金俊奇，李 彬，陳代文，余 冰，劉延杰，何 軍，黃志清，毛湘冰，鄭 萍，羅玉衡，羅鈞秋，閻 輝，虞 潔，*

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所/動(dòng)物抗病營(yíng)養(yǎng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，成都 611130；2.四川特驅(qū)農(nóng)牧科技集團(tuán)有限公司，成都 610207；3.濟(jì)南百斯杰生物工程有限公司，濟(jì)南 251600）

近年來(lái)，玉米已成為我國(guó)畜禽飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的主要能量原料，但因其富含非淀粉多糖（NSP），如木聚糖、纖維素和β-葡聚糖等，從而使消化道食糜黏度增加，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率，導(dǎo)致其使用價(jià)值受到一定限制[1-4]。研究表明，木聚糖酶可破壞木聚糖中的β-1,4-糖苷鍵結(jié)構(gòu)，提高飼料利用率[5]，添加木聚糖酶可顯著增加提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能[6-7]。但由于木聚糖主鏈上的阿拉伯糖和阿魏酸具有空間位阻現(xiàn)象，降低了木聚糖酶與木聚糖主鏈作用位點(diǎn)的結(jié)合概率，而阿拉伯呋喃糖苷酶和阿魏酸酯酶可以分別降解ɑ-L-阿拉伯呋喃糖苷鍵和阿魏酸酯鍵，提高內(nèi)切木聚糖酶與主鏈作用位點(diǎn)的接觸概率[1-2]。因此，本研究擬在玉米-豆粕型飼料中添加不同組合木聚糖酶，探明其對(duì)生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分表觀消化率和血液代謝指標(biāo)的影響，以期進(jìn)一步為木聚糖酶在生長(zhǎng)豬上的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用75頭健康“杜×長(zhǎng)×大”生長(zhǎng)育肥豬[(48.58±1.46)kg]，隨機(jī)分為5個(gè)處理，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭豬。對(duì)照組（CON）飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，處理組在基礎(chǔ)日糧上添加0.04%木聚糖酶組合，其中處理組1（T1）：黑曲霉木聚糖酶2 000 U/kg、處理組2（T2）：黑曲霉木聚糖酶2 000 U/kg+阿魏酸酯酶10 U/kg、處理組3（T3）：黑曲霉木聚糖酶2 000 U/kg+呋喃糖苷酶100 U/kg、處理組4（T4）：黑曲霉木聚糖酶2 000 U/kg+阿魏酸酯酶10 U/kg+呋喃糖苷酶100 U/kg。試驗(yàn)期29 d。

1.2 試驗(yàn)飼料

基礎(chǔ)飼料參照NRC（2012）生長(zhǎng)育肥豬營(yíng)養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。黑曲霉木聚糖酶酶活5 000 U/g，阿魏酸酯酶酶活25 U/g，阿拉伯呋喃糖苷酶250 U/g，由濟(jì)南百斯杰生物有限公司提供。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所教學(xué)科研試驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)豬只自由采食、飲水，每天08:00、13:00、18:00定時(shí)飼喂，試驗(yàn)期間清潔及消毒工作按常規(guī)進(jìn)行，保持圈舍通風(fēng)、衛(wèi)生和干燥。

1.4 樣品采集

從試驗(yàn)期第23天開(kāi)始在日糧中添加0.4%三氧化二鉻（Cr2O3）飼喂豬只。試驗(yàn)第26天開(kāi)始收集綠色糞便，直到試驗(yàn)結(jié)束。按糞便鮮重1∶10比例加入硫酸固氮，數(shù)滴甲苯防腐，混勻糞樣，-20℃保存。待試驗(yàn)結(jié)束，以每個(gè)重復(fù)為單位混合糞樣并攪拌均勻，置于65℃烘箱干燥，粉碎后取樣待測(cè)。

試驗(yàn)第30天，以每個(gè)重復(fù)為單位對(duì)豬只進(jìn)行空腹靜脈采血，血樣靜止放置30 min待其凝固后，3 500 r/min離心10 min，收集血清，-20℃保存?zhèn)溆?，用于待測(cè)血清指標(biāo)。

1.5 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)分別于第1天和第30天測(cè)量豬只空腹體重，計(jì)算平均日增重（ADG）；以每個(gè)重復(fù)為單位記錄當(dāng)日給料量及余料量，計(jì)算平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 養(yǎng)分消化率

參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[8]測(cè)定總能（GE），干物質(zhì)（DM），粗蛋白質(zhì)（CP），粗脂肪（EE），粗纖維（CF），粗灰分（Ash），總鈣（Ca），總磷（P）；飼料養(yǎng)分表觀消化率的計(jì)算公式如下：

式(1)中：Dd為待測(cè)飼料某養(yǎng)分表觀消化率（%）；Id為待測(cè)飼料中鉻含量（%）；Af為糞中該養(yǎng)分含量（%）；If為糞中鉻含量（%）；Ad為待測(cè)飼料中該養(yǎng)分含量（%）。

1.5.3 血清生化指標(biāo)

血清中尿素氮（UREA）、葡萄糖（GLU）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、均采用試劑盒（邁克生物）經(jīng)全自動(dòng)血清生化儀（日立3100）測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Microsoft Excel進(jìn)行初步計(jì)算處理與整理，采用SPSS 21.0中單因素方差分析程序（One-Way ANOVA）進(jìn)行方差分析，用Duncan氏多重比較法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，0.05＜P＜0.10表示差異具有顯著性趨勢(shì)，P＞0.05表示差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能

由表2可知，各處理組之間生長(zhǎng)育肥豬生產(chǎn)性能均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；但與對(duì)照組相比，T1、T2組豬只ADG分別提高5.7%和4.7%，ADFI分別提高7.6%和8.7%。

表2 不同木聚糖酶組合對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響Tbale 2 Effects of different xylanase combinations on growth performance of growing-finishing pigs

2.2 飼料養(yǎng)分表觀消化率

由表3可知，各處理組之間DM、CP和CF表觀消化率差異不顯著（P＞0.05）。T1組GE、EE、P和Ca表觀消化率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；T2、T3和T4組GE、EE、P和Ca均與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同木聚糖酶組合對(duì)飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響Table 3 Effects of different xylanase combinations on nutrient apparent digestibility of feed

2.3 血清生化指標(biāo)

由表4可知，不同木聚糖酶組合對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)均無(wú)顯著影響（P＞0.05）；但與對(duì)照組相比，T1、T2和T3組生長(zhǎng)育肥豬T-CHO分別提高8.6%，5.1%和6.8%；T2、T4組生長(zhǎng)育肥豬TG分別提高6.9%和17.2%。

表4 不同木聚糖酶組合對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清代謝相關(guān)指標(biāo)的影響Table 4 Effects of different xylanase combinations on serum related-metabolism indexes of growing-finishing pigs mmol/L

3 討論與結(jié)論

3.1 不同木聚糖酶組合對(duì)生長(zhǎng)性能的影響

近年來(lái)，關(guān)于木聚糖酶在畜禽營(yíng)養(yǎng)中的研究較多，但結(jié)論并不一致。有研究表明，木聚糖酶可以通過(guò)降低食糜黏度來(lái)提高營(yíng)養(yǎng)消化率和生產(chǎn)性能[9]。Lan R.X.等[10]在斷奶仔豬玉米-豆粕型日糧中添加0.005%和0.01%木聚糖酶可以顯著提高日增重，降低料重比。Lee K.Y.等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在玉米-豆粕型日糧中添加木聚糖酶可以顯著提高生長(zhǎng)育肥豬體重和日增重。D.H.Nguyen等[12]研究表明，在玉米-豆粕型飼料中添加木聚糖酶能夠顯著降低育肥豬料重比。盡管有大量研究報(bào)道表明木聚糖酶可以改善豬只生產(chǎn)性能，但也有報(bào)道指出木聚糖酶對(duì)機(jī)體生產(chǎn)性能并無(wú)顯著改善作用。A.A.Passos等[13]在生長(zhǎng)育肥豬玉米-豆粕型日糧中添加木聚糖酶，發(fā)現(xiàn)豬只生產(chǎn)性能無(wú)顯著差異。J.Willamil等[14]報(bào)道，日糧中添加NSP復(fù)合酶制劑（木聚糖酶+β-葡聚糖酶），對(duì)玉米-豆粕型日糧組生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)表明，在玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧中添加0.04%木聚糖酶對(duì)生長(zhǎng)育肥豬的生產(chǎn)性能無(wú)顯著影響，試驗(yàn)結(jié)果異同可能受試驗(yàn)豬的生長(zhǎng)階段、品種、飼喂條件、日糧類(lèi)型和酶制劑使用劑量及配伍等因素影響[14-16]。

3.2 不同木聚糖酶組合對(duì)飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

大量研究表明，添加木聚糖酶可以顯著改善動(dòng)物對(duì)飼料的養(yǎng)分表觀消化率。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加400 g/t木聚糖酶可以顯著提高飼料總能、粗脂肪、磷和鈣表觀消化率，與前人研究結(jié)果基本一致，但組合添加阿拉伯呋喃糖苷酶和/或阿魏酸酯酶并未顯著改善飼料養(yǎng)分表觀消化率。D.H.Nguyen等[12]研究發(fā)現(xiàn)，木聚糖酶可以顯著提高育肥豬對(duì)飼料中干物質(zhì)的消化率。A.A.Passos等[13]研究結(jié)果表明，木聚糖酶可以顯著提高生長(zhǎng)豬對(duì)飼料中干物質(zhì)，有機(jī)物，能量和中性洗滌纖維的回腸表觀消化率。A.Sterk等[17]在斷奶仔豬日糧中添加木聚糖酶能顯著提高對(duì)粗蛋白，粗纖維，有機(jī)物的表觀消化率。Fang Z.F.等[18]報(bào)道在日糧中添加非淀粉多糖（NSP）酶復(fù)合酶制劑（主要為木聚糖酶和葡聚糖酶，以及輔助活性酶，阿拉伯呋喃糖苷酶和阿魏酸酯酶等）或單一木聚糖酶，均能顯著提高生長(zhǎng)豬對(duì)飼料干物質(zhì)、總能、粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和總磷的總腸道表觀消化率，但由于復(fù)合酶制劑有效成分相對(duì)復(fù)雜，故其作用效果與本試驗(yàn)組合添加效果不一致。

3.3 不同木聚糖酶組合對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響

木聚糖酶可以將木聚糖降解為小分子寡糖，降低食糜黏度，提高消化酶與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸，進(jìn)而有效改善動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。血清代謝產(chǎn)物含量可以在一定程度上反映動(dòng)物機(jī)體整體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝水平。血清尿素氮是蛋白質(zhì)體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，甘油三酯和膽固醇（類(lèi)脂）是血脂重要組分。本試驗(yàn)中，血清尿素氮，甘油三酯和膽固醇差異不顯著，與粗蛋白表觀消化率結(jié)果相符，但與粗脂肪表觀消化率結(jié)果不符，可能受限于檢測(cè)的血脂指標(biāo)總數(shù)較少，不能代表粗脂肪消化水平。王利等[19]研究發(fā)現(xiàn)，在小麥基礎(chǔ)飼料中添加木聚糖酶可以顯著降低斷奶仔豬血清尿素氮含量。龔敏等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在小麥基礎(chǔ)日糧中添加阿拉伯木聚糖酶，斷奶仔豬血清中的甘油三酯和膽固醇均無(wú)顯著差異，但尿素氮顯著降低。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究結(jié)果不同，可能與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)階段、基礎(chǔ)日糧類(lèi)型、木聚糖酶類(lèi)型以及添加量等因素有關(guān)，導(dǎo)致木聚糖酶作用效果不顯著。

綜上，本試驗(yàn)條件下，玉米-豆粕型飼糧中添加不同組合木聚糖酶對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響，但添加單一木聚糖酶可在一定程度上改善養(yǎng)分消化率。