷倫氣相色譜儀-7890A，帶有電子捕獲器（ECD）檢測器;渦旋混勻器;AHWY-3.4振蕩器;DetelogyFV64氮吹儀;KQ-500W-E型超聲波清洗器;50 mL塑料離心管。

1.3 試驗方法

1.3.1 標液配制

將聯(lián)苯菊酯標液溶液用丙酮稀釋成10 ?g/mL的儲備液，儲備液于-18 ℃保存，使用時根據相應的濃度配制，準確吸取適量的標準儲備液，再用丙酮配制成所需的標準工作液。

1.3.2 樣品處理方法

（1）提取。準確稱取5 g試樣于50 mL離心管中，再加入30 mL乙腈，高速渦旋機混勻，振蕩30 min，超聲提取30 min，取出5 000 r/min離心5 min;于另外一離心管中加入5～7 g NaCl，將上清液過濾于含有氯化鈉的離心管中;蓋上蓋靜置10 min等待水相和有機相分層，待凈化。

（2）凈化。取10 mL上層乙腈層上清液溶液，放入氮吹管中，將氮吹管放入40 ℃氮吹儀中，氮吹至近干;取出至室溫冷卻，用1 mL丙酮復溶氮吹管中殘渣，混勻;0.2 ?m濾膜過濾再裝入樣品瓶中，用氣相色譜儀進行檢測。

1.3.3 色譜條件

HP-5石英毛細管（30 m×0.25 mm×0.25 ?m）;色譜程序升溫條件：初始溫度90 ℃，然后以40 ℃/min程序升溫至170 ℃，再以24 ℃/min升溫至230 ℃保持2 min;加熱器溫度：300 ℃;進樣口溫度：250 ℃;流量：1.2 mL/min;恒定流量模式;尾吹：60 mL/min;進樣方式：不分流;載體：氮氣。

2 結果與分析

2.1 標準曲線、線性范圍及方法回收率

將已經配制好的標準儲備液用丙酮溶劑分別稀釋成0.05 ?g/mL、0.10 ?g/mL、0.20 ?g/mL、0.40 ?g/mL和0.60 ?g/mL，按提前設定好的色譜條件進行上機測定。以響應值為縱坐標、標液的濃度為橫坐標繪制標準曲線，結果顯示聯(lián)苯菊酯在0.05～0.60 ?g/mL范圍內線性較好，相關系數r2為0.998，線性回歸方程見表1。

3組樣品數據分別做3組平行樣數據比較。特征值與檢測值的折算為該質控樣品的回收率見表2。在茶葉中聯(lián)苯菊酯質控樣品（QC-TE-702）的特征值分別是1.129 mg/kg，特性值區(qū)間0.825～1.433 mg/kg;0.122 0 mg/kg的特性值區(qū)間0.085 4～0.152 5 mg/kg;1.544 mg/kg特性值區(qū)間1.084～2.004 mg/kg，1.129 mg/kg質控樣回收率在80.5%～87.1%;0.122 0 mg/kg質控樣的回收率在95.2%～105.7%，1.544 mg/kg含量的質控樣回收率在85.9%～95.2%。

通過以上幾個質控樣品用本方法做出來的數據及回收率都在相應的范圍內，且特征值較小的質控回收很好，特征值比較大的兩個回收回收相對沒有數值小的回收率高，但是也在正常的范圍內，由此可看，此方法在做數據小的范圍效果比較，大數值需要將稱樣量減小、稀釋體積加大效果較好。

本文實驗建立了氣相色譜-電子捕獲器（ECD）檢測茶葉中聯(lián)苯菊酯農藥殘留的檢驗方法，該方法操作簡便、快捷、準確、回收率高，可以很好的用于茶葉中有機氯農藥殘留的測定。

參考文獻

[1]陳紅平，劉新，汪慶華，等.氣相色譜-串聯(lián)質譜法測定茶葉中88種農藥殘留量[J].色譜，2011，29（5）：409-416.

[2]李軍明，鐘讀波，王亞琴，等.在線凝膠滲透色譜-氣相色譜/質譜法檢測茶葉中的153種農藥殘留[J].色譜，2010，28（9）：840-848.

[3]肖林霞，辛新，丁環(huán)，等.氣相色譜法測定花生中六六六、滴滴涕、乙草胺和毒死蜱殘留[J].分析試驗室，2020，39（4）：454-458.

[4]寸宇智，陳宏鍇，梁恒.茶葉中農藥殘留聯(lián)苯菊酯的GC-ECD及GC-MS測定[J].云南化工，2014，41（6）：47-51.

[5]樊瑋，湯鋒，岳永德.高效薄層色譜法分析茶葉中高效氯氟氰菊酯和聯(lián)苯菊酯農藥殘留[J].分析儀器，2010（2）：36-39.