劉 盼,楊 慕,賈成霞,張清靖,曲疆奇
( 北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所 漁業(yè)生物技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部北方地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境觀測(cè)試驗(yàn)站,北京 100068 )
恩諾沙星又名乙基環(huán)丙沙星,是人工合成的第三代喹諾酮類(lèi)藥物,該藥物具有高效廣譜、副作用小以及不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn),已被應(yīng)用于動(dòng)物和人類(lèi)多種感染性疾病的治療,對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的細(xì)菌感染性疾病也具有很好的療效[1-4]。臨床上,恩諾沙星被廣泛應(yīng)用于淡水魚(yú)類(lèi)疾病中的出血性敗血癥、爛鰓病、腸炎病、赤皮病等,同時(shí)也已被應(yīng)用于鱘魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)中[5-7]。恩諾沙星在不同種類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)均可不同程度地代謝成環(huán)丙沙星,環(huán)丙沙星容易導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性,且易殘留在動(dòng)物體的血液和肝臟等組織中,對(duì)人類(lèi)健康造成威脅,為保證動(dòng)物源性食品的安全性,應(yīng)對(duì)其進(jìn)行藥殘監(jiān)測(cè)[8]。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是廣泛存在于魚(yú)類(lèi)細(xì)胞漿和線(xiàn)粒體中的重要氨基酸轉(zhuǎn)氨酶,在魚(yú)類(lèi)蛋白質(zhì)代謝中起到非常重要的作用,其活性大小不僅反映氨基酸代謝程度的強(qiáng)弱,也是指示肝細(xì)胞功能的敏感指標(biāo)[9-12]。陳琛等[6]研究了恩諾沙星對(duì)史氏鱘(Acipenserschrencki)和小體鱘(A.ruthenus)體內(nèi)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶系活性的影響,結(jié)果表明,兩種鱘魚(yú)肝臟組織中谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶系的變化幅度明顯大于血漿中。艾曉輝等[13]研究了不同水溫下磺胺甲惡唑在草魚(yú)(Ctenopharyngodonidella)體內(nèi)的藥動(dòng)力,結(jié)果表明,水溫越高,草魚(yú)體內(nèi)的藥物代謝越快。但西伯利亞鱘(A.baeri)在不同水溫下恩諾沙星對(duì)其機(jī)體中轉(zhuǎn)氨酶的影響還未見(jiàn)報(bào)道。筆者選擇西伯利亞鱘最適生長(zhǎng)水溫中的較低溫度(15 ℃)和較高溫度(26 ℃),研究在這兩種水溫條件下口灌恩諾沙星,實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)的西伯利亞鱘體內(nèi)的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的變化,進(jìn)而得出溫度對(duì)恩諾沙星代謝規(guī)律的影響,以期對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)踐中不同水溫下合理應(yīng)用恩諾沙星給藥方式、制定休藥期及藥物殘留標(biāo)準(zhǔn)限量提供基礎(chǔ)性的數(shù)據(jù)。
試驗(yàn)魚(yú)為人工繁殖的西伯利亞鱘,取自北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所房山養(yǎng)殖基地。挑選健壯無(wú)病無(wú)傷的西伯利亞鱘300尾。保證魚(yú)的狀態(tài)正常,無(wú)畸形;體色和皮膚光澤度正常,皮膚緊致無(wú)損傷,無(wú)病灶;眼球飽滿(mǎn),角膜清晰。體質(zhì)量(212.3±5.6) g,體長(zhǎng)(21.16±0.14) cm。試驗(yàn)前于養(yǎng)殖槽中暫養(yǎng)7 d,每日上、下午按體質(zhì)量1%投喂鱘魚(yú)專(zhuān)用不含任何藥物的商品膨化飼料。試驗(yàn)用水為經(jīng)活性炭過(guò)濾、充氧后經(jīng)過(guò)曝氣的自來(lái)水。養(yǎng)殖和暴露期間條件控制:水溫由冷暖機(jī)自動(dòng)控制(海鮮養(yǎng)殖恒溫機(jī),HYH-2DR-B,15 ℃和26 ℃),水硬度8.0 mg/L,pH 7.6±0.3,溶解氧(8.60±1.04) mg/L。試驗(yàn)用西伯利亞鱘經(jīng)抽查,組織中不含恩諾沙星。
1.2.1 藥品及試劑配置
恩諾沙星儲(chǔ)備液的配制:恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品0.1 g,使用流動(dòng)相[V(乙腈)∶V(磷酸四丁基溴化銨)=5∶95]溶解,定容至500 mL,放入棕色瓶中4 ℃保存。該儲(chǔ)備液質(zhì)量濃度為200 μg/mL。
口灌恩諾沙星工作液的配制:取0.5 mL恩諾沙星儲(chǔ)備液,加入流動(dòng)相9.5 mL,配制成質(zhì)量濃度為10.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
1.2.2 給藥及樣品采集
在試驗(yàn)水溫15 ℃和26 ℃下,從90尾西伯利亞鱘中隨機(jī)選取5尾為1組,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取1組魚(yú),共18個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn),另取10尾未口灌恩諾沙星的西伯利亞鱘作空白對(duì)照。試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室?guī)в醒h(huán)系統(tǒng)的玻璃缸中進(jìn)行。用套有橡皮軟管的卡介苗注射器以10 mg/kg[14]給藥劑量口灌恩諾沙星溶液,直立停留幾秒,無(wú)回吐者保留試驗(yàn)。給藥前12 h禁食,并于給藥后0(空白對(duì)照)、0.125、0.25、0.5、1.0、1.5、2、4、6、8、12、18、24、36、48、60、72、96 h和120 h分別采取血液和肝臟樣品,采集的血液于3 mL肝素抗凝管中,混勻,4000 r/min(離心半徑1 cm)下離心15 min,分離血漿,-80 ℃保存待測(cè)。肝臟取出后剪碎,按1∶9 (m/V)加入預(yù)冷生理鹽水(含0.75%氯化鈉和0.03%氯化鉀),用手持式勻漿機(jī)于冰浴中制成勻漿液(10 000 r/min,4 ℃,3 min)。勻漿液經(jīng)10 000 r/min(離心半徑1 cm)離心10 min,取上清液備用。
谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶酶活性測(cè)定按照南京建成生物工程研究所試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。組織蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010及SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=5)表示,各組樣本之間采用單因素方差分析和Duncan′s多重比較檢驗(yàn)均值的差異顯著性,以P<0.05為差異顯著。
2.1.1 不同溫度下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響
不同溫度下,恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響見(jiàn)圖1。兩溫度組中,血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均被緩慢誘導(dǎo)至峰值。其中15 ℃試驗(yàn)組谷草轉(zhuǎn)氨酶活性振蕩較劇烈。谷草轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在給藥后的24 h [(199.73±6.06) U/mg],與對(duì)照組[(71.24±2.36) U/mg]差異顯著(P<0.05),但與其之后36~72 h幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。而在26 ℃試驗(yàn)組中,血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在36 h [(236.02±10.29) U/mg]出現(xiàn)峰值,與對(duì)照組[(38.86±2.98) U/mg]差異顯著(P<0.05),后緩慢下降至平穩(wěn)。
圖1 不同溫度口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.1 Glutamic-oxaloacetic transaminase activity in serum of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at different temperatures
不同溫度下口灌恩諾沙星,血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性隨時(shí)間變化見(jiàn)圖2。谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均呈現(xiàn)逐漸升高至一定水平后趨于平穩(wěn)的變化趨勢(shì)。兩溫度組中,血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均在6 h達(dá)到最高。其中15 ℃峰值為(66.73±3.71) U/g,與對(duì)照組[(18.15±1.27) U/mg]差異顯著(P<0.05);26 ℃試驗(yàn)組中,血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性峰值為(286.93±24.50) U/mg,也與對(duì)照組[(7.36±1.04) U/mg]呈顯著性差異(P<0.05)。在15 ℃試驗(yàn)組中,谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在6 h達(dá)到最大值后逐漸下降,至18 h [(42.14±5.29) U/mg]后又緩慢上升,從24 h [(53.98±3.67) U/mg]后數(shù)值逐漸穩(wěn)定,各時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)。在26 ℃試驗(yàn)組中,血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性由1 h[(145.65±10.04) U/mg]時(shí)間點(diǎn)開(kāi)始逐步上升至峰值后緩慢下降,在這段時(shí)間內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)。由其變化趨勢(shì)可見(jiàn),高溫血清試驗(yàn)組中谷丙轉(zhuǎn)氨酶更易被誘導(dǎo)且酶活性水平更高。
圖2 不同溫度口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.2 Glutamic-pyruvic transaminase activity in serum of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at different temperatures
2.1.2 不同溫度下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響
不同溫度下,恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響見(jiàn)圖3。兩溫度組中,肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均被明顯誘導(dǎo)至一定數(shù)值后趨于穩(wěn)定。15 ℃試驗(yàn)組肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在給藥后的0.5 h [(158.10±14.25) U/mg],與對(duì)照組[(81.33±2.36) U/mg]差異顯著(P<0.05),但與其之后各組差異不顯著(P>0.05)。而26 ℃試驗(yàn)組中,肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性則在2 h[(182.79±18.90) U/mg]出現(xiàn)峰值,與對(duì)照組[(18.26±1.24) U/mg]差異顯著(P<0.05),后緩慢下降并趨于平穩(wěn),與后面各時(shí)間段差異不顯著(P>0.05)。
圖3 不同溫度口灌恩諾沙星后西柏利亞鱘肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.3 Glutamic-oxaloacetic transaminase activity in liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at different temperatures
不同溫度下口灌恩諾沙星,肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定見(jiàn)圖4,谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均呈現(xiàn)逐漸升高至一定水平后趨于平穩(wěn)的變化趨勢(shì)。不同溫度下,15 ℃試驗(yàn)組中肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在短時(shí)間內(nèi)被顯著誘導(dǎo),在1.5 h時(shí)即達(dá)到活性峰值[(134.29±3.98) U/mg],與對(duì)照組[(17.352±1.53) U/mg]差異顯著(P<0.05),隨后逐漸趨于平穩(wěn)。26 ℃試驗(yàn)組中,肝臟在36 h達(dá)到最大值[(129.40±16.00) U/mg],與對(duì)照組[(60.13±2.325) U/mg]差異顯著(P<0.05),但與其后的各時(shí)間段差異不顯著(P>0.05)。由其變化趨勢(shì)可見(jiàn),兩個(gè)溫度下,肝臟組織中谷丙轉(zhuǎn)氨酶更易被誘導(dǎo)且酶活性水平更高。
圖4 不同溫度口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.4 Glutamic-pyruvic transaminase activity in liver of Siberian sturgeon orally administrated with of enrofloxacin at different temperatures
2.2.1 15 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響
15 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性影響見(jiàn)圖5。由圖5可見(jiàn),口灌恩諾沙星0~4 h(除0.25 h外),魚(yú)體血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性差異不顯著(P>0.05),而6~24 h時(shí),血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05),但36~120 h(除72 h外),肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性又顯著高于血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)。
圖5 15 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.5 The activity of glutamic-oxaloacetic transaminase in serum and liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 15 ℃
15 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性影響見(jiàn)圖6。與谷草轉(zhuǎn)氨酶不同,對(duì)比0.25~4 h、36~120 h兩個(gè)時(shí)間段,肝臟內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05),而試驗(yàn)中6~24 h時(shí)間段內(nèi),血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性差異不顯著(P>0.05)。
圖6 15 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.6 The activity of glutamic-pyruvic transaminase in serum and liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 15 ℃
2.2.2 26 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響
26 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶的影響見(jiàn)圖7。0~0.5 h,西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性比肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性略高,但差異不顯著(P>0.05);1~4 h,肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性又略高于血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性,差異也不顯著(P>0.05);6~120 h,西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均高于肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性,其中在18、24、36 h時(shí)間點(diǎn)上差異顯著(P<0.05)。
圖7 26 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.7 The activity of glutamic-oxaloacetic transaminase in serum and liver at of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 26 ℃
26 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性影響見(jiàn)圖8。與谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化相似,0~0.5 h,鱘魚(yú)肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05);1.5~120 h,鱘魚(yú)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均高于肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性,4~120 h中每個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均顯著高于肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)。
圖8 26 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.8 The activity of glutamic-pyruvic transaminase in serum and liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 26 ℃
谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是動(dòng)物機(jī)體中參與藥物代謝的兩個(gè)關(guān)鍵的轉(zhuǎn)氨酶,它們?cè)跈C(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用[15-16]。二者均為非特異性免疫功能酶,但它們存在的組織不同[17-20],谷草轉(zhuǎn)氨酶廣泛分布于各個(gè)組織器官,而存在于肝細(xì)胞線(xiàn)粒體中較多,細(xì)胞質(zhì)和線(xiàn)粒體中的谷草轉(zhuǎn)氨酶是保證蘋(píng)果酸穿梭作用的重要酶系之一;谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于各組織細(xì)胞中,只有少量釋放入血液中[21-22]。谷草轉(zhuǎn)氨酶與谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的大小不僅反映氨基酸代謝程度的強(qiáng)弱,其活性變化與肝細(xì)胞的炎癥、變性等也密切相關(guān);血清中的轉(zhuǎn)氨酶活性亦可表征肝功能是否受到損傷,因此血清和肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性變化均為反映肝功能正常與否的主要敏感指標(biāo),可借以評(píng)價(jià)藥物的毒副作用[10]。
谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的主要作用是催化氨基酸生成酮酸。谷草轉(zhuǎn)氨酶催化谷氨酸與草酰乙酸的轉(zhuǎn)氨作用,谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化谷氨酸與丙氨酸的轉(zhuǎn)氨作用。當(dāng)機(jī)體中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性較弱時(shí),轉(zhuǎn)氨作用較弱;反之,當(dāng)機(jī)體中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性較高時(shí),加快尿素生成,轉(zhuǎn)氨作用相應(yīng)增加,聯(lián)合脫氨作用容易進(jìn)行,氨基酸的氧化分解作用增強(qiáng),減少氨基酸代謝產(chǎn)物對(duì)機(jī)體的毒害,從而保持機(jī)體的穩(wěn)定[9,17,23]。通過(guò)對(duì)血清及肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活性的檢測(cè),可以查明機(jī)體肝功能是否健康。健康血清中這兩種酶的活性均不高[24]。
在本試驗(yàn)中,口灌10 mg/kg恩諾沙星,15、26 ℃條件下西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均有所升高。15 ℃下西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值分別出現(xiàn)在給藥后的24 h和6 h,而26 ℃下谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在36 h和6 h。15 ℃下西伯利亞鱘肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在0.5 h和1.5 h,而26 ℃下谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值則分別出現(xiàn)在2 h和36 h。這說(shuō)明低溫下誘導(dǎo)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性達(dá)到峰值的時(shí)間較高溫更短。
由峰值看,15 ℃下血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的峰值為(199.73±6.06) U/mg和(66.73±3.71) U/mg,顯著低于26 ℃下血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的峰值[(236.02±10.29) U/mg和(286.93±24.50) U/mg]。與血清指標(biāo)不同,15 ℃下肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶的峰值[(158.10±14.25) U/mg]與26 ℃下谷草轉(zhuǎn)氨酶的峰值[(182.79±18.90) U/mg]差異顯著(P<0.05),但谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性峰值在兩個(gè)溫度下差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明,谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在高溫下的峰值均高于低溫下的峰值。說(shuō)明谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在高溫下更易被誘導(dǎo)。
在兩個(gè)溫度下,西伯利亞鱘血清和肝細(xì)胞內(nèi)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性隨時(shí)間推移而升高,之后則趨于平緩,這與乳酸諾氟沙星對(duì)南方大口鲇(Silurussoldatovimeridionalis)[25]肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響和高效氯氰菊酯殺蟲(chóng)劑對(duì)鯽(Carassiusauratusauratus)[26]體內(nèi)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響相似。在低溫下6~24 h,血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性高于肝臟,而隨著時(shí)間延長(zhǎng),肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性又高于血清,說(shuō)明藥物未對(duì)魚(yú)體造成損傷;但高溫18~36 h,血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性一直高于肝臟。與谷草轉(zhuǎn)氨酶相似,谷丙轉(zhuǎn)氨酶低溫下從0.25 h開(kāi)始肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于血清,但高溫下血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于肝臟。這是因?yàn)樵诟邷叵?,肝?xì)胞受到藥物刺激,產(chǎn)生了一定的應(yīng)激反應(yīng),細(xì)胞膜的通透性增大,肝細(xì)胞內(nèi)這兩種酶的活性降低,導(dǎo)致大量谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶滲入血液,致使肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性明顯下降[25]。試驗(yàn)結(jié)果表明,實(shí)際生產(chǎn)中,在應(yīng)用有效藥物含量之前,要充分考慮到環(huán)境因素。高溫天氣下,要適當(dāng)減小用藥量,盡量避免藥物對(duì)西伯利亞鱘機(jī)體帶來(lái)的影響。