黑水虻幼蟲蛋白及其酶解產(chǎn)物的抗氧化活性研究

李 鑫，周鵬飛，周東來，楊 瓊，鄺哲師

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣州 510610)

在生命體中，機體的氧化與抗氧化一般處于一種動態(tài)的平衡，隨著細胞代謝的進行，機體會產(chǎn)生具有高氧化活性的自由基，如果自由基產(chǎn)生過多或清除較少，可能會導(dǎo)致機體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)(Gül?in, 2012; Lietal., 2015)。研究表明這種氧化應(yīng)激狀態(tài)會導(dǎo)致細胞自噬、凋亡，并引起組織的不可逆損傷(Shenetal., 2017)。常用的化學(xué)合成抗氧化劑如丁基羥基茴香醚(BHA)、沒食子酸丙酯(PG)、丁基羥基甲苯(BHT)和叔丁基氫醌(TBHQ)等(張強, 2020)，及天然抗氧化物質(zhì)如抗壞血酸(Vc)、谷胱甘肽(GSH)以及一些酶類(張澤生等, 2017)。盡管化學(xué)合成的抗氧化物質(zhì)具有高效、廉價的特點，但是其潛在的安全隱患，使其應(yīng)用受到限制，因此人們把更多的關(guān)注轉(zhuǎn)移到天然抗氧化物質(zhì)。

近年來，大量研究證明昆蟲蛋白及昆蟲水解蛋白具有較強的抗氧化特性，如豐年蟲Chirocephalusdiaphanous(聶路等, 2011)、大麥蟲Zophobasmorio(郭倩等, 2011)、黑水虻Hermitiaillucens(許彥騰等, 2014)、蜜蜂Apismellifera(Dongetal., 2016)、編織蟻Oecophyllasmaragdina(Werawichetal., 2017)等。

黑水虻Hermitiaillucens，英文名為Black soldier fly，學(xué)名為亮斑扁角水虻，是雙翅目Diptera水虻科Stratiomyidae的一種陸生、營腐食性生活的昆蟲(柴志強等, 2012; 沈媛等, 2012)。目前對黑水虻的研究主要集中在黑水虻幼蟲飼養(yǎng)、畜禽糞便處理、飼用價值開發(fā)等方面(鄧文輝等, 2019; 袁橙等, 2019; 陳柏宇等, 2020)。近些年來部分學(xué)者開始對黑水虻幼蟲蛋白(black soldier fly larva proteins, BSFLP)制備(陳蘇婉等, 2019; 朱定等, 2020)與抗氧化活性進行研究(許彥騰等, 2014)，而基于BSFLP及其酶解產(chǎn)物的抗氧化活性研究較少。本文以鮮活黑水虻幼蟲凍蟲為對象，采用堿提酸沉法制備黑水虻幼蟲蛋白，并通過堿性蛋白酶(Alkaline)、菠蘿蛋白酶(Bromelain)、風(fēng)味蛋白酶(Flavourzyme)、木瓜蛋白酶(Papain)對其蛋白質(zhì)溶液進行酶解，分別從ABTS自由基、羥自由基、DPPH自由基3個方面對黑水虻蛋白及其酶解液的抗氧化能力進行測定，旨在初步了解黑水虻蛋白及其酶解產(chǎn)物的抗氧化能力，為黑水虻抗氧化肽的研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黑水虻幼蟲購自廣西上林縣方圓農(nóng)資店；定量(TP)測定試劑盒(BCA法)、DPPH自由基清除能力試劑盒、總抗氧化能力(T-AOC)測試盒(ABTS法)、羥自由基測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所；堿性蛋白酶(Alkaline)、菠蘿蛋白酶(Bromelain)、風(fēng)味蛋白酶(Flavourzyme)、木瓜蛋白酶(Papain)購自上海源葉生物科技有限公司；Vc(標準品)購自廣州市齊云生物技術(shù)有限公司；氫氧化鈉、濃鹽酸、冰醋酸、無水乙醇購自天津市大茂化學(xué)試劑廠。

1.2 儀器與設(shè)備

DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；HZQ-X300C恒溫振蕩器，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；SIGMA-3K15高速冷凍離心機，德國SIGMA儀器有限公司；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；PHS-3E pH計，上海雷磁儀器有限公司；Synergy H4多功能酶標儀，美國BioTek儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1樣品制備

取新鮮黑水虻5齡幼蟲適量，置于冰箱冷凍，將冰凍幼蟲使用粉碎機粉碎，制成蟲漿后于-20℃冰箱中冷凍保存。取上述冷凍蟲漿適量，于50℃烘箱中干燥48 h后去除雜質(zhì)，置于打粉機中研碎，過60目篩網(wǎng)，制成蟲粉作為送檢樣品。

1.3.2BSFLP粗提液的制備

參照許彥騰等(2014)的方法并略有改動，取適量冷凍蟲漿，放入錐形瓶中，按照料液比1 ∶ 22加入0.61 mol/L 氫氧化鈉溶液，在53.2℃，200 r/min的條件下?lián)u床反應(yīng)2 h。將提取液通過紗布進行過濾，除去蟲漿中的部分不溶物，將過濾好的提取液轉(zhuǎn)入離心管中進行離心(8 000 r/min)10 min。離心結(jié)束后取上清液，并用1 mol/L 鹽酸調(diào)節(jié)pH至等電點4.8。離心(8 000 r/min)10 min，提取沉淀并用去離子水復(fù)溶，用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，獲得BSFLP粗提液，保存于-20℃冰箱備用。

1.3.3BSFLP的酶解

將適量BSFLP溶液加入試管，放入水浴鍋中，調(diào)節(jié)水浴鍋的溫度使其達到適宜酶解溫度。用NaOH或HCl調(diào)節(jié)到適當(dāng)?shù)膒H，并按照比例加入適量的蛋白酶，酶解條件見表1(朱作藝等, 2020)。酶解結(jié)束后，將BSFLP酶解液放入100℃水浴鍋中迅速滅酶10 min，冷卻后，8 000 r/min離心10 min，取上清液。

表1 4種蛋白酶的酶解條件

1.3.4蛋白質(zhì)含量測定

BSFLP和4種蛋白酶酶解液的蛋白質(zhì)含量測定均按照試劑盒說明書進行。

1.3.5抗氧化活性的測定

分別配置不同濃度的BSFLP和4種蛋白酶酶解液，并采用Vc作為陽性對照。BSFLP和4種蛋白酶酶解液對ABTS自由基、羥自由基、DPPH自由基的清除能力測定均按照試劑盒說明書進行。

1.3.6黑水虻幼蟲蛋白質(zhì)的氨基酸組成測定

黑水虻幼蟲粉送至廣東省分析測試研究所作氨基酸組分分析，測定參照中華人民共和國國家標準(GB 5009.124-2016)中的方法進行，采用氨基酸分析儀(茚三酮柱后衍生離子交換色譜儀)測定黑水虻中的16種水解氨基酸。

1.4 數(shù)據(jù)處理及分析

所有實驗均重復(fù)3次，結(jié)果取平均值，實驗結(jié)果以平均數(shù)±標準差進行表示。采用SPSS 19.0軟件進行分析，Origin 2017軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 BSFLP的氨基酸組成分析

BSFLP的氨基酸組成，委托廣東省分析測試研究所(中國廣州分析測試中心)進行測定，測定結(jié)果如表3所示。在測定的16種氨基酸中，通過計算得出疏水性氨基酸的占比為39.8%，此外在測定的16種氨基酸中，谷氨酸(GLU)含量占比最高，為18.3%，其次為天冬氨酸(ASP)，占氨基酸總體含量的10.1%。

表2 黑水虻幼蟲的氨基酸組成

2.2 BSFLP的抗氧化活性

2.2.1總抗氧化能力(ABTS法)

BSFLP溶液和Vc對ABTS自由基的清除率隨著濃度的增加而增大，且呈現(xiàn)出一定的劑量效應(yīng)。在0～0.2 mg/mL濃度范圍內(nèi)，Vc溶液對ABTS自由基的清除率隨著溶液濃度的增加而顯著增加，在濃度達到0.2 mg/mL后，增長速率趨于平緩，最大清除率為91.3%。對Vc進行多項式模型擬合，擬合方程為：Vc y=-857.748x2+612.987x-0.923(R2=0.996)，通過擬合方程計算計算出Vc的半抑制濃度(IC50)(0.96 mg/mL)。BSFLP溶液對ABTS自由基的清除率隨著溶液質(zhì)量濃度的增加而增加，表現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。對BSFLP進行多項式擬合，其擬合方程為：BSFLP y=-1.435x2+20.902x+1.309(R2=0.997)，通過擬合方程的計算出BSFLP的IC50(2.91 mg/mL)(圖1)。

圖1 BSFLP的ABTS自由基清除能力Fig.1 ABTS radical scavenging activity of Hermetia illucens larvae protein

2.2.2羥自由基清除活性

陽性對照Vc在0.05～0.5 mg/mL范圍內(nèi)，對羥自由基的清除率隨著溶液質(zhì)量濃度的增加而增加，呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，線性擬合方程為：Vc y=173.333x+5.867(R2=0.994)，通過擬合方程得到Vc的IC50(0.229 mg/mL)。BSFLP溶液對羥自由基的清除率隨著質(zhì)量濃度的增加而逐漸上升，但增加速度逐漸趨于平緩。對BSFLP進行多項式模型擬合，其擬合方程為：BSFPL y=-225.789x2+259.613x+1.787(R2=0.926)，通過擬合方程得到BSFLP的IC50為0.232 mg/mL，與陽性對照Vc的IC50接近(圖2)。

圖2 BSFLP的羥自由基清除能力Fig.2 Hydroxyl radical scavenging activity of Hermetia illucens larvae protein

2.2.3DPPH自由基清除活性

BSFLP溶液和陽性對照Vc隨著質(zhì)量濃度的增加，對DPPH自由基的清除率逐漸增加，BSFLP溶液在0～2.5 mg/mL的范圍內(nèi)的清除率與溶液濃度基本呈線性關(guān)系，其線性擬合方程為：BSFLP y=25.366x+21.794(R2=0.915)，通過擬合方程計算其IC50為0.794 mg/mL。陽性對照組Vc在0～0.025 mg/mL范圍內(nèi)劑量效應(yīng)明顯，當(dāng)質(zhì)量濃度達到0.05 mg/mL時，清除率趨于平緩且達到最大值(95%)。對Vc進行多項式模型擬合，其擬合方程為：Vc y=-18160.383x2+2539.281x+21.232(R2=0.916)，通過擬合方程計算其IC50為0.0124 mg/mL。相比于陽性對照Vc，BSFLP表現(xiàn)出的抗氧化活性一般(圖3)。

圖3 BSFLP的DPPH自由基清除能力Fig.3 DPPH radical scavenging activity of Hermetia illucens larvae protein

2.3 BSFLP酶解液的抗氧化活性

2.3.1總抗氧化能力

BSFLP溶液和風(fēng)味蛋白酶酶解液(Flavourzyme enzymatic hydrolysate, Feh)、菠蘿蛋白酶酶解液(Bromelain enzymatic hydrolysate, Beh)、堿性蛋白酶酶解液(Alkaline enzymatic hydrolysate, Aeh)、木瓜蛋白酶酶解液(Papain enzymatic hydrolysate, Peh)均表現(xiàn)出一定的ABTS自由基清除能力，且都隨著溶液質(zhì)量濃度的增加，清除率不斷增加。然而當(dāng)濃度達到某一特定值時(如Feh，當(dāng)質(zhì)量濃度達到0.5 mg/mL時清除率增加速率趨于平緩)，清除速率的增加開始變慢。對BSFLP溶液和酶解液進行多項式模型擬合，得到的多項式模型分別為BSFLP：

y=1.09+20.92x-1.435x2(R2=0.997)

Feh：y=33.81+60.105x-17.77x2(R2=0.996)

Beh：y=20.61+35.289x-5.811x2(R2=0.996)

Aeh：y=19.791+21.962x-2.65x2(R2=0.995)

Peh：y=20.33+25.195x-3.72x2(R2=0.982)

通過擬合方程計算出BSFLP溶液和4種酶解液的IC50分別為BSFLP IC50(2.91 mg/mL)、Feh IC50(0.295 mg/mL)、Beh IC50(0.996 mg/mL)、Aeh IC50(1.733 mg/mL)、Peh IC50(1.51 mg/mL)。BSFLP和4種酶解液的ABTS自由基清除能力大小順序為：Feh>Beh>Peh>Aeh>BSFLP，其中4種酶解液的ABTS自由基清除能力均高于BSFLP溶液，清除能力最強的Feh約為BSFLP溶液ABTS自由基清除能力的9.86倍，因此酶解液具有更強的ABTS自由基清除能力(圖4)。

圖4 酶解液的ABTS清除能力Fig.4 ABTS radical scavenging activity of enzymatic hydrolysate

2.3.2羥自由基清除能力

BSFLP溶液和Feh、Beh、Aeh、Peh均表現(xiàn)出一定的羥自由基清除能力，且隨溶液質(zhì)量濃度的增加，清除能力逐漸增強。Feh、Aeh、Peh 三種酶解液中，當(dāng)質(zhì)量濃度達到一定值時，羥自由基的清除率增加速度趨于平緩，當(dāng)質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL時，Peh的清除率達到最大值(80%)。對BSFLP溶液和4種酶解液進行多項式模型擬合，得到的多項式模型分別為BSFLP：

y=1.787+259.6x-225.8x2(R2=0.976)

Feh：y=-12.287+211.093x-106.7x2(R2=0.965)

Beh：y=-9.887+223.598x-157x2(R2=0.993)

Aeh：y=-4.124+226.04x-132.511x2(R2=0.968)

Peh：y=31.483+207.509x-219.625x2(R2=0.987)

通過擬合方程計算出BSFLP溶液和4種酶解液的(IC50)分別為BSFLP IC50(0.232 mg/mL)、Feh IC50(0.36 mg/mL)、Beh IC50(0.357 mg/mL)、Aeh IC50(0.288 mg/mL)、Peh IC50(0.082 mg/mL)。BSFLP溶液和4種酶解液的羥自由基清除能力大小順序為：Peh>BSFLP>Aeh>Beh>Feh。4種酶解液中只有Peh的羥自由基清除能力強于BSFLP溶液，約為BSFLP溶液羥自由基清除能力的2.82倍，其余的3種酶解液的羥自由基清除能力略低于BSFLP溶液(圖5)。

圖5 酶解液的羥自由基清除能力Fig.5 Hydroxyl radical scavenging activity of enzymatic hydrolysate

2.3.3DPPH自由基清除能力

BSFLP溶液和Feh、Beh、Aeh、Peh均表現(xiàn)出一定的DPPH自由基清除能力，且隨溶液質(zhì)量濃度的增加，清除能力逐漸增加。對BSFLP溶液和4種水解溶液進行多項式模型擬合，得到的多項式模型分別為BSFLP：

y=12.132+59.246x-14.55x2(R2=1.00)

Feh：y=3.596+92.329x-23.109x2(R2=0.997)

Beh：y=11.176+137.317x-78.54x2(R2=0.995)

Aeh：y=4.738+64.746x-14.292x2(R2=0.997)

Peh：y=7.531+92.338x-29.093x2(R2=0.998)

通過擬合方程計算出BSFLP溶液和4種酶解液的IC50分別為BSFLP IC50(0.794 mg/mL)、Feh IC50(0.589 mg/mL)、Beh IC50(0.354 mg/mL)、Aeh IC50(0.862 mg/mL)、Peh IC50(0.558 mg/mL)。BSFLP溶液和4種酶解液的羥自由基清除能力大小順序為：Beh>Peh>Feh>BSFLP>Aeh。4種酶解液的羥自由基清除能力大多數(shù)強于BSFLP溶液，其中Beh是BSFLP溶液DPPH自由基清除能力的2.24倍，因此，酶解液具有更好的DPPH自由基清除能力(圖6)。

圖6 酶解液的DPPH自由基清除活性Fig.6 DPPH radical scavenging activity of enzymatic hydrolysate

3 結(jié)論與討論

3.1 BSFLP的抗氧化活性

ABTS經(jīng)氧化后產(chǎn)生穩(wěn)定的藍綠色ABTS水溶性自由基，抗氧化劑與ABTS自由基反應(yīng)后使其溶液褪色，特征吸光值降低，故待測樣品的ABTS自由基清除活性可利用分光光度法進行測定，該方法具有操作簡單、快速、高通量等優(yōu)點(鄭善元等, 2010)。本次實驗結(jié)果表明BSFLP對ABTS自由基的IC50約為2.91 mg/mL，而蔡雨嬌等(2020)對神農(nóng)架蜂蜜的抗氧化能力研究中發(fā)現(xiàn)其ABTS的IC50約為48.48 mg/mL；朱作藝等(2020)在對蜂王漿蛋白肽的抗氧化能力研究中發(fā)現(xiàn)其ABTS的IC50約為14.18 mg/mL，IC50值均高于BSFLP。一般認為某種物質(zhì)的IC50低于10.0 mg/mL時，說明其具有良好的抗氧化活性(鄭義等, 2014)，因此BSFLP具有較好的ABTS自由基清除能力。

羥自由基被認為是毒性最強的活性氧自由基，輻射損傷等物理、化學(xué)因子都會促進其形成，是造成生物有機體過氧化損傷的主要因素(郭倩, 2011)。本次實驗結(jié)果表明BSFLP對羥自由基的IC50約為0.232 mg/mL，明顯低于相關(guān)文獻報道的南美白對蝦酶解肽(林麗英等, 2012)及家蠅蛹抗氧化肽(孫婷婷等, 2019)的羥自由基的IC50值。因此相比于常見的動物抗氧化肽，BSFLP具有較好的羥自由基清除活性。

DPPH是一種較為穩(wěn)定的自由基，一般通過生物體的正常代謝形成。研究表明DPPH與生物體的衰老、各種炎癥疾病及癌癥都有一定的關(guān)系(閔建華等, 2019)。高涵等人(2019)在對幾種常見測定抗氧化性方法的比對中發(fā)現(xiàn)DPPH法測定抗氧化能力時，其測定結(jié)果變異系數(shù)低、標準偏差小、精密度高。因此DPPH法可以作為一種測定抗氧化活性的常用方法。本次實驗中，雖然BSFLP的DPPH自由基IC50明顯高于對照組Vc，但其IC50顯著低于文獻報道的河蜆抗氧化肽(劉晶晶等, 2020)及三文魚皮膠原低聚肽(劉文穎等, 2010)的IC50，因此BSFLP具有較好的DPPH自由基清除活性。

研究表明，蛋白質(zhì)的抗氧化活性主要來源于具有抗氧化的氨基酸，因此蛋白質(zhì)中的氨基酸組成是影響其抗氧化能力的重要要因素之一(Pengetal., 2009; Tang and Wang, 2012)。一般認為組氨酸(His)、亮氨酸(Leu)、等氨基酸具有較強的抗氧化活性(Saitoetal., 2003)。在本研究中，BSFPL中組氨酸(His)、亮氨酸(Tyr)含量較高，分別占BSFLP中氨基酸總量的5.9%、5.7%，因此BSFLP較強的抗氧化活性可能與此類氨基酸含量較高有關(guān)。此外，疏水性氨基酸含量較多的蛋白和多肽往往具有較高的抗氧化活性。葛曉鳴等人(2019)在對海馬酶解多肽的研究中發(fā)現(xiàn)疏水性氨基酸對其抗氧化活性貢獻較多。黃湛媛等人(2017)發(fā)現(xiàn)疏水性氨基酸結(jié)構(gòu)對自由基清除有重要影響。這有可能是因為疏水性氨基酸可以通過提供氫受體，與其它氨基酸相互作用來增強多肽的疏水性，進而增加抗氧化能力(Chenetal., 2009)，也可能是疏水性氨基酸通過促進蛋白和多肽的脂溶性，從而提高其自由基清除能力(Najafian and Babj, 2014)。在本研究中，BSFLP的氨基酸組成中，疏水性氨基酸占比高達39.8%，其中脯氨酸(Pro)、纈氨酸(Val)等疏水性氨基酸含量均較高，因此BSFLP中高含量的疏水性氨基酸對其抗氧化活性產(chǎn)生了重要影響。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是生物體內(nèi)過氧化反應(yīng)的最終產(chǎn)物，F(xiàn)emi等人(2020)在使用BSFLP替代魚粉對羅非魚的投喂試驗中發(fā)現(xiàn)，隨著BSFLP替代比例的增加，魚體血清中MDA的含量逐漸降低，表明魚體內(nèi)的過氧化反應(yīng)減少，從某種程度上證明了BSFPL的抗氧化活性，綜上BSFLP具有良好的抗氧化活性。

3.2 BSFLP與酶解液的抗氧化活性

本次研究結(jié)果表明，酶解液對ABTS和DPPH自由基的清除能力均強于BSFLP溶液，而在羥自由基的清除實驗中，僅Peh清除能力強于BSFLP溶液。出現(xiàn)這一結(jié)果的原因可能是由于BSFLP對ABTS、DPPH自由的清除基于電子轉(zhuǎn)移法(SET)機制，而對羥自由基的清除基于氫轉(zhuǎn)移(HAT)機制(Selgaetal., 2004; 朱作藝等, 2020)。

氫原子轉(zhuǎn)移(HAT)和電子轉(zhuǎn)移(SET)是兩種不同的清除自由基機制(Prioretal., 2005)。在電子傳遞法(SET)的反應(yīng)機制中，主要通過含半胱氨酸、色氨酸和組氨酸的肽段或氨基酸殘基發(fā)揮作用。在氫原子轉(zhuǎn)移(HAT)反應(yīng)機制中，主要通過含酪氨酸的肽段或氨基酸殘基發(fā)揮作用(Ashaoluetal., 2019)。因此根據(jù)4種酶解液對ABTS、DPPH自由基以及羥自由基表現(xiàn)出的不同清除能力，推斷4種酶解液中，半胱氨酸、色氨酸和組氨酸為主要組成成分，而酪氨酸在酶解液的氨基酸組成成分中占比不高。

已有研究表明多肽的抗氧化活性與其分子大小、疏水性以及氨基酸組成和序列密切相關(guān)(Chaietal., 2017; Huetal., 2020)。在本次實驗中4種蛋白酶由于酶切位點不同，酶解得到的多肽分子質(zhì)量以及氨基酸殘基也有所不同，因此表現(xiàn)出不同的抗氧化活性。如在對ABTS自由基的清除實驗中，F(xiàn)eh表現(xiàn)出較強的自由基清除能力，其IC50約為(0.295 mg/mL)，是BSFLP溶液清除率的9.86倍。這可能是因為風(fēng)味蛋白酶同時具有內(nèi)切酶和外切酶的特點(劉麗君等, 2019)，因此在水解過程中得到了更多、更小的多肽分子和氨基酸殘基。吳靖娜等人(2017)在對海馬抗氧化肽的研究中也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果。在對DPPH自由基的清除實驗中，Beh表現(xiàn)出較強的自由基清除活性，這可能與菠蘿蛋白酶作用于疏水性氨基酸的羧基(C)末端有關(guān)，從而形成了更多疏水性氨基酸殘基(吳茂玉等, 2008; 李榮喬, 2014; 王大巾等, 2016)。疏水性氨基酸是影響多肽抗氧化活性的關(guān)鍵因素之一，這些疏水性氨基酸殘基能夠促進多肽在脂質(zhì)-水界面處的溶解，從而更好地發(fā)揮清除自由基的作用(Wongetal., 2020; Yangetal., 2020)。Aeh的自由基清除能力低于BSFLP溶液，劉天紅等人(2019)在對沙蠶酶解產(chǎn)物的抗氧化研究中也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果。其原因可能是，酶解產(chǎn)物的小肽被過度水解，導(dǎo)致其喪失部分功能鍵，進而降低了酶解液中小肽的抗氧化活性。

綜上所述，經(jīng)蛋白酶處理過的大多數(shù)蛋白肽具有更強的抗氧化能力，對ABTS自由基、羥自由基、DPPH自由基有著更好的清除能力。本次實驗證明了酶解制備抗氧化肽的可行性，為今后利用昆蟲蛋白肽作為一種新型飼料添加劑提供了一定的研究基礎(chǔ)，同時也為無抗飼料以及昆蟲資源化利用提供了新的研究思路。