三氧化二砷結(jié)合靶向遞送系統(tǒng)
——實(shí)體瘤治療的新策略△

張璇，黃健，王金輝，藺聰聰

哈爾濱醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150081

三氧化二砷（As2O3）俗稱砒霜，是最古老的毒物之一，首載于《日華子本草》[1]，作為藥物應(yīng)用至今已有2400 多年。傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)認(rèn)為，砒霜是以毒攻毒的藥物，其藥性峻猛，有蝕瘡祛腐、殺蟲、劫痰、截瘧等功效[2]?，F(xiàn)代，As2O3發(fā)揮出不同的功效，20 世紀(jì)70 年代，張亭棟[3]以其為主藥研發(fā)出“癌靈一號(hào)”，運(yùn)用于急性早幼粒細(xì)胞白血病（APL），取得了顯著療效。隨著As2O3抗白血病臨床研究的開展及其機(jī)制的揭示[4]，As2O3已成為被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)的治療APL 的首選藥。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，As2O3不僅對(duì)白血病有奇效，對(duì)肝癌、肺癌、前列腺癌、胃癌等實(shí)體瘤的治療也有一定的效果。As2O3具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，且無(wú)需任何響應(yīng)或激活即具藥理活性。遺憾的是，全身注射后，抵達(dá)腫瘤并發(fā)揮生理活性的As2O3卻不足總給藥劑量的1%，其余大量As2O3會(huì)非特異性地殺傷正常組織細(xì)胞。此外，As2O3腎臟清除快、半衰期短等缺陷也阻礙了其在實(shí)體瘤治療中的進(jìn)一步推廣[5]。如何以“毒”攻“毒”、變“毒”為“寶”，實(shí)現(xiàn)As2O3在實(shí)體瘤臨床治療中的應(yīng)用，是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。納米載體作為新興的藥物運(yùn)載工具，能夠保護(hù)藥物不被降解，延長(zhǎng)藥物的血液循環(huán)時(shí)間，大大提高藥物在腫瘤部位的富集，從而降低其對(duì)正常組織和細(xì)胞的毒性。與納米技術(shù)相結(jié)合，研究者們開發(fā)了一系列具有被動(dòng)靶向性、主動(dòng)靶向性和響應(yīng)性釋放的新型As2O3靶向遞送系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)As2O3的定時(shí)定位遞送。本文綜述了近年來(lái)As2O3納米藥物應(yīng)用于實(shí)體瘤治療方面的最新研究進(jìn)展，以期為As2O3進(jìn)一步應(yīng)用于實(shí)體瘤提供新的思路。

1 被動(dòng)靶向遞送系統(tǒng)

相對(duì)于正常組織，實(shí)體瘤組織中血管豐富、血管壁結(jié)構(gòu)完整性差、間隙較寬，淋巴回流缺失，造成大分子類物質(zhì)和脂質(zhì)顆粒具有高通透性和滯留性，腫瘤部位這種增強(qiáng)滲透滯留（EPR）效應(yīng)，使得粒徑＜200 nm 的顆?？赏ㄟ^(guò)血液循環(huán)向腫瘤組織滲漏，賦予了其良好的被動(dòng)靶向性。筆者總結(jié)了基于EPR效應(yīng)被動(dòng)靶向遞送As2O3的不同納米載體，如脂質(zhì)體、聚合物囊泡及仿生納米粒在實(shí)體瘤中的最新研究進(jìn)展。

1.1 脂質(zhì)體

脂質(zhì)體是將藥物包封在類脂質(zhì)雙分子層中形成的納米級(jí)微小泡囊，其主要缺點(diǎn)是在血液中能被快速清除。隨著新型載體材料及藥物修飾物的開發(fā)，免疫脂質(zhì)體、長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體、靶向脂質(zhì)體等新型脂質(zhì)體逐漸問(wèn)世，已成為許多藥物的首選載體。As2O3脂質(zhì)體的研發(fā)始于Gortzi等[6]成功制備了胂酸脂質(zhì)體，在3種惡性腫瘤細(xì)胞系（HL-60、C6、GH3）實(shí)驗(yàn)中，胂酸脂質(zhì)體顯現(xiàn)出明顯的細(xì)胞毒性，而對(duì)正常細(xì)胞抑制作用小。張旭等[7]發(fā)現(xiàn)，As2O3脂質(zhì)體可誘導(dǎo)20.03%大鼠C6 腦膠質(zhì)瘤凋亡，遠(yuǎn)高于游離As2O3的誘導(dǎo)凋亡率（3.92%）。同時(shí)多項(xiàng)研究揭示，As2O3脂質(zhì)體對(duì)膠質(zhì)瘤中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）及CD34蛋白表達(dá)的抑制作用也更強(qiáng)[8-9]。腦膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型中，靜脈注射As2O3脂質(zhì)體取得顯著效果。這是由于As2O3脂質(zhì)體具有較高的血腦屏障（BBB）通透率，可明顯提高腦內(nèi)藥物濃度，對(duì)大鼠腦內(nèi)膠質(zhì)瘤發(fā)揮更有效的治療作用。但采用普通材料和方法制備的As2O3脂質(zhì)體包封率低且不穩(wěn)定，As2O3在生理pH條件下主要以亞砷酸［As（OH）3］的特殊形式存在，其可以穿透脂質(zhì)雙分子層，導(dǎo)致藥物泄露和全身毒性。為獲得高包封率、高穩(wěn)定性的As2O3脂質(zhì)體，研究者嘗試通過(guò)將As2O3與過(guò)渡金屬離子（NiⅡ、CoⅡ、PtⅡ等）共沉淀，產(chǎn)生復(fù)合物后再載入脂質(zhì)體中。結(jié)果表明此類脂質(zhì)體可使As2O3在血液循環(huán)過(guò)程中保留在脂質(zhì)體內(nèi)，從而提高了脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和包封率[10-13]。Wang等[14]采用醋酸銅梯度法制備的As2O3脂質(zhì)體，通過(guò)在脂質(zhì)體內(nèi)使得水相醋酸銅與As2O3形成復(fù)合物，使包封率達(dá)83.1%。體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，As2O3脂質(zhì)體血漿清除率顯著降低，與靜脈注射的As2O3溶液相比，體內(nèi)循環(huán)時(shí)間成倍增加，改善了藥物在腫瘤組織的分布。進(jìn)一步研究表明，砷與金屬離子形成的牢固骨架增加了藥物的穩(wěn)定性，這種脂質(zhì)體的儲(chǔ)存時(shí)間比原來(lái)延長(zhǎng)了6個(gè)月。綜上所述，由于脂質(zhì)體作為藥物載體時(shí)能改善藥物的藥動(dòng)學(xué)特征和組織分布，增加抗腫瘤藥的療效，減弱毒性，因此在構(gòu)建As2O3靶向遞送系統(tǒng)時(shí)，從基于EPR 效應(yīng)的普通脂質(zhì)體，到偶聯(lián)特異性配體，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)靶向腫瘤組織的主動(dòng)靶向脂質(zhì)體，脂質(zhì)體的開發(fā)也成為新的研究方向（表1）。

表1 As2O3脂質(zhì)體構(gòu)建策略及應(yīng)用

1.2 聚合物囊泡

聚合物囊泡基本結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)體相似，均為具有封閉的類脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)，但與脂質(zhì)體相比，聚合物囊泡的兩親性分子為合成的嵌段共聚物而不是磷脂，因此，其雙層膜具有更強(qiáng)的剛性，且其表面電性可通過(guò)共聚物組成改變，具有更強(qiáng)的增溶力、靶向性、緩釋性。在聚合物囊泡的制備中，聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）是常用材料，用聚乙二醇（PEG）表面修飾可避免其與單核巨噬系統(tǒng)的非特異性相互作用，獲得體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)效果。王琪等[18]將As2O3聚乳酸納米粒（As2O3-PLA-NPs）用PEG 衍生物（mPEG）修飾后藥時(shí)曲線下面積（AUC）為原來(lái)的1.64 倍。但PEG 本身會(huì)干擾納米粒和細(xì)胞間的相互作用，而且在藥物釋放過(guò)程中，PLGA 會(huì)被降解，降解體系呈酸性，可以引發(fā)炎癥反應(yīng)，這些都要求研究者尋找新的改性材料。國(guó)外研究中，Song等[19]將PEG 和乳糖酸（LA）偶聯(lián)至殼聚糖（CS）上，制備了改性材料PEG 和LA 修飾的殼聚糖（PLC）。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證明，優(yōu)化后的As2O3-PLGA/PLC納米粒子具有良好的血液相容性和緩釋性，在應(yīng)用于SMMC-7721細(xì)胞時(shí)，能有效抑制瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，而對(duì)正常人肝細(xì)胞毒性低。因藥物載體和改性材料均具有良好的生物相容性和可降解性，這種聚合物囊泡對(duì)腎臟和肝臟無(wú)毒，是一種安全有效的肝癌化療給藥系統(tǒng)。Hu 等[20]發(fā)現(xiàn)，PEG-PLGA-聚賴氨酸（PEAL）陽(yáng)離子胺基疏水/親水三嵌段共聚物在體內(nèi)降解產(chǎn)物無(wú)毒，且作為藥物載體時(shí)可增強(qiáng)對(duì)藥物的攝取，實(shí)現(xiàn)瘤內(nèi)給藥，在后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，PEAL 載As2O3遞藥后可通過(guò)降低DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶1（Dnmt1）和增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）的表達(dá)、減弱Dnmt1和PCNA之間相互作用、誘導(dǎo)G2/M1基因阻滯等方式抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，從而增強(qiáng)療效。由此可見(jiàn)，研究開發(fā)新的聚合物材料是優(yōu)化As2O3聚合物囊泡的關(guān)鍵。

1.3 仿生納米粒

由于載體材料本身為異源性物質(zhì)，因此在納米顆粒到達(dá)腫瘤組織前往往會(huì)被機(jī)體免疫系統(tǒng)快速清除，從而大大降低臨床療效。為解決此問(wèn)題，基于細(xì)胞、內(nèi)源性蛋白及病原體的仿生藥物遞送系統(tǒng)應(yīng)運(yùn)而生。目前，As2O3仿生納米粒的研究主要是基于前2 種設(shè)計(jì)理念。Lian 等[21]利用紅細(xì)胞膜（RBCM）對(duì)As2O3納米粒進(jìn)行包裹。實(shí)驗(yàn)中用離子交聯(lián)法制備了負(fù)載有As2O3的海藻酸鈉納米粒（SANA），再將RBCM 包封于表面得到紅細(xì)胞包裹的載藥納米粒（RSANs）。RSANs 具有完整的雙層結(jié)構(gòu)，平均粒徑為163 nm，平均包封率為14.31%，與未包膜組相比，包膜組藥物被巨噬細(xì)胞吞噬的幾率降低51%，且對(duì)NB4 及7721 瘤細(xì)胞系均有毒性，但對(duì)正常細(xì)胞毒性較低。另外，人血清白蛋白（HSA）也可用來(lái)包封納米粒，提高藥物的生物相容性或改善藥物的分散性。吳名等[22]發(fā)現(xiàn)，用HSA 包覆多孔氧化鐵運(yùn)載As2O3后，可改善As2O3在緩沖液中的分散性，達(dá)到更好的肝靶向效果。樊繼波[23]采用乳化-熱固法制備的As2O3白蛋白納米球具有載藥量高、釋藥緩慢的優(yōu)點(diǎn)，體外實(shí)驗(yàn)中能有效殺傷膀胱癌細(xì)胞，且與游離藥物相比，藥物毒性更低。最新研究中，研究人員采用化學(xué)原位沉淀法合成裸As2O3納米粒后用HSA 涂布。制得的納米粒在運(yùn)用于小鼠成纖維細(xì)胞和人皮膚成纖維細(xì)胞（HDF）中時(shí)，展現(xiàn)出良好的生物相容性，并且對(duì)正常組織細(xì)胞的毒性低，HDF中HSA-As2O3的質(zhì)量濃度低于20 μg·mL-1[24]。

2 主動(dòng)靶向遞送系統(tǒng)

隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境（TME）遠(yuǎn)比預(yù)期復(fù)雜，致密的細(xì)胞外基質(zhì)、血管高滲透性、較高的組織液壓等形成了阻礙抗腫瘤藥物有效遞送的天然屏障[25]，化被動(dòng)靶向?yàn)橹鲃?dòng)靶向的策略為納米藥物避開腫瘤組織致密微環(huán)境的天然屏障，進(jìn)一步提高負(fù)載藥物的療效開辟了新的思路。因此，在前期基礎(chǔ)上，研究者們針對(duì)腫瘤部位的特異性表達(dá)因子，設(shè)計(jì)了一系列主動(dòng)靶向納米制劑，如利用葉酸、抗體、多肽等對(duì)As2O3的納米粒進(jìn)行修飾。利用腫瘤細(xì)胞大量表達(dá)的特異性因子，實(shí)現(xiàn)As2O3在腫瘤部位的定向富集和精準(zhǔn)釋放，而正常組織細(xì)胞因缺乏對(duì)應(yīng)受體，藥物不易進(jìn)入細(xì)胞，從而減輕了藥物的不良反應(yīng)（圖1）。

圖1 As2O3主動(dòng)靶向遞藥原理

2.1 葉酸修飾

葉酸受體（FR）在腫瘤細(xì)胞膜上高度表達(dá)，在正常組織細(xì)胞上的表達(dá)卻相對(duì)保守，將葉酸偶聯(lián)至脂質(zhì)體，介孔二氧化硅（SiO2）納米粒等載體上可賦予其主動(dòng)靶向性。Chen 等[26]將葉酸作為配體連接到As2O3脂質(zhì)體上，研究表明，人鼻咽癌細(xì)胞以FR為中介內(nèi)吞As2O3脂質(zhì)體，結(jié)合葉酸的靶向脂質(zhì)體細(xì)胞攝入率是未結(jié)合組的3～6 倍。葉酸修飾的主動(dòng)靶向系統(tǒng)在抗肝癌的研究尤其多。Zhu等[17]制備了葉酸修飾的亞砷酸鈣脂質(zhì)體（FA-LP-CaAs），在應(yīng)用于HepG2 細(xì)胞系時(shí)，與未經(jīng)葉酸修飾的LP-CaAs 納米粒相比，F(xiàn)A-LP-CaAs 的細(xì)胞攝取率顯著增加，且HepG2 細(xì)胞內(nèi)As2O3濃度也提高，細(xì)胞凋亡率升高。葉酸也可以修飾其他納米載體，如白蛋白納米粒。劉海[27]合成了葉酸偶聯(lián)率為30.31 μg·mg-1的載藥葉酸偶聯(lián)牛血清白蛋白納米粒（F-BSANP）。將其應(yīng)用于A549 肺癌細(xì)胞模型時(shí)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)-BSANP 組對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率為72%，對(duì)正常細(xì)胞抑制率僅為13%，而未偶聯(lián)葉酸的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞的抑制率分別為14%和10%。這表明葉酸修飾賦予藥物載體對(duì)靶細(xì)胞特異性殺傷作用。Chi等[28]在成功制備了具有pH依賴釋放特性且中心含有磁性氧化鐵納米顆粒的介孔SiO2納米粒后，為進(jìn)一步提高其對(duì)肝癌組織的靶向作用，將其表面用葉酸修飾，在應(yīng)用于SMMC-7721肝癌細(xì)胞系后，結(jié)果顯示，葉酸修飾組半數(shù)抑制濃度（IC50）下降至0.36 μmol·L-1，而用mPEG 修飾的對(duì)照組IC50為1.46 μmol·L-1，這說(shuō)明葉酸修飾增加了細(xì)胞藥物攝入率，因而獲得更好的抗癌效果。

2.2 抗體修飾

抗體修飾可通過(guò)抗體-受體或抗體-配體識(shí)別結(jié)合的原理實(shí)現(xiàn)藥物的靶向運(yùn)送。采用抗體-受體結(jié)合策略構(gòu)建的主動(dòng)靶向藥物的基本原理是某些受體在腫瘤組織高表達(dá)，因此在As2O3藥物上偶聯(lián)相對(duì)應(yīng)的抗體構(gòu)建的免疫微球或納米?？梢园邢蚰[瘤組織。尿激酶系統(tǒng)包括尿激酶原激活物（uPA）和uPA 受體（uPAR），uPAR 在多種癌細(xì)胞表面過(guò)表達(dá)，而在正常組織中低表達(dá)。因卵巢癌細(xì)胞具有高表達(dá)的uPA 系 統(tǒng)，Zhang 等[13]將uPA 抗體連接 至As2O3脂 質(zhì)體上，這種靶向脂質(zhì)體應(yīng)用于卵巢癌細(xì)胞后，癌細(xì)胞藥物攝入的效率增加4 倍，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率為普通脂質(zhì)體的2倍。因VEGF-2受體在肝癌組織中過(guò)表達(dá)，研究者將VEGF-2 偶聯(lián)至As2O3-PEG-PLA 納米粒上，該體系應(yīng)用于肝癌裸鼠模型后在肝腫瘤組織藥物濃度為未偶聯(lián)抗體的2 倍，而在其他組織藥物濃度顯著降低[29]；陳巖等[30]將轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的單克隆抗體（OX26）偶聯(lián)至As2O3脂質(zhì)體上制備的As2O3免疫脂質(zhì)體對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤的抑制率高于單純As2O3組。另外，抗體-抗原的特異性結(jié)合亦可以提供設(shè)計(jì)主動(dòng)靶向藥的思路。Qian 等[31]將抗CD-44v6 抗體片段可變區(qū)共價(jià)連接至As2O3脂質(zhì)體囊泡上，因上皮細(xì)胞起源的腫瘤細(xì)胞高表達(dá)CD-44v6 抗原，所以該載藥體對(duì)此類腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出高度靶向性。該實(shí)驗(yàn)組進(jìn)一步將合成的納米粒應(yīng)用于人胰腺癌細(xì)胞系PANCE-1，發(fā)現(xiàn)與非靶向組相比，靶向組能夠更有效地運(yùn)送藥物到腫瘤組織。

2.3 多肽修飾

葉酸或轉(zhuǎn)鐵蛋白等修飾的載藥體系往往與天然配體之間存在競(jìng)爭(zhēng)，受體基本被內(nèi)源性的葉酸或轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和，導(dǎo)致外源性導(dǎo)向效率偏低，因此多肽修飾作為一種新型高效的運(yùn)載配體正被越來(lái)越多的研究者所青睞。Angiopep-2 是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種能夠通過(guò)高表達(dá)于BBB 和膠質(zhì)瘤的低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白（LRP）介導(dǎo)靶向BBB 和腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的多肽，因此用Angiopep-2 來(lái)修飾納米遞藥系統(tǒng)為As2O3腦部藥物遞送提供了新思路。研究者以聚丙烯酸（PAA）包覆的介孔SiO2（MSN）納米粒為載體，采用薄膜水化法自組裝形成Angiopep-2 修飾的功能化MSN 脂質(zhì)囊納米粒。其可通過(guò)和腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞上高表達(dá)的LRP-1 特異性地識(shí)別結(jié)合，增加As2O3跨BBB 并靶向治療腦膠質(zhì)瘤能力，體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)中展現(xiàn)了較好的體外抗腦膠質(zhì)瘤效果[32]。另外，整合素αvβ3 在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞和其血管內(nèi)皮表面高表達(dá)，而Arg-Gly-Asp 三肽序列（RGD 肽）是整合素αvβ3 的特異性配體，使用RGD 肽修飾的藥物也能實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤組織的靶向作用。Lu等[33]將RGD 肽與聚乙醇化-聚酰胺-胺（mPEG-PAMAM）樹狀大分子偶聯(lián)后，制備了靶向腫瘤組織的藥物載體RGDyCmPEG-PAMAM。由于偶聯(lián)RGD 肽增加了腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的攝取，因而對(duì)小鼠C6膠質(zhì)瘤抑制率為未偶聯(lián)RGD 肽載體的2 倍。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，iRGD（CRGDK/RGPD/EC）腫瘤滲透能力強(qiáng)，TGN 肽是另一種BBB 靶向短肽。倪文娟等[34]用BBB 轉(zhuǎn)運(yùn)（TGN）肽和iRGD 修飾PAMAM 樹狀大分子，構(gòu)建出iRGD/TGN-PEG-PAMAM/As2O3腦膠質(zhì)瘤靶向給藥系統(tǒng)，使得As2O3能更好地透過(guò)BBB 并在腫瘤組織呈特異性分布。在體外跨BBB-人惡性腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，在2種肽聯(lián)合修飾的給藥系統(tǒng)作用下，U87 細(xì)胞的存活率為39.24%，顯著低于單獨(dú)使用iRGD 肽，單獨(dú)用TGN 肽，或未修飾的對(duì)照組。在應(yīng)用于肝癌的研究時(shí)，F(xiàn)ei 等[35]將RGD 與脂質(zhì)體（LP）-空心SiO2（CHMSN）結(jié)合，制備了RGD-LPCHMSN-As2O3載藥體系。為了將RGD 成功修飾于載藥中空SiO2（HMSN）表面，研究者采用氯二甲基十六烷基硅烷修飾HMSN 表面，以支持磷脂雙分子層，提高藥物遞送系統(tǒng)與細(xì)胞膜的親和力，并使其易于被RGD 肽修飾。當(dāng)應(yīng)用于H22 腫瘤-異種移植小鼠模型時(shí)，RGD 肽修飾可顯著提高細(xì)胞攝取率，與游離As2O3組相比，半衰期延長(zhǎng)了1.7 倍，AUC 增加了2.4 倍，該載藥系統(tǒng)提高了藥物的靶向效率和抗癌潛力。

2.4 三苯基膦（TPP）修飾

越來(lái)越多的研究表明，選擇性地將藥物遞送到特定的亞細(xì)胞細(xì)胞器可以顯著提高癌癥治療的效率，其中以線粒體為靶點(diǎn)的治療策略最受關(guān)注。一方面，線粒體是為腫瘤細(xì)胞提供能量的重要細(xì)胞器，更容易受到熱療和氧化損傷；另一方面，線粒體在調(diào)節(jié)癌細(xì)胞凋亡過(guò)程中具有重要作用，當(dāng)細(xì)胞受到刺激時(shí)，線粒體內(nèi)外膜之間的細(xì)胞色素C 和凋亡誘導(dǎo)因子釋放，半胱氨酸-門冬氨酸特異性蛋白酶類（Caspases）凋亡通路被激活。因此，靶向線粒體可作為抗癌藥物遞送的新思路。研究表明，As2O3可通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。綜上，以線粒體為靶點(diǎn)的As2O3遞送策略在癌癥治療領(lǐng)域具有廣闊的前景。TPP是目前最常用的線粒體靶向基團(tuán)之一。TPP化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有的3 個(gè)苯基使其整個(gè)分子具有很強(qiáng)的脂溶性，同時(shí)，TPP 磷原子上的正電荷可以離域到3 個(gè)苯環(huán)，形成離域正電荷，促使TPP 可穿越線粒體的磷脂膜。周偉等[36]將TPP 通過(guò)硅烷化試劑鍵接到三氧化二鐵介孔納米棒的表面，制備了具有線粒體靶向性的藥物載體輸送As2O3。在應(yīng)用于人類乳腺癌細(xì)胞MCF-7 時(shí)發(fā)現(xiàn)，與未加TPP 的載藥體系及游離As2O3相比，結(jié)合TPP 后構(gòu)建的新型藥物遞送系統(tǒng)As2O3-TPP-PEG-MNRs 富集于MCF-7 細(xì)胞線粒體中，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向遞送。Wu 等[37]使用二氧化鋯為載體，用相變十四醇（PCM）修飾，構(gòu)建了微波（MWA）控制釋放的載As2O3納米微粒后，進(jìn)一步在其表面偶聯(lián)TPP。在體外實(shí)驗(yàn)中，與未偶聯(lián)組相比，偶聯(lián)TPP組直接靶向癌細(xì)胞線粒體，增強(qiáng)As2O3促進(jìn)線粒體損傷的作用。實(shí)驗(yàn)表明，表征線粒體凋亡的綠/紅熒光比值在偶聯(lián)TPP 組上升至2.39。在用于HepG2 細(xì)胞時(shí)，可顯著抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移和增殖并促進(jìn)其凋亡。除TPP 外，靶向線粒體的配體還有十八烷基TPP、促凋亡肽等[38]，但在As2O3的遞藥體系中并未研究。As2O3可通過(guò)多種機(jī)制對(duì)實(shí)體瘤起到治療作用，此過(guò)程涉及多種細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，而納米載體細(xì)胞器靶向藥物也逐步發(fā)展。因此，除線粒體外，靶向其他細(xì)胞器可能將會(huì)成為As2O3靶向遞送的一個(gè)新思路。

3 刺激響應(yīng)型遞送系統(tǒng)

為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)藥物的按需響應(yīng)釋放，基于TME中某些特殊環(huán)境、物理或化學(xué)因素設(shè)計(jì)的刺激響應(yīng)型納米遞送系統(tǒng)應(yīng)運(yùn)而生，這類智能納米藥物遞送系統(tǒng)進(jìn)入體內(nèi)后可在外源性（如溫度、磁場(chǎng)、光等）或內(nèi)源性（如pH、谷胱甘肽、活性氧、酶等）刺激下通過(guò)載體結(jié)構(gòu)、構(gòu)型等特征發(fā)生改變，迅速或按一定速率釋放藥物。

3.1 磁響應(yīng)型遞送系統(tǒng)

磁場(chǎng)在腫瘤治療中功能眾多，如外加高頻交變磁場(chǎng)（AMF）時(shí)可升溫實(shí)現(xiàn)磁熱療?；诖?，永磁性藥物可利用其磁場(chǎng)響應(yīng)性實(shí)現(xiàn)磁性靶向運(yùn)輸。此外，與具順磁性或超順磁性的金屬離子結(jié)合可進(jìn)行磁共振成像（MRI）。例如，磁靶向熱敏脂質(zhì)體可以在外加磁場(chǎng)的作用下隨血液循環(huán)聚集到靶器官，通過(guò)磁熱轉(zhuǎn)化升高腫瘤部位的溫度，使脂質(zhì)體雙層的滲透性增加，藥物快速釋放，與普通的脂質(zhì)體相比具有更強(qiáng)的靶向性和更好的控制釋放特性。Wang等[39]將磁性納米粒子MZFs 和As2O3用溫敏材料實(shí)現(xiàn)共包封，制備了As2O3/MZFs 熱敏磁性脂質(zhì)體，MZFs 在接觸AMF 時(shí)，其溫度可達(dá)到脂質(zhì)體相變溫度（42.71 ℃），實(shí)現(xiàn)定時(shí)定位給藥，應(yīng)用于肝癌細(xì)胞系時(shí)，腫瘤體積抑制率高達(dá)85.22%。此外，另有研究者采用化學(xué)沉淀法制備了新型磁性納米藥物As2O3/Fe2O3[40]。因Fe2O3納米顆粒在高頻交變電磁場(chǎng)中具有良好的功率吸收能力和較強(qiáng)的磁響應(yīng)性，因此可以通過(guò)調(diào)節(jié)Fe2O3濃度，選擇合適的溫度范圍（42～46 ℃）進(jìn)行腫瘤熱療?？梢?jiàn)，這種給藥系統(tǒng)結(jié)合了磁流體熱療（MSF）和藥物化療的優(yōu)勢(shì)，當(dāng)應(yīng)用于SMMC-7721 細(xì)胞系時(shí)，療效遠(yuǎn)優(yōu)于單獨(dú)使用藥物。Chi 等[28]用磁性氧化鐵和多孔SiO2合成一種磁性藥物載體M-LPMSNs，在載入As2O3后發(fā)現(xiàn)，在注射藥物0.5 h 后，腫瘤區(qū)域開始出現(xiàn)明顯的核磁信號(hào)，并持續(xù)至少24 h，這有利于治療過(guò)程中的持續(xù)監(jiān)測(cè)。這種成像技術(shù)可以監(jiān)測(cè)藥物是否準(zhǔn)確到達(dá)目標(biāo)部位，觀察藥物殺瘤效果，具有廣闊的發(fā)展前景。

3.2 pH響應(yīng)型遞送系統(tǒng)

由于腫瘤的快速生長(zhǎng)、新生血管生成導(dǎo)致腫瘤內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和氧氣匱乏，代謝方式以糖酵解為主，從而在腫瘤間質(zhì)中產(chǎn)生酸性代謝物，使得TME 中pH 為5.7～7.8，而正常組織的pH 為7.2～7.4，利用腫瘤部位與正常組織間pH 差異可構(gòu)建pH 敏感的藥物遞送系統(tǒng)。傳統(tǒng)構(gòu)建pH 響應(yīng)性As2O3藥物遞送系統(tǒng)有2 種，一是將As2O3的不同鹽與Zn2+、Ni2+等金屬離子絡(luò)合制成前藥，在酸性環(huán)境下變?yōu)榛钚运幬锇l(fā)揮藥效；二是采用pH 敏感材料，如PAA 等進(jìn)行表面修飾?；诘谝环N設(shè)計(jì)思路的研究較為成熟，研究者開發(fā)出多種可與砷形成絡(luò)合物并各具特點(diǎn)的金屬離子。Huang等[41]利用As（OH）3與氯化鋅反應(yīng)生成亞砷酸鋅(ZnAsOx），再將其載入合成的納米級(jí)介孔SiO2中，制備了以SiO2為外殼，ZnAsOx為核心（ZnAs@SiO2）的納米藥物。ZnAs@SiO2在體循環(huán)中保持穩(wěn)定，而在pH為6.4時(shí)釋放增強(qiáng)。與Zn具有類似作用的還有鎳離子，且對(duì)砷負(fù)載率高。在Chi等[28]制備的多功能納米粒中，As2O3以亞砷酸鎳配合物的形式存在，在生理?xiàng)l件（pH=7.4）下穩(wěn)定，不顯示藥理活性，而在pH=5.4時(shí)，核心藥物則會(huì)崩解成鎳離子和亞砷酸鎳，在將其應(yīng)用于SMMC-7721癌細(xì)胞時(shí)，與游離As2O3組相比，凋亡誘導(dǎo)基因和凋亡抑制基因的比值（Bax/Bcl-2）的表達(dá)顯著升高，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。Zhu 等[17]將As2O3以亞砷酸鹽的形式與Ca2+結(jié)合后構(gòu)建了以Ca3（AsO3）2為核心藥物的遞藥體系，其在酸性環(huán)境中同樣可溶解形成亞砷酸鹽，實(shí)現(xiàn)藥物的響應(yīng)性釋放。這一將As2O3與金屬離子結(jié)合制成納米前藥，構(gòu)建出自載藥物遞送體系的思路，在實(shí)現(xiàn)pH依賴可控性釋放的同時(shí)，大大提高了藥物遞送體系的載藥量。此外，以pH敏感材料作為載體的載藥體系亦可實(shí)現(xiàn)As2O3在TME 中的觸發(fā)性釋放。PAA是一種最常用的pH響應(yīng)材料，具有低毒和良好的生物相容性。Xiao等[42]在載有As2O3的納米級(jí)中空SiO2表面偶聯(lián)PAA 作為pH 響應(yīng)材料后，As2O3在pH 5.0 時(shí)的48 h 累積釋放率達(dá)76.15%，遠(yuǎn)高于pH 味7.4時(shí)（40.52%）。

值得一提的是，近年來(lái)金屬有機(jī)框架（MOFs）的出現(xiàn)為pH響應(yīng)型納米遞送系統(tǒng)的制備提供了新的材料支持。MOFs 納米遞藥系統(tǒng)是將有機(jī)化學(xué)基團(tuán)與金屬離子相結(jié)合，構(gòu)建出納米級(jí)的結(jié)晶材料作為藥物運(yùn)載體，制備時(shí)藥物通過(guò)配位交換的方式進(jìn)入載體，在TME 中藥物亦可通過(guò)離子交換等方式釋藥，從而實(shí)現(xiàn)藥物的觸發(fā)性釋放；與傳統(tǒng)納米級(jí)藥物載體相比，對(duì)As2O3這樣的無(wú)機(jī)化合物，MOFs 形成的空隙結(jié)構(gòu)與巨大的表面積還賦予了其高載藥量的優(yōu)勢(shì)。Ettlinger 等[43]采用ZnⅡ離子作為金屬離子，2-甲基咪唑作為有機(jī)基團(tuán)合成了新型藥物載體鋅-甲基咪唑MOF（ZIF-8）作為藥物載體，再將As2O3以As（OH）3的形式通過(guò)配位交換的方式載入載體中，載藥量高達(dá)98 μg·mg-1。體外實(shí)驗(yàn)中，因ZIF-8 骨架在酸性條件下分解，因此載有As2O3的納米粒在酸性的TME 中可實(shí)現(xiàn)特異性釋放。在將其應(yīng)用于非典型畸胎樣橫紋肌瘤細(xì)胞系時(shí)，可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。MOFs 作為載體不僅載藥量大，且載體本身具備pH觸發(fā)釋放特性，這與目前pH 觸發(fā)釋放納米藥物大多是基于將As2O3制成各種鹽的思路不同，具有廣闊的研究前景。然而，在此研究中，實(shí)驗(yàn)者采用PEG 對(duì)MOFs進(jìn)行表面修飾，與未修飾藥物相比卻未發(fā)現(xiàn)明顯優(yōu)勢(shì)，因此，關(guān)于MOFs的表面修飾方面仍需進(jìn)一步探究。

此外，低pH 插入肽（pHLP）的發(fā)現(xiàn)也為pH 觸發(fā)釋放遞藥系統(tǒng)提供了新思路。由于自身的特殊序列結(jié)構(gòu)，pHLP 在堿性和中性條件下以單體形式存在，酸性條件下跨膜序列中的谷氨酸殘基、天冬氨酸羧基、C 末端均被質(zhì)子化，疏水性增強(qiáng)。因此，在酸性TME 中，pHLP 可折疊并插入細(xì)胞的脂質(zhì)雙層中，促進(jìn)納米藥物的細(xì)胞攝取，增強(qiáng)其在腫瘤部位滯留。Zhang等[44]利用反相微乳法構(gòu)建了以亞砷酸錳（MnAs）為核心藥物，納米級(jí)介孔SiO2為載體的載藥體系，再使用pHLP 包被，制備了在TME 中可控性釋藥的多功能藥物遞送體系MnAs-SiO2-pHLIP。體外實(shí)驗(yàn)表明，在肝癌、宮頸癌等多種癌細(xì)胞系中，MnAs-SiO2-pHLIP 在pH 6.0 時(shí)細(xì)胞攝入率更高，釋藥量也更大。同時(shí)，酸性環(huán)境可以觸發(fā)Mn2＋的釋放而增強(qiáng)T1 信號(hào)，因此可以通過(guò)對(duì)比增強(qiáng)的磁共振成像信號(hào)實(shí)現(xiàn)藥物釋放情況的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

3.3 無(wú)機(jī)磷（Pi）響應(yīng)性釋放

無(wú)機(jī)磷酸鹽在體內(nèi)以磷酸二氫鹽和磷酸一氫鹽的形式富集于血漿及細(xì)胞質(zhì)中。TME 中Pi的濃度是正常組織的2 倍。因此，Pi 被認(rèn)為是一種新的TME特征性生物標(biāo)志物?；诖耍芯空邆冮_發(fā)了Pi 觸發(fā)釋放的As2O3納米前藥。因鑭系礦物多以磷酸鹽的形式存在，其中釓離子（Gd2＋）的磷酸鹽與相應(yīng)的砷酸磷酸化合物相比更加穩(wěn)定［KspGdAsO4（10.0～21.7）＞KspGdPO4（10～25）］。因此，Chen 等[45]利用［GdAsOx（s）+Pi（aq）-GdPO4（s）+H3AsO3（aq）］的反應(yīng)，制備了以亞砷酸釓（GdAsOx）為核心藥物的Pi 依賴釋放性As2O3自載遞藥體系。研究表明，在高濃度Pi 存在時(shí)，釋藥率高達(dá)96%，而在沒(méi)有Pi的情況下，納米粒在不同pH條件下均無(wú)藥物泄露，證明了此載藥體系的高度腫瘤靶向性。此外，與游離As2O3相比，GdAsOx納米粒在腫瘤內(nèi)砷的積累增加10倍。此外，TME中高濃度的Pi不僅用于蛋白質(zhì)的快速合成和腫瘤細(xì)胞的增殖，而且是維持TME 酸性環(huán)境的重要離子。與未轉(zhuǎn)移的腫瘤相比，高轉(zhuǎn)移性腫瘤的Pi濃度增加。因此，當(dāng)磷酸取代As（OH）3時(shí)，實(shí)現(xiàn)了靶向釋藥和堿化TME 的雙重治療作用。Fu等[46]用氯化釓水溶液（GdCl3·6H2O）和亞砷酸鈉（NaAsO2）制備了粒徑處于納米范圍的膠體GdAsOx納米顆粒。體外研究顯示，在存在1.4 mmol·L-1Pi介質(zhì)中，超過(guò)80%的砷釋放，而無(wú)Pi 時(shí)無(wú)藥物泄露。而隨著Pi濃度的降低，介質(zhì)pH逐漸升高。這證明，TME 中的Pi 在觸發(fā)藥物釋放的同時(shí)自身被耗竭，TME被堿化，而堿化TME也是一種新的腫瘤治療策略[47]，因而Pi 響應(yīng)性釋放體系與其他刺激響應(yīng)性遞送系統(tǒng)相比可能具有更大的優(yōu)勢(shì)。在用于肝癌模型小鼠后發(fā)現(xiàn)，多次注射后小鼠腫瘤體積減小了50%以上，與對(duì)照組相比生存時(shí)間顯著延長(zhǎng)。而且，雖然該藥物是由Pi 觸發(fā)釋放的，但對(duì)體內(nèi)磷平衡無(wú)明顯干擾，且該藥毒性可逆，停藥3 周后，小鼠重要臟器恢復(fù)正常。

3.4 氧化還原響應(yīng)性釋放

腫瘤細(xì)胞內(nèi)還原性谷胱甘肽（GSH）的濃度（2～10 mmol·L-1）遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞，而生理狀態(tài)下細(xì)胞外區(qū)GSH 濃度僅為2～20 μmol·L-1。因此，利用GSH 濃度的差異可以實(shí)現(xiàn)藥物載體在腫瘤細(xì)胞內(nèi)快速解離并釋藥。與pH 響應(yīng)及Pi 響應(yīng)釋放系統(tǒng)相比，還原性響應(yīng)釋放直接與腫瘤細(xì)胞內(nèi)高GSH 相關(guān)聯(lián)，實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)定位釋放藥物。As-S 鍵可以被高濃度的GSH 還原為巰基而斷裂，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向釋放。利用這一性質(zhì)，Zhang等[48]將巰基和疏水嵌段共聚物結(jié)合形成共聚物PEO-b-P（CCLC6-SH），再將三價(jià)砷的氧化物氧化苯砷（PAO）和巰基共同包封，由于巰基與砷的高親和力，藥物包封率提高15 倍，在高濃度的GSH 中，藥物釋放得到了顯著增強(qiáng)。與As-S 鍵相比，二硫鍵具有良好的氧化還原敏感性，其僅在10 mmol·L-1水平的GSH 中斷裂并釋放藥物，可以避免因正常細(xì)胞內(nèi)外存在的GSH 濃度差異觸發(fā)的藥物釋放，減少不良反應(yīng)。馬瑞等[49]以介孔SiO2為載體，通過(guò)二硫鍵修飾表面后，經(jīng)?；磻?yīng)連接PEG，最后通過(guò)靜電吸附作用負(fù)載As2O3，成功制備了氧化還原響應(yīng)性As2O3納米遞藥系統(tǒng)。研究發(fā)現(xiàn)，在含有10 mmol·L-1GSH 的釋放介質(zhì)中，As2O3累積釋放量達(dá)到81%，而不含GSH 時(shí)釋放量?jī)H為25.84%，有力證明了此載藥體系具有GSH響應(yīng)性釋放特性。除此之外，由于系統(tǒng)表面帶有一定正電荷，電荷密度和排斥力隨著pH的降低而增加，因此，此載藥體系也具有一定的pH 依賴性釋放特性。事實(shí)上，在其他抗癌藥物的納米遞藥系統(tǒng)中，二硫鍵還被用于構(gòu)建“前修飾”及“后修飾”[50]還原響應(yīng)納米載體，但有關(guān)研究在As2O3的遞送中尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，如何充分利用二硫鍵在氧化還原響應(yīng)型納米載體構(gòu)建中的優(yōu)勢(shì)，為As2O3的精準(zhǔn)遞送服務(wù)仍有待研究者的進(jìn)一步探究。

綜上，在刺激響應(yīng)性理念下設(shè)計(jì)的As2O3遞送體系可通過(guò)響應(yīng)外加磁場(chǎng)或微波實(shí)現(xiàn)藥物的可控性釋放，與MRI 技術(shù)結(jié)合后還可給藥的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，利用腫瘤微環(huán)境中低pH、高Pi 濃度、高GSH 濃度也實(shí)現(xiàn)藥物在靶向部位的精準(zhǔn)釋放，從而在降低As2O3引起的不良反應(yīng)、提高腫瘤療效等方面顯示了巨大的應(yīng)用潛能（圖2）。

圖2 刺激響應(yīng)型遞送系統(tǒng)構(gòu)建原理

4 結(jié)語(yǔ)與展望

從As2O3成功應(yīng)用于白血病的治療以來(lái)，研究人員致力于將其開發(fā)為高效低毒的抗實(shí)體瘤藥物應(yīng)用于臨床，使用納米技術(shù)協(xié)助As2O3運(yùn)送到腫瘤部位，減少其對(duì)正常組織細(xì)胞的不良反應(yīng)，已成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。迄今為止，研究人員嘗試制備了各種各樣的納米材料，進(jìn)行As2O3的包載和遞送，如脂質(zhì)體、聚合物囊泡、仿生納米粒等，被動(dòng)靶向納米粒主要通過(guò)EPR 效應(yīng)實(shí)現(xiàn)藥物在腫瘤組織的滯留。在此基礎(chǔ)上，對(duì)這些載體進(jìn)行修飾，構(gòu)建可實(shí)現(xiàn)主動(dòng)靶向。基于抗體和配體的主動(dòng)靶向系統(tǒng)可以將藥物定向輸送到腫瘤細(xì)胞或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中，提高療效、減輕不良反應(yīng)。已經(jīng)研究出通過(guò)使用多肽、葉酸、抗體及線粒體靶向的配體，可以實(shí)現(xiàn)As2O3向多種實(shí)體瘤的主動(dòng)靶向運(yùn)送。而如何針對(duì)不同腫瘤組織尋找其特異表達(dá)的受體，并使用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ岣吲潴w在載藥系統(tǒng)上的修飾效率，有待進(jìn)一步研究。除此之外，通過(guò)響應(yīng)內(nèi)源或外源物質(zhì)可實(shí)現(xiàn)藥物的可控性釋放。與磁性納米粒子及外加磁場(chǎng)相結(jié)合，構(gòu)建出磁響應(yīng)性釋放及溫度響應(yīng)性釋放體系，除靶向遞送藥物到腫瘤組織外，磁場(chǎng)用于升溫使得化療熱療相結(jié)合，且磁性粒子可用MRI 技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物釋放情況和腫瘤組織的監(jiān)測(cè)。但目前，在As2O3磁性藥物遞送載體的研究中，開發(fā)的磁性納米粒子較為局限，且與磁性納米粒子復(fù)合的材料也有待進(jìn)一步研究，以減少藥物的泄露問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)更精準(zhǔn)的靶向。與外源性響應(yīng)系統(tǒng)相比，基于TME 中高酸度、高磷及腫瘤細(xì)胞內(nèi)高GSH 濃度所設(shè)計(jì)的內(nèi)源性靶向系統(tǒng)一方面可以實(shí)現(xiàn)藥物的靶向遞送，且與外源性響應(yīng)系統(tǒng)相比，無(wú)需外加輔助，更具安全性；另一方面，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)TME 的調(diào)節(jié)，如內(nèi)源性磷的減少可升高腫瘤局部pH，起到堿化TME 的治療作用。而將主動(dòng)靶向與內(nèi)源性及外源性響應(yīng)釋放技術(shù)相結(jié)合所構(gòu)建的多功能納米靶向遞送體系相當(dāng)于對(duì)以上靶向技術(shù)的加和，能將As2O3更精準(zhǔn)地運(yùn)送到腫瘤部位，并響應(yīng)于刺激性物質(zhì)而定位釋放。

目前，關(guān)于As2O3靶向遞送系統(tǒng)的研究雖取得了一定進(jìn)展，但仍面臨與其他納米藥物一樣的棘手問(wèn)題。在納米載藥體系設(shè)計(jì)方面，包括粒徑分布、表面功能性修飾、粒徑調(diào)控、結(jié)構(gòu)可變等，都或多或少存在著理論框架的空白，如何設(shè)計(jì)功能良好且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的納米載體有待進(jìn)一步研究。人體內(nèi)環(huán)境的復(fù)雜性要遠(yuǎn)超過(guò)我們的理論設(shè)計(jì)，如血液含有大量不同的生物蛋白，同時(shí)體內(nèi)氧化還原環(huán)境、pH 環(huán)境等都在不斷地變化，且體內(nèi)保護(hù)性的免疫清除系統(tǒng)會(huì)高效地清除外來(lái)異物。因此，簡(jiǎn)單設(shè)計(jì)的納米載體往往會(huì)導(dǎo)致納米藥物的理化性質(zhì)存在許多不確定性，在進(jìn)入體內(nèi)血液循環(huán)后極易產(chǎn)生不穩(wěn)定崩解，被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)快速清除，或者與帶電生物分子發(fā)生不良反應(yīng)。尤其對(duì)于As2O3這樣治療窗窄，且會(huì)以無(wú)機(jī)鹽形式穿透脂質(zhì)雙分子層的毒效并存藥物，納米藥物固有的理化性質(zhì)缺陷更不容忽視。因此，今后的研究仍需進(jìn)一步結(jié)合As2O3自身的性質(zhì)，采用雙靶向或多靶向的設(shè)計(jì)策略，通過(guò)物理化學(xué)原理及相應(yīng)的標(biāo)度關(guān)系精確設(shè)計(jì)出結(jié)構(gòu)穩(wěn)定且功能最優(yōu)化的納米載體，以實(shí)現(xiàn)As2O3在實(shí)體瘤中的精準(zhǔn)釋放。