地黃下腳料品質(zhì)與獸用化開發(fā)利用價(jià)值的研究

喬卿梅，王迎春，程茂高，張夢如

(1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 動(dòng)物醫(yī)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046；2.河南省唐河縣桐河鄉(xiāng)人民政府，河南 唐河 473400)

地黃為玄參科植物地黃RehmanniaglutinosaLibosch的塊根，始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1]，古時(shí)主產(chǎn)于河南懷慶府，因而得名懷地黃，現(xiàn)全國各地普遍種植。地黃因加工炮制方法不同分為鮮地黃、生地黃和熟地黃[2]。生地黃和熟地黃為大宗常用藥材，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全國每年地黃用量約3萬噸。地黃在采收、加工、運(yùn)輸、保管等過程中會(huì)產(chǎn)生大量的根須、破碎組織和碎屑等，按照商品等級(jí)劃分，地黃藥材也會(huì)有一定數(shù)量的不合格產(chǎn)品。根須、破碎組織、碎屑和不合格產(chǎn)品統(tǒng)稱為下腳料，常被隨意堆積或丟棄。地黃下腳料富含粗蛋白、粗脂肪、多糖類等營養(yǎng)物質(zhì)和活性成分，可作為禽畜用藥和飼料添加劑的原料[3-5]。

《中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告 第194號(hào)》規(guī)定，自2020年1月起，退出除中藥外的所有促生長類藥物飼料添加劑品種，因而，中藥類飼料添加劑的研究受到前所未有的重視。目前，大多數(shù)中獸藥企業(yè)還是利用人用中藥原料進(jìn)行獸藥生產(chǎn)，既與人用中藥搶奪資源，又抬高了制藥成本。本試驗(yàn)分析地黃下腳料的水分、總灰分、浸出物、梓醇含量等質(zhì)量控制指標(biāo)及粗蛋白、粗脂肪、多糖、礦質(zhì)元素等營養(yǎng)成分，為中獸藥飼料添加劑的開發(fā)提供新原料。

1 材料與方法

1.1 樣品

15個(gè)批次的地黃下腳料來自安徽亳州康美中藥城周邊多家飲片加工廠及醫(yī)藥公司。樣品來源廣泛，外觀性狀差異較大，具有廣泛的代表性。具體樣品編號(hào)及主要性狀特征如表1所示。

表1 不同批次地黃下腳料的編號(hào)及主要性狀特征

續(xù)表1 不同批次地黃下腳料的編號(hào)及主要性狀特征

1.2 試劑

梓醇(批號(hào)L15S9Y70277)購自源葉生物有限公司。磷酸、甲醇為色譜純。水為超純水。

1.3 主要儀器

QUINTIX224電子天平(北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)。HWL-10XB-2馬弗爐(山東華威公司)。YB-1A型真空恒溫干燥箱(天津精拓儀器科技有限公司)。T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)。K9860全自動(dòng)凱氏定氮儀和SOX406脂肪測定儀(濟(jì)南海能儀器股份有限公司)。WFX-120B北分瑞利原子吸收分光光度計(jì)(北京京科瑞達(dá)科技有限公司)。K2025高效液相色譜儀(山東悟空儀器有限公司)。AF-610E全自動(dòng)原子熒光光譜儀(北京金利同建環(huán)境技術(shù)有限公司)。

1.4 方法

水分、總灰分、浸出物和梓醇的含量測定分別按照2020版《中國藥典四部通則》中0832水分測定法、2302灰分測定法、2201浸出物測定法和0512高效液相色譜法進(jìn)行[6]。

粗蛋白含量測定按照《GB/T6432-94凱氏定氮法》進(jìn)行[7]。

粗脂肪含量測定采用索氏提取法。將濾紙包恒重(記為a)，準(zhǔn)確稱取各批次樣品2 g，置濾紙包中封口，放入105 ℃烘箱中干燥3 h，快速取出放入干燥器中冷卻并稱重(記為b)。按脂肪測定儀操作規(guī)程，將濾紙包放入濾紙架內(nèi)，抽提桶內(nèi)加入60 mL乙醚，40 ℃下浸提2 h，再抽提淋洗30 min。抽提結(jié)束后取出濾紙包，放在通風(fēng)櫥中自然晾干，使乙醚揮發(fā)，再將濾紙包置于105 ℃烘箱中干燥2 h，取出放入干燥器中冷卻并稱重(記為c)。

多糖含量測定參考國標(biāo)食用菌中粗多糖含量的測定方法[8]，在孫月川[9]等方法的基礎(chǔ)上稍作調(diào)整。

1.5 礦物質(zhì)元素

利用火焰原子吸收法測定地黃下腳料的Ca、K、Mg、Fe、Cu、Zn、Mn等元素的含量[10]，儀器工作參數(shù)見表2。利用氫化物原子熒光光譜法測定Se元素含量[11,12]，儀器工作參數(shù)見表3。

表2 原子吸收儀器工作參數(shù)表

表3 原子熒光光度計(jì)工作參數(shù)表

2 結(jié)果

2.1 水分含量

水分含量測定結(jié)果見圖1。15個(gè)批次地黃下腳料的水分含量為4.57%～11.97%，平均含量為8.96%，未超出2020版《中國藥典》和2015版《中國獸藥典》(二者以下簡稱藥典)規(guī)定的地黃藥材含水量不超過15.0% 的限度要求，但各批次之間存在顯著差異(P<0.05)。

注：數(shù)字上方不同小寫字母表示95%置信區(qū)間差異顯著，下圖同

2.2 總灰分含量

總灰分含量測定結(jié)果見圖2。15個(gè)批次地黃下腳料的總灰分含量為4.21%～30.12%，平均含量為16.67%，除DH4的總灰分含量外，其他14個(gè)批次樣品的總灰分含量都超出藥典規(guī)定的8.0%的限度要求，且DH1、DH2、DH14的總灰分含量超出限度要求的3倍以上，批次之間差異顯著(P<0.05)。

圖2 15個(gè)批次地黃下腳料中總灰分含量

2.3 浸出物含量

浸出物含量測定結(jié)果見圖3。15批次地黃下腳料的浸出物含量為49.92%～76.91%，平均含量為63.35%，略低于藥典規(guī)定的65.0%的限度要求。一些批次之間浸出物含量差異顯著(P<0.05)。

圖3 15個(gè)批次地黃下腳料中浸出物含量

2.4 梓醇含量

梓醇含量測定結(jié)果見圖4。15個(gè)批次地黃下腳料的梓醇含量為0.06%～1.4%，平均含量為0.30%，高于藥典規(guī)定的0.20%的限度要求，但不同批次之間梓醇含量差異較大，有7個(gè)批次(DH1、DH3、DH4、DH7、DH8、DH9、DH10)的梓醇含量超過0.20%的限度要求，其中DH4梓醇含量最高，為1.41%，與其他批次之間存在顯著差異(P<0.05)，梓醇含量低于限度要求的有8個(gè)批次，其中DH5最低，為0.06%，與其他批次之間也存在顯著差異(P<0.05)。

圖4 15個(gè)批次地黃下腳料中梓醇含量

2.5 粗蛋白含量、粗脂肪含量和多糖含量

粗蛋白、粗脂肪和多糖含量的測定結(jié)果見表4。15個(gè)批次地黃下腳料的粗蛋白含量為3.94%～6.37%，平均含量為4.97%，不同批次之間差異顯著(P<0.05)。15個(gè)批次地黃下腳料的粗脂肪含量為0.69%～2.78%，平均含量為1.31%，各批次之間差異顯著(P<0.05)，其中DH15的粗脂肪含量最高(P<0.05)。15個(gè)批次地黃下腳料的多糖含量為0.17%～2.81%，平均含量為1.96%，批次之間存在差異。

表4 不同批次地黃下腳料中粗蛋白、粗脂肪及總多糖含量

2.6 礦物質(zhì)元素

15個(gè)批次地黃下腳料的礦物質(zhì)元素含量測定結(jié)果見表5。地黃下腳料含有豐富的鈣、鉀、鎂等常量元素，其中鎂含量達(dá)到1580.66 mg/kg。樣品含有豐富的鐵、錳、銅、鋅、硒等微量元素，鐵元素含量達(dá)到5489.17 mg/kg。

表5 地黃下腳料中礦物質(zhì)元素含量

3 討論

水分、總灰分、浸出物和梓醇含量是中藥材地黃質(zhì)量控制的主要指標(biāo)。浸出物中存在大量的活性成分，是反映中藥材整體質(zhì)量的重要指標(biāo)。梓醇為地黃主要的活性成分之一，具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、降血糖等多種藥理作用[13]。本試驗(yàn)中，15個(gè)批次地黃下腳料的浸出物含量平均值略低于藥典的限度要求，但按照中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)要求，15個(gè)批次中只有DH1、DH2、DH14等3個(gè)批次的浸出物含量與《中國藥典》規(guī)定的65.0%限度的相對平均偏差大于10%，不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)要求[14]，其他12個(gè)批次地黃下腳料的浸出物含量都符合相對平均偏差不得大于10%的技術(shù)要求，說明這12個(gè)批次的地黃下腳料含有大量的活性成分，具有較大的藥用價(jià)值。

不同批次地黃下腳料的水分和總灰分含量差異較大。人們傳統(tǒng)地認(rèn)為下腳料就是廢棄物，隨意堆放或拋棄，導(dǎo)致下腳料吸潮嚴(yán)重，混入較多的泥沙、石塊或塵土，因而導(dǎo)致部分批次地黃下腳料的水分和總灰分含量較高。規(guī)范地黃下腳料的貯存，能降低地黃下腳料的水分和總灰分含量，確保下腳料品質(zhì)。

本試驗(yàn)中，地黃下腳料的浸出物和梓醇含量較高，不同批次地黃下腳料之間差異較大，這可能與不同批次地黃下腳料的性狀差異較大有關(guān)。地黃是道地性藥材，浸出物和梓醇含量與產(chǎn)地關(guān)系密切。此外，地黃以塊根入藥，而地黃下腳料主要是非藥用部位如蘆頭、須根或部分塊根的破碎組織，從而導(dǎo)致不同批次地黃下腳料的浸出物和梓醇含量差異較大。

本試驗(yàn)中，地黃下腳料的粗蛋白含量為3.94%～6.37%，高于木薯干、甘薯干、麥麩、豆粕、魚粉等常規(guī)飼料的粗蛋白含量[15，16]，也高于某些青貯玉米的粗蛋白含量[17]。本試驗(yàn)中，地黃下腳料的粗脂肪含量為0.69%～2.78%，高于常規(guī)飼料木薯干、甘薯干的粗脂肪含量，與貴州省35種常見禾本科飼用植物粗脂肪含量相當(dāng)[18]。地黃多糖是地黃重要的藥效成分，具有抗疲勞、抗焦慮、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫等藥理作用[19]，地黃下腳料的總多糖含量為0.17%～2.81%，低于李詢等[20]和張駱琪[21]等的測定結(jié)果，但高于或接近道地產(chǎn)區(qū)一些地黃品種的多糖含量[22-24]。

礦物質(zhì)元素在畜禽生長發(fā)育、新陳代謝、神經(jīng)活動(dòng)、免疫功能及內(nèi)分泌等生命活動(dòng)過程中都發(fā)揮著重要的生理作用，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，地黃下腳料含有豐富的鈣、鉀、鎂等常量元素，也含有豐富的鐵、錳、銅、鋅、硒等微量元素。但鐵元素含量過高，達(dá)到5489.17 mg/kg，其原因有待進(jìn)一步探究。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，地黃下腳料既含有較高量的浸出物和梓醇，又含有豐富的粗蛋白、粗脂肪、多糖和礦質(zhì)元素，是集藥用價(jià)值和營養(yǎng)價(jià)值于一體的優(yōu)質(zhì)資源，如果能將地黃下腳料作為制藥原料或者在飼料中合理添加利用，既可增強(qiáng)動(dòng)物的免疫能力，減少疾病的發(fā)生，還可滿足動(dòng)物的部分營養(yǎng)需求。從成本上看，地黃下腳料價(jià)格多為每噸0.2～0.3萬元，遠(yuǎn)低于中藥材地黃的價(jià)格，因此，地黃下腳料是具有較高的獸用化開發(fā)利用價(jià)值，對緩解獸用中藥材資源緊張、增加藥材的附加值、降低養(yǎng)殖業(yè)成本等具有重要意義。