柿葉中黃酮類化合物及提取工藝研究進展

王夢杰，李 鎬，華會明，周 微，趙余慶,

柿葉中黃酮類化合物及提取工藝研究進展

王夢杰1，李 鎬1，華會明2，周 微1*，趙余慶1, 2*

1. 延邊大學 長白山天然藥物研究教育部重點實驗室，吉林 延吉 133002 2. 沈陽藥科大學，遼寧 沈陽 110016

柿葉來源于柿科柿屬植物柿的干燥葉。柿葉中的主要化學成分有黃酮、三萜等，其中黃酮類化合物是中藥制劑腦心清片的主要活性成分，在腦心清片治療心腦血管疾病的過程中起關(guān)鍵作用，因此柿葉中的黃酮類成分具有較高的經(jīng)濟和藥用價值。針對柿葉中的黃酮類化合物結(jié)構(gòu)類型及柿葉黃酮的不同提取工藝進行綜述，以期為柿葉中黃酮成分的深入開發(fā)和應用提供參考依據(jù)。

柿葉；黃酮類；三萜；提取工藝；心腦血管；槲皮素；山柰酚；蘆丁

柿葉來源于柿科柿屬L.植物柿Thunb.的干燥葉，全世界柿屬有6屬450余種，我國有2屬50多種，主要分布于山西、山東、河南、甘肅等省[1]。柿葉入藥最早記載于明《滇南本草第一卷》[2]“柿花”項下，曰：“經(jīng)霜葉敷臃瘡?！薄侗静菰傩隆分杏涊d柿葉“味苦，性寒，無毒，專入肺經(jīng)，治咳嗽吐血，止渴生津?！薄斗诸惒菟幮浴芬嘤涊d柿葉可“治咳嗽氣喘，消肺氣脹”。大量國內(nèi)外研究證明，黃酮類化合物是柿葉的主要活性物質(zhì)，具有抗氧化、保護心腦血管、抗菌、抗癌、免疫調(diào)節(jié)等多種藥理活性，且具有毒性低、資源豐富、易于工業(yè)化提取制備等優(yōu)點[3]。本文對柿葉中已報道的黃酮類化合物及柿葉黃酮的不同提取工藝進行綜述，為柿葉黃酮提取物的進一步開發(fā)和應用提供科學依據(jù)。

1 黃酮類化合物

黃酮類化合物廣泛存在于自然界，是一類重要的天然抗氧化劑，是植物、蔬菜以及水果等自身產(chǎn)生的一類次生代謝產(chǎn)物[4]。柿葉中的黃酮類化合物主要是以槲皮素和山柰酚為苷元，與不同的糖苷結(jié)合而成[5]。由于柿葉黃酮類化合物具有保護心腦血管、抗氧化、抗腫瘤以及調(diào)節(jié)免疫力等作用，使其在天然藥物和保健品研制開發(fā)方面得到廣泛應用[6-7]。迄今為止已從柿葉中發(fā)現(xiàn)的黃酮類化合物見表1～3和圖1～3。

表1 柿葉黃酮醇類化合物

Table 1 Flavonoids from persimmon leaves

序號化合物名稱取代基位置糖基取代位置文獻 1槲皮素5,7,3,′4′-OH無8-9 2楊梅酮苷5,7,3′,4′-OH無10 3楊梅酮-3-甲基醚5,7,3′,4′,5′-OH,3-OCH3無10 4山柰酚3,5,7,4′-OH無8-9 5染料木素5,7,4?-OH無11 6異鼠李素3,5,7,4′-OH,5′-OCH3無11 7山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷5,7,4′-OH3-O-α-L-rhas8 8山柰酚-3-O-D-木糖苷5,7,4′-OH3-O-β-D-xyls12 9黃芪苷5,7,4′-OH3-glus10,13 10槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷5,7,3′,4′-OH3-O-α-L-aras10 11槲皮素-3-D-葡萄糖苷5,7,3,4′-OH3-β-D-glus9,13-15 12槲皮素-3-D-半乳糖苷5,7,3′,4′-OH3-β-D-gals9,14 13楊梅酮-3-O-α-L-鼠李糖苷3,5,7,3′,4′,5′-OH3-O-α-L-rhas10 14楊梅酮-3-O-D-葡萄糖苷5,7,3′,4′,5′-OH3-O-β-D-glus10 15異槲皮素-3-O-D-葡萄糖苷3,5,7,4′-OH,3′-OCH33-O-β-D-glus10 16山柰酚-3-O-D-半乳糖苷5,7,4′-OH3-O-β-D-gals9,13-16 17異鼠李素-3-O-D-葡萄糖苷3,5,7,4′-OH,5′-OCH33-O-β-D-glus9,18 18山柰酚-3-O-D-葡萄糖苷5,7,4′-OH3-O-β-D-glus9,13-17 19山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷5,7,4′-OH3-aras12 20槲皮素-7-O-D-鼠李糖苷5,7,3′,4′-OH7-O-β-D-rhas11 21金絲桃苷3,5,7,4′,5?-OH，3-gals10 22山柰酚-3-O-(2″-沒食子酰基)-葡萄糖苷5,7,4′-OH3-glus10 23山柰酚-3-O-(6?-O-α-鼠李糖)-β-葡萄糖苷5,7,4?-OH3-O-β-glus,6?-rha19 24沒食子?；鸾z桃苷5,7,3′,4′-OH3-glus10 25槲皮素-3-O-(2?-α-鼠李糖)-β-葡萄糖酸苷5,7,4?-OH2?-O-α-rha,3-O-β-glucus19 26槲皮素-3-O-β-葡萄糖酸苷5,7,3?,4?-OH3-O-β-glucus18 27牡荊素5,7,8,4′-OH8-glus9,20 28山柰酚-3-O-(2?-O-α-鼠李糖)-β-葡萄糖苷5,7,4?-OH3-O-β-glu,2?-rha19 292′′-O-鼠李糖-牡荊素5,7,4′-OH8-glu,2′′-rha9,20 308-C-[α-L-鼠李糖-(1→4)]-α-D-吡喃葡萄糖苷5,7,4′-OH8-glus,4?-rha10 31山柰酚-3-O-[2?-O-α-鼠李糖-3?-O-(6-O-α-鼠李糖)-β-葡萄糖]-β-葡萄糖苷5,7,4?-OH3-O-β-glu,2?-rha,3?-O-glu,6???-O-α-rha19 32槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-( 6→1)-α-L-鼠李糖苷5,7,3?,4?-OH3-glu,6?-rhas21 33槲皮素-3-O-(6?-O-α-鼠李糖l)-β-葡萄糖苷5,7,3?,4?-OH3-O-β-glus,6?-rha19,22 34山柰酚-3-O-β-葡萄糖酸苷5,7,4?-OH3-O-β-glucus19 35異槲皮素5,7,3′,4′-OH3-glus10,13 36山柰酚-3-O-β-(2?-O-α-鼠李糖-3?-O-β-葡萄糖)-葡萄糖酸苷5,7,4?-OH2?-O-α-rha,3?-O-β-glu,3-O-β-glucus19 37槲皮素-3-O-(2?,6?-二鼠李糖)-β-葡萄糖苷5,7,3?,4?-OH3-O-β-glus,2?,6?-rha19 38槲皮素-3-O-D-吡喃葡萄糖苷3,5,7,4′,5′-OH3-O-β-D-glus8 39槲皮素-3-O-(2?-O-α-鼠李糖)-β-葡萄糖苷5,7,3?,4?-OH3-O-β-glus,2?-rha19 40山柰酚-3-O-(2?-α-鼠李糖)-β-葡萄糖酸苷5,7,4?-OH2?-O-α-rha,3-O-β-glucus19,22 41蘆丁5,7,3′,4′-OH3-glc,6?-rhas8-9

glus-葡萄糖苷 rhas-鼠李糖苷 aras-阿拉伯糖苷 gals-半乳糖苷 xyl-木糖苷 glul-吡喃葡萄糖基 glucus-葡萄糖醛酸吡喃葡萄糖苷 rhal-鼠李糖基 glu-葡萄糖 rha-鼠李糖 gal-半乳糖 xyl-木糖 ara-阿拉伯糖

glus-glucoside rhas-rhamnoside aras-arabinoside gals-galactoside xyl-xyloside glul-glucopyranosyl glucus-glucuronopyranoside rhal-rhamnopyranosyl glu-glucose rha-rhamnose gal-galactose xyl-xylose ara-arabinose

表2 柿葉中二氫黃酮醇類和黃烷-3-醇類

Table 2 Dihydroflavonols and flavane-3-alcohols in persimmon leaves

序號化合物名稱取代基位置糖取代位置文獻 42二氫槲皮素5、7、3?、4?-OH無23 43原花色素5、7、3?、4?、5?-OH無24 44兒茶素5、7、3′、4′、5′-OH無25 45倍兒茶5、7、3′、4′-OH無25

表3 柿葉中花色素類化合物

Table 3 Anthocyanidins in persimmon leaves

序號化合物名稱取代基位置糖取代位置文獻 46花青素3、5、7、3′、4′-OH無23 47花葵素3、5、7、4′-OH無23 48花翠素3、5、7、3′、4′、5′-OH無23

圖1 黃酮醇類化合物的結(jié)構(gòu)

Fig. 1 Structure of flavonoids compounds

圖2 二氫黃酮醇類和黃烷-3-醇類化合物的結(jié)構(gòu)

圖3 花色素類化合物的結(jié)構(gòu)

2 總黃酮提取工藝研究

2.1 溶劑提取法

溶劑提取法常用的有浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及連續(xù)回流提取法等，常用溶劑有水、乙醇、甲醇等。大量研究證明[26-39]，在其他條件相同的情況下，使用丙酮提取柿葉黃酮的得率略高于乙醇，甲醇相對較低。考慮到乙醇相對成本低、毒性小等特點，乙醇作為提取劑為更佳[28]，且研究報道相對較多。最佳提取工藝具有低耗、高效、得率高的特點。周吳萍[29]和王蘭等[37]分別采用單因素和正交試驗以及單因素和響應面法優(yōu)化黃酮的提取工藝，得到提取率較高的總黃酮，分別為7.59%和4.04%；趙文紅等[39]采用單因素和正交試驗優(yōu)化總黃酮的提取工藝，以水為溶劑提取10 min，得到總黃酮提取率為3.12%，實現(xiàn)了提取工藝的高效且得率高；周雅陽等[33]從提取工藝和純化工藝2方面對柿葉黃酮進行了全面的研究。通過單因素實驗優(yōu)化黃酮提取的最佳工藝：15倍量的75%乙醇加熱回流2次，每次1 h。在此提取工藝下又對黃酮進行了純化工藝研究，在對酸水解法、萃取法、大孔吸附樹脂法純化工藝進行比較的同時，也比較了不同酸水解液對純化工藝和黃酮得率的影響。結(jié)果表明，5%硫酸水解液純化的黃酮質(zhì)量分數(shù)及得率最高，且3種方法中萃取法的黃酮質(zhì)量分數(shù)最高，為12.6%。其他研究者有關(guān)溶劑提取法的實驗設(shè)計、最佳工藝參數(shù)及提取率的實驗結(jié)果歸納總結(jié)見表4。

2.2 超聲波輔助提取法

此法在柿葉提取黃酮的工藝研究報道較多[40-47]。利用超聲波產(chǎn)生的機械、熱和空化作用原理和高效低耗等特點，可將柿葉中的黃酮類物質(zhì)快速溶出，從而提高柿葉中黃酮類化合物的提取率。以提取率高為評價指標，楊露等[43]采用單因素和正交試驗優(yōu)化柿葉黃酮超聲波提取的最佳工藝，得到黃酮提取率為6.36%。而孫化鵬等[45]以同樣的方法對柿葉中的黃酮進行提取，其提取率較6.36%高，為7.52%，可能與乙醇濃度和提取時間有關(guān)；以低耗和高效為評價指標，賈娜等[47]采用單因素實驗對柿葉黃酮的提取工藝進行優(yōu)化，在固液比1∶21的條件下提取32 min，黃酮得率為3.54%，與其他方法相比，實現(xiàn)了低耗、高效，且得率相對較高（表5）。

2.3 微波提取法

微波提取柿葉黃酮，效率高，易提純。陳淑燕等[48]采用微波法提取柿葉中總黃酮。通過單因素試驗和正交試驗優(yōu)化最佳提取條件為：65%乙醇，固液比為1 g∶25 mL，微波輻射功率和時間為300 W和15 min，總黃酮的提取率為5.22%。衛(wèi)靜莉等[49]采用微波輔助浸提工藝從柿葉中提取黃酮類化合物的工藝條件及參數(shù)，以單因素和正交試驗相結(jié)合的方法優(yōu)化提取工藝，其最佳的提取工藝參數(shù)：65%乙醇；料液比1 g∶25 mL；微波輻射時間和功率為2 min和420 W，柿葉黃酮的提取率為6.15%。董江濤等[50]采用響應曲面法優(yōu)化微波輔助提取柿葉中總黃酮的工藝，微波輔助提取柿葉總黃酮的最佳工藝為：微波功率422.36 W；提取時間20.97 min；液料比1 g∶20.66 mL，柿葉總黃酮的得率達6.15%。

表4 溶劑提取法

Table 4 Solvent extraction method

實驗設(shè)計提取最佳工藝提取率/%文獻 提取溶劑固液比時間/min溫度/℃次數(shù) 正交試驗70%乙醇1∶106070?0.1226 正交試驗70%乙醇?9010022.6027 正交試驗50%乙醇?18075??28 單因素與正交試驗50%乙醇1∶604590?7.5929 單因素與正交試驗70%乙醇1∶40601002?30 單因素與正交試驗60%乙醇?60100?0.7331 單因素與正交試驗60%乙醇1∶30?10020.7132 單因素實驗75%乙醇1∶15601002>0.433 單因素與正交試驗70%乙醇1∶10120、60、6010031.1034 單因素與正交試驗水1∶1060?20.7235 單因素與正交試驗40 %乙醇1∶5012050?1.8136 單因素和響應面法65.78%乙醇1∶35.01?74.05?4.0437 單因素與正交試驗70%乙醇1∶106010020.6838 單因素與正交試驗水1∶301060?3.1239

表5 超聲波輔助提取法

Table 5 Ultrasonic extraction method

實驗設(shè)計提取最佳工藝提取率/%文獻 乙醇/%料液比時間/min功率/W溫度/℃ 響應面法701∶5050450?1.5740 單因素和正交試驗601∶5045250?2.5941 單因素和正交試驗701∶2040350550.7042 單因素和正交試驗40?50?606.3643 單因素和正交試驗701∶2530?301.7544 正交試驗601∶5030?607.5245 單因素和正交試驗601∶3050?400.5146 響應面法691∶2132?533.5447

2.4 酶提取法

袁秀平等[51]以柿葉為原料，利用酶法輔助提取柿葉總黃酮的工藝研究，以總黃酮提取率為指標，通過單因素試驗考察酶的種類、添加酶量、溶劑pH、提取溫度和提取時間對總黃酮提取率的影響，在此基礎(chǔ)上經(jīng)過正交試驗優(yōu)化提取工藝，其最佳的提取工藝參數(shù)：提取溶劑為pH5.8的檸檬酸緩沖液，復合酶用量7%，45 ℃水浴條件下提取90 min，柿葉總黃酮的提取率為6.02%。

2.5 雙水相萃取法

羅曉[52]采用PEG1000/(NH4)2SO4雙水相體系萃取柿葉分離總黃酮的最佳萃取條件為PEG1000：0.55 g/mL，(NH4)2SO4：0.6 mL，MgCl2：0.04 g/mL，pH值為7，離心時間3 min，其萃取率可達94%。周艷紅[53]利用超聲波輔助離子液體雙水相提取柿葉中總黃酮，利用響應面法優(yōu)化的試驗條件為：料液比為1 g∶25 mL、提取時間為50 min、離子液體濃度為0.7 mol/L、提取溫度為60 ℃，柿葉中總黃酮提取率為2.68%。

2.6 超高壓法

樊振江等[54]采用超高壓提取柿葉中黃酮化合物，在單因素實驗的基礎(chǔ)上，采用正交試驗法對柿葉中黃酮化合物的超高壓提取工藝進行優(yōu)化，以總黃酮的得率為指標，得到的最佳工藝條件為乙醇體積分數(shù)65%、超高壓壓力450 MPa、超高壓時間3 min，固液比1 g∶14 mL，其總黃酮的提取得率可達50.2%。

2.7 堿溶酸沉法

陳麗等[55]采用堿溶酸沉與超聲波相結(jié)合的方法提取柿葉總黃酮。以柿葉總黃酮含量為評價指標，用均勻設(shè)計法優(yōu)選最佳工藝條件為15% HCl調(diào)pH值為6.20，NaOH調(diào)pH值為10，液料比為11∶1，超聲時間為32 min，超聲溫度為30 ℃，乙醇體積分數(shù)為70%。

2.8 半仿生法

孫彩云等[56-57]通過正交試驗確定半仿生法提取磨盤柿葉總黃酮的最佳工藝條件：固液比1 g∶20 mL，提取溫度80 ℃，提取時間1 h，分別以pH 2.0鹽酸溶液和pH 7.5、8.5的氨-氯化氨緩沖溶液作為提取液各提取1次。

2.9 超聲-復合酶協(xié)同提取法

衛(wèi)靜莉等[58]以柿葉總黃酮得率為指標，采用正交試驗法確定優(yōu)化提取工藝條件，得到最佳工藝條件為超聲功率60 W，提取時間40 min，酶解質(zhì)量濃度0.3 mg/mL，酶解時間2 h，pH值4.5，酶解溫度50 ℃，溶劑量50 mL，總黃酮的得率為5.45%。袁秀平等[59]以柿葉為試驗材料，研究復合酶和超聲波聯(lián)合提取柿葉總黃酮的最佳工藝，在單因素影響實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，對提取條件進行正交優(yōu)化，其最佳工藝為：固液比1∶25，60%乙醇，5%的復合酶量，室溫酶解30 min后，60 W超聲功率，50 ℃條件下超聲提取35 min，最高提取率為7.16%。

2.10 超聲-微波輔助提取法

微波提取具有高效、節(jié)能、快速、提取率高的優(yōu)點。董江濤等[60]采用超聲-微波協(xié)同輔助乙醇提取柿葉中的總黃酮，結(jié)果表明，超聲-微波協(xié)同輔助乙醇法提取柿葉總黃酮的最佳工藝為微波功率458.95 W、超聲波功率和提取時間為587.89 W和21.4 min、超聲/間隔時間1.06 s/0s，此條件下的柿葉總黃酮得率為6.49%。

2.11 小結(jié)

不同提取方法其影響因素和考察因素也各不相同，但通過提取工藝總結(jié)可知，溫度、時間、料液比以及乙醇濃度是每種方法幾乎都會考察的因素，現(xiàn)將不同提取方法最佳工藝的條件總結(jié)見表6。考慮各種提取方法的優(yōu)缺點以及工業(yè)化大生產(chǎn)等因素，溶劑提取法仍然是最適合于工業(yè)化生產(chǎn)的方法，其他方法則有待于研究開發(fā)。

表6 不同提取方法最佳工藝總結(jié)

Table 6 Summary of the optimal process for different extraction methods

提取方法最佳工藝提取率/% 溫度/℃時間/min料液比/(g·L?1)乙醇濃度/% 溶劑提取法90451∶60507.59 超聲波輔助提取法60301∶50607.52 微波提取法?20.911∶20.66?6.15 酶提取法4550??6.02 雙水相萃取法60501∶25?2.68 超高壓法?31∶146550.2 超聲-復合酶協(xié)同提取法50351∶25607.16 超聲-微波輔助提取法?21.4??6.49

3 結(jié)語

傳統(tǒng)中藥柿葉含有大量的黃酮類化合物具有抗菌消炎、生津止渴、清熱解毒、潤肺強心、鎮(zhèn)咳止血、抗癌防癌等多種生物功能[14]。以柿葉提取物為原料的腦心清制劑具有活血化瘀、通絡(luò)的功效，主治冠心病、腦動脈硬化癥等心腦血管疾病，在臨床廣泛應用。但目前對于柿葉和腦心清的主要藥效物質(zhì)、檢測指標及提取工藝還有待深入的研究。

3.1 腦心清制劑的有效成分

腦心清制劑是柿葉經(jīng)水提和醋酸乙酯提取后為原料制成一種中藥口服制劑[61]。黃酮類化合物作為柿葉的主要化學成分在腦心清制劑中發(fā)揮主要的作用[60]。有相關(guān)文獻報道[62]已經(jīng)指出腦心清的主要活性成分是槲皮素和山柰酚以及以二者為苷元的糖苷類。其活性成分具有降低血壓、降低血脂以及改善血流量、抑制血小板聚集、抑制炎癥反應以及抗氧化清除自由基等藥理作用[62]。構(gòu)效關(guān)系的研究結(jié)果[63]表明，B環(huán)的羥基數(shù)目和位置是其發(fā)揮作用的主要部位，作用強度是具有鄰位羥基槲皮素大于間位羥基山柰酚；B環(huán)C2-OH的活性大于C3-OH的；A環(huán)上的羥基是其發(fā)揮作用的重要基團；糖基取代會減弱其藥理活性，且糖基越多活性越低，即作用強度苷元＞單糖苷＞雙糖苷。

3.2 腦心清制劑的質(zhì)量標準現(xiàn)狀及問題

《中國藥典》2020年版采用HPLC法測定經(jīng)鹽酸水解后的黃酮苷元類成分槲皮素、山柰酚總含有量并對其進行質(zhì)量控制，但是腦心清的藥效物質(zhì)除了槲皮素和山柰酚以及二者的糖苷外，還有楊梅素及其他黃酮苷類化合物[62]。因此該方法難以全面反映柿葉提取物中的藥效物質(zhì)。槲皮素和山柰酚在很多植物中存在[64]，可通過酸堿水解或生物轉(zhuǎn)化法提高含量或大量制備[65-66]，但做為原料和制劑的質(zhì)量控制檢測指標，應具專屬性或特征性。建立柿葉提取物和腦心清制劑藥效物質(zhì)的的多指標同時測定方法[67]或開展質(zhì)量標志物[68]的研究，可有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，從而完善柿葉提取物和腦心清制劑的質(zhì)量標準評價系統(tǒng)。

3.3 柿葉總黃酮的提取工藝

《中國藥典》2020年版對柿葉提取使用的醋酸乙酯，盡管低毒性，但易燃易爆，存在安全隱患。本文總結(jié)的柿葉總黃酮提取工藝盡管都有各自的優(yōu)勢，但應用還有局限性。如酶法提取反應條件溫和，具有專一性，且環(huán)保，但需要篩選合適的專屬酶；溶劑提取法可實現(xiàn)生產(chǎn)流程化，生產(chǎn)周期較長；超聲和微波輔助法高效、低耗，但設(shè)備成本高等。因此目前更多的企業(yè)提取柿葉還是采用水和乙醇進行提取。如果能將超聲、微波輔助等方法和傳統(tǒng)提取法聯(lián)合應用于工業(yè)生產(chǎn)中，對于柿葉提取工藝的流程化和現(xiàn)代化及實現(xiàn)高效低耗具有重要的現(xiàn)實意義。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 李娜, 周志宏. 柿的藥學研究概況 [J]. 中國民族民間醫(yī)藥, 2015, 24(16): 40-43.

[2] 《滇南本草》整理組整理. 滇南本草(第一卷) [M]. 2版. 昆明: 云南人民出版社, 1975: 332-335.

[3] 馬新博, 宮汝飛. 柿葉黃酮藥理作用研究進展 [J]. 中醫(yī)藥學報, 2012, 40(4): 130-132.

[4] Morimoto M, Tanimoto K, Nakano S,. Insect antifeedant activity of flavones and chromones against[J]., 2003, 51(2): 389-393.

[5] 宣偉. 黃酮類化合物的研究進展 [J]. 中國林副特產(chǎn), 2017(1): 66-69.

[6] 李杰, 和素娜, 楊暉, 等. 金銀花中黃酮類化合物的提取及其檢測方法的研究進展 [J]. 食品研究與開發(fā), 2015, 36(17): 175-178.

[7] 張巖, 曹國杰, 張燕, 等. 黃酮類化合物的提取以及檢測方法的研究進展 [J]. 食品研究與開發(fā), 2008, 29(1): 154-158.

[8] 李羽晗, 王欣, 石繼祥, 等. 柿葉的化學成分研究 [J]. 華西藥學雜志, 2018, 33(4): 388-392.

[9] 陳光. 柿葉化學成分及生物活性的研究 [D]. 沈陽: 沈陽藥科大學, 2003.

[10] 周鑫堂, 王麗莉, 韓璐, 等. 柿葉化學成分和藥理作用研究進展 [J]. 中草藥, 2014, 45(21): 3195-3203.

[11] 張勝海, 王英姿, 段飛鵬, 等. 柿葉中黃酮類成分的化學研究 [J]. 天津中醫(yī)藥, 2014, 31(8): 501-503.

[12] 郭偉華, 張放. 柿樹中3種主要活性成分研究進展 [J]. 食品工業(yè)科技, 2015, 36(1): 395-399.

[13] 李娜. 柿葉柿皮的化學成分研究及其三萜、黃酮類化學物質(zhì)的制備工藝研究 [D]. 昆明: 云南中醫(yī)學院, 2015.

[14] 孫化鵬. 湖南省柿資源優(yōu)選及柿葉黃酮類化合物分離鑒定研究 [D]. 長沙: 湖南農(nóng)業(yè)大學, 2010.

[15] 梅為云, 李娜, 劉錄, 等. 云南甜柿葉化學成分研究 [J]. 云南民族大學學報: 自然科學版, 2017, 26(4): 274-277.

[16] Jeong D W, Cho C H, Lee J S,. Deastringent peel extracts of persimmon (Thunb. cv. cheongdo-bansi) protect neuronal PC-12 and SH-SY5Y cells against oxidative stress [J]., 2018, 28(7): 1094-1104.

[17] 馬桂榮, 孫靜, 段普凡, 等. 柿葉有效成分提取分離方法研究 [J]. 河北省科學院學報, 1991, 8(2): 68-74.

[18] 范杰平. 柿葉中有效成分的提取與分離研究 [D]. 杭州: 浙江大學, 2006.

[19] Furusawa M, Tanaka T, Ito T,. Flavonol glycosides in leaves of twospecies [J].(), 2005, 53(5): 591-593.

[20] 辛寧, 豐杰, 姚波. 柿葉黃酮類提取分離及藥理作用研究概況 [J]. 中醫(yī)藥學報, 2007, 35(2): 49-51.

[21] 姜紅波, 趙衛(wèi)星, 馮國棟, 等. 柿葉的主要有效成分及藥理作用研究進展 [J]. 化工時刊, 2010, 24(6): 38-44.

[22] Furusawa M, Tanaka T, Ito T,. Flavonol glycosides in leaves of twospecies [J].(), 2005, 53(5): 591-593.

[23] Ikegami A, Akagi T, Potter D,. Molecular identification of 1-Cys peroxiredoxin and anthocyanidin/flavonol 3-O-galactosyltransferase from proanthocyanidin-rich young fruits of persimmon (Thunb.) [J]., 2009, 230(4): 841-855.

[24] Katsumi E, Oshima N, Kagawa N,. Changes in the extracted amounts and seasonally variable constituents ofat different growth stages [J]., 2021, 75(1): 105-115.

[25] Akagi T, Ikegami A, Suzuki Y,. Expression balances of structural genes in shikimate and flavonoid biosynthesis cause a difference in proanthocyanidin accumulation in persimmon (Thunb.) fruit [J]., 2009, 230(5): 899-915.

[26] 徐赫, 李榮華, 夏巖石, 等. 黃酮類化合物提取、分離純化方法研究現(xiàn)狀及展望 [J]. 應用化工, 2021, 50(6): 1677-1682.

[27] 孫彩云, 柳鳳娟. 磨盤柿葉總黃酮的提取研究 [J]. 化學工程師, 2014, 28(2): 67-70.

[28] 段保宏. 柿葉的鑒別及其總黃酮的提取工藝考察 [J]. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2010, 5(6): 500-501.

[29] 石錦芹, 黃紹華, 胡欣愷, 等. 柿葉黃酮類化合物乙醇提取工藝的研究 [J]. 南昌大學學報: 理科版, 1999, 23(3): 264-267.

[30] 周吳萍, 黃瓊, 黃國霞, 等. 柿葉黃酮類物質(zhì)的提取及抗氧化性研究 [J]. 糧油加工, 2010(12): 156-159.

[31] 陳吼, 龍鳳來, 李黔蜀. 柿葉藥材的鑒別及總黃酮提取工藝探索 [J]. 楊凌職業(yè)技術(shù)學院學報, 2015, 14(4): 30-31.

[32] 王小芳, 董曉寧, 劉玉姣, 等. 柿葉中總黃酮提取工藝模式的建立及抗氧化活性研究 [J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2011, 30(1): 32-35.

[33] 劉紹雄, 羅祝泉, 葉敏, 等. 柿葉總黃酮和總多糖的提取工藝研究 [J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學, 2012, 40(9): 250-252.

[34] 周雅陽, 杜江. 柿葉總黃酮提取純化工藝研究 [J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2019, 15(4): 68-70.

[35] 晏亦林, 楊桂興, 李云秋. 柿葉總黃酮提取方法研究 [J]. 中藥材, 2003, 26(11): 811-812.

[36] 秦晶晶, 錢慧琴, 趙媛, 等. 柿葉總黃酮提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性 [J]. 食品工業(yè)科技, 2020, 41(13): 32-38, 45.

[37] 王蘭, 趙麟. 響應面分析法優(yōu)化柿葉總黃酮提取工藝 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學, 2011, 39(3): 1370-1373.

[38] 吉俊生, 董岳峰. 正交優(yōu)選柿葉總黃酮提取工藝及其抗氧化研究 [J]. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2013, 8(5): 464-467.

[39] 趙文紅, 趙翾, 白衛(wèi)東, 等. 柿葉黃酮化合物提取工藝研究 [J]. 陜西科技大學學報, 2007, 25(5): 54-58.

[40] Duan R, Zhao Z H, Zhang Y X,. Optimization and antioxidant activity of flavonoids extract fromThunb. ‘mopan’ pulp [J]., 2013, 25(12): 6925-6930.

[41] 王寧, 李遠志, 徐莉珍, 等. 超聲波法提取柿葉總黃酮的工藝研究 [J]. 現(xiàn)代食品科技, 2008, 24(7): 687-690.

[42] 盧鑫, 張琳, 盧瑞雪. 柿葉中黃酮類化合物提取和檢測方法研究綜述 [J]. 濟源職業(yè)技術(shù)學院學報, 2016, 15(2): 7-11.

[43] 楊露, 李小芳, 羅開沛, 等. 柿葉中總黃酮的超聲提取工藝研究 [J]. 中藥與臨床, 2016, 7(6): 27-30.

[44] 劉少靜, 趙旭, 張穎, 等. 柿葉中總黃酮的提取和純化工藝優(yōu)化及鮮、干柿葉中總黃酮的含量比較 [J]. 中國藥房, 2015, 26(25): 3572-3575.

[45] 孫化鵬, 張珉, 鐘曉紅. 柿葉總黃酮超聲輔助提取工藝研究 [J]. 湖南林業(yè)科技, 2014, 41(5): 18-21.

[46] 侯笑林, 林娜. 柿葉總黃酮的提取及對油脂抗氧化性研究 [J]. 現(xiàn)代食品, 2020(21): 92-95.

[47] 賈娜, 李曉崴, 宋立, 等. 響應面法優(yōu)化柿葉總黃酮的超聲波輔助提取條件 [J]. 食品與發(fā)酵科技, 2013, 49(6): 1-6.

[48] 陳淑燕, 周文富. 三明產(chǎn)柿葉總黃酮的微波提取研究 [J]. 化學與生物工程, 2011, 28(11): 57-61.

[49] 衛(wèi)靜莉, 薛笑麗, 向輝, 等. 微波輔助浸提柿葉總黃酮工藝 [J]. 林業(yè)科技開發(fā), 2009, 23(2): 93-96.

[50] 董江濤, 李燕, 徐慧強, 等. 響應曲面法優(yōu)化微波輔助提取柿葉總黃酮的工藝 [J]. 浙江農(nóng)業(yè)學報, 2010, 22(4): 521-526.

[51] 袁秀平, 王云云, 袁向輝. 復合酶輔助提取柿葉總黃酮工藝研究 [J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學, 2019, 65(5): 59-61.

[52] 羅曉. PEG1000/(NH4)2SO4雙水相萃取磨盤柿葉總黃酮的研究 [J]. 化學工程師, 2017, 31(7): 29-32.

[53] 周艷紅. 超聲輔助[C4mim]Br/(NH4)2SO4雙水相提取柿葉中總黃酮 [J]. 皮革與化工, 2020, 37(6): 16-20.

[54] 樊振江, 于旺堂, 縱偉. 超高壓提取柿葉黃酮的研究 [J]. 食品工程, 2008(2): 46-48.

[55] 陳麗, 韋運東, 顏曉婷, 等. 堿溶酸沉與超聲相結(jié)合法提取柿葉總黃酮的工藝改進 [J]. 廣西科技大學學報, 2017, 28(4): 108-112.

[56] 孫彩云, 柳鳳娟. 磨盤柿葉總黃酮的提取研究 [J]. 化學工程師, 2014, 28(2): 67-70.

[57] 孫彩云, 柳鑫華, 王慶輝, 等. 半仿生提取柿葉黃酮及其抗氧化和抗菌作用 [J]. 食品研究與開發(fā), 2014, 35(10): 115-118.

[58] 衛(wèi)靜莉, 翟懷健, 肖俊. 超聲波—生物酶協(xié)同萃取柿葉黃酮類化合物工藝研究[A] // 2012年中國藥學大會暨第十二屆中國藥師周論文集[C]. 南京: 中國藥學會, 2012: 5.

[59] 袁秀平, 華燕青, 王云云. 復合酶協(xié)同超聲法提取柿葉總黃酮的工藝優(yōu)化 [J]. 中國食品添加劑, 2019, 30(8): 103-108.

[60] 董江濤, 李燕, 徐慧強, 等. 響應曲面法優(yōu)化超聲-微波協(xié)同提取柿葉總黃酮的工藝研究 [J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學, 2010, 38(4): 314-318.

[61] 尹仁杰, 李楚源, 梁敬儀, 等. HPLC法測定腦心清片中糠酸的含量 [J]. 今日藥學, 2012, 22(3): 134-136.

[62] 貝偉劍. 柿葉活性成分及腦心清片對腦缺血神經(jīng)保護作用研究 [D]. 廣州: 中山大學, 2004.

[63] 常軍, 王晨曦, 李玉萍. 天然黃酮類化合物的構(gòu)效關(guān)系最新研究進展 [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2013, 25(7): 1006-1010.

[64] 金越. 槲皮素及其單糖苷異槲皮素，雙糖苷蘆丁抗自由基構(gòu)效關(guān)系研究 [D]. 大連: 大連醫(yī)科大學, 2006.

[65] 范小華, 郭清坤, 吳錦文, 等. 酸性乙醇提取蘆筍下腳料黃酮的工藝研究 [J]. 福建輕紡, 2010(6): 32-35.

[66] 徐守霞. 銀杏葉中黃酮類化合物的提取工藝研究 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學, 2012, 40(2): 706-707, 744.

[67] 蘇詩韻, 郭海彪, 李楚源, 等. 一測多評法同時測定腦心清片中6種黃酮 [J]. 中成藥, 2018, 40(11): 2441-2445.

[68] 劉瑩, 覃驪蘭. 桑葚化學成分、藥理作用及質(zhì)量標志物研究進展 [J]. 重慶醫(yī)學, 2021, 50(6): 1063-1067.

Research progress of flavonoids and extraction processes in persimmon leaves

WANG Meng-jie1, LI Gao1, HUA Hui-ming2, ZHOU Wei1, ZHAO Yu-qing1, 2

1. Key Laboratory of Natural Medicines of Changbai Mountain, Ministry of Education, Yanbian University, Yanji 133002, China 2. Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China

Persimmon leaf derived from the dried leaves ofThunb, which belongs to thegenus and Persimmon family. The main chemical components are the flavonoids and triterpenes, among which flavonoids as the major active ingredients of preparation of Chinese medicine Naoxinqing Tablets, which play a key role in the treatment of cardiovascular diseases, therefore, the flavonoids in persimmon leaves posses high economic and medicinal value. In this paper, the structural types of flavonoids which have been reported in persimmon leaves and the different extraction processes of persimmon leaf flavonoids were reviewed, in order to provide a reference for the further development and application of the flavonoids in persimmon leaves.

persimmon leaf; flavonoids; extraction processes; research progress; quercetin; kaempferol; rutin

R286

A

0253 - 2670(2022)13 -4214 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.13.034

2021-12-09

高等教育學科創(chuàng)新工程（NO.111, D18012）

王夢杰（1995—），女，碩士研究生，生藥學專業(yè)。E-mail: 1286738824@qq.com

趙余慶（1957—），男，教授，研究方向為藥食同源品功效物質(zhì)發(fā)現(xiàn)與功效評價。E-mail: zyq4885@126.com

周 微（1984—），女，副教授，研究方向為天然產(chǎn)物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。E-mail: zhouwei8452@163.com

[責任編輯 時圣明]