梁 莉,李皓晨
(1.中山市動物疫病預(yù)防控制中心,廣東中山 528400;2.中山市三鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,廣東中山 528400)
食品安全問題一直都是社會關(guān)注的一個焦點,2021年央視3·15晚會就向大眾曝光了河北青縣養(yǎng)殖戶在養(yǎng)羊過程中,為了提高羊的出肉率,獲得更高的收益,在飼料中添加“瘦肉精”飼養(yǎng)的情況,且這種飼養(yǎng)方式竟長達(dá)10年。這一報道使我國2002年明令禁止的“瘦肉精”又一次出現(xiàn)在人們的視野中。
在畜牧業(yè)生產(chǎn)中“瘦肉精”的使用仍屢禁不止,“瘦肉精”主要是一類叫做腎上腺素受體激動劑的統(tǒng)稱,包括克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇等多種藥物,主要用于治療支氣管哮喘和慢性支氣管炎等疾病[1]。在養(yǎng)殖過程中使用“瘦肉精”,能促進(jìn)動物機(jī)體的新陳代謝,降低骨骼肌脂肪,增加瘦肉率,改善肉質(zhì)色澤。長期食用含有“瘦肉精”殘留的畜禽,藥物在人體內(nèi)蓄積到一定的量時,會導(dǎo)致人體出現(xiàn)各種不良反應(yīng)。例如,①急性中毒。出現(xiàn)心悸,面頸、四肢肌肉顫動,手指震顫,足有沉感甚至不能站立,頭痛、頭暈、惡心、嘔吐和乏力,臉部潮紅,皮膚過敏性紅色丘疹。②誘發(fā)疾病。原有高血壓、冠心病、甲狀腺功能亢進(jìn)者上述癥狀更易發(fā)生。如果機(jī)體耐受不良,長期有壓力因素,患者猝死的概率就會升高[2]。③心率失常。與糖皮質(zhì)激素一起使用會引起低血鉀,誘發(fā)心率失常。④惡性腫瘤。持續(xù)長期食用,會導(dǎo)致人體代謝紊亂,有可能導(dǎo)致染色體畸變,甚至?xí)T發(fā)惡性腫瘤。
其應(yīng)用了競爭抑制免疫層析的原理,樣品經(jīng)提取和凈化后得到待測液,將待測液滴入樣品孔后,樣品溶液中的待檢物質(zhì)與金標(biāo)抗體相結(jié)合,進(jìn)而封閉金標(biāo)抗體上待檢物的抗原結(jié)合位點,阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上待檢物蛋白偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本中待檢物質(zhì)含量高于檢出限時,檢測線(T線)無紅色條帶出現(xiàn),結(jié)果為陽性,反之,則結(jié)果為陰性。該方法檢測成本低,檢測時間短,操作難度低,適合宰后快速檢測,其缺點是假陽性率較高。
采用間接競爭ELISA方法。在酶標(biāo)微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原,樣本中殘留的“瘦肉精”和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭“瘦肉精”的抗體,加入酶標(biāo)二抗后,用TMB底物顯色,終止液終止反應(yīng)。設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處測定吸光度值,樣本吸光度值與其所殘留“瘦肉精”的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中“瘦肉精”的殘留量。該方法具有樣品前處理簡單,檢測靈敏度高,重復(fù)性好,檢測速度快的特點,適用于大批量樣本檢測。
固體樣品絞碎后,用有機(jī)溶液提取,經(jīng)弱陽離子交換柱進(jìn)行凈化分離后,洗脫液濃縮,加入流動相溶解殘渣,過濾后在高效液相色譜儀上進(jìn)行測定。高效液相色譜法是以流動相為液體,采用高效的固定相,用高壓輸送流動相的色譜法,該方法是以經(jīng)典液相色譜法為基礎(chǔ),引入了氣相色譜的塔板理論和速率理論及先進(jìn)的實驗技術(shù)和方法,分離效能高,分析速度快,靈敏度較高,操作簡便,前處理耗時相對較短,檢測精確度較高,假陽性率低[3]。
此種利用氣相色譜分離并定性與質(zhì)譜法定量相聯(lián)合的檢測方法被認(rèn)為是國內(nèi)檢測“瘦肉精”的確證性方法,作為檢測結(jié)果的確認(rèn)和仲裁。此種檢測方法同時結(jié)合色譜高效、快速分離和質(zhì)譜高敏感定性分析,能夠準(zhǔn)確定性檢測,從而實現(xiàn)多種“瘦肉精”同時測定。其原理是氣相色譜系統(tǒng)與質(zhì)譜系統(tǒng)由網(wǎng)口連接起來,氣相色譜系統(tǒng)將復(fù)雜復(fù)合物分離固定后進(jìn)入質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行檢測分析[4]。此方法的優(yōu)點是重復(fù)性好,檢測靈敏度高,但所需儀器設(shè)備非常昂貴,檢測過程煩瑣,要求檢測人員專業(yè)性強(qiáng)且實際操作經(jīng)驗豐富。另外,與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低。
樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱內(nèi),由于各組分在色譜柱上的移動速度不同,各組分依次從柱內(nèi)流出進(jìn)入質(zhì)譜,在高壓、霧化氣和脫溶劑氣的共同作用下,分析物在離子源處轉(zhuǎn)換成氣相離子,氣相離子通過離子橋進(jìn)入四級桿內(nèi),四級桿內(nèi)將離子根據(jù)質(zhì)荷比(m/z)分開,選擇目標(biāo)m/z離子通過穩(wěn)定的運動軌道,傳輸至檢測器。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是將液相色譜的分離性能和質(zhì)譜的質(zhì)量分析能力結(jié)合在一起的一種分析化學(xué)技術(shù),具有高靈敏度和選擇性,通常用于復(fù)雜基質(zhì)中化合物的分析和鑒定。
考慮對人體會產(chǎn)生副作用,各國開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一。目前,國際食品法典委員會(CAC)制定的《食品中獸藥殘留的最大殘留限量和風(fēng)險管理建議》中,豬和牛中的萊克多巴胺最大殘留限量:肌肉為10 μg/kg、脂肪為10 μg/kg、肝臟為40 μg/kg、腎臟為90 μg/kg,每日允許攝入量在0~1 μg/kg。
2002年,中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第176號發(fā)布的《禁止在飼料和動物飲用水中使用的藥物品種目錄》中,禁止在動物飼養(yǎng)過程中使用鹽酸克侖特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺等7種腎上腺素受體激動劑。2011年12月5日,中華人民共和國工業(yè)和信息化部與其他五部委聯(lián)合發(fā)布2011年第41號公告,自即日起禁止在我國境內(nèi)生產(chǎn)和銷售萊克多巴胺?!妒称穭游镏薪故褂玫乃幤芳捌渌衔锴鍐巍罚ㄞr(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號)中,禁止在食品動物中使用β-興奮劑類及其鹽、酯。中國臺灣禁止使用,但可以進(jìn)口符合β-興奮劑最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的畜禽產(chǎn)品。
美國、日本、加拿大、澳大利亞和巴西等部分國家和地區(qū)認(rèn)為,只要科學(xué)地使用“瘦肉精”,把握好動物的生產(chǎn)周期,讓“瘦肉精”在動物體內(nèi)通過新陳代謝排出體外,在動物養(yǎng)殖過程中仍然可以使用萊克多巴胺以增加瘦肉率和提高蛋白質(zhì)含量[5]。但在歐盟、俄羅斯、法國、意大利、泰國、越南等多個國家,禁止在動物飼養(yǎng)過程中使用“瘦肉精”。
“瘦肉精”殘留危害人們的身體健康和生命安全,由于各國開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一,以上幾種動物源性食品中“瘦肉精”的檢測分析方法,給“瘦肉精”實驗室鑒定和檢測提供了參考。同時,各相關(guān)單位要貫切落實我國關(guān)于食品安全的重要指示,把消費者的生命安全和身體健康放在第一位,完善健全畜禽養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、屠宰環(huán)節(jié)、銷售環(huán)節(jié)的日常監(jiān)管機(jī)制,加強(qiáng)監(jiān)督力度,提高改進(jìn)檢驗方法,對違法行為予以嚴(yán)厲打擊,守護(hù)好人們“舌尖上的安全”。