孫欣怡 周建慶 廉姜芳

冠心病是導(dǎo)致當(dāng)前全球范圍內(nèi)心血管事件發(fā)生的主要原因，發(fā)病率仍在逐年上升。動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展主要包括內(nèi)皮細(xì)胞損傷、脂蛋白沉積、炎癥和纖維帽形成，是冠心病發(fā)生的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)，但其分子機(jī)制極其復(fù)雜，至今尚未完全闡明。20世紀(jì)60年代，有學(xué)者在對(duì)雞胚進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，上皮細(xì)胞可以轉(zhuǎn)化為肌樣或成纖維細(xì)胞樣表型細(xì)胞，即上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）[1]。內(nèi)皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（endothelium-mesenchymal transition，EndMT）作為EMT的一種亞型日益受到臨床關(guān)注。越來越多的研究證實(shí)EndMT可促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展[2-3]，這為明確冠心病的發(fā)病機(jī)制和發(fā)展過程提供了新證據(jù)。本文對(duì)EndMT在動(dòng)脈粥樣硬化中的機(jī)制、作用的研究進(jìn)展作一綜述。

1 調(diào)節(jié)EndMT的信號(hào)通路

EndMT是指在病理和生理狀態(tài)下，內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生形態(tài)和功能紊亂，遷移能力增加，細(xì)胞外基質(zhì)蛋白分泌增加，并逐漸喪失緊密連接的特征，同時(shí)血小板黏附分子31（platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM-1/CD31）、血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（vascular endothelial cadherin，VE-cad）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）等內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)水平下調(diào)；α平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、平滑肌細(xì)胞22α（smooth muscle cell 22α，SM22α）等間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)水平上調(diào)，逐漸完成內(nèi)皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過程[3-4]。

EndMT可通過多種生化和生物力學(xué)信號(hào)通路被激活，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）信號(hào)通路、骨形成蛋白（bone morphogenetic proteins，BMP）信號(hào)通路、Notch信號(hào)通路等，其中占據(jù)核心地位的是TGF-β信號(hào)通路。

1.1 TGF-β信號(hào)通路TGF-β是一種多功能蛋白，在卵巢閉鎖、腎臟纖維化、腫瘤生長(zhǎng)、非酒精性肝病和炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)中顯示出功能高度多樣化[5-8]。在內(nèi)皮細(xì)胞中，TGF-β通過Ⅱ型受體和Ⅰ型受體復(fù)合物發(fā)出經(jīng)典信號(hào)。隨后TGF-β與受體復(fù)合物在細(xì)胞表面結(jié)合，形成活性復(fù)合物，并通過Smad1、2、3、5的依次活化在細(xì)胞內(nèi)完成信號(hào)傳遞，最后與Smad 4結(jié)合穿梭入細(xì)胞核中，當(dāng)他們與核內(nèi)輔助激活因子、輔助抑制因子和附加轉(zhuǎn)錄因子相互作用時(shí)，可引起細(xì)胞染色質(zhì)重排，最終導(dǎo)致EndMT發(fā)生[9-10]。TGF-β可被單獨(dú)用作EndMT的刺激物，或與其他促炎細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）聯(lián)合使用，以研究各種疾病模型中炎癥對(duì)EndMT的影響。

1.2 BMP信號(hào)通路BMP屬于TGF-β信號(hào)通路超家族，迄今，超過20個(gè)不同功能的BMP已被確定[11]，TGF-β/BMP信號(hào)的串?dāng)_也已被證實(shí)[12]。BMP配體與受體相互作用誘導(dǎo)Smad1、5、8磷酸化，介導(dǎo)下游信號(hào)傳導(dǎo)[13]。BMP分別與兩種不同受體結(jié)合，通過Smad依賴和非Smad依賴的途徑介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[14]。研究證實(shí)，在促炎誘導(dǎo)的EndMT中，BMPⅡ型受體下調(diào)，BMP9誘導(dǎo)的成骨分化和鈣化增強(qiáng)，導(dǎo)致c-Jun氨基末端激酶信號(hào)通路被抑制，促進(jìn)血管鈣化[15]。有研究表明BMPⅡ型受體在內(nèi)皮細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮保護(hù)作用，特別是其可通過調(diào)節(jié)BMP/TGF-β信號(hào)來保護(hù)細(xì)胞，減少內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)TGF-β反應(yīng)[16]。除了BMPⅡ型受體，BMP6也具有誘導(dǎo)成骨分化及鈣化的能力?；钚匝趸罨荁MP6調(diào)節(jié)成骨基因、成骨分化和鈣化的必需環(huán)節(jié)[17]。此外，Zhu等[18]發(fā)現(xiàn)大腦和肌肉arnt樣蛋白-1可通過BMP信號(hào)通路抑制活性氧誘導(dǎo)的EndMT，從而抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成。

1.3 Notch信號(hào)通路Notch信號(hào)通路在生物進(jìn)化中高度保守，表現(xiàn)為通過局部細(xì)胞間相互作用調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖和凋亡等[19]。Lin等[20]已證實(shí)，Notch信號(hào)通路激活可誘導(dǎo)EndMT的進(jìn)展并促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化病變發(fā)展。Notch配體Delta4和Notch受體1、2、3、4在房室管和流出道心臟細(xì)胞上的表達(dá)可在整個(gè)EndMT進(jìn)程中發(fā)揮作用。當(dāng)細(xì)胞膜上的Notch受體1與配體結(jié)合，蛋白酶發(fā)生裂解，釋放出Notch1細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，遷移至細(xì)胞核內(nèi)，充當(dāng)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，激活或抑制定義細(xì)胞特性的基因。Notch1信號(hào)通過在心肌上表達(dá)的配體Jagged1，抑制BMP介導(dǎo)的EndMT[21]。Chang等[22]證實(shí)，Notch蛋白可誘導(dǎo)激活素A促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞通過磷酸肌醇3激酶（phosphatidylionsitol 3-kinase，PI3K）/Akt途徑分泌一氧化氮，一氧化氮與其受體鳥苷酸環(huán)化酶相互作用，調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。在此過程中，Notch信號(hào)通路也可與TGF-β信號(hào)通路協(xié)同，在Notch信號(hào)激活時(shí)，釋放可溶性Notch1細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，上調(diào)Smad3相關(guān)tRNA，激活Smad依賴型信號(hào)傳導(dǎo)通路，從兩條途徑上共同促進(jìn)EndMT。在體外實(shí)驗(yàn)中，Notch信號(hào)通路通過增加VE-cad和α-SMA表達(dá)誘導(dǎo)EndMT，而γ分泌酶抑制劑可通過抑制Notch信號(hào)通路延緩動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)展[20]。Lin等[20]認(rèn)為Notch信號(hào)通路的激活可誘導(dǎo)EndMT的進(jìn)展，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化病變發(fā)展。

1.4 Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路可激活細(xì)胞核內(nèi)靶基因的表達(dá)，并通過抑制糖原合成酶激酶3β介導(dǎo)的磷酸化作用以及抑制胞質(zhì)中的β-連環(huán)蛋白降解誘發(fā)EndMT。β-連環(huán)蛋白在細(xì)胞內(nèi)大量累積后會(huì)轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，作為轉(zhuǎn)錄因子亞單位誘導(dǎo)EndMT相關(guān)基因表達(dá)，從基因水平促進(jìn)EndMT。Lee等[23]表明，Wnt-3a在瘢痕發(fā)病機(jī)制中誘導(dǎo)EndMT，Wnt-3a可顯著降低VE-cad mRNA表達(dá)水平，誘導(dǎo)間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物在人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)上調(diào)。

1.5 其他EndMT相關(guān)信號(hào)通路 除了經(jīng)典的TGF-β信號(hào)通路、BMP信號(hào)通路、Notch信號(hào)通路、Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路外，還有多種信號(hào)通路介導(dǎo)了EndMT的作用。Medici等[24]研究證明,促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）信號(hào)通路、PI3K/Akt激酶信號(hào)通路、p38絲裂原激活的蛋白激酶信號(hào)通路和抑制性微小RNA（microRNA，miRNA）等，可與TGF-β信號(hào)通路相互作用，由TGF-β信號(hào)系統(tǒng)整合這些途徑，上調(diào)Snail轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)水平，誘導(dǎo)EndMT的發(fā)展[25]。TGFβ3也可通過Rho激酶和活化素受體樣激酶2，誘導(dǎo)EndMT[26]。

2 影響EndMT發(fā)生的因素

2.1 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）TGF-β途徑上游的FGF可抑制TGF-β介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)。Chen等[27]發(fā)現(xiàn)FGF受體1是抑制內(nèi)皮細(xì)胞TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)鍵，F(xiàn)GF受體1豐度降低可促進(jìn)EndMT和廣泛血管病變。連接FGF受體與MAPK的銜接蛋白FRS2可在人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，表現(xiàn)為內(nèi)皮凋亡相關(guān)基因、平滑肌細(xì)胞重構(gòu)相關(guān)基因上調(diào)。Chen等[28]證實(shí)在體外小鼠模型中敲除FRS2后，小鼠主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈和主動(dòng)脈根部動(dòng)脈粥樣硬化病變數(shù)量增加。高脂飲食16周后，F(xiàn)RS2敲除小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)一步增加，斑塊負(fù)荷增加84%。此外，炎性細(xì)胞因子，如干擾素-γ、TNF-α和IL-1β，可下調(diào)FGF受體1，使內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)FGF信號(hào)的反應(yīng)性降低，促進(jìn)EndMT。從目前的研究來看，干預(yù)FGF介導(dǎo)的TGF-β信號(hào)通路是控制EndMT失衡的有效靶點(diǎn)。

2.2缺氧和缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxia-inducible factor，HIF）HIF是一種轉(zhuǎn)錄因子，是氧穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)因子，作為細(xì)胞的穩(wěn)定成分，可在低氧狀態(tài)下被激活和誘導(dǎo)，靶向調(diào)節(jié)下游基因來介導(dǎo)機(jī)體各項(xiàng)生命活動(dòng)。已有研究發(fā)現(xiàn)HIF下游基因與許多神經(jīng)系統(tǒng)疾病特別是缺血性腦卒中密切相關(guān)[29]。體內(nèi)環(huán)境中，HIF-1α在動(dòng)脈粥樣硬化小鼠主動(dòng)脈弓中表達(dá)增加，與斑塊負(fù)荷最高的區(qū)域重疊，同時(shí)，具有EndMT標(biāo)志物的缺氧細(xì)胞數(shù)量顯著增加。體外環(huán)境中，免疫熒光實(shí)驗(yàn)顯示缺氧狀態(tài)下內(nèi)皮細(xì)胞表型與TGF-β誘導(dǎo)EndMT效果一致。流式細(xì)胞檢測(cè)也證實(shí)缺氧可增加內(nèi)皮細(xì)胞間質(zhì)標(biāo)志物Sca1蛋白、EndMT標(biāo)志物Snai1、a-SMA和TGF-β1的mRNA水平。對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化主動(dòng)脈中具有EndMT表型的單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行缺氧檢測(cè)也證實(shí)，缺氧是EndMT的重要因素[30]。斑塊破裂導(dǎo)致血栓栓塞是心肌梗死的主要原因，與動(dòng)脈斑塊中的新生血管生成有關(guān)。研究表明，HIF-1通過上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)缺血損傷組織中的血管生成和新生血管形成，最終導(dǎo)致斑塊進(jìn)展、出血和潰瘍[31-32]。此外，缺氧條件可誘導(dǎo)心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生EndMT和核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）活化。乙酰膽堿可降低缺氧條件下HIF-1α蛋白表達(dá)水平，抑制NF-κB活化及誘導(dǎo)自噬來抑制缺氧導(dǎo)致的EndMT，從而延緩動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展[33]。

2.3 剪切應(yīng)力和機(jī)械傳感器 剪切應(yīng)力對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有調(diào)節(jié)作用。由于冠狀動(dòng)脈的解剖形態(tài)特征，在降主動(dòng)脈處血流剪切應(yīng)力較高且方向一致，血流表現(xiàn)為穩(wěn)定流，穩(wěn)定流有動(dòng)脈粥樣硬化保護(hù)作用，相反，在主動(dòng)脈弓處血流剪切應(yīng)力較降主動(dòng)脈處下降且方向改變，血流表現(xiàn)為擾動(dòng)流，擾動(dòng)流主要發(fā)生在主動(dòng)脈弓小彎處，能夠促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化，主要特點(diǎn)是低震蕩切應(yīng)力。Andueza等[34]通過對(duì)暴露于擾動(dòng)流中的內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞RNA測(cè)序，證明內(nèi)皮細(xì)胞有高度異質(zhì)性和可塑性。低震蕩切應(yīng)力誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞從動(dòng)脈粥樣硬化保護(hù)表型轉(zhuǎn)變?yōu)榇傺准?xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、造血干細(xì)胞、內(nèi)皮干細(xì)胞和內(nèi)皮源性免疫細(xì)胞樣表型。研究證實(shí)，非選擇性的陽離子通道Piezo1可作為機(jī)械傳感器針對(duì)穩(wěn)定流和擾動(dòng)流分別進(jìn)行對(duì)應(yīng)調(diào)節(jié)[35]，Piezo1首先觸發(fā)相同的鈣內(nèi)流形成初始機(jī)械信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而激活內(nèi)皮反應(yīng)。在穩(wěn)定流條件下，Piezo1激活參與抑制動(dòng)脈粥樣硬化的PI3K/eNOS通路。在擾動(dòng)流條件下，Piezo1激活NF-κB通路以促進(jìn)炎癥反應(yīng)及動(dòng)脈粥樣硬化[36]。因?yàn)镹F-κB通路是已知的炎癥介導(dǎo)EndMT的通路[37]，因此Piezo1可能在調(diào)節(jié)擾動(dòng)流誘導(dǎo)的EndMT中發(fā)揮了重要的機(jī)械感覺作用。此外，機(jī)械傳感器激活素受體樣激酶5（activin receptor-like kinase 5，Alk5）是調(diào)節(jié)擾動(dòng)流誘導(dǎo)的EndMT至關(guān)重要的受體。Alk5及其相關(guān)蛋白Shc與Smad2介導(dǎo)的EndMT通路激活直接相關(guān)[38]。叢蛋白D1也被確定為促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的剪切應(yīng)力的機(jī)械傳感器[39]。內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)擾動(dòng)流反映的可塑性表明，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的進(jìn)展可能涉及多種細(xì)胞類型及機(jī)械感受器之間的復(fù)雜作用，了解、控制內(nèi)皮細(xì)胞生理病理變化過程，確定在不同血流狀態(tài)中內(nèi)皮細(xì)胞激活的過渡類型，可能是開發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化靶向治療方法的重要考慮因素。

2.4 轉(zhuǎn)錄因子和miRNA Snail、Twist是EndMT發(fā)生的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，均在引起動(dòng)脈粥樣硬化的低穩(wěn)態(tài)切應(yīng)力部位表達(dá)較多。Snail可通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移來增強(qiáng)內(nèi)皮對(duì)大分子的滲透性。激活Snail可引起α-SMA、SM22a等間質(zhì)標(biāo)志物表達(dá)上調(diào)，因此可能有助于血管損傷和動(dòng)脈粥樣硬化的形成[40]。但也有研究證實(shí),Snail過度表達(dá)不能直接導(dǎo)致EndMT,但抑制Snail表達(dá)可防止TGF-β2誘導(dǎo)的EndMT[41]。Twist決定細(xì)胞譜系在發(fā)育過程中的最終分化狀態(tài)，對(duì)細(xì)胞形態(tài)變化起重要作用，有Twist1、Twist2兩種分型。Twist1可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，促進(jìn)發(fā)育性血管生成，并通過誘導(dǎo)炎癥來促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化[42]。在腎損傷小鼠模型中，將內(nèi)皮細(xì)胞中Twist1特異性刪除，可顯著抑制EndMT的出現(xiàn)，改善腎臟纖維化[43]。

此外，微小RNA是轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的關(guān)鍵調(diào)控因子，可通過靶向定位轉(zhuǎn)錄因子或調(diào)控與EndMT誘導(dǎo)相關(guān)的信號(hào)通路來激活或抑制EndMT。研究證實(shí)，miR-122在載脂蛋白E基因敲除小鼠和體外EndMT模型中均呈高表達(dá)，在載脂蛋白E基因敲除小鼠中抑制miR-122可以減少斑塊形成[44]。同樣，抑制miR-122可逆轉(zhuǎn)過氧化氫誘導(dǎo)的EndMT。miR-122可以通過轉(zhuǎn)錄因子NPAS3介導(dǎo)的EndMT促進(jìn)斑塊形成，并可能成為治療動(dòng)脈粥樣硬化的新靶點(diǎn)[44]。LINC00657通過miRNA-30c-5p積極調(diào)節(jié)Wnt7b/β-連環(huán)蛋白激活以促進(jìn)EndMT[45]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA ZFAS1通過抑制miR-150-5p觸發(fā)EndMT，從而增加EndMT調(diào)控因子Notch3的表達(dá)[46]。Yoshimatsu等[47]證實(shí)TNF-α可加強(qiáng)TGF-β信號(hào)從而增強(qiáng)TGF-β誘導(dǎo)的EndMT。轉(zhuǎn)錄因子活化T細(xì)胞核因子1、GATA結(jié)合蛋白4、轉(zhuǎn)錄因子SOX9和多功能蛋白聚糖也參與了EndMT。

3 EndMT參與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成并影響斑塊穩(wěn)定性

由于動(dòng)脈粥樣硬化的病理生理學(xué)機(jī)制涉及多種細(xì)胞類型，包括內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和免疫細(xì)胞等。因此人們對(duì)這些細(xì)胞的分化、功能改變進(jìn)行了研究。目前，EndMT被認(rèn)為是導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞分化為促動(dòng)脈粥樣硬化細(xì)胞的一個(gè)關(guān)鍵過程[48]。

3.1 EndMT是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中間質(zhì)細(xì)胞的來源之一 以間質(zhì)細(xì)胞作為來源的平滑肌樣細(xì)胞數(shù)量增加是動(dòng)脈粥樣硬化病理生理過程中的特征。傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)中，心肌固有的平滑肌細(xì)胞被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化平滑肌細(xì)胞增殖的唯一來源，但Evrard等[3]利用Scl啟動(dòng)子成功開發(fā)出內(nèi)皮特異性功能性環(huán)化重組酶，通過內(nèi)皮譜系跟蹤系統(tǒng)確定，小鼠內(nèi)膜斑塊中所有成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞中19%來源于內(nèi)皮源性細(xì)胞，外膜中7%～16%的成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞來自內(nèi)皮源性細(xì)胞。新近，Depuydt等[49]對(duì)人類晚期動(dòng)脈粥樣硬化斑塊進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組分析，識(shí)別出斑塊內(nèi)存在同時(shí)具有平滑肌和內(nèi)皮細(xì)胞特征的EndMT細(xì)胞簇。這證實(shí)EndMT可能在動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展中發(fā)揮積極作用，是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中間質(zhì)細(xì)胞的來源之一。

3.2 EndMT調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞表型及功能 巨噬細(xì)胞隨組織微環(huán)境變化具有高度可塑性，這使巨噬細(xì)胞能夠獲得不同表型，并在復(fù)雜的生理過程中發(fā)揮作用。巨噬細(xì)胞可在體外動(dòng)脈粥樣硬化血管壁上積累，影響內(nèi)皮細(xì)胞向EndMT表型轉(zhuǎn)變，而EndMT細(xì)胞可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞表型和脂質(zhì)攝取。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，EndMT可同時(shí)影響動(dòng)脈粥樣硬化斑塊表面結(jié)構(gòu)和斑塊內(nèi)部，改變巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的表型。在功能上，EndMT減弱了巨噬細(xì)胞的增殖，抗原呈遞細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)，以及氧化低密度脂蛋白反應(yīng)中TNF-α的產(chǎn)生，并且增加氧化低密度脂蛋白的攝取[50]。EndMT可促進(jìn)巨噬細(xì)胞向吞噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變并減弱巨噬細(xì)胞增殖。報(bào)道認(rèn)為，吞噬細(xì)胞增多可能有利于減少壞死核心和動(dòng)脈粥樣硬化病灶的大小[51-52]。巨噬細(xì)胞增殖減少，活化低密度脂蛋白引起的TNF-α生成減少，EndMT細(xì)胞分泌因子引起的抗原呈遞細(xì)胞標(biāo)志物減少，都可能共同促進(jìn)炎癥減少，從而使斑塊表型更加穩(wěn)定[53]，這也意味著EndMT對(duì)巨噬細(xì)胞的影響具有潛在的抗炎作用。

3.3 EndMT與斑塊穩(wěn)定性Evrard等[3]分別檢測(cè)穩(wěn)定纖維粥樣斑塊和不穩(wěn)定粥樣斑塊EndMT細(xì)胞比例，證實(shí)在不穩(wěn)定斑塊中EndMT細(xì)胞比例較高，此外斑塊纖維帽的形成與EndMT細(xì)胞比例之間也呈反比關(guān)系。由此可見，EndMT與動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊和斑塊破裂的出現(xiàn)有直接聯(lián)系。但另一方面，EndMT也可能有助于斑塊的穩(wěn)定性。EndMT誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞分化為肌纖維母細(xì)胞樣細(xì)胞，而肌纖維母細(xì)胞樣細(xì)胞聚集在與穩(wěn)定的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊相關(guān)的厚纖維帽中[54]。此外，由于EndMT對(duì)巨噬細(xì)胞具有潛在抗炎作用，因此，可以推測(cè)EndMT對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定可能起到動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)作用。

3.4 藥物抑制EndMT延緩動(dòng)脈粥樣硬化EndMT是治療心血管疾病的有效靶點(diǎn)。已有研究證實(shí)，部分藥物可能通過抑制EndMT，延緩動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展。淫羊藿苷通過H19/miR-148b-3p/ELF5軸抑制氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)的EndMT，抑制動(dòng)脈粥樣硬化[55]。組蛋白去乙?；?在動(dòng)脈粥樣硬化病變中表達(dá)增加，RGFP966是組蛋白去乙?；?的選擇性抑制劑，可抑制主動(dòng)脈根部EndMT，減少動(dòng)脈粥樣硬化病變[56-57]。此外，臨床降脂藥物辛伐他汀被證明可通過上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中Krtippel樣因子4/miR-483軸抑制EndMT。辛伐他汀也可通過抑制氧化應(yīng)激和TGF-β/Smad信號(hào)通路，減弱EndMT，起到治療動(dòng)脈粥樣硬化的積極作用[58]。以上研究均證實(shí)抑制EndMT在動(dòng)脈粥樣硬化治療中的潛力。然而遺憾的是，目前仍缺乏有效逆轉(zhuǎn)EndMT的藥物以用于動(dòng)脈粥樣硬化治療。

4 結(jié)語與展望

隨著對(duì)EndMT研究的深入，學(xué)者們逐漸意識(shí)到對(duì)EndMT的程度評(píng)估和功能定義仍缺乏共識(shí)，目前主要通過監(jiān)測(cè)各種內(nèi)皮和間質(zhì)標(biāo)志物表達(dá)水平來評(píng)估EndMT的進(jìn)展。但由于已知的內(nèi)皮、間質(zhì)標(biāo)志物表達(dá)具有時(shí)間依賴性，對(duì)主要通過標(biāo)志物表達(dá)水平來評(píng)估EndMT的評(píng)價(jià)體系不利。細(xì)胞機(jī)械表型技術(shù)已證明其在異質(zhì)性腫瘤中識(shí)別不同表型細(xì)胞的能力，評(píng)估轉(zhuǎn)化細(xì)胞的機(jī)械表型能夠僅根據(jù)細(xì)胞變形能力確定細(xì)胞更傾向于間質(zhì)細(xì)胞還是上皮細(xì)胞。由此推測(cè)，這種技術(shù)方法可通過動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)細(xì)胞機(jī)械表型，克服傳統(tǒng)使用細(xì)胞表面標(biāo)志物評(píng)估EndMT的局限，為建立更加精確的EndMT評(píng)估體系提供新思路。EndMT是一種復(fù)雜、多層面的現(xiàn)象，眾多激活因子和信號(hào)通路參與其中，研究也證實(shí)，EndMT還有一個(gè)反向?qū)?yīng)的轉(zhuǎn)變稱為“間質(zhì)-內(nèi)皮轉(zhuǎn)化”,有助于心臟損傷后血管新生，這為未來心血管疾病治療提供了積極思路。此外，EndMT在發(fā)育和疾病以外的穩(wěn)態(tài)條件中的作用尚缺乏深入研究，探索內(nèi)皮可塑性和如何平衡EndMT的保護(hù)和危害作用將變得更有價(jià)值。