楊寧，盧勉飛，李艷嫦，蔡芷荷,3，吳清平，余錦鑾

（1.廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，廣東廣州 510663）（2.廣東省微生物研究所，廣東廣州 510070）（3.廣東環(huán)凱生物科技有限公司，廣東肇慶 526238）

隨著無(wú)菌冷灌裝生產(chǎn)線逐漸成為中國(guó)飲料行業(yè)的主流生產(chǎn)工藝[1-9]，如何確保冷灌裝生產(chǎn)線無(wú)菌，對(duì)于飲料生產(chǎn)是一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)。不單是飲料還有藥品，為確保無(wú)菌生產(chǎn)工藝系統(tǒng)中無(wú)菌的可靠性和適應(yīng)性，國(guó)內(nèi)法規(guī)及指導(dǎo)文件均要求通過(guò)一定的驗(yàn)證方法對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證[10-12]。多數(shù)企業(yè)采用培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)來(lái)證明其無(wú)菌工藝的可靠性[13-16]。培養(yǎng)基灌裝又稱無(wú)菌培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)，是采用微生物培養(yǎng)基替代產(chǎn)品對(duì)無(wú)菌工藝進(jìn)行評(píng)估的驗(yàn)證[15,16]。GB/T 24571-2009規(guī)定了PET瓶無(wú)菌冷灌裝生產(chǎn)線驗(yàn)證的培養(yǎng)基為L(zhǎng)G培養(yǎng)基[11,16-19]。

目前，飲料企業(yè)大多數(shù)是自行購(gòu)買LG培養(yǎng)基配方中的各個(gè)原材料配制LG培養(yǎng)基，用于冷灌裝生產(chǎn)線的無(wú)菌驗(yàn)證。由于培養(yǎng)基原材料一般是化學(xué)和生物試劑，不同廠家的試劑質(zhì)量?jī)?yōu)劣不齊，飲料企業(yè)對(duì)培養(yǎng)基所用的原料控制比較粗放，導(dǎo)致飲料企業(yè)采用自行配制的LG培養(yǎng)基驗(yàn)證時(shí)，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)基混濁，顏色不一的現(xiàn)象，以致不能使用；或者出現(xiàn)LG培養(yǎng)基檢測(cè)微生物的靈敏度低，不能如實(shí)地反映生產(chǎn)線的微生物污染情況，導(dǎo)致造成很大的生產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)以及由于微生物污染造成的損失。

針對(duì)這一行業(yè)共性問(wèn)題，我們通過(guò)優(yōu)選LG培養(yǎng)基配方所用的原料，以及研究及優(yōu)選出合適的生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)出商品化復(fù)合型LG干粉培養(yǎng)基，解決飲料企業(yè)自行配制培養(yǎng)基存在批間差的問(wèn)題。相關(guān)文獻(xiàn)也表明，復(fù)合型的LG培養(yǎng)基無(wú)論對(duì)細(xì)菌還是真菌，均具有較高的檢測(cè)靈敏度及較優(yōu)的促生長(zhǎng)能力[20]。

本研究采用中國(guó)飲料罐裝生產(chǎn)線上常見的污染菌株作為試驗(yàn)菌株[20,21]，以半定量的方法，以符合標(biāo)準(zhǔn)的工廠化生產(chǎn)的3批復(fù)合型LG培養(yǎng)基作為參照，比較由同一集團(tuán)3個(gè)飲料分廠分別提供的各個(gè)原料在本實(shí)驗(yàn)室配制的LG培養(yǎng)基，對(duì)比其在外觀、理化指標(biāo)及微生物指標(biāo)（靈敏度）方面的差異，得出一定的研究結(jié)論，旨在為PET瓶飲料無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線的無(wú)菌驗(yàn)證進(jìn)行培養(yǎng)基選擇時(shí)提供參考。

1 材料與方法

1.1 培養(yǎng)基

3批商品化復(fù)合型LG培養(yǎng)基（復(fù)合型LG：1069401、1069361、1069421）、血平板和改良馬丁瓊脂均由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司提供；3批自配LG培養(yǎng)基分別由國(guó)內(nèi)某食品集團(tuán)公司的3個(gè)分廠提供，分別命名為自配G、自配T和自配H。

1.2 儀器與設(shè)備

BSC-1360-LⅡB2生物安全柜，北京東聯(lián)哈爾儀器；PB-10 pH計(jì)，賽多利斯；HVE50滅菌鍋，日本HIRAYAMA；DNP-9162電熱恒溫培養(yǎng)箱，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

1.3 培養(yǎng)基的制備

取復(fù)合型LG培養(yǎng)基3批（批號(hào)：1069401，1069361，1069421）與3個(gè)自行配制的LG培養(yǎng)基分別按LG培養(yǎng)基配方配制量稱取于不同的2 L三角瓶中，各加1000 mL的純化水，充分溶解后，煮沸，冷卻至45 ℃，測(cè)定各瓶培養(yǎng)基的初始pH值，然后用堿調(diào)節(jié)至相同的pH，分裝試管，每管10 mL。上述培養(yǎng)基121 ℃高壓滅菌15 min后備用。

LG配方[17]：葡萄糖20 g/L，蛋白胨2 g/L，酵母提取物3.5 g/L，硫酸銨2 g/L，硫酸鎂1 g/L，磷酸二氫鉀1 g/L，pH值6.5±0.2。

1.4 試驗(yàn)菌株

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）ATCC 6538、肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella. peneumoniae）CMCC(B) 46117、枯草芽孢桿菌黑色變種（Bacillus subtilis var. niger）ATCC 9372、銅綠假單胞菌（Pseudomonas. aeruginosa）ATCC 27853、洋蔥假單胞菌（Pseudomonas cepacia）ATCC 25416、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）CMCC(B)63303、黑 曲 霉（Aspergillus niger）ATCC 16404、白色念珠菌（canidia albicans）ATCC 10231，由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司提供。

1.5 試驗(yàn)用菌懸液的制備

1.5.1 細(xì)菌試驗(yàn)用菌懸液的制備

將試驗(yàn)菌株接種于血平板上，置36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h～24 h，以無(wú)菌生理鹽水懸浮培養(yǎng)物，制備成約含活菌數(shù)100～1000 CFU/mL的菌懸液，再以無(wú)菌生理鹽水10倍稀釋成分別制成約含活菌數(shù)10～100 CFU/mL和1～10 CFU/mL的菌懸液，備用。

1.5.2 霉菌試驗(yàn)用菌懸液的制備

將試驗(yàn)菌株接種于改良馬丁瓊脂斜面上，置25 ℃±1 ℃培養(yǎng)7 d，加入3～5 mL含0.05%（V/V）聚山梨酯80的無(wú)菌生理鹽水，輕輕洗脫孢子。并以無(wú)菌生理鹽水稀釋制備成約含活菌數(shù)100～1000 CFU/mL、10～100 CFU/mL和1～10 CFU/mL的菌懸液，備用。

上述試驗(yàn)菌株的培養(yǎng)物均使用新鮮培養(yǎng)物，傳代次數(shù)不超過(guò)5代。

1.6 試驗(yàn)方法

分別取上述2個(gè)不同劑量（10～100 CFU/mL、1～10 CFU/mL）的試驗(yàn)菌株的菌懸液1 mL種接于LG 6個(gè)檢樣的培養(yǎng)基管中。于30 ℃±1 ℃中培養(yǎng)18 h～24 h后，輕輕振搖試管，同時(shí)與無(wú)生長(zhǎng)管（陰性對(duì)照管）比較，當(dāng)出現(xiàn)肉眼可見的混濁時(shí)計(jì)為生長(zhǎng)管（陽(yáng)性管）。逐日觀察結(jié)果，直到各個(gè)菌在各自配培養(yǎng)基上均出現(xiàn)相同的生長(zhǎng)速度。分別記錄不同接種量的受試培養(yǎng)基的混濁程度。每種受試培養(yǎng)基每稀釋度分別接種3管培養(yǎng)基。

2 結(jié)果與討論

2.1 感觀及理化試驗(yàn)

不同LG培養(yǎng)基感觀及理化結(jié)果如表1所示。

表1 LG培養(yǎng)基3批及3個(gè)自配的感觀及理化結(jié)果Table 1 The results of sensory and physicochemical of LG media form four manufactor

在感觀方面，復(fù)合型LG 3批與自配G的相當(dāng)，均為澄清無(wú)沉淀，淺黃色，符合LG培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)；優(yōu)于自配T和自配H，其培養(yǎng)基底部有黑色雜質(zhì)，其中自配T輕微混濁，有白色絮狀沉淀，且為黃色，色澤最深，這兩個(gè)自配LG培養(yǎng)基感官均不合格。由此可見，飲料企業(yè)自行采用不同原料配制的培養(yǎng)基其外觀存在較大差異，黑色雜質(zhì)、白色絮狀沉淀及色澤過(guò)深均會(huì)影響結(jié)果的觀察及判斷。而3批復(fù)合型LG培養(yǎng)基的感官一致，沒(méi)有批間差異。

在理化方面，自配G、自配T和自配H，初始pH值均較低，滅菌前需調(diào)節(jié)pH值到合適的范圍，滅菌后才能達(dá)到要求的pH值；而復(fù)合型LG滅菌前無(wú)需調(diào)整pH，滅菌后3批均在標(biāo)準(zhǔn)要求范圍（6.5±0.2）內(nèi)，可以直接使用。

復(fù)合型LG培養(yǎng)基的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性均優(yōu)于其它三個(gè)自配的LG培養(yǎng)基。

2.2 金黃色葡萄球菌的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖1所示。第1 d時(shí)，金黃色葡萄球菌在3批復(fù)合型LG上均生長(zhǎng)有輕微混濁，而在自配G、自配H和自配T3個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第2 d時(shí)，金黃色葡萄球菌在復(fù)合型LG 3批和自配T上均達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而在自配H上可見輕微混濁，自配G仍未見生長(zhǎng)；第3 d時(shí)，金黃色葡萄球菌在復(fù)合型LG 3批、自配H和自配T上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而在自配G上才可見輕微混濁。直到第5 d，自配G才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。5 d后金黃色葡萄球菌在6個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。

圖1 金黃色葡萄球菌（6 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.1 Growth of Staphylococcus aureus (6 CFU) on LG medium from different manufacturers

2.3 肺炎克雷伯氏菌的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖2所示。第1 d時(shí)，肺炎克雷伯氏菌在復(fù)合型LG 3批上均生長(zhǎng)有輕微混濁，而在自配G、自配H和自配T3個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第2 d時(shí)，肺炎克雷伯氏菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而在自配G、自配H和自配T上可見輕微混濁；第3 d時(shí)，肺炎克雷伯氏菌在復(fù)合型LG 3批及自配T上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而在自配G和自配H上分別為生長(zhǎng)良好和輕微混濁。直到第4 d，自配G和自配H才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。4 d后肺炎克雷伯氏菌在6個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。

圖2 肺炎克雷伯氏菌（7 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.2 Growth of Klebsiella pneumoniae (7 CFU) on LG medium from different manufacturers

2.4 枯草芽孢桿菌黑色變種的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖3所示。第1 d時(shí)，枯草芽孢桿菌黑色變種在復(fù)合型LG 3批上均生長(zhǎng)有輕微混濁，而在自配G、自配H和自配T3個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第2 d時(shí)，枯草芽孢桿菌黑色變種在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而在自配T上生長(zhǎng)良好，在自配G和自配H可見輕微混濁；第3 d時(shí)，除在自配H上為生長(zhǎng)良好外，枯草芽孢桿菌黑色變種在其余樣品上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)；而在自配G和自配H上分別為生長(zhǎng)良好和輕微混濁。直到第4 d，自配H才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。4 d后枯草芽孢桿菌黑色變種在6個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。

圖3 枯草芽孢桿菌黑色變種（8 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.3 Growth of Bacillus subtilis var. Niger (8 CFU) on LG medium from different manufacturer

2.5 銅綠假單胞菌的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖4所示。第1 d時(shí)，銅綠假單胞菌在復(fù)合型LG 3批和自配G上均生長(zhǎng)有輕微混濁，而在自配T和自配H2個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第2 d時(shí)，銅綠假單胞菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而在自配G、自配H和自配T上仍為可見輕微混濁；第3 d時(shí)，銅綠假單胞菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而在自配G、自配H和自配T上均為生長(zhǎng)良好。直到第4 d，自配G、自配H和自配T才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。4 d后銅綠假單胞菌在6個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。

圖4 銅綠假單胞菌（8 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.4 Growth of Pseudomonas aeruginosa (8 CFU) on different LG media from different manufacturer

2.6 洋蔥假單胞菌的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖5所示。第1 d時(shí)，洋蔥假單胞菌在6個(gè)樣品上均未見生長(zhǎng)；第2 d時(shí)，洋蔥假單胞菌在復(fù)合型LG 3批和自配G上均有輕微混濁，而在自配H和自配T2個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第3 d時(shí)，洋蔥假單胞菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而在自配G和自配T上分別為生長(zhǎng)良好和輕微混濁，在自配H上仍為未見生長(zhǎng)。直到第4 d，自配G和自配T才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而自配H一直未見生長(zhǎng)。4 d后，除自配H外，洋蔥假單胞菌在其余5個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別，7 d內(nèi)均未觀察到自配H有生長(zhǎng)。

圖5 洋蔥假單胞菌（8 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.5 Growth of Pseudomonas cepacia (8 CFU) on LG medium from different manufacturers

2.7 蠟樣芽孢桿菌的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖6所示。第1 d時(shí)，蠟樣芽孢桿菌在6個(gè)LG培養(yǎng)基樣品上均生長(zhǎng)有輕微混濁；第2 d時(shí)，蠟樣芽孢桿菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而在自配G、自配H和自配T廠上仍為可見輕微混濁；第3 d時(shí)，蠟樣芽孢桿菌在復(fù)合型LG 3批和自配H廠上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而在自配G和自配T上均為生長(zhǎng)良好。直到第4 d，自配G和自配T才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。4 d后蠟樣芽孢桿菌在6個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。

圖6 蠟樣芽孢桿菌（4 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.6 Growth of Bacillus cereus (4 CFU) on LG medium from different manufacturers

2.8 黑曲霉的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖7所示。第1、2 d時(shí)，黑曲霉在6個(gè)樣品上均未見生長(zhǎng)；第3 d時(shí)，黑曲霉在復(fù)合型LG 3批上均有輕微混濁，而在自配G、自配H和自配T3個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第4 d時(shí)，黑曲霉在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而在自配H和自配T上均為輕微混濁，在自配G上仍為未見生長(zhǎng)。第5 d時(shí)，黑曲霉在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，自配H才達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，自配T未見有進(jìn)一步的生長(zhǎng)，自配G仍為未見生長(zhǎng)；第6 d時(shí)，自配H也達(dá)到了生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，而自配T為生長(zhǎng)良好，自配G仍為未見生長(zhǎng)；第7 d時(shí)，除自配G仍為未見生長(zhǎng)外，黑曲霉在其余5個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別，均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。

圖7 黑曲霉（8 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.7 Growth of Aspergillus niger (8 CFU) on LG medium from different manufacturers

2.9 白色念珠菌的生物學(xué)結(jié)果

生長(zhǎng)速度結(jié)果如圖8所示。第1 d時(shí)，白色念珠菌在6個(gè)樣品上均未見生長(zhǎng)；第2 d時(shí)，白色念珠菌在復(fù)合型LG 3批上均有輕微混濁，而在自配G、自配H和自配T3個(gè)自配的培養(yǎng)基上均未見生長(zhǎng)；第3 d時(shí)，白色念珠菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而在自配G和自配T上均為輕微混濁，在自配H上仍為未見生長(zhǎng)。第4 d時(shí)，白色念珠菌在復(fù)合型LG 3批上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，自配G和自配T上均為生長(zhǎng)良好的狀態(tài)，而自配H為輕微混濁；第5 d時(shí)，白色念珠菌在復(fù)合型LG 3批和自配G上均達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)，自配H和自配T上均為生長(zhǎng)良好；第6 d時(shí)，自配H和自配T才達(dá)到生長(zhǎng)極好的狀態(tài)。6 d后白色念珠菌在6個(gè)樣品上的生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。

圖8 白色念珠菌（6 CFU）在不同廠家LG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Fig.8 Growth of Candida albicans (6 CFU) on LG medium from different manufacturers

3 討論

3.1 無(wú)菌培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)，無(wú)論采用TSB或LG培養(yǎng)基，在上線驗(yàn)證前均需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行性能測(cè)試[10,12,17]，如果培養(yǎng)基靈敏度不夠，會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果無(wú)法真實(shí)的反映灌裝工藝的無(wú)菌保證水平，所以在試驗(yàn)前對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行靈敏度試驗(yàn)，確保培養(yǎng)基的靈敏度及促生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)符合要求[20,22]。

3.2 在本研究中，微生物促生長(zhǎng)方面，3批次復(fù)合型LG效果相當(dāng)，微生物促生長(zhǎng)效果均優(yōu)于3個(gè)自配LG，而且3個(gè)自行配制的LG培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)能力差異較大，穩(wěn)定性不好。第7 d時(shí)，8個(gè)測(cè)試菌在3批次復(fù)合型LG上生長(zhǎng)均已達(dá)最大值，而自配G和自配H分別接種黑曲霉和洋蔥假單胞菌的3個(gè)平行管依然未見生長(zhǎng)?？梢姡耘銰和自配H LG培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)能力不穩(wěn)定，存在漏檢的風(fēng)險(xiǎn)。促生長(zhǎng)能力越強(qiáng)、越穩(wěn)定，微生物生長(zhǎng)速度越快，越能準(zhǔn)確、快速地發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)線的染菌情況，從而可以及早作出處理，避免了在時(shí)間上的浪費(fèi)以及出現(xiàn)微生物漏檢的風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 出現(xiàn)上述差異的原因，主要是飲料企業(yè)自行配置的LG培養(yǎng)基，是自行購(gòu)買培養(yǎng)基原材料配制的，由于培養(yǎng)基原材料中的酵母浸粉、蛋白胨是生物試劑，質(zhì)量批間差較大，受專業(yè)程度和保存菌株多樣性的限制，飲料企業(yè)很難對(duì)培養(yǎng)基原材料像專業(yè)培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家那樣進(jìn)行全面的微生物生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)試，所以不同的企業(yè)配置出來(lái)的培養(yǎng)基質(zhì)量有很大的差異；加上LG培養(yǎng)基配方中含鹽較多，在自行配制過(guò)程中需按一定的投料順序一項(xiàng)一項(xiàng)進(jìn)行，須等前一組完全溶解后才能加入下一組成分，否則容易出現(xiàn)混濁或沉淀，其實(shí)是LG培養(yǎng)基組分在配制過(guò)程中的性能已發(fā)生了改變，不同程度上也會(huì)影響檢測(cè)微生物的靈敏度；另外，配制過(guò)程中pH的調(diào)試也容易出現(xiàn)不穩(wěn)定性，這些因素導(dǎo)致即使是同一個(gè)飲料企業(yè)配制出來(lái)的培養(yǎng)基批間差也較大。而商品化復(fù)合型LG培養(yǎng)基是由專業(yè)培養(yǎng)基生產(chǎn)商研發(fā)生產(chǎn)的，所用的每批原材料均進(jìn)行嚴(yán)格篩選，確保原材料批間質(zhì)量的穩(wěn)定性，同時(shí)通過(guò)專業(yè)的、標(biāo)準(zhǔn)化的生產(chǎn)工藝控制，確保每批復(fù)合型LG培養(yǎng)基批間的感官、理化及靈敏度的穩(wěn)定性。

4 結(jié)論

PET瓶飲料無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線的無(wú)菌驗(yàn)證所用的LG培養(yǎng)基建議選用商品化復(fù)合型LG，盡量避免自行購(gòu)買原材料配制LG培養(yǎng)基，以降低由于原料的質(zhì)量不穩(wěn)定以及配制的復(fù)雜過(guò)程導(dǎo)致培養(yǎng)基質(zhì)量無(wú)法控制的風(fēng)險(xiǎn)。