分析酶聯(lián)免疫法篩查人類免疫缺陷病毒抗體在艾滋病診斷中的應用

羅大泉

【摘要】目的 以膠體金法作為對照，分析采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）對人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體進行篩查對艾滋病診斷的價值。方法 回顧性分析2020年1月至2020年12月我市645例艾滋病高危且疑似感染的受檢者的臨床資料，采集645例受檢者的血液標本分別進行ELISA、膠體金法檢測，并以蛋白印跡檢測法作為金標準，對比分析ELISA、膠體金法檢測HIV抗體在艾滋病診斷中的價值。結(jié)果 在645例受檢者中，采用蛋白印跡檢測法最終確認共有54例HIV抗體陽性患者，檢出率為8.37%（54/645）;膠體金法共檢出HIV抗體陽性患者45例，檢出率為6.98%（45/645）;ELISA共檢出HIV抗體陽性患者52例，檢出率為8.06%（52/645）;與膠體金法比較，ELISA檢出率明顯升高（X2=4.960，P=0.026）。與膠體金法比較，ELISA準確度、敏感度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值均升高（P<0.05）。結(jié)論 ?采用ELISA進行HIV抗體篩查可提升檢出率，與膠體金法比較，其敏感度、特異度、準確度等指標均升高，是診斷艾滋病較有效的方法。

【關鍵詞】人類免疫缺陷病毒;篩查;酶聯(lián)免疫法;艾滋病;診斷

艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引發(fā)的一種慢性免疫性疾病，其具有較強的傳染性，HIV進入人體后，將與免疫細胞結(jié)合并快速、大量的復制，從而導致患者免疫系統(tǒng)遭到嚴重破壞，進而降低其機體各項功能。HIV感染過程中患者將經(jīng)歷急性期、潛伏期和艾滋病期三個時期，急性期患者癥狀與感冒類似，具有較強的隱匿性，并不容易被察覺，過后就是處于較長的潛伏期，盡管該時期患者無明顯的癥狀，但HIV仍然存在于各種體液中，同樣具較強的傳染性，因此為了阻斷艾滋病的擴散，進行HIV篩查是很有必要的。HIV抗體篩查是艾滋病診斷中常用的方式，其可以作為判斷個體是否感染艾滋病的依據(jù)，為了加強對我市艾滋病的防控工作，本研究通過分析酶聯(lián)免疫法（ELISA）篩查HIV抗體的有效性，以為艾滋病的診斷提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1臨床資料

回顧性分析2020年1月至2020年12月我市645例艾滋病高危且疑似感染的受檢者的臨床資料，納入標準：（1）所有患者存在艾滋病高危風險;（2）疑似被感染;（3）為合并其他傳染性疾病，如肺結(jié)核等。排除標準：（1）合并惡性腫瘤患者;（2）伴有機體嚴重感染患者;（3）合并血液系統(tǒng)疾病患者;（4）存在認知功能障礙或者精神系統(tǒng)疾病患者;（5）臨床資料不完整者。645例受檢者中，男294例，女351例;年齡10-87歲，平均（57.44±3.52）歲。

1.2方法

收集645例受檢者的晨起空腹靜脈血5ml，以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，分離上層血清，所有血液樣本分別采用ELISA（試劑來源：北京萬泰）、膠體金法（試劑來源：英科新創(chuàng)）進行HIV抗體篩查，所有操作嚴格按照試劑說明書進行，并將645例血液樣本送至百色市疾病預防控制中心采用蛋白印跡檢測法進行結(jié)果統(tǒng)一復核，最終確定患者是否感染HIV。

1.3觀察指標

分別分析三種方法的HIV抗體檢測結(jié)果，計算645例受檢者的HIV抗體采用三種方法檢測的檢出率，并以蛋白印跡檢測法結(jié)果作為金標準，對比分析ELISA、膠體金法的診斷價值（具體指標包括檢測方式的準確度、敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值）。

1.4統(tǒng)計學處理

采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件對問卷及量表數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計。計量資料如年齡組成等采用（ ±s）描述，行t檢驗，計數(shù)資料如性別構(gòu)成、檢測方法各指標等采用（%）描述，行卡方檢驗，檢驗標準設置為α=0.05。

2結(jié)果

2.1 645例受檢者不同檢測方法HIV抗體檢出率比較

在645例受檢者中，采用蛋白印跡檢測法最終確認共有54例HIV抗體陽性患者，檢出率為8.37%（54/645）;膠體金法共檢出HIV抗體陽性患者45例，檢出率為6.98%（45/645）;ELISA共檢出HIV抗體陽性患者52例，檢出率為8.06%（52/645）;與膠體金法比較，ELISA檢出率明顯升高（X2=4.960，P=0.026）。

2.2 ELISA與膠體金法的診斷價值比較

與膠體金法比較，ELISA準確度、敏感度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值均升高（P<0.05）。見表1、表2。

3討論

HIV存在與人體的各種體液中，可對人體免疫系統(tǒng)中的CD4 T淋巴細胞進行攻擊，致使該類細胞失去免疫功能，同時，HIV是一種單鏈RNA病毒，具有較強的不可逆復制能力，當患者病情發(fā)展至艾滋病期將引發(fā)各種并發(fā)癥，直至患者死亡。目前，由于HIV突變率較高，臨床缺乏有效的艾滋病疫苗，一旦個體感染HIV只能通過逆轉(zhuǎn)錄病毒療法減緩HIV的復制，導致艾滋病死亡率較高，因此對HIV的篩查并加以盡早干預以控制艾滋病的傳播具有重要的意義。HIV在患者體內(nèi)很難做到被有效清除，絕大多數(shù)患者一旦感染即是終生攜帶，HIV抗體的檢出就意味著HIV病毒的存在，因此進行HIV抗體篩查可以作為診斷艾滋病的指標。HIV抗體檢測結(jié)果準確與否直接關系到艾滋病診斷的正確與否，采用不同的檢測方法以確保HIV抗體檢測結(jié)果的準確性已成為臨床難題。

膠體金法用于HIV抗體檢測具有操作簡單、檢測速度快、方便攜帶等優(yōu)勢，已在HIV篩查中逐漸被推廣使用，但該方法對艾滋病的診斷價值還有待進一步提高。本研究中，膠體金法的敏感度、特異度以及準確度等指標均低于ELISA檢測，也證實膠體金法診斷價值并不理想。ELISA是一種將明確的HIV抗原固定于固相載體表面，使其與新加入的酶標記HIV抗原及待檢血液樣本發(fā)生反應，通過觀察底物是否顯色判定抗體性質(zhì)，并以酶標儀測定具體結(jié)果的檢測方法，該方法一方面可以通過酶催化底物反應的放大作用，提高抗原抗體反應的敏感度，從而可以提高HIV抗體陽性檢出率;另一方面該檢測方法整個檢測過程是在一個封閉的流動系統(tǒng)中進行，這可以極大地降低交叉污染，也不受血液樣本中脂血、溶血以及外部溫度等因素的影響，測定結(jié)果準確、可靠。同時，ELISA檢測無需特殊設備，對操作環(huán)境也無要求，一次性可檢測多份血液樣本，操作更加方便，檢測效率也更高。此外，相比傳統(tǒng)的檢測方法，ELISA檢測可以更早的發(fā)現(xiàn)HIV早期感染，從而可以縮短艾滋病診斷的窗口期。值得注意的是，與金標準蛋白印跡檢測法結(jié)果比較，ELISA檢測同樣存在一定的假陽性病例，需要通過金標準蛋白印跡檢測法復核確認，說明ELISA檢測也有待完善;同時，ELISA檢測成本相對較高，很難在基層醫(yī)院普及使用。

綜上所述，ELISA檢測用于HIV抗體篩查具有快速、方便的優(yōu)勢，同時可提高檢測的敏感度、特異度以及準確度，能夠為艾滋病的診斷提供較為可靠的依據(jù)。

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