莫潤光

東莞市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 東莞 523000

0 引言

尿液干化學(xué)檢驗(yàn)又被稱為尿試帶測定法，是傳統(tǒng)的尿液檢查方法，其檢驗(yàn)的原理在于，尿液中的成分與干化學(xué)試劑發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致相應(yīng)模塊的顏色發(fā)生變化，顏色深淺與化學(xué)成分的濃度成正比，再經(jīng)過光電轉(zhuǎn)換，計(jì)算出各檢測項(xiàng)目的反射率，最后輸出檢驗(yàn)結(jié)果[1]。尿液干化學(xué)檢驗(yàn)所需標(biāo)本用量少，檢驗(yàn)指標(biāo)多，檢測速度快，而且重復(fù)性好，極大地提高了工作效率[2]。不過，臨床研究發(fā)現(xiàn)，尿液干化學(xué)檢驗(yàn)容易受到各種因素影響，導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性或假陰性[3]。為此，本研究總結(jié)多年臨床經(jīng)驗(yàn)，探討尿液干化學(xué)檢驗(yàn)的影響因素，并且指出針對性質(zhì)量控制措施。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年4～9月本院檢驗(yàn)科收到的290份非菌尿，都屬于新鮮中段晨尿，用一次性尿杯收集。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者正在接受藥物治療而且可能影響本次檢驗(yàn)；②尿液混濁；③尿色異常；④管型尿液；⑤病理性結(jié)晶。按照檢驗(yàn)方式的不同進(jìn)行分組，把前期實(shí)施常規(guī)干化學(xué)檢驗(yàn)的143份尿液設(shè)為對照組，后期采取針對性質(zhì)量控制措施進(jìn)行檢驗(yàn)的147份尿液設(shè)為干預(yù)組。對照組男76例、女67例；年齡18～52歲，平均（28.67±2.41）歲。干預(yù)組男81例、女66例；年齡19～53歲，平均（28.72±245）歲。兩組患者的一般資料均衡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究已得到本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)，患者知情同意本研究計(jì)劃。

1.2 儀器與方法

叮囑患者在采集尿標(biāo)本前8h不要大量飲水，使用一次性尿杯收集新鮮中段晨尿10mL（注意保持尿道口清潔），在2h內(nèi)送檢，最好在30min內(nèi)完成檢驗(yàn)（冷藏時(shí)間不宜超過6h）。檢驗(yàn)儀器為希森美康尿液化學(xué)分析儀（型號UC-3500），使用配套的試紙條。

對照組實(shí)施常規(guī)干化學(xué)檢驗(yàn)，把試管內(nèi)的尿液標(biāo)本混勻，把標(biāo)本編上號碼，放到對應(yīng)號數(shù)試管架，使用尿液干化學(xué)分析儀進(jìn)行檢測分析，檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照說明書和標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程操作[4]。

干預(yù)組總結(jié)多年來的經(jīng)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)以下因素會影響尿液干化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果：①尿液影響：尿液如果被污染（例如含有大便、膽色素偏高），則表現(xiàn)出假陽性；尿液存放時(shí)間過長，結(jié)果酸堿度改變，部分管型溶解。②試紙影響：不同廠家提供的試紙標(biāo)準(zhǔn)不一樣，檢驗(yàn)人員需要注意試紙的保質(zhì)期或有效期。試紙存放時(shí)間太長、不夠密封、變得潮濕，都會影響檢驗(yàn)結(jié)果。而且干化學(xué)的試劑載體對于儲存溫度具有一定的要求，超出溫度范圍就會縮短其有效期。③感染影響：如果樣本存在泌尿系統(tǒng)感染，則試紙會發(fā)生顯色反應(yīng)。④藥物影響：藥物會對多個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目造成影響，例如奎寧丁與奎寧會引起堿性尿；抗生素導(dǎo)致假陰性；尿膽原、膽紅素受到氯丙嗪和吩噻嗪的影響而表現(xiàn)出假陽性；葡萄糖、潛血、膽紅素會受到維生素C的影響而表現(xiàn)出假陰性[2]。鑒于此，干預(yù)組采取了針對性的質(zhì)量控制措施：在收集到標(biāo)本之后盡快檢驗(yàn)，以防尿液樣本遭受污染或者變質(zhì)；靜脈滴注青霉素6h后再采集尿液標(biāo)本；一旦發(fā)現(xiàn)菌尿，則改用其他檢驗(yàn)方法；把試紙條存放在陰涼干燥的地方，并且注意檢查使用期限；與臨床科室加強(qiáng)溝通交流，提醒科室人員嚴(yán)格按照規(guī)范要求采集標(biāo)本，而且注明受檢者情況（包括疾病類型、用藥情況等）。

1.3 評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

對照蛋白質(zhì)（PRO）、葡萄糖（GLU）、潛血（BLD）、尿比重（SG）、酮體（KET）、膽紅素（BIL）、尿膽原（URO）、酸堿度（pH）、白細(xì)胞（WBC）、亞硝酸鹽（NIT）的質(zhì)控靶值，比較對照組與干預(yù)組檢驗(yàn)這些項(xiàng)目的符合率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對照組檢驗(yàn)的其中6項(xiàng)指標(biāo)符合率分別為：蛋白質(zhì)86.71%、潛血83.22%、酮體88.11%、膽紅素86.01%、尿膽原90.21%、亞硝酸鹽91.61%，干預(yù)組分別為97.96%、95.24%、96.60%、95.92%、98.64%、99.32%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組檢驗(yàn)葡萄糖、尿比重、酸堿度、白細(xì)胞的符合率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

3 討論

尿液可以反映人體的代謝情況，而尿液檢驗(yàn)對于臨床診斷、判斷療效和預(yù)后具有重要的價(jià)值。尿液干化學(xué)檢驗(yàn)是常用的尿液檢驗(yàn)方法，其操作簡便，靈敏度高，特別適用于大批量尿標(biāo)本篩檢[5]。根據(jù)尿液干化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果，檢驗(yàn)人員可以初步診斷患者所患疾病，例如膽紅素、尿膽原組合可用于診斷肝病，糖、pH、酮體組合可用于診斷糖尿病，蛋白、pH、潛血（紅細(xì)胞）組合可用于診斷腎病[6]。不過，綜合文獻(xiàn)資料內(nèi)容和本院檢驗(yàn)科的實(shí)際檢驗(yàn)情況來看，尿液干化學(xué)檢驗(yàn)容易受到多種因素影響，結(jié)果出現(xiàn)假陰性和假陽性，為此針對10個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行具體分析。

3.1 干化學(xué)法檢測蛋白質(zhì)

干化學(xué)法檢測蛋白質(zhì)利用了指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理，所以pH值會影響檢驗(yàn)結(jié)果。如果尿液標(biāo)本含有嘧啶、奎寧、奎寧丁等藥物，或者洗必泰、磷酸鹽、聚乙烯吡咯酮、季銨鹽消毒劑等，就會呈強(qiáng)堿性，超出試紙條的緩沖能力，進(jìn)而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。此外青霉素族藥物可能導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。干化學(xué)法對白蛋白敏感，對黏蛋白、球蛋白、凝溶蛋白則不夠敏感，所以針對腎病患者（尤其是需要系統(tǒng)觀察尿蛋白含量），應(yīng)該采用磺硫酸法[7]。

3.2 干化學(xué)法檢測葡萄糖

干化學(xué)法檢測尿糖利用了葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng)，特異性強(qiáng)，靈敏度高，不過當(dāng)尿糖濃度較低（14mmol/L）時(shí)，維生素C容易導(dǎo)致假陰性反應(yīng)。如果次氯酸鹽、過氧化物、強(qiáng)氧化性清潔劑污染尿液，則會尿液葡萄糖出現(xiàn)假陽性結(jié)果。而以下情況容易導(dǎo)致尿糖呈現(xiàn)假陰性結(jié)果：尿液中含有氟化鈉、L-多巴胺、大量水楊酸鹽；尿比重過高；維生素C＞500mg/L；尿酮體＞0.4g/L。

3.3 干化學(xué)法檢測潛血

干化學(xué)法對于血紅蛋白非常敏感，但是在高蛋白、高比重尿液中紅細(xì)胞不溶解，就會影響檢驗(yàn)結(jié)果。如果樣本中存在大量維生素C（濃度超過100mg/L），就會發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)，結(jié)果出現(xiàn)假陰性[8]。如果尿液含有氧化劑、肌紅蛋白、對熱不穩(wěn)定酶，或者因?yàn)楸患?xì)菌感染而成為菌尿，就會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

3.4 干化學(xué)法檢測尿比重

尿蛋白或者糖濃度增加會導(dǎo)致比重增加；pH＜6.5或尿素＞l0g/L會導(dǎo)致比重降低。在采用干化學(xué)法檢測尿比重時(shí)，pH值變化幅度為6.2～7.2。如果pH值≥7.0，就會導(dǎo)致比重結(jié)果偏低，此時(shí)需要把測定結(jié)果增加0.005，以補(bǔ)償堿性尿的損失。干化學(xué)法檢測尿比重的變化范圍為1.003～1.030，因此比重范圍太大的樣本或超出范圍的樣本不宜采用干化學(xué)法，例如新生兒尿液的比重范圍為1.000～1.004，應(yīng)采用其他方法測定。

3.5 干化學(xué)法檢測酮體

丙酮、乙酰乙酸、β-羥基丁酸統(tǒng)稱酮體，干化學(xué)法檢測酮體采用亞硝基鐵氰化鈉法，這種方法對乙酰乙酸最敏感，丙酮次之，β-羥基丁酸則不發(fā)生反應(yīng)，所以檢驗(yàn)結(jié)果與實(shí)際酮體量可能存在差異。另外，丙酮、乙酰乙酸均有揮發(fā)性，因此要使用新鮮尿，以免結(jié)果偏低或者出現(xiàn)假陰性[9]。

3.6 干化學(xué)法檢測尿膽原、膽紅素

干化學(xué)法檢測應(yīng)使用新鮮尿液標(biāo)本，為了避免尿膽原被氧化為尿膽素，必須在2h內(nèi)完成檢驗(yàn)。為了避免膽紅素被氧化成膽綠素，尿液不能受強(qiáng)光照射。如果尿液含有吩噻嗪類、酚嗪類藥物，會使膽紅素呈現(xiàn)假陽性。如果尿液含有鹽酸苯偶氮吡啶代謝產(chǎn)物或者高濃度的維生素C、亞硝酸鹽，或者患者接受大劑量氯丙嗪治療，膽紅素檢測可能呈假陰性。重氮藥物、亞硝酸鹽、對氨基水楊酸會導(dǎo)致尿膽原檢測呈假陰性。吲哚、膽紅素、膽色素原等內(nèi)源性物質(zhì)以及某些藥物（例如酚噻類、磺胺藥）會發(fā)生顏色干擾，導(dǎo)致尿膽原檢測出現(xiàn)假陽性。

3.7 干化學(xué)法檢測酸堿度

尿液中CO2自然擴(kuò)散，會使pH值升高（呈假陽性結(jié)果）；如果尿液樣本放置太久，尿液中的細(xì)菌繁殖，分解尿素并產(chǎn)生氨，會使尿液呈現(xiàn)堿性。因此在采用酸堿指示劑法測定pH值時(shí)，必須保證尿液標(biāo)本新鮮。臨床研究發(fā)現(xiàn)，室溫20℃為最佳溫度，pH值最接近靶值，因此應(yīng)注意控制實(shí)驗(yàn)室溫度。

3.8 干化學(xué)法檢測白細(xì)胞

因?yàn)樵嚰垘е慌c粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的酯酶發(fā)生反應(yīng)，所以干化學(xué)法只對粒細(xì)胞敏感，只能測定尿液中的粒細(xì)胞。如果樣本含有高濃度膽紅素，或被甲醛污染，或患者使用了呋喃妥因等藥物，干化學(xué)法可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。腎移植患者尿液中的粒細(xì)胞較少，可能呈現(xiàn)陰性結(jié)果，因此需要實(shí)施尿沉渣鏡檢明確診斷。如果尿液含有維生素C或者大劑量的慶大霉素、先鋒霉素IV等藥物，或者尿蛋白大于5g/L，就可能出現(xiàn)假陰性。

3.9 干化學(xué)法檢測亞硝酸鹽

亞硝酸鹽檢測一般用來診斷樣本是否為菌尿，所以盛放容器必須清潔、干燥，保持尿液標(biāo)本新鮮，采集好后立即送檢，以防被偶氮?jiǎng)?、亞硝酸鹽等污染而呈現(xiàn)假陽性。雖然干化學(xué)法檢測亞硝酸鹽診斷大腸埃希菌感染的準(zhǔn)確率高達(dá)80%，但是考慮到樣本可能被污染或者放置時(shí)間過久，對陽性結(jié)果的解釋仍需慎重[10]。利尿劑會降低亞硝酸鹽含量，抗生素會抑制尿液中的細(xì)菌，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果，因此需要注意患者是否使用了利尿劑或抗生素。

綜上所述，在整個(gè)檢驗(yàn)過程中，檢驗(yàn)人員需要注意以下方面：①使用干燥、潔凈的容器收集新鮮尿液；②在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成檢驗(yàn)；③在檢驗(yàn)前要把樣本混勻，以免放置太久白細(xì)胞沉淀在下面；④干化學(xué)法檢驗(yàn)的室溫以20～25℃為宜。尿液干化學(xué)法具有簡單便捷的特點(diǎn)，但是受到采集方法、轉(zhuǎn)運(yùn)途徑、保存方式、檢驗(yàn)環(huán)境等影響，可能出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果，檢驗(yàn)人員需要與臨床科室人員加強(qiáng)溝通協(xié)調(diào)，充分考慮各種影響因素，嚴(yán)格控制檢驗(yàn)質(zhì)量，為患者提供準(zhǔn)確、高效的檢驗(yàn)服務(wù)，并且有效發(fā)揮尿液干化學(xué)檢驗(yàn)的價(jià)值。