王金蘭，劉志華，趙英楠，趙 明，李 軍，時志春，王 丹，梁欣蕊，孫立秋，張樹軍

工業(yè)大麻地上部分化學(xué)成分研究（Ⅱ）

王金蘭1, 2，劉志華1，趙英楠1, 2，趙 明1, 2，李 軍1, 2，時志春1, 2，王 丹1, 2，梁欣蕊1，孫立秋1, 2，張樹軍1, 2

1.齊齊哈爾大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006 2.黑龍江省工業(yè)大麻加工技術(shù)創(chuàng)新中心，黑龍江 齊齊哈爾 161006

研究工業(yè)大麻地上部分的化學(xué)成分。采用硅膠柱色譜及HPLC等色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，通過理化性質(zhì)與波譜數(shù)據(jù)分析鑒定結(jié)構(gòu)。從工業(yè)大麻地上部分的醋酸乙酯萃取物中分離得到20個單體化合物，分別鑒定為大麻色原烯（1）、次大麻色原烯（2）、次大麻酚（3）、(2, 6)-2,6-壬二烯酸（4）、大麻艾爾松酚（5）、acetyl cannabispirol（6）、對羥基苯甲醛（7）、8-羥基乙酸芳樟酯（8）、羥基二氫博伏內(nèi)酯（9）、次大麻艾爾松酚（10）、6-hydroxy-?(7,8)-cannabichromene（11）、cannabispiran（12）、cannabispiradienone（13）、13-羥基-9,11,15-十八碳三烯酸（14）、(±)-2,3,3a,5-tetrahydro- 1-benzo[]pyrrolo[2,1-b][1,3]oxazin-1-one（15）、次大麻艾爾松酸B（16）、亞麻酸甲酯（17）、棕櫚酸甲酯（18）、2,5-二叔丁基苯（19）、-[2-()-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-ethyl]-3-(4-hydroxy-3-methoxy- phenyl)-acrylamide（20）?；衔?5為新天然產(chǎn)物，命名為大麻內(nèi)酰胺A；化合物4、8、9、14、19、20為首次從該屬植物中分離得到，且補充了化合物10、16的核磁共振碳譜數(shù)據(jù)。

工業(yè)大麻；大麻素；螺環(huán)；大麻內(nèi)酰胺A；(2, 6)-2,6-壬二烯酸；8-羥基乙酸芳樟酯；次大麻艾爾松酚

工業(yè)大麻L.是植株中四氫大麻酚（tetrahydrocannabinol，THC）含量低于0.3%，不具備提取毒性成分THC或直接作為毒品吸食價值的漢麻，又叫火麻、黃麻、漢麻等，為?？拼舐閷僖荒晟荼局参?，多雌雄異株，在我國各地均有分布[1]，但僅黑龍江、云南2省允許規(guī)?；N植。近年來人們對工業(yè)大麻進(jìn)行了廣泛的研究，結(jié)果表明其提取物具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗炎、抗驚厥和神經(jīng)保護(hù)等作用[2]。為進(jìn)一步開發(fā)利用工業(yè)大麻資源，本研究在前期研究[3]的基礎(chǔ)上，從工業(yè)大麻甲醇提取液醋酸乙酯萃取物中分離得到20個化合物，分別鑒定為大麻色原烯（cannabichromene，1）、次大麻色原烯（cannabivarichromene，2）、次大麻酚（cannabivarin，3）、(2,6)-2,6-壬二烯酸 [(2,6)-2,6-nonadienoic acid，4]、大麻艾爾松酚（cannabielsoin，5）、acetyl cannabispirol（6）、對羥基苯甲醛（-hydroxybenzaldehyde，7）、8-羥基乙酸芳樟酯（8-hydroxylinalyl acetate，8）、羥基二氫博伏內(nèi)酯（hydroxydihydrobovolide，9）、次大麻艾爾松酚（cannabielsoin-C3，10）、6-hydroxy-(7,8)- cannabichromene（11）、cannabispiran（12）、cannabispiradienone（13）、13-羥基-9,11,15-十八碳三烯酸（13-hydroxy-9,11,15-octadecatrienoic acid，14）、2,3,3a,5-tetrahydro-1-benzo[]pyrrolo [2,1-b][1,3]oxazin-1-one（15）、次大麻艾爾松酸 B（cannabielsoic acid B-C3，16）、亞麻酸甲酯（methyl linolenate，17）、棕櫚酸甲酯（methyl hexadecanoate，18）、2,5-二叔丁基苯酚（2,5-di-tert-butylphenol，19）、-[2-()-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-ethyl]-3-(4- hydroxy-3-methoxy- phenyl)-acrylamide（20）。其中化合物15為新天然產(chǎn)物，化合物4、8、9、14、19、20為首次從該屬植物中分離得到。

1 材料與儀器

X-6 顯微熔點測定儀（北京泰克儀器有限公司）；Bruker AV-600型核磁共振波譜儀（瑞士Bruker公司，TMS為內(nèi)標(biāo)）；AUTOPOL V型旋光儀（美國魯?shù)婪蚬荆粓A二色譜儀（J-1500 CD光譜儀，日本分光株式會社）；半制備高壓液相色譜儀（日本日立公司，LC-6AD泵，Shodex RI SE-61視差折光檢測器）；PREP-SIL（250 mm×10 mm，5 μm）不銹鋼色譜柱；PREP-ODS（250 mm×10 mm，5 μm）不銹鋼色譜柱；柱色譜用硅膠（200～300目）為青島海洋化工廠產(chǎn)品；薄層色譜硅膠板為煙臺化工廠生產(chǎn)。有機(jī)溶劑為國藥集團(tuán)上海試劑廠產(chǎn)品，其他試劑為分析純。

工業(yè)大麻于2018年7月采自于黑龍江省大興安嶺地區(qū)，經(jīng)大興安嶺金億順漢麻種植專業(yè)合作社劉祥忠高級農(nóng)藝師鑒定為工業(yè)大麻L.。標(biāo)本（CSL-201807）收藏于齊齊哈爾大學(xué)天然產(chǎn)物研究室。

2 提取與分離

干燥的工業(yè)大麻地上部分5.5 kg，用甲醇室溫浸泡3 d后過濾，重復(fù)3次，合并甲醇浸提液濃縮至小體積加水混懸，依次用正己烷和醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液并減壓濃縮至恒定質(zhì)量，得到醋酸乙酯萃取物87.7 g。

取醋酸乙酯萃取物32.0 g，用硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（6∶4）8.5 L、（3∶7）7.0 L，醋酸乙酯-甲醇（8∶2）4.0 L、（5∶5）4.0 L，甲醇（3.0 L）洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流分，濃縮得到12個組分（F1～F12）。F3（7.37 g）用硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（9∶1）6.0 L、（7∶3）5.0 L，醋酸乙酯（2.0 L），醋酸乙酯-甲醇（5∶5）2.0 L洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流分，濃縮得到13個組分（F3-1～F3-13）。F3-7（1.31 g）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯97∶3，體積流量4 mL/min）分離得化合物1（1.8 mg，R＝17.56 min）、2（2.9 mg，R＝31.04 min）、3（1.6 mg，R＝57.46 min）。F4（4.0 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（8∶2）4.0 L、（6∶4）1.5 L、（3∶7）3.0 L，醋酸乙酯-甲醇（5∶5）1.0 L洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流分，濃縮得到9個組分（F4-1～F4-9）。F4-4（232.0 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯8∶2，體積流量4 mL/min）分離得到8個組分（F4-4-1～F4-4-8）。F4-4-2（74.8 mg）用反相高效液相色譜（甲醇-水8∶2，體積流量4 mL/min）分離得化合物4（3.0 mg，R＝5.21 min）。F4-5-2（402.2 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯9∶1，體積流量4 mL/min）分離得化合物5（4.6 mg，R＝27.09 min）。F4-5-3（304.8 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯8∶2，體積流量4 mL/min）分離得到8個組分（F4-5-3-1～F4-5-3-8）。F4-5-3-4（60.7 mg）用反相高效液相色譜（甲醇-水8∶2，體積流量4 mL/min）分離得化合物6（1.6 mg，R＝6.48 min）。F4-5-3-5（46.5 mg）用反相高效液相色譜（甲醇-水8∶2，體積流量4 mL/min）分離得化合物7（1.9 mg，R＝3.92 min）、8（1.1 mg，R＝6.79 min）、9（1.7 mg，R＝4.63 min）、10（4.0 mg，R＝7.13 min）、11（2.8 mg，R＝8.86 min）。F4-5-3-7（32.7 mg）用反相高效液相色譜（甲醇-水8∶2，體積流量4 mL/min）分離得化合物12（2.0 mg，R＝6.88 min）。F4-6（501.2 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯75∶25，體積流量4 mL/min）分離得化合物13（2.4 mg，R＝27.34 min）。F5（2.3 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（7∶3）2.0 L、（5∶5）1.5 L、（1∶9）1.0 L，醋酸乙酯-甲醇（5∶5）1.0 L洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流分，濃縮得到10個組分（F5-1～F5-10）。F5-5（37.7 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯7∶3，體積流量4 mL/min）分離得化合物14（1.0 mg，R＝9.38 min）。F5-6（678.3 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯7∶3，體積流量4 mL/min）分離得到10個組分（F5-6-1～F5-6-10）。F5-6-6（94.6 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯8∶2，體積流量4 mL/min）分離得化合物15（1.5 mg，R＝21.3 min）。F6（2.01 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（65∶35）2 L、（6∶4）1.5 L、（1∶9）1.0 L洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流分，濃縮得到15個組分（F6-1～F6-15）。F6-9（93.0 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯4∶6，體積流量4 mL/min）分離得到6個組分（F6-9-1～F6-9-6）。F6-9-1（42.6 mg）用正相高效液相色譜（正己烷-醋酸乙酯6∶4，體積流量4 mL/min）分離得化合物16（3.3 mg，R＝9.26 min）。F8（8.6 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（2∶8）3.0 L、（0∶1）2.0 L、醋酸乙酯-甲醇（9∶1）3.0 L、（6∶4）3.0 L洗脫，經(jīng)TLC檢測合并相同流分，濃縮得到11個組分（F8-1～F8-11）。F8-2（98.7 mg）用反相高效液相色譜（甲醇-水95∶5，體積流量4 mL/min）分離得化合物17（3.1 mg，R＝7.58 min）、18（1.3 mg，R＝10.91 min）、19（1.5 mg，R＝16.73 min）。F8-6（542.5 mg）用反相高效液相色譜（甲醇-乙腈-水23∶7∶70，體積流量4 mL/min）分離得化合物20（3.5 mg，R＝29.98 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色脂狀物，[α]25 D?53.2° (0.4, CH3OH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)6.61 (1H, d,= 10.0 Hz, H-1), 6.25 (1H, s, H-5′), 6.11 (1H, s, H-3′), 5.49 (1H, d,= 10.0 Hz, H-2), 5.09 (1H, m, H-6), 2.42 (2H, t,= 7.4 Hz, H-1″), 1.66 (3H, s, H-8), 1.58 (3H, s, H-9), 1.57 (2H, m, H-2″), 1.38 (3H, s, H-10), 1.30 (4H, m, H-3″, 4″), 0.88 (3H, t,= 6.8 Hz, H-5′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 154.1 (C-2′), 150.9 (C-6′), 144.8 (C-4′), 131.6 (C-7), 127.3 (C-6), 124.2 (C-1), 116.7 (C-2), 109.2 (C-5′), 107.6 (C-1′), 107.0 (C-3′), 78.2 (C-2), 41.3 (C-5), 35.9 (C-1′′), 31.4 (C-3′′), 30.2 (C-2′′), 26.5 (C-9), 25.9 (C-8), 22.7 (C-4), 22.5 (C-34′′), 17.8 (C-10), 14.2 (C-5′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[4]，故鑒定化合物1為大麻色原烯。

化合物2：淡黃色脂狀物，[α]25 D?20.5° (0.2, CH3OH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.61 (1H, d,= 10.0 Hz, H-1), 6.25 (1H, s, H-5′), 6.11 (1H, s, H-3′), 5.49 (1H, d,= 10.0 Hz, H-2), 5.09 (1H, m, H-6), 2.42 (2H, t,= 7.4 Hz, H-1′′), 2.10 (2H, m, H-5), 1.76 (1H, m, H-4a), 1.66 (3H, s, H-8), 1.65 (1H, m, H-4b), 1.58 (2H, m, H-2′′), 1.57 (3H, s, H-9), 1.38 (3H, s, H-10), 0.92 (3H, t,= 7.4 Hz, H-3′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 154.1 (C-2′), 150.9 (C-6′), 144.8 (C-4′), 131.6 (C-7), 127.3 (C-6), 124.2 (C-1), 116.7 (C-2), 109.2 (C-5′), 107.6 (C-1′), 107.0 (C-3′), 78.2 (C-2), 41.3 (C-5), 38.0 (C-1′′), 26.5 (C-9), 25.9 (C-8), 24.0 (C-2′′), 22.7 (C-4), 17.8 (C-10), 13.8 (C-3′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[4]，故鑒定化合物2為次大麻色原烯。

化合物3：淺黃色脂狀物；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 8.15 (1H, s, H-2), 7.14 (1H, d,= 7.8 Hz, H-5), 7.07 (1H, d,= 7.8 Hz, H-4), 6.43 (1H, s, H-5′), 6.29 (1H, s, H-3′), 2.48 (2H, t,= 7.4 Hz, H-1′′), 2.38 (3H, s, H-7), 1.63 (2H, m, H-2′′), 1.60 (6H, s, H-9, 10), 0.89 (3H, t,= 6.6 Hz, H-3′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 154.7 (C-2′), 153.0 (C-6′), 144.3 (C-4′), 136.9 (C-6), 136.9 (C-3), 127.6 (C-4), 127.5 (C-5′), 126.4 (C-2), 122.7 (C-5), 110.8 (C-1′), 109.9 (C-3′), 108.7 (C-1), 77.3 (C-8), 37.2 (C-1′′), 27.2 (C-9, 10), 23.9 (C-2′′), 21.5 (C-7), 13.8 (C-3′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[4]，故鑒定化合物3為次大麻酚。

化合物4：淡黃色粉末，mp 136～138 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.07 (1H, dt,= 15.6, 6.6 Hz, H-3), 5.84 (1H, d,= 15.6 Hz, H-2), 5.43 (1H, dt,= 10.2, 8.4 Hz, H-6), 5.31 (1H, dt,= 10.2, 7.8 Hz, H-7), 2.29 (2H, m, H-4), 2.22 (2H, m, H-5), 2.04 (2H, m, H-8), 0.96 (3H, t,= 7.2 Hz, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 171.1 (C-1), 151.5 (C-3), 133.1 (C-6), 127.0 (C-7), 120.9 (C-2), 32.4 (C-4), 25.5 (C-5), 20.6 (C-8), 14.2 (C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[5]，故鑒定化合物4為 (2,6)- 2,6-壬二烯酸。

化合物5：淡黃色脂狀物，[α]25 D?36.9° (0.17, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.30 (1H, s, H-2′), 6.28 (1H, s, H-4′), 5.38 (1H, brs, 5′-OH), 5.07 (1H, s, H-9a), 5.04 (1H, s, H-9b), 4.11 (1H, d,= 6.0 Hz, H-2), 3.33 (1H, dd,= 11.4, 6.0 Hz, H-3), 2.49 (2H, t,= 7.8 Hz, H-1′′), 1.88 (1H, m, H-4), 1.83 (3H, s, H-10), 1.72 (3H, m, H-5a, 6), 1.57 (3H, m, H-5b, 2′′), 1.48 (3H, s, H-7), 1.30 (4H, m, H-3′′, 4′′), 0.88 (3H, t,= 6.6 Hz, H-5′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 159.9 (C-1′), 153.3 (C-8), 152.0 (C-5′), 144.8 (C-3′), 116.8 (C-6′), 111.4 (C-9), 109.7 (C-4′), 103.2 (C-2′), 89.3 (C-2), 69.2 (C-1), 48.3 (C-4), 42.0 (C-3), 36.0 (C-1′′), 34.6 (C-6), 31.5 (C-3′′), 30.9 (C-2′′), 28.2 (C-7), 25.8 (C-5), 22.6 (C-4′′), 22.6 (C-10), 14.0 (C-5′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[6]，故鑒定化合物5為大麻艾爾松酚。

化合物6：淺黃色粉末，mp 184～185 ℃，[α]25 D21.5° (1.0, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)6.36 (1H, s, H-7), 6.14 (1H, s, H-5), 5.07 (1H, s, OH-8), 4.66 (1H, s, H-4′), 3.75 (3H, s, -OCH3), 2.85 (2H, t,= 7.2 Hz, H-3), 2.42 (2H, m, H-2′a, 6′a), 2.10 (3H, s, H-2′′), 2.03 (2H, m, H-2), 1.90 (2H, m, H-5′), 1.70 (2H, m, H-2′b, 6′b), 1.38 (2H, m, H-3′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)170.8 (C-1′′), 160.0 (C-6), 153.0 (C-8), 146.5 (C-4), 128.5 (C-9), 102.2 (C-5), 100.9 (C-7), 69.0 (C-4′), 55.4 (-OCH3), 47.9 (C-1), 34.9 (C-2), 31.0 (C-3), 29.1 (C-3′, 5′), 27.1 (2′, 6′), 21.5 (C-2′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[7]，故鑒定化合物6為acetyl cannabispirone。

化合物7：無色針狀結(jié)晶（氯仿），mp 110～114 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 9.88 (1H, s, H-7), 7.82 (2H, d,= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.95 (2H, d,= 8.4 Hz, H-3, 5), 5.51 (1H, s, 4-OH)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 190.8 (C-7), 161.1 (C-4), 132.4 (C-2, 6), 130.2 (C-1), 115.9 (C-3, 5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[8]，故鑒定化合物7為對羥基苯甲醛。

化合物8：淡黃色脂狀物；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.91 (1H, dd,= 17.4, 10.8 Hz, H-2), 5.47 (1H, t,= 7.2 Hz, H-6), 5.22 (1H, brd,= 17.4 Hz, H-1a), 5.08 (1H, brd,= 10.8 Hz, H-1b), 4.44 (2H, brs, H-8), 2.10 (2H, m, H-5), 2.07 (3H, s, H-2′), 1.65 (3H, m, H-9), 1.63 (2H, m, H-4), 1.30 (3H, s, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 171.2 (C-1′), 144.8 (C-7), 130.3 (C-2), 129.4 (C-6), 111.9 (C-1), 73.3 (C-3), 70.2 (C-8), 41.5 (C-5), 28.0 (C-4), 22.5 (C-2′), 21.0 (C-9), 14.0 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)基本一致[9]，故鑒定化合物8為 8-羥基乙酸芳樟酯。

化合物9：淺黃色粉末，mp 131～135 ℃，[α]25 D6.5° (0.5, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 3.02 (1H, s, 4-OH), 2.02 (1H, m, H-5a), 1.95 (3H, s, H-10), 1.82 (3H, s, H-11), 1.75 (1H, m, H-5b), 1.25 (6H, m, H-6～8), 0.88 (3H, t,= 6.6 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 172.0 (C-1), 157.7 (C-3), 125.4 (C-2), 106.9 (C-4), 36.0 (C-6), 31.5 (C-8), 22.6 (C-5), 22.4 (C-7), 13.9 (C-9), 10.7 (C-10), 8.5 (C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[10]，故鑒定化合物9為羥基二氫博伏內(nèi)酯。

化合物10：淡黃色脂狀物，[α]25 D?30.9° (0.1, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)6.30 (1H, s, H-2′), 6.27 (1H, s, H-4′), 5.37 (1H, br s, OH-5′), 5.07 (1H, s, H-9a), 5.04 (1H, s, H-9b), 4.11 (1H, d,= 6.0 Hz, H-2), 3.33 (1H, dd,= 11.4, 6.0 Hz, H-3), 2.48 (2H, t,= 7.8 Hz, H-1′′), 1.88 (1H, m, H-4), 1.82 (3H, s, H-10), 1.72 (3H, m, H-5a, 6), 1.59 (3H, m, H-5b, 2′′), 1.48 (3H, s, H-7), 0.92 (3H, t,= 6.6 Hz, H-3′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)159.9 (C-1′), 153.4 (C-8), 152.0 (C-5′), 144.6 (C-3′), 116.8 (C-6′), 111.4 (C-9), 109.8 (C-4′), 103.2 (C-2′), 89.3 (C-2), 69.2 (C-1), 48.3 (C-4), 42.0 (C-3), 38.1 (C-1′′), 34.7 (C-6), 28.3 (C-7), 25.8 (C-5), 24.3 (C-2′′), 22.6 (C-10), 13.9 (C-5′′)。該化合物的NMR數(shù)據(jù)與大麻艾爾松酚（5）對照，僅在高場相差2個亞甲基，其余數(shù)據(jù)基本一致，根據(jù)文獻(xiàn)報道[11]，確定為大麻艾爾松酚（5）的丙基同系物，鑒定化合物10為次大麻艾爾松酚。

化合物11：淡黃色脂狀物；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.62 (1H, d,= 10.2 Hz, H-1), 6.24 (1H, s, H-5′), 6.12 (1H, s, H-3′), 5.47 (1H, d,= 10.2 Hz, H-2), 4.93 (1H, brs, H-8a), 4.83 (1H, brs, H-8b), 4.68 (1H, m, 2′-OH), 4.06 (1H, t,= 6.6 Hz, H-6), 2.44 (2H, t,= 7.2 Hz, H-1′′), 1.70 (3H, s, H-9), 1.38 (3H, s, H-10), 0.88 (3H, t,= 6.6 Hz, H-5′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 153.9 (C-2′), 151.0 (C-6′), 147.2 (C-4′), 144.9 (C-7), 126.9 (C-8), 117.0 (C-1), 111.1 (C-2), 109.1 (C-5′), 107.7 (C-1′), 106.8 (C-3′), 77.9 (C-3), 75.9 (C-6), 37.0 (C-1′′), 35.9 (C-3′′), 31.5 (C-2′′), 30.6 (C-9), 29.3 (C-5), 26.4 (C-4), 22.5 (C-4′′), 17.6 (C-10), 14.0 (C-5′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[12]，故鑒定化合物11為6-hydroxy-?(7,8)- cannabichromene。

化合物12：淺黃色粉末，mp 179～180 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.38 (1H, s, H-7), 6.11 (1H, s, H-5), 4.92 (1H, s, 8-OH), 3.75 (3H, s, -OCH3), 2.95 (2H, t,= 7.2 Hz, H-3), 2.52 (2H, m, H-6′), 2.51 (2H, m, H-3′), 2.49 (2H, m, H-5′), 2.23 (2H, m, H-2), 2.82 (2H, m, H-2′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 212.9 (C-4′), 160.3 (C-6), 152.9 (C-8), 146.5 (C-4), 126.7 (C-9), 102.1 (C-5), 100.9 (C-7), 55.4 (-OCH3), 47.7 (C-1), 39.0 (C-3, 5), 35.3 (C-2), 34.4 (2, 6), 31.0 (C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[13]，故鑒定化合物12為cannabispiran。

化合物13：淺黃色粉末，mp 158～161 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3):6.99 (2H, d,= 10.2 Hz, H-2′, 6′), 6.46 (1H, s, H-7), 6.38 (2H, d,= 10.2 Hz, H-3′, 5′), 6.22 (1H, s, H-5), 4.84 (1H, s, OH-8), 3.77 (3H, s, -OCH3), 3.11 (2H, t,= 7.2 Hz, H-3), 2.32 (2H, t,= 7.2 Hz, H-2)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 193.4 (C-4′), 160.2 (C-6), 154.0 (C-8), 152.5 (C-2′, 6′), 147.1 (C-4), 128.8 (C-9), 128.3 (C-3′, 5′), 103.8 (C-5), 101.0 (C-7), 55.6 (-OCH3), 55.3 (C-1), 38.3 (C-2), 31.0 (C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[14]，故鑒定化合物13為cannabispiradienone。

化合物14：淡黃色脂狀物，[α]25 D＋6.9° (0.1, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.53 (1H, dd,= 15.0, 10.8 Hz, H-11), 5.98 (1H, t,= 11.4 Hz, H-10), 5.69 (1H, dd,= 15.0, 6.0 Hz, H-12), 5.58 (1H, m, H-16), 5.44 (1H, m, H-9), 5.36 (1H, m, H-15), 4.24 (1H, m, H-13), 2.34 (4H, m, H-2, 14), 2.18 (2H, m, H-8), 2.07 (2H, m, H-17), 1.62 (2H, m, H-3), 1.40～1.25 (8H, m, H-4～7), 0.97 (3H, t,= 7.6 Hz, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 178.2 (C-1), 135.1 (C-16), 135.0 (C-9), 132.8 (C-12), 127.8 (C-11), 125.8 (C-10), 123.7 (C-15), 72.1 (C-13), 35.3 (C-14), 34.1 (C-2), 29.4 (C-4), 29.0 (C-5), 29.0 (C-6), 28.9 (C-7), 27.6 (C-8), 24.8 (C-3), 20.8 (C-17), 14.2 (C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[15]，故鑒定化合物14為13-羥基-9,11,15-十八碳三烯酸。

化合物15：淺黃色粉末，mp 88～90 ℃；HR-ESI-MS/: 190.086 0 [M＋H]+（計算值 190.086 8），推得分子式為C11H11NO2。1H-NMR譜（表1）中，在8.31 (1H, d,= 8.4 Hz, H-2), 7.28 (1H, t,= 8.4 Hz, H-3), 7.12 (1H, td,= 8.4, 7.8 Hz, H-4), 7.04 (2H, d,= 7.8 Hz, H-5) 各給出1個芳香質(zhì)子信號，根據(jù)其偶合常數(shù)推測其為鄰二取代苯，5.28 (1H, dd,= 7.2, 5.4 Hz, H-4′) 給出1個連氧次甲基信號，5.06 (1H, d,= 15.0 Hz, H-7a) 和4.92 (1H, d,= 15.0 Hz, H-7b) 給出1個連氧芐基信號，2.61 (2H, m, H-2′), 2.50 (1H, m, H-3′a), 2.07 (1H, m, H-3′b) 給出2個飽和亞甲基信號。13C-NMR譜（表1）中，給出了11個碳的信號，其中171.9給出1個酮羰基信號，134.1, 127.6, 124.3, 124.3, 123.8, 119.6給出6個烯碳信號，推測含有1個苯環(huán)，87.2, 68.0給出2個連氧碳，剩余2個為飽和碳。

由HMBC譜（圖1）可知，H-7 (5.02, 4.96) 與C-4′ (87.2), C-1 (134.1), C-5 (124.3), C-6 (123.8) 相關(guān)，由此證明存在芐基結(jié)構(gòu)單元。H-4′ (5.28) 與C-7 (68.0), C-1′ (171.9), C-2′ (30.0), C-3′ (24.7) 相關(guān)。H-5 (7.02) 與C-7 (68.0), C-1 (134.1), C-3 (127.6) 相關(guān)。H-2 (8.31) 與C-4 (124.3), C-6 (123.8) 相關(guān)。H-3 (7.28) 與C-1 (134.1), C-2 (119.6), C-4 (124.3), C-5 (124.3) 相關(guān)。H-4 (7.12) 與C-2 (119.6), C-3 (127.6), C-5 (124.3), C-6 (123.8) 相關(guān)。H-2′ (2.61) 與C-1′ (171.9), C-3′ (24.7), C-4′ (87.2) 相關(guān)。H-3′ (2.50, 2.07) 與C-1′ (171.9), C-2′ (30.0), C-4′ (87.2) 相關(guān)。由1H-1H COSY譜可知，H-3′ (2.50, 2.07) 與H-4′ (5.28) 相關(guān)。H-3′ (2.50, 2.07) 與H-2′ (2.61) 相關(guān)。H-5 (7.02) 與H-4 (7.12) 相關(guān)。H-3 (7.28) 與H-4 (7.12) 相關(guān)。H-3 (7.28) 與H-2 (8.31) 相關(guān)。根據(jù)對該分子進(jìn)行旋光測試其比旋光度接近0，并且該分子的實測CD圖譜在200～400 nm的Cotton效應(yīng)幾乎為零，因此推測化合物15是1對外消旋體。由此可以推測化合物15的結(jié)構(gòu)為(±)-2,3,3a,5-tetrahydro-1-benzo[] pyrrolo [2,1-b][1,3]oxazin-1-one。經(jīng)與文獻(xiàn)對照[16]，該化合物系由人工合成得到，未見其作為植物的次級代謝產(chǎn)物相關(guān)報道，并根據(jù)波譜數(shù)據(jù)綜合分析結(jié)合苯并四氫異吡喃結(jié)構(gòu)單元的文獻(xiàn)報道[17]，糾正了文獻(xiàn)所報道該分子C-7的數(shù)據(jù)錯誤[16]。

表1 化合物15的核磁共振波譜數(shù)據(jù)(600/150 MHz, CDCl3)

圖1 化合物15主要的HMBC (H→C) 和1H-1H COSY (―) 相關(guān)

化合物16：白色粉末，mp 215～217 ℃，[α]25 D＋21.1° (0.1, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.42 (1H, s, H-5′), 5.08 (2H, d,= 7.0 Hz, H-9), 4.35 (1H, d,= 5.8 Hz, H-2), 3.44 (1H, dd,= 11.1, 5.8 Hz, H-3), 2.97 (2H, m, H-1′′), 1.84 (3H, s, H-10), 1.53 (3H, s, H-7), 0.96 (3H, t,= 7.8 Hz, H-3′′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 164.6 (C-7′), 160.1 (C-2′), 155.2 (C-1′), 152.5 (C-8), 149.2 (C-3′), 116.9 (C-6′), 114.0 (C-5′), 111.8 (C-9), 105.5 (C-4′), 91.2 (C-3), 68.7 (C-1), 48.0 (C-4), 41.5 (C-3), 36.7 (C-1′′), 34.6 (C-6), 28.1 (C-7), 25.6 (C-5), 24.4 (C-2′′), 22.6 (C-10), 14.2 (C-3′′)。該化合物的NMR數(shù)據(jù)與大麻艾爾松酸 B 對照，僅在高場相差2個亞甲基，其余數(shù)據(jù)基本一致，根據(jù)文獻(xiàn)報道[11]，判斷其為大麻艾爾松酸B的丙基同系物，故鑒定化合物16為次大麻艾爾松酸B。

化合物17：淺黃色油狀物；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.35 (6H, m, H-9, 10, 12, 13, 15, 16), 3.67 (3H, s, H-1′), 2.81 (4H, m, H-11, 14), 2.30 (2H, t,= 7.8 Hz, H-2), 2.06 (4H, m, H-8, 17), 1.61 (2H, m, H-3), 1.34～1.28 (8H, m, H-4～7), 0.98 (3H, t,= 7.5 Hz, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 174.3 (C-1), 132.0 (C-9), 130.3 (C-16), 128.3 (C-12), 128.3 (C-13), 127.7 (C-15), 127.1 (C-10), 51.5 (C-1′), 34.1 (C-2), 29.6 (C-7), 29.2 (C-6), 29.2 (C-5), 29.1 (C-4), 27.2 (C-3), 25.6 (C-8), 25.5 (C-11), 24.9 (C-14), 20.6 (C-17), 14.3 (C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[18]，故鑒定化合物17為亞麻酸甲酯。

化合物18：白色粉末，mp 28～29 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 3.37 (3H, s, H-1′), 2.30 (1H, d,= 7.8 Hz, H-2), 1.61 (2H, m, H-3), 1.29 (28H, m, H-4～17), 0.88 (3H, t,= 6.6 Hz, H-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[19]，故鑒定化合物18為棕櫚酸甲酯。

化合物19：白色粉末，mp 140～142 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.54 (1H, d,= 8.4 Hz, H-3), 7.35 (1H, brs, H-6), 7.13 (1H, brd,= 8.4 Hz, H-4), 1.33 (9H, s, H-9～11), 1.28 (9H, s, H-12～14)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 147.7 (C-1), 147.6 (C-5), 138.5 (C-2), 124.5 (C-3), 124.0 (C-4), 119.1 (C-6), 34.9 (C-8), 34.5 (C-7), 31.4 (C-9～11), 30.2 (C-12～14)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[20]，故鑒定化合物19為2,5-二叔丁基苯酚。

化合物20：淡黃色脂狀物，[α]25 D?34.5° (1.4, CH3OH)；1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 9.32 (2H, brs, 7, 6′-OH), 7.93 (1H, t,= 5.4 Hz, N-H), 7.30 (1H, d,= 15.6 Hz, H-3), 7.14 (2H, d,= 8.4 Hz, H-4′, 8′), 7.11 (1H, s, H-5), 6.98 (1H, d,= 7.8 Hz, H-9), 6.78 (1H, d,= 7.8 Hz, H-8), 6.71 (2H, d,= 8.4 Hz, H-5′, 7′), 6.53 (1H, d,= 15.6 Hz, H-2), 4.53 (1H, t,= 6.6 Hz, H-2′), 3.80 (3H, s, -OCH3), 3.38 (1H, m, H-1′a), 3.19 (1H, m, H-1′b)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 166.0 (C-1), 156.9 (C-6′), 148.7 (C-7), 148.3 (C-6), 139.4 (C-3), 134.5 (C-3′), 127.6 (C-4′, 8′), 126.9 (C-4), 122.0 (C-9), 119.6 (C-2), 116.1 (C-8), 115.2 (C-5′, 7′), 111.2 (C-5), 71.7 (C-2′), 56.0 (-OCH3), 47.5 (C-1′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[21]，故鑒定化合物20為-[2-()-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)- ethyl]-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-acrylamide。

4 討論

工業(yè)大麻在抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗炎、抗驚厥和神經(jīng)保護(hù)等方面具有廣闊的應(yīng)用前景和極高的藥理研究價值，其中以大麻素類成分最受人們關(guān)注。為進(jìn)一步探討工業(yè)大麻藥效基礎(chǔ)物質(zhì)，本研究繼續(xù)對工業(yè)大麻醇提液醋酸乙酯萃取物化學(xué)成分進(jìn)行研究，得到了20個單體化合物。這些次生代謝產(chǎn)物除大麻素類以外，其他類成分大多具有較強的生物活性，如羥基二氫博伏內(nèi)酯（9）對HIV病毒具有抑制作用[10]，這提示工業(yè)大麻的抗HIV作用可能與該類成分有關(guān)；亞麻酸甲酯（17）、-[2-(S)- hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-ethyl]-3-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-acrylamide（20）等具有一定的抗氧化作用[21-22]等。這些活性成分從工業(yè)大麻醋酸乙酯萃取物中分離得到，預(yù)示工業(yè)大麻具有較好的藥物開發(fā)前景。本研究通過進(jìn)一步研究工業(yè)大麻的物質(zhì)基礎(chǔ)，并推測成分與生物活性的相關(guān)性，可為綜合利用工業(yè)大麻資源、研究開發(fā)新型藥物等提供理論依據(jù)。此外，一些稀有大麻素類成分波譜數(shù)據(jù)不全面，本研究補充了2個大麻素丙基同系物次大麻艾爾松酚（10）和次大麻艾爾松酸B（16）的核磁共振碳譜數(shù)據(jù)，為后續(xù)開發(fā)工業(yè)大麻應(yīng)用提供支撐。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents from acrial part of

WANG Jin-lan1, 2, LIU Zhi-hua1, ZHAO Ying-nan1, 2, ZHAO Ming1, 2, LI Jun1, 2, SHI Zhi-chun1, 2, WANG Dan1, 2, LIANG Xin-rui1, SUN Li-qiu1, 2, ZHANG Shu-jun1, 2

1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Qiqihar University, Qiqihar 161006, China 2.Heilongjiang Industrial Hemp Processing Technology Innovation Center, Qiqihar 161006, China

To study the chemical constituents from aerial part of.The chemical constituents were isolated by silica gel column chromatography and HPLC, and the structures were identified by their spectral data and physicochemical properties analysis.Twenty compounds were isolated from, and identified as cannabichromene (1), cannabivarichromene (2), cannabivarin (3), (2,6)-2,6-nonadienoic acid (4), cannabielsoin (5), acetyl cannabispirol (6),-hydroxybenzaldehyde (7), 8-hydroxylinalyl acetate (8), hydroxydihydrobovolide (9), cannabielsoin-C3(10), 6-hydroxy- ?(7,8)-cannabichromene (11), cannabispiran (12), cannabispiradienone (13), 13-hydroxy-9,11,15-octadecatrienoic acid (14), 2,3,3a,5-tetrahydro-1-benzo[]pyrrolo[2,1-b][1,3]oxazin-1-one (15), cannabielsoic acid B-C3(16), methyl linolenate (17), methyl hexadecanoate (18), 2,5-di-tert-butylphenol (19),-[2-()-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-ethyl]-3-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)- acrylamide (20).Compound 15 is new natural product, named cannabinolactam A.Compounds 4, 8, 9, 14, 19, 20 are isolated fromgenus for the first time.Furthermore, the assignments of13C-NMR data of compounds 10 and 16 are reported for the first time.

L.; cannabinoids; spiro ring; cannabinolactam A; (2,6)-2,6-nonadienoic acid; 8-hydroxylinalyl acetate; cannabielsoin-C3

R284.1

A

0253 - 2670(2022)10 - 2949 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.10.003

2021-09-14

黑龍江省省屬高等學(xué)校基本科研業(yè)務(wù)費科研項目（145109513）；齊齊哈爾大學(xué)研究生創(chuàng)新科研項目（YJSCX2019030）

王金蘭，女，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)研究。E-mail: jinlwang@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]