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      病原微生物快速檢測的臨床研究進展概述

      2021-11-30 11:34:13鄭青
      今日健康 2021年7期
      關(guān)鍵詞:底物病原抗原

      鄭青

      (欽州市靈山縣人民醫(yī)院,廣西 欽州,535400)

      近幾年,隨著環(huán)境污染程度的明顯加重,導致我國感染性疾病的患病率日漸增加,給患者機體健康以及生存質(zhì)量帶來極大危害。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn),鼠疫耶爾森菌、霍亂弧菌等病原微生物再次繁殖后,增加感染性疾病發(fā)生的風險,隨后病原微生物的種類明顯增加,耐藥性隨之升高,進一步提升臨床診治的困難程度[1]。另外我國范圍內(nèi)的流動人口逐漸擴增,明顯提升傳染性疾病發(fā)生的風險。針對此,臨床應(yīng)盡早選擇合適的病原微生物檢驗方式,以此達到早期診斷、治療的目的,同時還可有效減少感染性疾病的擴散傳播[2-3]?,F(xiàn)綜述如下:

      1 病原微生物檢驗的意義

      病原微生物測定的本質(zhì)是檢驗微生物中特異性酶,但不同種類微生物的酶系統(tǒng)存在較大差異,且對多重物質(zhì)分解的功能也不相同,因此選擇不同底物所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)區(qū)可間接測定微生物酶,以此發(fā)揮檢驗微生物的效果[4]。研究表明[5],沙門氏菌能夠分泌辛酯酶,其他腸桿菌科的細菌均不存在這一現(xiàn)象。因此,遵循此特征可選擇快速檢驗辛酯酶法測定沙門氏菌,期間底物選擇4-甲基傘形酮辛酯,利用沙門氏菌酶進行降解,可產(chǎn)生4MU,同時選擇紫外燈檢查藍色熒光。由此看出,此方式具備簡便易行的優(yōu)勢,可在紫外燈下觀察底物,明顯縮短檢驗時長,其敏感性、特異性均達到90%以上,值得推廣[6-7]。

      2 血清免疫學檢驗

      臨床為了獲得對應(yīng)的抗原抗體反應(yīng),應(yīng)將對應(yīng)的標記物與抗體相結(jié)合,并利用標記物熒光或者酶有色性反應(yīng)、高電子密度、放射性,經(jīng)過電鏡或者光鏡開展定位、定量、定性研究。目前臨床免疫分析方法較多,包含化學發(fā)光免疫分析法、放射性免疫分析法、熒光免疫分析法、酶免疫分析法、間接性酶聯(lián)免疫吸附法等,均被廣泛運用于臨床[8-9]。其中(1)酶聯(lián)免疫吸附法:主要遵循抗原抗體免疫反應(yīng)與酶高效催化作用的原則發(fā)生有機結(jié)合反應(yīng),同時經(jīng)酶催化底物產(chǎn)生一系列化學反應(yīng),促進溶液顏色改變,提示存在抗原抗體特異性反應(yīng)。隨后醫(yī)療技術(shù)不斷進步發(fā)展,酶聯(lián)免疫吸附法的敏感性、特異性明顯升高,在多種病原微生物檢驗上具有重要意義[10]。(2)熒光抗體技術(shù):熒光抗體技術(shù)通常遵循抗原抗體的高特異性反應(yīng),選擇熒光素作為抗原標記物,并利用熒光顯微鏡觀察,結(jié)果發(fā)現(xiàn)熒光特異性抗原抗體的復(fù)合物、抗原抗體的具體部位。但熒光抗體技術(shù)仍具備較多缺陷,例如操作程序復(fù)雜、染色標本無法長時間保存、特殊器械較昂貴等[11]。其中快速檢驗病原菌的方式包含直接與間接檢驗,前者表示在樣品上直接獲得特異性熒光抗血清,經(jīng)洗滌后放在熒光顯微鏡下觀察;而后者是指在樣品上添加對應(yīng)的細菌特異性抗體,產(chǎn)生作用后開展洗滌操作,添加熒光標記第二抗體[12-13]。

      3 分子生物學檢驗及傳感器

      近些年,分子生物學以及分子遺傳學不斷改進,人們對微生物的認識從外部結(jié)構(gòu)逐漸發(fā)展至內(nèi)部基因結(jié)構(gòu),因此微生物檢驗也從生化免疫發(fā)展至基因水平上。另外生物傳感器也隨之被提出,其作為新型檢驗技術(shù),主要是將傳感器技術(shù)與分子診斷技術(shù)相聯(lián)合,在分子識別器件以及換能器上效果顯著。待測物質(zhì)、轉(zhuǎn)換器件、識別器件主要利用化學、生物以及物理之間的相互作用,加上傳感器具備操作簡便、準確性高等特點,在相關(guān)領(lǐng)域獲得一定價值。但其仍存在較多不足,例如容易受到外界干擾、敏感性較低等,還需臨床作進一步的研究。

      4 小結(jié)

      綜上所述,病原微生物的檢驗方式較多,均存在一定優(yōu)缺點,因此臨床為了彌補其缺陷,可選擇聯(lián)合多種檢驗方式的途徑,可有效提升檢驗結(jié)果的敏感性與特異性。另外在挑選檢驗方式時,應(yīng)充分考慮相關(guān)條件,重點在于提升敏感性、減低假陽性上。近幾年,醫(yī)療水平以及計算機技術(shù)不斷提升,病原微生物檢驗技術(shù)隨之完善,并逐漸向自動化以及簡便快速上發(fā)展,且分子生物學技術(shù)也被提出,經(jīng)過自動化儀器,實現(xiàn)高效、低廉、安全的檢驗技術(shù)。

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