張勇,胡文靜,張春梅,蔣正寧,呂國峰,高德榮*
1.江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,農(nóng)業(yè)部長江中下游小麥生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 揚(yáng)州225007;
2.揚(yáng)州大學(xué)江蘇省糧食作物現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇省植物功能基因組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 揚(yáng)州225009
小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌等引起的世界性病害,不僅造成嚴(yán)重的糧食減產(chǎn),而且發(fā)病后產(chǎn)生的DON等赤霉毒素嚴(yán)重危害人類健康[1-2]。長江中下游麥區(qū)和黃淮麥區(qū)分別是赤霉病重發(fā)區(qū)和常發(fā)區(qū),2001—2010年平均發(fā)病面積為6 000萬畝,2011—2018年上升至8 000萬畝,多數(shù)地區(qū)赤霉毒素含量超過國家限量,嚴(yán)重影響我國糧食和食品安全[3-6]。到目前為止,赤霉病仍然是可防不可治,一旦發(fā)病不能控制,只能采取預(yù)防措施。因赤霉病發(fā)生受氣象條件等影響,發(fā)病程度準(zhǔn)確預(yù)報難度較大,因此無論發(fā)病與否,一般都要防治1~2次[5],也造成了不必要的浪費(fèi)和環(huán)境污染,與綠色生產(chǎn)要求相悖,而且高感品種在重發(fā)年份即使藥劑防治也難以奏效。因此,選育和推廣抗病品種是解決赤霉病問題最經(jīng)濟(jì)高效的途徑[6]。
我國最早開展抗赤霉病遺傳改良工作,20世紀(jì)70年代育成了高抗赤霉病品種蘇麥3號,20世紀(jì)80年代,我國小麥赤霉病研究協(xié)作組鑒定了3萬多份材料,篩選出中抗以上材料1 000多份,但只有蘇麥3號、望水白等極少數(shù)材料穩(wěn)定達(dá)高抗水平[6-7]。20世紀(jì)90年代后,以揚(yáng)麥158為代表的揚(yáng)麥、寧麥系列中抗赤霉病品種的育成和大面積推廣有效控制了長江中下游麥區(qū)赤霉病危害,使我國抗赤霉病育種處于國際領(lǐng)先水平[8-9]。但由于赤霉病抗性機(jī)制復(fù)雜,培育高抗高產(chǎn)品種仍然極其困難[6]。此前赤霉病在黃淮等主產(chǎn)區(qū)為偶發(fā)病害,未列為小麥主要育種目標(biāo),因此絕大多數(shù)品種為高感。隨著赤霉病向黃淮麥區(qū)的不斷擴(kuò)展,抗赤霉病育種得到重視?!笆濉逼陂g,國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)、國家小麥產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系等設(shè)置了小麥赤霉病綜合防控技術(shù)集成與生產(chǎn)模式示范以及在黃淮麥區(qū)設(shè)立了抗赤霉病大區(qū)試驗(yàn)組別,國家七大作物育種專項(xiàng)及各省重大育種專項(xiàng)明確了抗赤霉病育種相關(guān)專項(xiàng),進(jìn)一步推動了我國抗赤霉病遺傳改良研究。通過對國家區(qū)試和國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)相關(guān)試驗(yàn)中我國主要育種單位提供的新品系和“十三五”期間國家審定及主要省份審定品種的赤霉病抗性鑒定結(jié)果綜合分析,可以客觀反映我國抗赤霉病育種取得的最新進(jìn)展、品系群體抗性基礎(chǔ)和后續(xù)發(fā)展?jié)摿Α?/p>
對2017—2020年國家區(qū)域試驗(yàn)1 777份/次參試品系4年度揚(yáng)州點(diǎn)赤霉病抗性鑒定結(jié)果分析表明(表1),R級品系比例為2.50%~3.93%,雖然總體占比極低,但在參試品系總數(shù)逐年增加的基礎(chǔ)上,保持著緩慢增加趨勢。MR級品系比例為19.26%~35.76%,2018、2019年度中抗品系絕對數(shù)量與2017年相比波動不大,但由于參試品系數(shù)大幅度增加,因此比例呈下降趨勢;2020年中抗品系數(shù)量明顯增加,中抗以上品系比例恢復(fù)并超越2017年水平(圖1),一方面是因?yàn)樘厥鈿夂驅(qū)е?020年抗性鑒定整體偏輕,另一方面也說明各單位近幾年加大了新品系赤霉病抗性的篩選力度,參試品系抗性總體水平有所提升。小麥赤霉病當(dāng)年抗性鑒定結(jié)果為下年度審定品種提供了抗性參考數(shù)據(jù),表1右側(cè)數(shù)據(jù)為2018—2021年國審品種不同抗性類型分類匯總,可以發(fā)現(xiàn),隨著對赤霉病育種的重視,中抗品種數(shù)量緩慢上升,但是所占比例仍然偏低(6.56%~12.68%),與中抗以上參試新品系占比22.57%~39.69%相比,仍有許多抗性較好的品系由于綜合豐產(chǎn)性等因素未能達(dá)到品種審定的標(biāo)準(zhǔn);高感品種比例呈現(xiàn)出緩慢下降趨勢,但仍占70%以上(72.54%~77.78%),說明我國審定品種的總體抗性水平仍有巨大的提升空間(圖2)。
表1 國家區(qū)試品系及通過審定品種抗赤霉病性分類匯總(2017—2021年)Table 1 Summary of National Regional Test lines and National approved varieties according to the resistance to FHB(2017—2021)
國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)抗赤霉病指定鑒定單位江蘇里下河地區(qū)農(nóng)科所(主要負(fù)責(zé)長江上游和中下游麥區(qū))和南陽市農(nóng)科院(主要負(fù)責(zé)黃淮麥區(qū)等)分別對參試新品系進(jìn)行了多年篩選鑒定。2017—2020年共鑒定參試品(種)系932份/次,其中高抗赤霉病品系7份/次,占參試品系0.75%;中抗赤霉病品系163份/次,占參試品系17.49%;中感品系201份/次,占參試品系21.57%;高感品系561份/次,占參試品系60.19%(表2)。對不同抗性類型品(種)系所屬麥區(qū)分析表明,R級品(種)系全部來自長江中下游麥區(qū),52.15%的MR級品系來自長江中下游麥區(qū);93.76%的S級品系來自黃淮南片和黃淮北片(圖3)。張煜等[10]鑒定結(jié)果表明,康F、西農(nóng)511、陜墾10號、安農(nóng)1581、財(cái)源2號、華齊麥5號、輪選33、廬麥2號和WK1602等9個品種(系)表現(xiàn)為中抗赤霉病。2020年召開的國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)鑒評中推薦了包括黃淮麥區(qū)的安科1801、安農(nóng)1589、WK1602、皖宿0891、紫麥19、康F、徐農(nóng)029、秦農(nóng)578和西農(nóng)511等赤霉病抗性較好的品種,而長江中下游麥區(qū)的揚(yáng)16-157是唯一多點(diǎn)鑒定均達(dá)R級的新品系。
表2 國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)不同試驗(yàn)組別參試品系赤霉病抗性匯總(揚(yáng)州、南陽,2017—2020)Table 2 Summary of FHB resistance in different test groups of National Joint Tackling of improved wheat varieties(Yangzhou and Nanyang,2017—2020)
鐘光躍等[11]曾對2009—2020年國審小麥品種根據(jù)赤霉病抗性進(jìn)行了分類,在360個品種中,只有1個達(dá)到R級(生選6號,未大面積應(yīng)用),27個達(dá)到MR級,中抗以上比例僅占8.05%,其中22個來自江蘇??;感病品種占比達(dá)91.95%(其中MS級69個,占19.17%;S級262個,占72.78%);其從不同年度間抗赤霉病品種所占比例分析認(rèn)為,10余年間抗赤霉病育種并未取得顯著進(jìn)步。2021年6月農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布第432號公告,154個新品種通過國家品種審定,其中赤霉病R級品種1個,MR級品種18個,中抗以上品種占比達(dá)到了12.33%,較前幾年有明顯提高,而揚(yáng)麥33時隔10年之后成為唯一通過國家審定的高抗品種。
對“十三五”期間通過國家審定和江蘇、河南等省級審新品種赤霉病抗性分類比較(表3),長江中下游麥區(qū)中抗以上品種占本麥區(qū)審定品種數(shù)的62.96%,占該類型國審品種數(shù)的94.44%;黃淮麥區(qū)以高感品種為主,黃淮南片和黃淮北片高感品種分別占該麥區(qū)審定品種的88.51%和93.55%,中感品種分別占11.06%和4.84%,僅有2個達(dá)中抗。在省審品種比較中,江蘇淮南由于實(shí)行中抗赤霉病的審定準(zhǔn)入條件,所以中抗以上品種100%,河南黃淮麥區(qū)高感比例達(dá)到96.10%,中感品種3.41%,僅1個品種達(dá)到中抗。因此“十四五”期間,長江中下游育種目標(biāo)是如何實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)與高抗的持續(xù)突破,而黃淮麥區(qū)則要將如何達(dá)到中抗水平作為努力目標(biāo)。
表3 “十三五”期間不同麥區(qū)品種抗赤霉病性統(tǒng)計(jì)Table 3 Statistics of varieties resistance to FHB in different wheat zone during“the 13th Five-year Plan”period
對2009—2020年28個赤霉病中抗以上的國審品種組合系譜分析表明,由揚(yáng)麥5號或揚(yáng)麥4號衍生的品種有16個,占55.17%,為育成品種的赤霉病抗性提供了穩(wěn)定的抗源[11]。在此基礎(chǔ)上,對2021年通過國家審定的19個赤霉病中抗以上品種的遺傳背景分析結(jié)果進(jìn)一步明確了上述兩個親本的貢獻(xiàn),15個品種中有揚(yáng)麥5號或揚(yáng)麥4號血統(tǒng),占比78.95%,其中大多同時有揚(yáng)麥或?qū)廂湹挠H本參與配組(表4),僅有兩個品種的組合中有黃淮品種血統(tǒng),其余均為長江中下游麥區(qū)的親本,說明在以抗赤霉病為主要目標(biāo)的育種進(jìn)程中,以黃淮主推品種為親本所配的組合難以保留下來。胡文靜等[12]從揚(yáng)麥16中挖掘到了抗赤霉病位點(diǎn)QFhb.yaas-2DL、QFhb.yaas-3BL、QFhb.yaas-4DS和QFhb.yaas-6AS,表型貢獻(xiàn)率為8.8%~15.0%。呂國鋒等[13]對長江中下游麥區(qū)49個新品種(系)抗赤霉病基因檢測結(jié)果表明:36個品種攜有QFhs.crc-2D位點(diǎn),其中揚(yáng)麥158(揚(yáng)麥4號衍生品種)或揚(yáng)麥5號衍生系有32個;15個品種攜有Fhb1基因,其中12個為寧麥9號衍生系。其中3個品種(系)同時攜有QFhs.crc-2D和Fhb1。揚(yáng)麥158和寧麥9號及其衍生品種在抗赤霉病主效基因/位點(diǎn)Fhb1和QFhs.crc-2D組成上存在分離。因此,聚合這兩類品種的主效抗性位點(diǎn)更易取得豐產(chǎn)性和赤霉病抗性協(xié)調(diào)。
表4 2021年中抗以上國審品種及國內(nèi)已審定R級品種匯總Table 4 Summary of new national approved varieties with resistance or moderate resistance to FHB and total approved varieties with high resistance to FHB in China in 2021
黃淮麥區(qū)育種單位近年來加強(qiáng)了抗赤霉病育種的力度。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所利用矮敗周麥16與具有Fhb1基因的品種如生選6號等雜交和回交,利用Fhb1基因的功能標(biāo)記選擇,后代攜帶Fhb1家系整體抗性達(dá)到中感水平[14]。山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院以含有4個抗赤霉病基因(Fhb1、Fhb2、Fhb4和Fhb5)聚合的種質(zhì)NMAS020為抗源與濟(jì)麥22、石H083-366等雜交復(fù)交構(gòu)建的抗赤霉病育種選擇群體,創(chuàng)制和篩選出綜合性狀優(yōu)良且抗赤霉病的小麥新品系濟(jì)麥8681和濟(jì)麥8775,可作為抗病中間材料進(jìn)一步加以利用[15]。周口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院利用本地主栽周麥品種(系)周麥22號、周麥32號、周11550等與抗赤霉病小麥品種寧麥9號、生選6號、揚(yáng)麥21等配置一系列雜交組合,利用抗赤霉病主效基因Fhb1緊密連鎖的診斷性標(biāo)記His-InDel對后代材料進(jìn)行分子檢測,篩選到的陽性后代材料的赤霉病抗性比感病親本有顯著的提升[16]。此外,抗赤霉病育種還得到了政府部門的高度重視,河南省小麥新品種區(qū)試為此專門設(shè)置了小麥抗赤霉病組,并對赤霉病抗性好的品種放寬了產(chǎn)量要求[17]?!笆濉逼陂g黃淮麥區(qū)抗赤霉病育種取得了階段性進(jìn)展,有31個中感以上品種通過國家審定,為黃淮麥區(qū)后續(xù)育種抗性提升奠定了基礎(chǔ)。但通過對中感以上品種系譜分析(表5),發(fā)現(xiàn)其中以淮麥為親本育成的品種約占1/3,暫未見直接利用長江中下游麥區(qū)抗病品種為親本育成的品種,因此長江中下游抗性資源在黃淮麥區(qū)的抗赤霉病育種中的利用有待進(jìn)一步加強(qiáng)。
表5 “十三五”期間黃淮麥區(qū)中感以上國審品種匯總Table 5 Summary of moderate resistant and moderate susceptible varieties to FHB in Huang-huai wheat zone during“the 13th Five-year Plan”period
揚(yáng)麥33(揚(yáng)16-157)是江蘇里下河地區(qū)農(nóng)科所應(yīng)用多基因聚合與分子標(biāo)記育種技術(shù)育成的高抗赤霉病新品種,2021年6月通過國家審定(國審麥20210078)。攜有赤霉病主效抗性基因Fhb1和QFhb-yaas-2DL,以及白粉病主效抗性基因Pm21,國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)試驗(yàn)多點(diǎn)抗赤霉病鑒定結(jié)果均為R級,抗性與蘇麥3號相當(dāng)。在2018—2020年度國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)大區(qū)試驗(yàn)中,20個試點(diǎn)兩年平均比對照揚(yáng)麥20增產(chǎn)5.18%,2019—2020年度生產(chǎn)試驗(yàn)中,平均較對照增產(chǎn)5.74%,居參試品種第1位,增產(chǎn)率100%。實(shí)現(xiàn)了小麥品種赤霉病抗性與豐產(chǎn)性有效結(jié)合,是國內(nèi)外小麥抗赤霉病育種的重大突破。
據(jù)江蘇省植保站2021年5月下旬調(diào)查,今年高郵市小麥赤霉病屬于偏重至大發(fā)生,自然發(fā)病程度重,揚(yáng)麥33在高郵市甘垛鎮(zhèn)帶程村示范種植田間抗性表現(xiàn)優(yōu)異,不防治田塊自然病穗率僅1.59%,病情指數(shù)0.39,自然發(fā)病程度明顯低于中抗品種揚(yáng)麥20不防治田塊的12.89%(病指4.51),及防治二次田塊的3.19%(病指1.02),顯著低于中感品種揚(yáng)麥15防治兩次田塊的35.10%(病指14.84);此外,揚(yáng)麥33對白粉病也具有較好的抗病性,不防治田葉片完整、未見病葉。揚(yáng)麥33的育成和推廣對于促進(jìn)我國小麥綠色高質(zhì)量發(fā)展,保障我國種業(yè)安全和糧食安全具有重要意義。
我國小麥赤霉病相關(guān)基礎(chǔ)研究大多集中在蘇麥3號、望水白、長穗偃麥草、鵝觀草等小麥和野生物種并取得重要進(jìn)展[3,18-20],2016—2020年來自蘇麥3號和長穗偃麥草的抗赤霉病基因Fhb1和Fhb7[21-23]被分別克隆。Fhb1是國際公認(rèn)抗性最好的基因,得到國內(nèi)外廣泛應(yīng)用[3,16,24]。同時,國內(nèi)外也定位了大量的抗赤霉病QTL[3,25]。由于抗病基因和QTL總體效應(yīng)仍然較低,可能與農(nóng)藝性狀存在連鎖累贅,實(shí)現(xiàn)赤霉病抗性和豐產(chǎn)性的結(jié)合非常困難。揚(yáng)麥系列多數(shù)品種沒有Fhb1,但是具有良好的抗性,是我國抗赤霉病重要的材料來源,針對其抗赤霉病基因資源雖已有研究但仍未充分利用[12,26-27]。胡文靜等[27-29]從長江中下游93個改良品種和地方品種篩選出赤霉病抗性與綜合農(nóng)藝性狀結(jié)合較好的品種8個,以揚(yáng)麥品種為主,經(jīng)過分子標(biāo)記檢測表明這些品種多數(shù)不攜有Fhb1,但是攜有其他如QFhs.crc-2DL等抗病位點(diǎn),說明Fhb1不是增強(qiáng)赤霉病抗性的唯一途徑。此外,長江中下游麥區(qū)的其他一些早期品種也有較好的抗性,解析這些品種的抗赤霉病遺傳基礎(chǔ),發(fā)掘優(yōu)異抗病基因,加強(qiáng)這類抗源和抗病基因/位點(diǎn)在育種中的利用,是突破我國抗赤霉病育種難題的重要途徑。
程順和院士曾提出抗赤霉病育種的兩條路線[30],其重點(diǎn)在于充分利用品種間的超親遺傳并基于表型選擇選育出抗赤性與豐產(chǎn)性同步得到提高的品種。揚(yáng)麥系列大多數(shù)品種背景中攜有高粒重、灌漿速率快等優(yōu)異等位變異,長期育種實(shí)踐表明,在揚(yáng)麥品種原有抗性基礎(chǔ)上導(dǎo)入Fhb1,結(jié)合充分的抗性表型和產(chǎn)量鑒定篩選,可以將Fhb1與揚(yáng)麥品種的抗赤霉病和優(yōu)良農(nóng)藝性狀背景結(jié)合,實(shí)現(xiàn)抗赤霉病與產(chǎn)量的同步突破。在以上育種實(shí)踐的基礎(chǔ)上,江蘇里下河地區(qū)農(nóng)科所獲得了一批抗赤霉病的高代品系,“十三五”期間推薦參加省級以上試驗(yàn)新品系20多份,培育中抗以上新品種5個。通過對包括揚(yáng)麥33在內(nèi)的5個高抗品種(表4)系譜分析發(fā)現(xiàn)有3個同時有揚(yáng)麥和寧麥品種的背景,證明該技術(shù)方案的可行性。因此,我們提出通過分子標(biāo)記選擇技術(shù)將Fhb1導(dǎo)入揚(yáng)麥主體品種中,聚合Fhb1和揚(yáng)麥系列品種攜帶的其他優(yōu)異赤霉病抗性基因/位點(diǎn),同時保留揚(yáng)麥優(yōu)良農(nóng)藝性狀,結(jié)合充分的抗性表型和產(chǎn)量鑒定篩選程序,可以實(shí)現(xiàn)長江中下游麥區(qū)品種赤霉病抗性和產(chǎn)量的協(xié)同提高。
隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展,利用高通量分子檢測平臺可以快速地進(jìn)行抗病基因的聚合或累加,提高育種效率。目前已鑒定了7個抗赤霉病基因,為定靶追蹤開展抗赤霉病育種提供了重要支撐[18,22,25]。但由于赤霉病抗性機(jī)制復(fù)雜,已有育種實(shí)踐表明,提高赤霉病抗性決非簡單導(dǎo)入幾個抗性基因就能解決問題,單純依賴上述基因無法根本解決我國小麥赤霉病難題。不同麥區(qū)的相關(guān)研究及育種實(shí)踐表明,育種后代攜帶相同的Fhb1基因其赤霉病抗性存在顯著差異[3,13-14]。張煜等[9]在黃淮麥區(qū)抗赤霉病育種過程中發(fā)現(xiàn),同時含有3個抗性基因的種質(zhì)材料K03562和K03566經(jīng)單小花滴注接種鑒定僅為中感赤霉病,而許多不含抗性基因的材料仍然具有較好的抗性。劉建軍[15]在分子標(biāo)記輔助育種過程中發(fā)現(xiàn)含有1個或幾個抗赤霉病基因/QTL的品系也不一定都表現(xiàn)良好的赤霉病抗性,所以,分子標(biāo)記跟蹤檢測雜交后代只能作為抗赤霉病育種的輔助手段,最終需要田間赤霉病抗性鑒定進(jìn)行抉擇。因此,精準(zhǔn)的表型鑒定必不可少,而且高代品系需要多年多點(diǎn)的重病區(qū)鑒定檢驗(yàn)。由于自然鑒定受氣象條件和小麥花期差異影響較大,抗性評價結(jié)果不精確;人工接種鑒定相對準(zhǔn)確,但用工量大和效率低,難以在育種進(jìn)程中大規(guī)模使用。因此,在不同麥區(qū)構(gòu)建適用于大面積育種的高通量表型鑒定平臺可以為我國抗赤霉病育種集中提供鑒定服務(wù)?!笆濉逼陂g在江蘇揚(yáng)州、河南南陽等已建立的抗赤霉病表型鑒定平臺為國家小麥良種聯(lián)合攻關(guān)和國家區(qū)試等提供了有效的鑒定服務(wù),建設(shè)更多的適合不同麥區(qū)的鑒定設(shè)施或平臺將為我國抗赤霉病遺傳改良提供有力保障。
未來隨著更多的豐產(chǎn)品種中易于育種利用的抗性基因的發(fā)掘和定位,可以通過定向選擇和保留足夠的遺傳變異來克服抗病基因/位點(diǎn)對農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量的負(fù)向效應(yīng);隨著更多攜有來源于長穗偃麥草、纖毛鵝觀草等的抗赤霉病基因的小片段易位系等材料的創(chuàng)制和利用,通過把不同來源的抗性基因轉(zhuǎn)移到各主產(chǎn)區(qū)豐產(chǎn)品種的背景中,再繼續(xù)根據(jù)育種目標(biāo)進(jìn)行雜交等,利用分子標(biāo)記輔助聚合已知常規(guī)抗源中抗赤霉病基因/QTL和外源的抗性基因,結(jié)合表型鑒定篩選,仍然是提高抗性、實(shí)現(xiàn)抗赤霉病育種突破努力的方向之一。此外,通過對感赤霉病基因的發(fā)掘和認(rèn)識的加深,在育種群體中除篩選利用抗性基因外,還可以利用標(biāo)記篩選剔除攜帶感病基因材料實(shí)現(xiàn)抗性提高,而根據(jù)小麥易感赤霉病基因TaHRC、TaRD21A等序列設(shè)計(jì)特異性靶位點(diǎn)序列,利用基因編輯技術(shù)也可能是實(shí)現(xiàn)感病材料提升赤霉病抗性的新途徑。
鑒于國內(nèi)目前眾多單位對抗赤霉病育種的重視、大量的研究投入和已有的不同階段的育種材料基礎(chǔ),通過國家小麥良種重大聯(lián)合攻關(guān)、產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系及全國赤霉病研究優(yōu)勢單位間的協(xié)作,將會重點(diǎn)突破新基因發(fā)掘、高通量鑒定平臺和抗赤霉病育種技術(shù)等瓶頸。通過5~10年的共同努力有望實(shí)現(xiàn):長江中下游麥區(qū)抗性達(dá)R(抗)級品種占20%,MR(中抗)級占80%;黃淮麥區(qū)抗性提高一個等級,MR級占10%,MS(中感)級以上品種占50%,逐漸淘汰S(感病)級品種。