成祥

【摘 要】目的：探討不同煎煮時間對大黃總蒽醌類含量的影響。方法：選擇醋酸鎂染色紫外分光光度法測定大黃蒽醌類組分含量，分析大黃在臨床使用中合理的煎煮時間，以最大限度提高大黃總蒽醌類含量。結(jié)果：游離蒽醌在煎煮60min時含量最高（1.479mg），在煎煮10min是含量最低（0.881mg）；結(jié)合蒽醌在煎煮15min～30min時含量最高（1.283mg～1.320mg），在煎煮120min時含量最低（0.710mg）；總蒽醌在煎煮30min時含量最高（2.520mg），在煎煮10min時含量最低（1.973mg）。結(jié)論：臨床在煎煮大黃時若用于清熱瀉火則煎煮60min以最大限度提高游離蒽醌含量，用于瀉下則煎煮30min即可以提高結(jié)合蒽醌含量，避免久煎以降低治療效果。

【關(guān)鍵詞】煎煮時間；大黃；蒽醌類含量

Effects of Different Decocting Time on the content of total anthraquinones in Rhubarb

CHENG Xiang

Huantai Hospital of traditional Chinese Medicine， Zibo， Shandong 256400， China

【Abstract】Objective： To investigate the effect of Different Decocting Time on the content of total anthraquinones in rhubarb. Methods： The content of anthraquinones in rhubarb was determined by magnesium acetate staining UV spectrophotometry， and the reasonable decocting time of Rhubarb in clinical use was analyzed to maximize the content of total anthraquinones in rhubarb. Results： The content of free anthraquinone was the highest （1.479mg） at 60min and the lowest （0.881mg） at 10min； the content of bound anthraquinone was the highest （1.283mg～1.320mg） at 15min～30min and the lowest （0.710mg） at 120min； the content of Total Anthraquinone was the highest （2.520mg） at 30min and the lowest（1.973mg） at 10min. Conclusions： When decocting Rhubarb in clinic， if it is used to clear away heat and fire， decoct it for 60min to maximize the content of free anthraquinone， and decoct it for 30min to reduce the therapeutic effect.

【Key？Words】Decocting time； chinese rhubarb； Anthraquinone content

大黃是臨床上常見的一種中藥材，性苦寒，歸胃經(jīng)、大腸經(jīng)、肝經(jīng)、脾經(jīng)，具有活血化瘀、清熱瀉火、清泄?jié)駸帷a下攻積、瀉火解毒的作用，常被臨床廣泛應(yīng)用于瘀血證、熱結(jié)便秘、熱毒瘡瘍、熱結(jié)胸痞、濕熱瀉痢、淋病、小便不利、咽喉腫痛、胃熱嘔吐、癥瘕積聚、燙傷等多種疾病的治療[1]。蒽醌類是大黃的主要成分，極易在水中溶出，以游離蒽醌與結(jié)合蒽醌的形式存在，其中結(jié)合蒽醌通過水解或代謝可轉(zhuǎn)化為游離蒽醌及糖類。游離蒽醌與清熱瀉火功效相對應(yīng)，抗菌活性顯著，結(jié)合蒽醌與瀉下功效相對應(yīng)[2]。有研究表明，大黃的煎煮時間與蒽醌的含量有一定關(guān)系[3]，為此本研究選擇醋酸鎂染色紫外分光光度法測定大黃蒽醌類組分含量，探討不同煎煮時間對大黃總蒽醌類含量的影響，現(xiàn)進行如下報道。

1.1 儀器設(shè)備

UV1780紫外/可見分光光度計、BP211D萬分之一電子天平、R501旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵、DL-360超聲波清洗機、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。

1.2 試劑試藥

取大黃的干燥根及根莖，大黃素，甲醇、醋酸鎂、冰醋酸、重蒸水、濃鹽酸。

1.3 方法

精密稱定12.5mg大黃素對照品，取適量甲醇溶解后置入50mL容量瓶內(nèi)，加甲醇至刻度，配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。選擇510nm為測定波長，精密量取0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2mL大黃素對照品溶液并置于蒸發(fā)皿中揮干，采用1%醋酸鎂甲醇溶液洗脫，測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：y=3.001x+0.0212，R=0.999，n=3。精密稱取0.2g大黃粉末，加40mL蒸餾水至于水浴加熱回流1h，濾紙濾出，濾出液用于測定游離蒽醌與結(jié)合蒽醌。（1）測定游離蒽醌：取10mL上述濾液，采用氯仿40mL分次萃取，之后再用5%NaOH～2%NH4OH混合液100mL分次萃取，洗滌后過濾，濾液加熱4min后冷卻至室溫，用混合堿液調(diào)整至100mL，30min后于510nm處比色，計算游離蒽醌含量。（2）測定總蒽醌：取上述濾液0.2ml×3，分別放置在具有刻度的試管內(nèi)（規(guī)格15mL），加入40%的FeCI3，加入水溶液0.5mL，經(jīng)水浴加熱20min后加入0.2mL的HCL，再次水浴加熱30min，同時振搖。完成以上操作后使用流水冷卻試液至室溫，將其倒入分液漏斗內(nèi)，加入2次乙醚，每次5.0mL，進行萃取處理，再用5%NaOH至2%NH4OH混合堿液進行2次萃取，分別為5.0mL與3.0mL，過濾后觀察波長為535nm處的吸收度，算出百分含量。（3）測定結(jié)合蒽醌：取10mL上述濾液，加入10mL醋酸鎂與20mL氯仿水浴繼續(xù)回流2h，冷卻后分出氯仿液再用30mL氯仿分次提取，之后再用5%NaOH～2%NH4OH混合液100mL分次萃取，合并提取液并過濾，冷卻至室溫，用混合堿液調(diào)整至100mL，30min后于510nm處比色，計算總蒽醌含量，結(jié)合蒽醌=總蒽醌-游離蒽醌。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料采用（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（χ±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

游離蒽醌在煎煮60min時含量最高（1.479mg），在煎煮10min是含量最低（0.881mg）；結(jié)合蒽醌在煎煮15min～30min時含量最高（1.283mg～1.320mg），在煎煮120min時含量最低（0.710mg）；總蒽醌在煎煮30min時含量最高（2.520mg），在煎煮10min時含量最低（1.973mg），見表1。

大黃是常用的一種中藥材，其治療作用包括涼血解毒、清熱瀉火、利濕退黃和瀉下攻積等，多通過不同炮制品方式進行疾病治療。現(xiàn)代藥理證實，大黃的抗菌、保肝、止血與利膽作用較佳，且能有效對抗腫瘤，可作為腫瘤患者的基礎(chǔ)藥物[4]。大黃具有生殖毒性與肝腎毒性，且生大黃的毒性最強，需要合理確定其煎煮時間，發(fā)揮減毒增效等效用。蒽醌類成分在大黃中的含量比較高，是其最主要的成分，可以用作大黃藥材質(zhì)量的評價指標(biāo)，也是大黃發(fā)揮藥理作用的化學(xué)物質(zhì)之一。為此，在大黃煎煮過程中需要分析蒽醌類的含量變化，總結(jié)不同煎煮時間下，蒽醌類含量的具體變化特點，確定大黃蒽醌類含量最高時的煎煮時間，篩選最佳的煎煮時間，進而合理指導(dǎo)大黃的臨床使用，確保其能夠充分發(fā)揮其藥效[5]。

大黃以湯劑入藥，其煎煮時間的長短常會影響有效成分含量，在本研究中結(jié)合蒽醌在煎煮30min時含量最高（1.320mg），在之后60min內(nèi)大幅下降之后趨于平穩(wěn)，30min后隨著煎煮時間的延長游離蒽醌含量增加，在煎煮60min時含量最高（1.479mg），結(jié)合蒽醌水解為游離蒽醌速度加快，從大黃水煎液結(jié)合蒽醌的含量變化趨勢可得出要發(fā)揮瀉下作用煎煮時間應(yīng)控制在30min內(nèi)，要發(fā)揮清熱瀉火功效可適當(dāng)延長煎煮時間，以1h為宜[6]。大黃水煎過程中蒽醌類成分水解過程早期隨著煎煮時間的改變主要經(jīng)歷溶出期（主要為結(jié)合蒽醌），30min后隨著煎煮時間的改變主要經(jīng)歷水解代謝期（主要為游離蒽醌），該溶出與分解平衡常受水環(huán)境、煎煮時間、溫度等因素的影響，因此除了加強煎煮時間對藥物的影響外，還需控制其他物理因素，最大限度保證藥物功效[7]。

綜上所述，在煎煮大黃時若用于清熱瀉火則煎煮60min以最大限度提高游離蒽醌含量，用于瀉下則煎煮30min即可以提高結(jié)合蒽醌含量，避免久煎以降低治療效果。

參考文獻

[1] 房慶偉，王海彬，茍家保，等.經(jīng)典烘干工藝對大黃中總蒽醌含量的影響[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，32（3）：92-96.

[2] 卞理，竇志華，王丹丹，等.《中華人民共和國藥典》大黃總蒽醌含量測定方法的改進[J].國際中醫(yī)中藥雜志，2021，43（2）：156-160.

[3] 魏江存，陳勇，謝臻，等.紫外-可見分光光度法測定生大黃和醋大黃的總蒽醌含量[J].井岡山大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2017，38（6）：88-92.

[4] 大黃不同炮制品煎煮時間對5種蒽醌類化合物含量影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2020，31（4）：867-870.

[5] 劉剛彥，葉強，余蔥蔥，等.煎煮時間對大黃蒽醌類成分的影響研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，34（2）：79-81.

[6] 武印奇，楊大宇，郭玉巖，等.大黃不同煎煮時間對大柴胡湯中蒽醌類成分和鞣質(zhì)含量的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2020，31（10）：2375-2378.

[7] 王永超，厲夢華，尹曉華.比較大黃浸漬和煎煮兩種不同提取方法過程中蒽醌類成分的含量變化[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2017，49（11）：1283-1285.