吳丹丹,劉玥如,何靜,2,明亮,2,吉日木圖,2*
1(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 乳品生物技術(shù)與工程教育部重點實驗室,內(nèi)蒙古 呼和浩特,010018)2(內(nèi)蒙古駱駝研究院,內(nèi)蒙古 巴丹吉林,737300)
隨著中國人口數(shù)量的增加和經(jīng)濟日益飛速發(fā)展,人們對肉品質(zhì)的需求也不斷上升,食用的肉制品種類也越來越多樣化。在非洲、阿拉伯國家、蒙古、中國西北補等地區(qū)駱駝肉深受人們喜愛。根據(jù)糧農(nóng)組織的統(tǒng)計數(shù)據(jù),世界上伊斯蘭國家駝肉數(shù)量約占肉類生產(chǎn)總量的8%[1-3]。駱駝肉色澤鮮艷且無膻味,還具有高水分、高蛋白、低脂肪、低膽固醇等特點[4],是許多亞洲和非洲國家人們最理想的肉食來源[5]。現(xiàn)如今,肉類的食用品質(zhì)特性受到性別、不同年齡、不同部位、營養(yǎng)狀況等諸多因素的影響[6]。因此,常采用pH值、揮發(fā)性鹽基氮、水分含量、失水率、色差、質(zhì)構(gòu)、持水力等指標檢驗肉類品質(zhì)。其中肉制品水分含量直接關(guān)系到成品的適口性、新鮮度、多汁性、口感、風(fēng)味等食用品質(zhì)[7-8],決定了肉品的質(zhì)量和貨架期,是肉品加工貯藏中的重要衛(wèi)生、營養(yǎng)指標[9]。
近紅外光譜技術(shù)是一種利用光譜學(xué)來檢測物質(zhì)成分的技術(shù)[10],因其快速、準確、高效無污染[11]等優(yōu)點被廣泛應(yīng)用于食品檢測中。近年來,近紅外光譜技術(shù)在食品行業(yè)發(fā)揮了巨大的作用。趙鉅陽等[12]在對凍藏豬肉在近紅外光譜應(yīng)用中的快速無損檢測的研究中表明,利用近紅外光譜技術(shù)建立新鮮肉和長期凍藏豬肉的預(yù)測模型,可以較好地判別新鮮豬肉與凍藏豬肉,達到了快速無損檢測豬肉新鮮度的目的。謝安國[13]研究了不同形態(tài)豬肉近紅外光譜的特征及蛋白和水分在豬肉光譜中的意義,更深入地了解光譜在各波段的生物學(xué)意義。PRIETO等[14]利用近紅外光譜,預(yù)測了牛肉樣品的成分,結(jié)果表明近紅外光譜技術(shù)在肉制品的檢測研究中具有很大的潛力。
目前,由于駱駝地域性較強,分布不廣泛,所以對駱駝肉的研究并不算多,已有人對駱駝肉的營養(yǎng)成分以及肉制品進行了初步研究,但利用近紅外光譜技術(shù)預(yù)測駱駝肉品質(zhì)特性的研究還未見報道。因此,本研究利用近紅外技術(shù)對阿拉善雙峰駝不同部位肉基本營養(yǎng)成分進行檢測,并建立預(yù)測模型,以期提供一種快速預(yù)測駝肉品質(zhì)的模型。
選取3~5歲齡阿拉善雙峰駝胴體的辣椒條、駱駝霖、大黃瓜條、腹肉、腱子肉、里脊、米龍、上腦、臀肉、外脊、胸肉、小黃瓜條、眼肉等13個部位肉樣,各部位肉切割成3 cm×2 cm×1 cm(長×寬×高)大約20 g的塊狀,標記后置于-20 ℃的冰箱進行保存,每個部位平行30個樣品。13個不同部位的分布具體見表1。
表1 不同部位駝肉的名稱Table 1 The names of different parts of camel
Frontier近紅外光譜分析儀,鉑金埃爾默企業(yè)管理(上海)有限公司;DHG/50 Hz電熱鼓風(fēng)干燥箱,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;Kjeltec 8100凱氏定氮儀、Soxtec TM2050脂肪測定儀,丹麥FOSS公司;EX224ZH電子天平,奧豪斯儀器(常州)有限公司;5810R高速冷凍離心機,Eppendorf公司。
1.3.1 不同部位駝肉營養(yǎng)品質(zhì)的測定
參照GB 5009.3—2016《食品中水分的測定》中的直接干燥法測定不同部位駝肉中的水分含量。
參照GB 5009.5—2016《食品中蛋白質(zhì)的測定》中的凱氏定氮法測定不同部位駝肉中的蛋白質(zhì)含量。
參照GB 5009.6—2016《食品中脂肪含量的方法測定》中的索氏抽提法測定不同部位駝肉中的脂肪含量。
1.3.2 采集近紅外光譜
將樣品從-20 ℃環(huán)境中取出,置于4 ℃冰箱中解凍12 h,使用絞肉機絞碎成肉糜,將制成的肉糜放入樣品杯中,表面刮平使內(nèi)部氣泡流出。設(shè)定近紅外光譜儀的參數(shù)為:分辨率8 cm-1,波數(shù)范圍4 000~1 000 cm-1。每個樣品重復(fù)掃描3次,取3次掃描的平均值作為每個樣品的光譜。
1.3.3 光譜預(yù)處理與建模
對上述13個部位肉分別進行光譜掃描,共獲得390份駝肉近紅外原始光譜。將390個光譜數(shù)據(jù)以7∶3 的比例分為校正集和預(yù)測集[15]。用濾波平滑法(savitzky-golay,S-G)進行平滑濾波,可以提高光譜的平滑性,并降低噪音的干擾;標準正態(tài)變量轉(zhuǎn)換法(standard normal variate,SNV)可以消除由樣本顆粒大小、表面散射等對漫反射的影響;多元散射校正(multiplication scatter correction,MSC)主要的目的是消除由顆粒分布不均勻和顆粒大小引起的散射現(xiàn)象[16]。采用導(dǎo)數(shù)(derivative,Der)可以消除基線漂移或背景引起的干擾,區(qū)分出重疊峰,提高分辨率和靈敏度[17-18]。因此本研究選用S-G、一階導(dǎo)數(shù)(1stDer)、二階導(dǎo)數(shù)(2ndDer)、SNV、MSC等方法進行光譜預(yù)處理,采用偏最小二乘判別分析法(partial least square-discrimination analysis,PLS-DA)建立模型。以校正集決定系數(shù)Rc2、預(yù)測集決定系數(shù)Rp2、校正均方根誤差(root mean square error of calibration,RMSEC)以及預(yù)測均方根誤差(root mean square error of prediction,RMSEP)作為評價模型好壞。決定系數(shù)越接近于1,RMSEC和RMSEP越接近0時,表明預(yù)處理方法越好,模型的預(yù)測能力越高[19]。
本實驗數(shù)據(jù)用WPS Excel 2010錄入,用IBM-SPSS Statistics 24.0對不同部位駝肉營養(yǎng)成分化學(xué)真值進行差異顯著性分析。利用“The Unscrambler X 10.4”軟件對13個不同部位駝肉的營養(yǎng)成分進行建模,并驗證。
表2為雙峰駝不同部位肉樣的營養(yǎng)成分測定結(jié)果。由表2可知,駱駝肉中的含水量豐富,各部位均在70%以上,水分是評價肉品質(zhì)的一個重要指標,辣椒條、駱駝霖、大黃瓜條、腹肉、腱子肉、里脊、米龍、上腦、臀肉、小黃瓜條、眼肉水分含量差異不顯著(P>0.05),辣椒條、駱駝霖、大黃瓜條、腱子肉、眼肉均顯著高于外脊和胸肉(P<0.05);大黃瓜條、腹肉、腱子肉、里脊、米龍、臀肉、胸肉蛋白質(zhì)含量差異不顯著(P>0.05),駱駝霖和上腦的蛋白質(zhì)含量均顯著高于外脊、上腦、眼肉(P<0.05);腹肉和外脊、胸肉脂肪含量差異不顯著(P>0.05),外脊脂肪含量顯著高于其他部位(P<0.05)。
13個不同部位駝肉樣的原始光譜如圖1所示。根據(jù)2.1的實驗結(jié)果可知,外脊部位脂肪含量較多,因此由圖1可以看出外脊部位的光譜曲線均分布在最下方,與其他部位肉樣的光譜曲線不一致,其余不同部位的駝肉樣光譜曲線的變化基本處于一致。掃描圖譜基本重合,說明光譜較為穩(wěn)定,重復(fù)性較好。為進一步強化光譜特征,本研究對13個不同部位駝肉樣的數(shù)據(jù)取了平均值(圖2),可以明顯看出13個不同部位駝肉樣的平均光譜較好地區(qū)分開來,因此采用近紅外光譜技術(shù)可有效鑒別不同部位駝肉。
圖1 不同部位駝肉樣的390個原始光譜Fig.1 390 original spectra of different parts of camel meat
圖2 不同部位駝肉樣的平均光譜Fig.2 Average spectra of different parts of camel meat
光譜在8 400、6 800、5 100 cm-1附近產(chǎn)生了明顯的吸收峰,在4 200、5 700 cm-1光譜附近的噪音較大。6 900 cm-1處的寬帶主要是由水引起的,是氫氧拉伸振動的第一泛音,5 000 cm-1處的吸收帶主要與蛋白質(zhì)有關(guān),與脂肪含量相對應(yīng)的吸收帶主要出現(xiàn)在8 350、5 800~5 700和5 300~5 260 cm-1處[20-21]。
圖3對13個不同部位駝肉樣品原始光譜數(shù)據(jù)進行了主成分分析。如圖3所示,利用樣本的前2個主成分得分作圖,獲得PC1和PC2,當整個的樣品集全部由PC1和PC2表示時,13個不同部位駝肉樣品中外脊部位(WJ)呈現(xiàn)明顯不同的分布特征。除個別部位如外脊、眼肉、小黃瓜條、臀肉等有區(qū)別于其他部位之外,其余樣品均聚集在中間。
圖3 不同部位駝肉樣光譜的主成分分析圖Fig.3 Principal component analysis diagram of spectra of different parts of camel meat
光譜采集過程中,無論人為操作多么精確,還是會無法避免一些客觀因素產(chǎn)生系統(tǒng)誤差影響近紅外定量分析模型的信息,例如樣品不均勻或受污染、樣品受到其他組分的干擾、光譜采集不準確、光譜范圍的選擇不正確、光譜噪音大等而產(chǎn)生誤差。因此在建模前,要對原始光譜進行預(yù)處理,進而不斷優(yōu)化所建立的模型。
由表3可知,營養(yǎng)成分不同適宜的預(yù)處理方法也有所不同,不同部位駝肉樣的水分含量模型的最佳預(yù)處理方法為MSC,模型的決定系數(shù)R2、RMSEC分別是0.745 9和0.008 5;不同部位駝肉樣的蛋白質(zhì)含量模型的最佳預(yù)處理方法為SNV,模型的決定系數(shù)R2、RMSEC分別是0.660 2和0.287 9;不同部位駝肉樣的脂肪含量模型的最佳預(yù)處理方法為S-G,模型的決定系數(shù)R2、RMSEC分別是0.988 5和0.086 3。由于近紅外技術(shù)對化學(xué)指標的預(yù)測能力較強,水分、脂肪和蛋白質(zhì)中的—CH和—OH基團具有強烈的近紅外吸收[22],同時蛋白質(zhì)和脂肪是肉中的主要成分,是引起光譜差異性的主要原因[23]。
表3 不同的預(yù)處理方法對建模效果的影響Table 3 The influence of different preprocessing methods on the modeling effect
(圖4)將劃分好的驗證集數(shù)據(jù)對建立的模型進行了驗證。由圖4可知,不同部位駝肉樣水分含量驗證集決定系數(shù)RP2、RMSEP為0.774 1、0.013 4;蛋白質(zhì)含量模型的決定系數(shù)Rp2、RMSEP為0.672 5、0.276 0;脂肪含量模型模型的決定系數(shù)Rp2、RMSEP為0.996 3、0.056 7。驗證結(jié)果與校正集結(jié)果一致,說明利用近紅外光譜技術(shù)對不同部位駝肉樣的脂肪含量預(yù)測效果最好,水分含量的預(yù)測效果次之,蛋白質(zhì)含量的預(yù)測效果最不理想。
a-水分含量模型的預(yù)測圖;b-蛋白質(zhì)含量模型的預(yù)測圖;c-脂肪含量模型的預(yù)測圖圖4 營養(yǎng)成分模型驗證集的真實值與預(yù)測值的分布圖Fig.4 Distribution of true and predicted values of the nutrient content model validation set
本研究以阿拉善雙峰駝13個不同部位肉為實驗樣品,采用近紅外光譜技術(shù),結(jié)合PLS-DA,對駝肉中水分、蛋白質(zhì)及脂肪含量進行了定性分析,建立了駝肉營養(yǎng)成分模型。結(jié)果表明,通過13個不同部位駝肉平均光譜不同這一特點可成功鑒別雙峰駝不同部位的肉。與水分和蛋白質(zhì)含量相比,近紅外光譜技術(shù)更適合不同部位駝肉樣脂肪含量的預(yù)測,模型的決定系數(shù)Rc2值最高、RMSEC值最小,模型預(yù)測能力較好。預(yù)測的水分和蛋白質(zhì)含量的PLS-DA模型的性能有待進一步提高。因此,采用近紅外光譜技術(shù)可以簡便且準確地對不同部位駝肉樣進行鑒別和營養(yǎng)成分的預(yù)測。