黃皮疣柄牛肝菌多糖結(jié)構(gòu)鑒定及對小鼠盲腸與糞便中短鏈脂肪酸的影響

樊瑩潤，鄭婷婷，李澤林，沈曉靜，王雪峰，谷大海，肖智超，范江平,*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.普洱茶研究院，云南 普洱 665000）

近年來，隨著人工馴化菌和野生菌的食用頻率以及開發(fā)利用率的提高，人們對真菌的研究越來越多，特別是其菌多糖的生物活性得到了研究者的廣泛關(guān)注；大量研究表明，香菇、銀耳、金針菇、靈芝、云芝、茯苓、冬蟲夏草、黑木耳、猴頭菇等食用或藥用真菌中的多糖組分具有提高身體免疫等功能，部分還具有抗腫瘤、抗衰老、降血糖和血脂、保肝、抗凝血等作用。黃皮疣柄牛肝菌又稱黃癩頭（（Letellier.）Watliag），屬真菌界（Fungi）、擔(dān)子菌門（Basidiomycota）、傘菌綱（Agaricomycetes）、牛肝菌目（Boletales）、牛肝菌科（Boletaceae）、疣柄牛肝菌屬（），其菌肉細嫩、味道鮮美，富含蛋白質(zhì)、多糖以及人體所需的8種必需氨基酸，其中以谷氨酸含量最高。本研究團隊前期采用水提醇沉法提取了黃皮疣柄牛肝菌多糖（polysaccharides from(Letellier.) Watliag，LCP），提取率達18.44%，對其純化后進行免疫活性以及抗氧化活性探究，發(fā)現(xiàn)具有較好的免疫調(diào)節(jié)活性和抗氧化活性。但是對LCP維持腸道健康相關(guān)的研究還很少。

多糖類物質(zhì)由于分子質(zhì)量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，不易被胃腸消化酶消化。未被消化的多糖進入大腸，被厭氧菌進一步降解及發(fā)酵，主要降解和代謝產(chǎn)物為寡糖及短鏈脂肪酸，這些寡糖和短鏈脂肪酸可以被人體直接吸收并發(fā)揮各種生理功能，對人體健康產(chǎn)生有益的影響。多糖作為一種天然的“免疫調(diào)節(jié)劑”及“微生態(tài)調(diào)節(jié)劑”，可通過免疫調(diào)節(jié)來改善腸道免疫系統(tǒng)紊亂所導(dǎo)致的機體炎癥反應(yīng)，也可通過調(diào)節(jié)腸道菌群、改善腸道組織、促進短鏈脂肪酸的產(chǎn)生來緩解代謝綜合征、減輕炎癥、增強免疫反應(yīng)以及改善腸道黏膜屏障等，為腸道提供一個良好的內(nèi)部環(huán)境。短鏈脂肪酸作為特定腸道厭氧菌在膳食纖維和抗性淀粉發(fā)酵后產(chǎn)生的主要細菌代謝產(chǎn)物，具有許多生理作用，如乙酸可以通過調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄因子與信號通路促進脂肪細胞分化、抑制脂肪沉積和改善肥胖引發(fā)的胰島素抵抗；丙酸主要由腸道菌群中的優(yōu)勢菌群擬桿菌門參與代謝生成，經(jīng)結(jié)腸吸收后由肝臟代謝參與糖異生作用并用作能源；丁酸被認為是維持結(jié)腸穩(wěn)態(tài)的主要因素，能被腸道迅速吸收，是結(jié)腸上皮的主要能量來源，在預(yù)防某些疾?。ㄈ缒[瘤、炎癥障礙、糖尿病、心血管疾病等）方面具有潛在價值。張冠亞對鐵皮石斛多糖保持腸道健康作用進行研究，發(fā)現(xiàn)該多糖能有效地降低小鼠盲腸結(jié)腸內(nèi)容物、體外糞便的pH值以及增加盲腸、結(jié)腸、糞便中的短鏈脂肪酸的含量。胡婕倫發(fā)現(xiàn)車前子多糖能減緩葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium，DSS）引起的結(jié)腸炎癥狀，使患結(jié)腸炎小鼠糞便中短鏈脂肪酸含量的下降趨勢減緩。段萌萌發(fā)現(xiàn)褐藻多糖可以改善高脂飲食誘發(fā)的代謝綜合征，包括使高脂小鼠糞便中短鏈脂肪酸含量的下降趨勢減緩。宋倩倩對綠豆皮多糖對小鼠腸道健康影響進行研究，發(fā)現(xiàn)綠豆皮多糖灌胃增加了小鼠結(jié)腸長度和短鏈脂肪酸含量，綠豆皮多糖可能通過酵解產(chǎn)生的短鏈脂肪酸改善腸道微環(huán)境并有益于提高小鼠的腸道健康狀態(tài)。

目前，對LCP的研究主要集中在提取工藝以及體外抗氧化和調(diào)節(jié)免疫活性等方面。前期研究發(fā)現(xiàn)LCP能夠增加小鼠糞便含水率、降低糞便pH值、縮短排便時間、促進小腸蠕動及結(jié)腸發(fā)育。因此，本實驗旨在對LCP結(jié)構(gòu)進行表征并研究其對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸的調(diào)節(jié)作用，以期對LCP維持腸道健康及其構(gòu)效的深入研究提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

BALB/c雄性小鼠（體質(zhì)量16～18 g）（生產(chǎn)許可證號：SCXK（滇）K2020-0004）。

新鮮黃皮疣柄牛肝菌產(chǎn)自楚雄彝族自治州南華縣，從云南省易門縣康源菌業(yè)有限公司采購。

AB-8大孔樹脂 河北美凱化工有限公司；鹽酸、氯仿 成都市科隆化學(xué)品有限公司；氫氧化鈉、正丁醇、苯酚 天津風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司；無水乙醇四川西隴科學(xué)有限公司；1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone，PMP） 上海瀚思化工有限公司；透析袋MD34（7 000 D）、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、巖藻糖、半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、核糖、葡聚糖 上海源葉生物科技有限公司；低聚果糖（fructo-oligosaccharides，F(xiàn)OS） 上海麥克林生化科技有限公司；磷酸、乙醚、三氟乙酸 國藥集團化學(xué)試劑有限公司；木糖、葡萄糖、異丁酸、正丁酸 美國TMstandard公司；乙酸 德國Dr.Ehrenstorfer公司；丙酸瑞士Fluka公司；異戊酸、正戊酸 德國CNW公司。

1.2 儀器與設(shè)備

UV-2450紫外分光光度計 島津儀器（蘇州）有限公司；1200型高效液相色譜儀（紫外檢測器）、7890B-7000D氣相色譜-質(zhì)譜儀 美國Agilent公司；ELEOS凝膠色譜儀 美國Wyatt公司；激光檢測器、示差檢測器 美國Warers公司；Tensor27傅里葉變換紅外光譜儀 德國Bruker公司。

1.3 方法

1.3.1 LCP的制備

黃皮疣柄牛肝菌洗凈、切片、凍干、打粉過80 目篩后，采用熱水法提取LCP，按液料比34∶1（/）混勻，51 ℃水浴3.1 h，4 000 r/min離心10 min得到提取液，50 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/5，加入4 倍體積的無水乙醇（注意需要緩慢加入，邊攪拌邊加入），置于4 ℃冰箱中靜置過夜，4 000 r/min離心10 min，取沉淀用適量的去離子水溶解，得到多糖溶液，冷凍干燥后得到粗多糖。配制100 mL質(zhì)量濃度為2 mg/mL的粗多糖溶液，添加7 g大孔樹脂后，放入53.3 ℃、130 r/min的恒溫振蕩箱中振蕩5.3 h，以達到脫色的效果。過濾得到濾液，50 ℃進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/2，將Sevag溶液（（氯仿）∶（正丁醇）＝4∶1）與多糖溶液按一定比例混合（1∶4，/），劇烈振蕩20 min，4 000 r/min離心10 min，取上層水層，重復(fù)此步操作，直至沒有白色蛋白沉淀層產(chǎn)生為止，旋蒸去除有機溶劑，透析48 h，冷凍干燥得到精多糖LCP。采用苯酚-硫酸法對LCP的多糖質(zhì)量分數(shù)進行測定，確定其純度。

1.3.2 LCP紫外光譜分析

將LCP配制成質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的多糖溶液，在波長190～400 nm下進行紫外全波長掃描。

1.3.3 LCP的單糖組成分析

稱取適量樣品于水解管中，加1 mL去離子水和1 mL 4 mol/L三氟乙酸，充氮，110 ℃水解2 h，冷卻至室溫，取0.1 mL水解液于4 mL離心管中，在60 ℃真空干燥箱中干燥2 h。向4 mL離心管中加入0.3 mol/L NaOH和0.5 mol/L PMP甲醇溶液各0.5 mL，充氮，70 ℃水浴60 min，冷卻至室溫，加0.5 mL 0.3 mol/L HCl、0.75 mL去離子水、1.5 mL氯仿，振蕩搖勻后靜置分層，棄去下層氯仿，萃取3 次，水層過膜上機（高效液相色譜儀）。液相色譜條件：檢測波長245 nm，SHISEIDO C色譜柱（250 mmh4.6 mm，5 μm），流速1.0 mL/min，柱溫為25 ℃，進樣量10 mL。

1.3.4 LCP分子質(zhì)量測定

LCP分子質(zhì)量采用凝膠滲透色譜法測定。色譜條件為：Shodex OHpak系列SB-806和SB-803兩根GPC色譜柱串聯(lián)，ELEOS凝膠色譜儀，檢測器采用激光檢測器和示差檢測器串聯(lián)使用，流動相為0.05 mol/L硫酸鈉＋0.02% NaN，流速1 mL/min，柱溫40 ℃，進樣量500 mL。測定方法：取葡聚糖制成標(biāo)準品溶液，過濾后，在上述色譜條件下進樣，記錄色譜峰保留時間，以響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，以保留時間為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準曲線。樣品配制成溶液在同樣的色譜條件下進樣，根據(jù)保留時間計算分子質(zhì)量。

1.3.5 LCP紅外光譜分析

稱取1 mg LCP，采用KBr壓片法壓片后，利用傅里葉變換紅外光譜儀進行掃描。掃描范圍為3 800～600 cm，分辨率為4 cm，掃描次數(shù)為16。

1.3.6 LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸的影響

1.3.6.1 動物分組與給藥

60只雄性BALB/c小鼠適應(yīng)7 d后隨機分為空白對照（blank control，CON）組、陽性對照（FOS）組、LCP高劑量（HIGH）組、LCP中劑量（MED）組、LCP低劑量（LOW）組，每組12只。CON組每天按10 mL/kg灌胃去離子水，共30 d。陽性對照FOS組按80 mg/kg灌胃FOS，共30 d。LCP高、中、低劑量組每天分別按160、80、40 mg/kg灌胃LCP，共30 d。

1.3.6.2 樣本采集

在第30天收集小鼠糞便進行短鏈脂肪酸含量測定。第30天灌胃結(jié)束后，處死各組小鼠，解剖，取出盲腸，用取樣勺取出盲腸內(nèi)容物用于短鏈脂肪酸含量測定。

1.3.6.3 短鏈脂肪酸含量測定

取適量樣品加入2 mL磷酸溶液（（磷酸）∶（去離子水）＝1∶3），渦旋均漿2 min，加入2 mL乙醚萃取10 min，4 000 r/min低溫離心20 min；離心后取出乙醚相，再加入2 mL乙醚萃取，4 000 r/min低溫離心10 min，離心后再次取出乙醚相，將兩次萃取液合并揮發(fā)定容至2 mL，進樣進行氣相色譜-質(zhì)譜分析。色譜條件：色譜柱為HP-INNOWAX色譜柱（25 mh0.20 mm，0.40 mm）；柱溫為初溫100 ℃保持5 min，以5 ℃/min升至150 ℃，再以30 ℃/min升至240 ℃，保持30 min；進樣口溫度為240 ℃；載氣流速為1.0 mL/min；不分流。質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源；離子源溫度為200 ℃；傳輸線溫度為250 ℃；轟擊電壓為70 eV；單離子掃描模式為定量離子60、73。短鏈脂肪酸的含量按下式計算。

式中：為試樣中短鏈脂肪酸的含量/（mmol/g）；為試樣測定液中短鏈脂肪酸的質(zhì)量濃度/（mg/L）；為定容體積/mL；為稀釋倍數(shù)；為試樣的質(zhì)量/g；為摩爾質(zhì)量/（g/mol）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準差表示，應(yīng)用SPSS 21.0軟件中Duncan檢驗進行差異顯著性分析，＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義，表示差異顯著，使用Graphpad prism 5軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 LCP結(jié)構(gòu)分析

經(jīng)過苯酚-硫酸法測定LCP多糖質(zhì)量分數(shù)達到89.11%，純度較高，后續(xù)對LCP進行結(jié)構(gòu)分析。

2.1.1 LCP紫外光譜分析

如圖1所示，在波長190～400 nm內(nèi)，LCP在波長200 nm附近具有特征吸收峰，表明該樣品屬于多糖類物質(zhì)；在波長260 nm處有一個較小的吸收峰，表明含有少量核酸，在波長280 nm處有也具有較小吸收峰，表明該多糖含有少量蛋白質(zhì)。說明黃皮疣柄牛肝菌作為一種富含蛋白質(zhì)的食用菌，采用單一的Sevag方法，不能完全脫掉其中的蛋白成分，因此后期實驗需進行多種方式結(jié)合法進行脫蛋白處理。

圖1 LCP的紫外吸收光譜圖Fig.1 UV-visible absorption spectra of LCP

2.1.2 LCP單糖組成分析

由圖2可知，LCP由7種單糖組成，分別為甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、巖藻糖，其物質(zhì)的量比為4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80；其中，葡萄糖質(zhì)量百分比大約占56.3%，甘露糖質(zhì)量百分比大約占18.2%，半乳糖質(zhì)量百分比大約占14.1%，巖藻糖質(zhì)量百分比大約占6.9%，說明LCP主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖3 類單糖組成。

圖2 LCP高效液相色譜圖Fig.2 High performance liquid chromatogram of LCP

2.1.3 LCP分子質(zhì)量

結(jié)合圖3、表1可知，LCP有一個色譜峰，其分散系數(shù)較大，屬于寬分布的多分散體系。重均分子質(zhì)量為1.540h10Da。

圖3 LCP凝膠色譜圖Fig.3 Gel permeation chromatogram of LCP

表1 LCP分子質(zhì)量及其分布Table 1 Molecular mass and distribution of LCP

2.1.4 LCP紅外光譜分析

如圖4所示，LCP在3 800～600 cm范圍內(nèi)具有多糖典型特征吸收峰。在3 325.00 cm處為OüH的伸縮振動；2 925.32 cm處的吸收峰為CüH鍵的伸縮振動；1 652.07 cm處的吸收峰是C＝O鍵伸縮振動；1 424.68 cm處的吸收峰為C＝O對稱伸縮振動，是糖醛酸中質(zhì)子化羧基特征峰，說明LCP含有糖醛酸，與單糖組成分析結(jié)果一致；1 373.1 cm處的吸收峰是CüH的彎曲振動；在1 200.76 cm及1 063.16 cm處的吸收峰由CüOüH和糖環(huán)CüOüC的兩種CüO鍵伸縮振動所引起，且1 200.76 cm及1 063.16 cm處吸收峰為吡喃糖苷特征吸收峰，說明結(jié)構(gòu)中存在-(1→6)糖苷鍵；在916.11 cm處出現(xiàn)的微弱吸收峰表明-型糖苷鍵的存在，表明多糖是吡喃型多糖；652.06 cm處為C≡CH鍵的彎曲振動峰的基頻峰。以上結(jié)果說明LCP是含有-(1→6)糖苷鍵以及-型糖苷鍵的吡喃型多糖。

圖4 LCP的傅里葉變換紅外光譜圖Fig.4 Fourier transform infrared (FTIR) spectrum of LCP

2.2 LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸的影響

2.2.1 LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量的影響

圖5為灌胃30 d后，各組小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的含量，與CON組對比，高劑量LCP能顯著增加小鼠盲腸中乙酸、丙酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸含量（＜0.05）；陽性對照FOS僅對小鼠盲腸內(nèi)容物中正丁酸含量有顯著增加的作用（＜0.05），中劑量LCP能顯著增加小鼠盲腸內(nèi)容物中異丁酸、正戊酸含量（＜0.05）?？傮w來看，LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的影響有一定量效關(guān)系。高劑量LCP能顯著增加盲腸內(nèi)容物中除正丁酸外的其他各類短鏈脂肪酸的含量。

圖5 LCP對小鼠盲腸短鏈脂肪酸含量的影響Fig.5 Effect of LCP on short-chain fatty acid production in mouse cecum contents

2.2.2 LCP對糞便中短鏈脂肪酸含量的影響

各組小鼠在經(jīng)過30 d的灌胃后糞便中的短鏈脂肪酸含量如圖6所示。高、中、低劑量LCP組陽性對照FOS組乙酸含量與CON組各短鏈脂肪酸含量之間都具有顯著性差異（＜0.05），其中高劑量LCP組乙酸含量最高，達到9.28 mmol/g，其次是陽性對照FOS組的乙酸含量較高，達到8.51 mmol/g，高、中、低劑量LCP 3 組乙酸含量呈劑量依賴性上升，CON組乙酸含量最低，為7.33 mmol/g。對比丙酸含量，低劑量LCP組丙酸含量最低（3.59 mmol/g），其次為CON組、陽性對照FOS組和中劑量LCP組，高劑量LCP組的丙酸含量最高，達到4.38 mmol/g。對比各組正丁酸的含量，高、中、低劑量LCP 組以及陽性對照FOS組都顯著高于CON組（＜0.05），且小鼠糞便中正丁酸含量與LCP呈劑量依賴性，正戊酸含量結(jié)果與該結(jié)果一致。從異丁酸及異戊酸結(jié)果看，高劑量LCP組糞便中異丁酸及異戊酸含量顯著高于其他各組（＜0.05），陽性對照FOS組糞便中異丁酸及異戊酸含量顯著低于CON組（＜0.05）。

圖6 LCP對小鼠糞便短鏈脂肪酸含量的影響Fig.6 Effect of LCP on short-chain fatty acid production in the feces of mice

3 討 論

由單糖組成可以發(fā)現(xiàn)LCP主要是由葡萄糖、甘露糖、半乳糖組成；對比其他牛肝菌科的多糖，可以發(fā)現(xiàn)其主要單糖也是以上3種，如日本海氏牛肝菌、海南黃肉牛肝菌、橙牛肝菌、長頸金牛肝菌、褐黃牛肝菌等。不同種類的牛肝菌多糖的分子質(zhì)量存在較大的差異，其分子質(zhì)量跨度較大，目前研究發(fā)現(xiàn)，海南黃肉牛肝菌（最小）的分子質(zhì)量為5 286 Da，白牛肝菌（最大）則大于2.00h10Da；對比LCP的分子質(zhì)量1.540h10Da，可以發(fā)現(xiàn)LCP的分子質(zhì)量適中，分子質(zhì)量的大小會影響多糖被腸道微生物的酵解情況，分子質(zhì)量太大會造成微生物酵解較困難；較小分子質(zhì)量的多糖可能在胃腸道就被降解不能進入大腸被腸道微生物利用；分子質(zhì)量適中更有利于被腸道微生物利用，將其降解為寡糖和短鏈脂肪酸供腸道上皮細胞吸收及利用。

盲腸內(nèi)容物和糞便中短鏈脂肪酸是由腸道微生物在厭氧條件下對未消化的可溶性碳水化合物酵解而轉(zhuǎn)化來的。多糖類物質(zhì)基本不能被消化道消化，需要進入大腸被腸道菌群酵解，由于其結(jié)構(gòu)以及單糖組成不同，在酵解過程中將會轉(zhuǎn)化為不同的短鏈脂肪酸。綜合近年來體外模擬人體結(jié)腸酵解多糖的研究可發(fā)現(xiàn)，乙酸主要由葡萄糖醛酸、木糖、果膠、半乳糖、半乳糖醛酸酵解產(chǎn)生，丙酸由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖酵解產(chǎn)生，丁酸由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、半乳糖醛酸產(chǎn)生，木糖對丁酸產(chǎn)生影響最大，單糖含量中甘露糖與葡萄糖含量更高，可以產(chǎn)生更高的丁酸。

根據(jù)小鼠灌胃30 d后糞便中短鏈脂肪酸含量來看，高劑量LCP可以顯著增加小鼠糞便中乙酸、丙酸、正丁酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸的含量（＜0.05）；FOS可以增加小鼠糞便中乙酸、丙酸、正丁酸的含量。對比小鼠灌胃30 d后盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量，高劑量LCP可以增加小鼠盲腸內(nèi)容物中乙酸、丙酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸的含量，對異丁酸、正戊酸的影響最為明顯；FOS只對小鼠盲腸內(nèi)容物中正丁酸促進作用，這可能與FOS作用劑量以及作用時間有關(guān)系。通過LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸影響以及LCP的單糖組成，可以發(fā)現(xiàn)乙酸含量的增加可能是由葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖被酵解，丙酸含量的增加可能是葡萄糖、木糖被酵解，丁酸、戊酸含量的增加可能與木糖、甘露糖有很大關(guān)系，與其他種類的多糖相比，LCP的單糖組成中甘露糖與葡萄糖的質(zhì)量百分比更高；有研究表明，猴頭菇多糖消化過程中發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生大量的游離甘露糖，對其酵解時也產(chǎn)生了戊酸，并且酵解一些不含甘露糖的多糖時幾乎不產(chǎn)生戊酸。研究表明靈芝多糖體內(nèi)酵解乙酸、丙酸和丁酸含量的增加可能是由于在大腸中發(fā)酵葡萄糖、半乳糖和甘露糖所致。

目前，由于對LCP的研究相對較少，所以參考一些其他菌類多糖，對其結(jié)構(gòu)研究沒有深入到糖苷鍵類型確定方面，在下一階段可以通過進行甲基化、高碘酸氧化、Smith降解、核磁共振等來進一步確定。另外，有研究發(fā)現(xiàn)靈芝多糖誘發(fā)結(jié)腸中乙酸、丙酸和丁酸的生成增加，可能對2型糖尿病和相關(guān)疾病的治療具有應(yīng)用潛力，高脂血癥小鼠通過腸道微生物群將海參多糖轉(zhuǎn)化為短鏈脂肪酸參與肝臟的脂質(zhì)代謝，因此對于LCP的研究可以深入到進一步確定該多糖在小鼠腸道結(jié)腸還是盲腸或者哪一段發(fā)生酵解，可以通過肝臟以及血液中短鏈脂肪酸變化來確定LCP對小鼠代謝影響，體內(nèi)及體外實驗結(jié)合研究LCP對肥胖、糖尿病、腸炎等疾病的影響。

4 結(jié) 論

LCP的結(jié)構(gòu)中單糖組成為甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、巖藻糖，其物質(zhì)的量之比為4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80；重均分子質(zhì)量為1.540h10Da；是含有-(1→6)糖苷鍵以及-型糖苷鍵的吡喃型多糖；LCP能顯著增加小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中乙酸、丙酸、正丁酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸6 類短鏈脂肪酸的含量，且呈劑量依賴性。在糞便中，LCP表現(xiàn)出對正丁酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸影響更大，在盲腸內(nèi)容物中，LCP表現(xiàn)出對異丁酸、正戊酸影響更大。不同劑量的LCP中，高劑量LCP對小鼠產(chǎn)生短鏈脂肪酸的影響最大。