李園園，李 震，莫慶楠，盧鳳蘭，周潔蕊，臧一天，吳紅翔

(江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西 南昌 332045)

隨著畜牧業(yè)的迅速發(fā)展，蛋白質(zhì)飼料資源的短缺已成為制約養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵，急需研究開發(fā)新的蛋白質(zhì)飼料。蚯蚓是一種極具開發(fā)潛力的動(dòng)物性飼料蛋白源。有研究表明，蚯蚓的蛋白質(zhì)含量為56.5%，最高可達(dá)71%，含17種氨基酸以及磷、鈣、硒等礦物質(zhì)、維生素及微量元素[1]。此外，還含有許多核苷酸、酶類、抗菌肽、活性物質(zhì)及某些生長因子，這些物質(zhì)可以增強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能及抗病力，促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，提高生產(chǎn)性能[2-6]。據(jù)有關(guān)報(bào)道，蚯蚓消化道中有十多種蛋白水解酶如蚯蚓纖溶酶等，這些蛋白酶類對(duì)蛋白質(zhì)有較強(qiáng)的水解活性，可使蛋白質(zhì)發(fā)生水解作用，選擇適宜的酶解條件，使蚯蚓體內(nèi)酶保持較高活性，并利用這些酶水解體蛋白，使之變成可溶性的小分子活性肽和氨基酸，作為添加劑可以直接被其他動(dòng)物體完整吸收[7-8]。有報(bào)道用蚯蚓粉飼喂動(dòng)物，發(fā)現(xiàn)其可以明顯提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能和免疫性能，增加經(jīng)濟(jì)效益[9-10]。孫茂紅等[11]在柴雞飼糧中添加一定水平的蚯蚓粉，發(fā)現(xiàn)蚯蚓粉可以通過調(diào)控血液激素水平提高柴雞的生長性能和飼料轉(zhuǎn)化率，并具有一定的降血脂功效。但目前有關(guān)蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞的研究卻較為少見。

安義瓦灰雞原產(chǎn)于江西省安義縣東陽鎮(zhèn)，具有耐粗飼、適應(yīng)性強(qiáng)、抗病性強(qiáng)、肉質(zhì)細(xì)嫩等特點(diǎn)[12]。是我國唯一以“灰羽”為特征的珍稀地方雞種，屬于肉蛋兼用型[13]。但由于其生長速度慢且飼養(yǎng)周期長，所以導(dǎo)致其推廣受到了一定地限制。且目前有關(guān)蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞的生產(chǎn)性能、血清指標(biāo)及免疫器官等影響的系統(tǒng)報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)以120～162日齡的安義瓦灰雞(母雞)為研究對(duì)象，研究蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞生長性能、血清指標(biāo)及免疫器官指數(shù)的影響，為蚯蚓發(fā)酵液在安義瓦灰雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料安義瓦灰雞購自江西安義龍富山實(shí)業(yè)公司；蚯蚓發(fā)酵液：浙江倍康生物科技有限公司，經(jīng)過高溫發(fā)酵后獲得。經(jīng)檢測(cè)分析，蚯蚓發(fā)酵液的pH值 6.02，原質(zhì)量濃度中蛋白質(zhì)含量10.59 g/L、氨基酸總量(17種) 12 590.9 mg/L、鈣 476.10 mg/L、鎂 68.00 mg/L、銅 0.071 mg/L、鋅 3.07 mg/L、鐵 8.90 mg/L、錳 5.90 mg/L、維生素A 300 mg/L、維生素D 37.2 mg/L、維生素E 0.3 mg/L、枯草芽孢桿菌 0.55 億/mL、地衣芽孢桿菌 0.21 億/mL、巨大芽孢桿菌 0.04 億/mL、總氮 1.12%、磷(P2O5)1.42%、鉀(K2O)0.76%、砷(As)1.57 mg/kg、鎘(Cd)0.18 mg/kg、鉛(Pb)1.18 mg/kg、鉻(Cr)0.99 mg/kg、汞(Hg)0.01 mg/kg等。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組選取120日齡體質(zhì)量相近且健康狀況良好的安義瓦灰雞320只(全部為母雞)，隨機(jī)均分為4個(gè)處理，每個(gè)處理8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)照組(Ⅰ組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加蚯蚓發(fā)酵液的試驗(yàn)飼糧，按蚯蚓發(fā)酵液/飼糧分別為2.5，5.0，7.5 μL/g的質(zhì)量濃度添加蚯蚓發(fā)酵液?；A(chǔ)飼糧為玉米—豆粕型，參照《中國飼料成分及營養(yǎng)價(jià)值表(2019年第30版)》和《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33-2004)進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ)) %

1.3 飼養(yǎng)管理試驗(yàn)開始前，對(duì)雞舍及其用具進(jìn)行徹底清掃和消毒。飼養(yǎng)試驗(yàn)于江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物基地完成，試驗(yàn)期間，試驗(yàn)雞采用舍內(nèi)階梯籠養(yǎng)，自由采食與飲水，飼養(yǎng)環(huán)境與管理?xiàng)l件一致，雞舍通風(fēng)和環(huán)境符合衛(wèi)生要求，各組雞飼養(yǎng)管理和免疫接種程序按常規(guī)飼養(yǎng)規(guī)程進(jìn)行。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1生長性能的測(cè)定 試驗(yàn)期間，每天以重復(fù)為單位，記錄各組安義瓦灰雞的日采食量，0，14，28，42 d，空腹稱質(zhì)量，計(jì)算其平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G)。

1.4.2血樣采集及指標(biāo)測(cè)定 在試驗(yàn)42 d分別從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選擇6只安義瓦灰雞，每組48只，共192只，進(jìn)行空腹12 h，翅靜脈采血5 mL，室溫靜置1 h，3 000 r/min離心10 min，吸取血清(上清液)分裝于200 μL EP管中，-20℃保存。

血清抗氧化指標(biāo)：丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)均采用試劑盒檢測(cè)，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

血清生化指標(biāo)：總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、堿性磷酸酶(AKP)、脂肪酶(LPS)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、鈣(Ca)均采用試劑盒檢測(cè)，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

血清生理指標(biāo)：采用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀(邁瑞 BC-2800,深圳)測(cè)定血清中白細(xì)胞數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW)、血小板數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)。

激素指標(biāo)：采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫儀(羅氏E 801，德國)測(cè)定血清中雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、促甲狀腺激素(TSH)含量。

1.4.3免疫器官指數(shù) 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取6只接近平均體質(zhì)量的安義瓦灰雞，屠宰，摘取胸腺、法氏囊、脾臟，稱量質(zhì)量并計(jì)算免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官質(zhì)量(g)/活體質(zhì)量(g)]×100%。

1.4.4油紅O染色觀察肝組織脂肪沉積 將屠宰后的雞，剖開腹腔，剪開胸骨，取出完整的肝臟，用生理鹽水沖洗后，在每只雞肝臟的肝小葉邊緣位置切除相同大小的肝臟組織，于-80℃凍存，由武漢市皮諾飛生物科技有限公司制作冰凍切片并進(jìn)行油紅O染色，鏡下觀察脂肪呈鮮紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色，紅色面積越大代表脂肪沉積越嚴(yán)重。

2 結(jié)果

2.1 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞生長性能的影響由表2可知，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組的料重比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。其他指標(biāo)無顯著差異(P>0.05)。

表2 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞生長性能的影響

2.2 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清抗氧化指標(biāo)的影響由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組MDA含量分別降低25.98%，30.43%和23.43%(P<0.05)；SOD活性分別升高25.52%，34.51%和26.60%(P<0.05)；GSH-Px活性分別升高21.17%，26.05%和31.40%(P<0.05)；CAT活性分別升高56.42%，76.61%和41.28%(P<0.05)。

表3 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清生化指標(biāo)的影響由表4可知，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組TP含量較對(duì)照組分別升高了8.58%，14.26%和13.42%(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組ALB含量較對(duì)照組分別升高了16.13%，27.48%(P<0.05)和12.78%(P>0.05)。試驗(yàn)Ⅲ組與對(duì)照組相比，顯著降低總膽固醇(T-CHO)的含量(P<0.05)。此外，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血清中AKP的活力顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，分別較對(duì)照組升高了26.62%，34.78%和28.43%(P<0.05)。

表4 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清生化指標(biāo)的影響

2.4 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清生理指標(biāo)的影響由表5可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組對(duì)血清生理指標(biāo)的影響不顯著(P>0.05)。

表5 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清生理指標(biāo)的影響

2.5 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清激素指標(biāo)的影響由表6可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組血清中T3、T3/T4的濃度顯著升高(P<0.05)，其他激素指標(biāo)無顯著性影響(P>0.05)。

表6 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清激素指標(biāo)的影響

2.6 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞免疫器官指數(shù)的影響由表7可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅲ組的法氏囊指數(shù)顯著提高(P<0.05)，較對(duì)照組提高了32.5%。

表7 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞免疫器官指數(shù)的影響

2.7 油紅O染色的肝臟切片觀察油紅O染色見圖1，結(jié)果顯示，對(duì)照組雞肝細(xì)胞內(nèi)可見部分散在的紅色脂滴，呈彌漫狀(圖1A)；細(xì)胞核被染成藍(lán)色，散布有少數(shù)細(xì)小脂滴，脂肪變性程度和脂滴含量均較對(duì)照組有明顯改善(圖1B、C)；細(xì)胞漿可見少數(shù)紅色脂滴(圖1D)。

A..對(duì)照組；B～D.分別對(duì)應(yīng)3個(gè)試驗(yàn)組

3 討論

3.1 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞生長性能的影響生長性能是品種鑒定，評(píng)價(jià)飼養(yǎng)管理狀況、營養(yǎng)狀況和經(jīng)濟(jì)效益的重要參考指標(biāo)[14]。料重比是表示飼料轉(zhuǎn)化率的重要指標(biāo)，料重比越低則相應(yīng)的飼料轉(zhuǎn)換率越高[15]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加蚯蚓發(fā)酵液的質(zhì)量濃度在5 μL/g以下時(shí)，可顯著降低安義瓦灰雞的料重比。與雷小文等[16]、李娟等[17]的研究結(jié)果相近。原因可能是：蚯蚓發(fā)酵液中含有枯草芽孢桿菌與地衣芽孢桿菌，這兩種益生菌能夠提高動(dòng)物的消化率以及生長性能[18]。其機(jī)理可能是益生菌將蛋白質(zhì)降解為小肽，將多糖降解為易吸收的短鏈糖類或單糖，從而提高動(dòng)物的飼料利用率，加快生長速度[19]。同時(shí)枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生高活性的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶，從而降解植物中的復(fù)雜碳水化合物，提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化率，并為動(dòng)物提供更多的營養(yǎng)，使得飼料原料原有的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)被改變，營養(yǎng)性提高，更容易在消化道中吸收利用[20]；蚯蚓中的蚓激酶、抗菌肽等改善了消化道內(nèi)環(huán)境、促進(jìn)了飼料的消化功能，同時(shí)蚯蚓在發(fā)酵過程中，會(huì)降解自身的部分毒素和抗?fàn)I養(yǎng)因子[21]，產(chǎn)生多種不飽和脂肪酸和芳香酸，微生物菌體蛋白和有益代謝產(chǎn)物等，改善營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體生長。

3.2 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清抗氧化指標(biāo)的影響動(dòng)物機(jī)體在新陳代謝過程中會(huì)產(chǎn)生大量的自由基，當(dāng)過多的自由基不能被有效清理時(shí)，其過氧化作用會(huì)對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生不利或有害作用[22]。SOD、GSH-Px、CAT是機(jī)體中主要的抗氧化物酶，維持著機(jī)體的氧化平衡，它們能清除多余的超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷[23]，而MDA含量則反映脂質(zhì)過氧化程度，間接反映細(xì)胞受損傷程度[24]。SOD能夠促使體內(nèi)過量的自由基產(chǎn)生歧化，減少自由基過量對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生的損害從而提高動(dòng)物的抗衰老和免疫能力[25]。GSH-Px是一種重要的過氧化物分解酶，它能催化還原型谷胱甘肽(GSH)變?yōu)檠趸怨入赘孰?GSSG)，使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物，從而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能不受損害[26-27]。CAT可清除H2O2自由基，避免細(xì)胞和組織受到氧化損傷[28]。MDA為脂質(zhì)氧化反應(yīng)的穩(wěn)定終產(chǎn)物，其含量越高反映了自由基對(duì)機(jī)體脂肪的損傷程度越大，表明機(jī)體細(xì)胞膜和肝組織被氧化受損[29]。徐麒麟等[30]研究結(jié)果表明，蚯蚓提取物的添加可提高成華豬機(jī)體的抗氧化功能。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，蚯蚓發(fā)酵液的添加能顯著提高安義瓦灰雞血清中SOD、GSH-Px及CAT活性，降低MDA的含量。這表明在飼糧中添加蚯蚓發(fā)酵液可以提高細(xì)胞的抗氧化功能，降低細(xì)胞受脂質(zhì)過氧化造成的損傷。原因可能是：蚯蚓發(fā)酵液中的精氨酸能有效地提高機(jī)體總抗氧化能力，降低體內(nèi)自由基含量，抑制活性氧(ROS)生成與積累，促進(jìn)GSH合成與積累，增強(qiáng)內(nèi)源性抗氧化酶(CAT、SOD等)活性，抑制氧化應(yīng)激的產(chǎn)生[31]；試驗(yàn)組抗氧化能力的增強(qiáng)也可能與蚯蚓發(fā)酵液中的益生菌有關(guān)，益生菌可以通過其金屬離子螯合能力，抗氧化系統(tǒng)，調(diào)節(jié)信號(hào)通路，酶產(chǎn)生ROS簇等方面發(fā)揮其抗氧化作用[32]；蚯蚓發(fā)酵液中的維生素A可能通過IL-1和核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)/GPx1/核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)途徑對(duì)一氧化氮(NO)的過量生成進(jìn)行調(diào)節(jié)，進(jìn)而減緩動(dòng)物細(xì)胞的氧化應(yīng)激，提高機(jī)體的抗氧化能力[33]。

3.3 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清生化生理指標(biāo)的影響動(dòng)物機(jī)體的原料以及消化產(chǎn)物的代謝都是通過血液的運(yùn)輸來實(shí)現(xiàn)，血清生化指標(biāo)的變化能夠直接反映動(dòng)物的營養(yǎng)狀態(tài)和健康狀況，也能反映組織器官機(jī)能的變化[34]。血清TP和ALB的含量主要受飼糧類型以及營養(yǎng)水平的影響，可以反映機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝水平和免疫機(jī)能[35]。T-CHO不僅是構(gòu)成動(dòng)物機(jī)體的重要組織成分，也是血液中的脂類轉(zhuǎn)移系統(tǒng)的必需因子，其含量的高低能夠體現(xiàn)出動(dòng)物機(jī)體內(nèi)脂肪的沉積狀況，當(dāng)機(jī)體脂肪沉積增加時(shí)，其含量降低[36]。血清中AKP主要來自肝臟和骨骼，國內(nèi)外研究一致認(rèn)為AKP是反映骨改變?nèi)^程最合適的指標(biāo)，其特異性、靈敏度及準(zhǔn)確性優(yōu)于其他物質(zhì)[37]，其活性對(duì)動(dòng)物機(jī)體骨骼的發(fā)育和鈣(Ca)、磷(P)代謝有重要的影響作用[38]，并能反映機(jī)體肝臟功能受損程度和抗應(yīng)激能力[39]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，蚯蚓發(fā)酵液的添加可以增加血清中蛋白含量，降低膽固醇含量，提高AKP的含量。表明蚯蚓發(fā)酵液的添加能增強(qiáng)機(jī)體的蛋白質(zhì)合成代謝和免疫力，促進(jìn)機(jī)體內(nèi)的脂肪沉積。原因可能是由于蚯蚓發(fā)酵液的添加會(huì)促進(jìn)肝臟細(xì)胞活力，進(jìn)而加快脂肪消化吸收和鈣磷沉積，提高機(jī)體的抗應(yīng)激能力，從而改善雞的免疫力。

3.4 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞血清激素指標(biāo)的影響甲狀腺激素通過信號(hào)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝，能夠直接地反映機(jī)體的基礎(chǔ)代謝率，具有促進(jìn)機(jī)體新陳代謝及組織生長發(fā)育的作用，包括T3和T4[40-41]。T3、T4具有較廣泛的生理作用，可通過作用于線粒體促進(jìn)細(xì)胞氧化作用，使糖、脂肪的氧化作用加強(qiáng)，可為體內(nèi)蛋白質(zhì)合成提供足夠的ATP，促進(jìn)蛋白質(zhì)和各種酶的生成，使機(jī)體在不同營養(yǎng)條件下維持總氮平衡[42]。T3的活性是T4的數(shù)倍，T3一部分由甲狀腺直接分泌，另一部分由T4在組織內(nèi)脫碘酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)門3，并且在局部發(fā)揮生理作用[43]。血液中甲狀腺激素主要以T4形式存在，由甲狀腺合成并釋放到血液中[44]。T3/T4值的大小反映出T4向T3轉(zhuǎn)化的能力，較高的T3/T4值代表具有較高的甲狀腺功能活性[45]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組蚯蚓發(fā)酵液的添加量顯著提高T3和T3/T4的值，這表明蚯蚓發(fā)酵液有利于提高安義瓦灰雞甲狀腺功能的活性，并能通過提高T3的分泌促進(jìn)雞體內(nèi)脂類的氧化分解。

3.5 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞免疫器官指數(shù)的影響免疫器官是免疫細(xì)胞發(fā)育、增殖和分化的場(chǎng)所，免疫器官的發(fā)育情況以及功能的強(qiáng)弱對(duì)禽類的免疫水平起著至關(guān)重要的作用[46]。胸腺、脾臟及法氏囊是禽類最重要的免疫器官，免疫器官稱重法是研究機(jī)體免疫狀況的方法之一[47]。一般研究認(rèn)為，免疫器官質(zhì)量降低為免疫抑制所致，免疫器官質(zhì)量增加則為免疫增強(qiáng)的表現(xiàn)[48]。而法氏囊是禽類特有的體液免疫器官，法氏囊指數(shù)增大表明機(jī)體的免疫機(jī)能提高[49]。劉瀚揚(yáng)等[50]研究表明，蚯蚓提取物在一定添加范圍內(nèi)能促進(jìn)小鼠免疫器官的發(fā)育。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加適量的蚯蚓發(fā)酵液能顯著提高雞的法氏囊指數(shù)，表明蚯蚓發(fā)酵液對(duì)雞免疫器官的發(fā)育具有促進(jìn)作用，進(jìn)而增加機(jī)體的免疫功能。

3.6 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)安義瓦灰雞肝臟的影響肝臟脂滴是肝細(xì)胞內(nèi)的一種特殊細(xì)胞器，可特異性儲(chǔ)存中性脂肪，如膽固醇酯和甘油三酯，直接參與肝臟脂類代謝[51]。脂滴形成后可通過兩條途徑增大，在已有脂滴基礎(chǔ)上不斷擴(kuò)大或者合成新脂滴不斷融合形成大脂滴[52]。脂滴水解主要途徑為：甘油三酯脂肪酶催化甘油三酯水解，羧酸酯酶3和CIDEB介導(dǎo)的脂解[53]。通過油紅O染色的結(jié)果來看，蚯蚓發(fā)酵液的添加降低了脂滴在肝臟的沉積，從這一結(jié)果可推斷出，蚯蚓發(fā)酵液可以使脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)能力升高，加強(qiáng)脂滴的水解，最終起到降低肝臟脂滴含量的效果。

綜上所述，在飼糧中添加適量的蚯蚓發(fā)酵液可以調(diào)節(jié)安義瓦灰雞的生長性能、血清抗氧化能力和免疫能力，降低血脂水平，提高甲狀腺功能的活性，促進(jìn)免疫器官發(fā)育，改善肝臟的脂肪沉積，以5 μL/g蚯蚓發(fā)酵液添加量的效果最佳。