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      3 種鋅源對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腹瀉率、腸黏膜形態(tài)及腸道菌群多樣性的影響

      2022-11-17 03:53:04周金柱李二偉黃世猛李運(yùn)川劉秀娟孟靈彪呂家煌
      中國(guó)畜牧雜志 2022年11期
      關(guān)鍵詞:隱窩蒙脫石氧化鋅

      郭 彤,周金柱,李二偉,黃世猛,李運(yùn)川,劉秀娟,孟靈彪,顧 俊,呂家煌,李 彬

      (1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系,北京 102442;2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所,江蘇南京 210014;3.北京桃古圖新材料有限公司,北京 100025)

      預(yù)防和降低斷奶仔豬應(yīng)激產(chǎn)生的腹瀉是養(yǎng)殖生產(chǎn)研究的熱點(diǎn)[1-2]。研究表明,飼糧中添加高劑量氧化鋅能有效降低仔豬早期斷奶帶來(lái)的應(yīng)激[3]。但長(zhǎng)期添加高劑量氧化鋅會(huì)導(dǎo)致資源浪費(fèi)、環(huán)境污染,甚至對(duì)人類健康產(chǎn)生嚴(yán)重危害[4]。因此,降低日糧中鋅的添加量、尋找安全環(huán)保的鋅替代品成為亟待解決的問(wèn)題。

      納米氧化鋅具有顆粒小、比表面積大、吸附率高等特點(diǎn),可提高鋅的生物利用率,降低氧化鋅的使用量,在豬、雞上已有研究報(bào)道[5-6]。由于納米氧化鋅能滲入到細(xì)胞和組織內(nèi),使細(xì)胞壞死和組織發(fā)生病變[7],其對(duì)動(dòng)物可能有毒害作用[8-9]。蒙脫石能吸附腸道致病菌、病毒及其產(chǎn)生的毒素并將其固定,隨糞便排出體外[10],在治療畜禽腹瀉性疾病、保護(hù)腸黏膜方面具有良好的療效[11-13],且綠色環(huán)保、無(wú)耐藥性、無(wú)毒副作用,已被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中[14]。蒙脫石本身無(wú)抑菌或殺菌作用,但載入金屬離子(Ag+、Cu2+、Zn2+)或金屬氧化物(TiO2、ZnO)后,具有了強(qiáng)大的殺菌作用[15],能將動(dòng)物腸道有害菌殺滅,起到類似抗生素的作用。

      本試驗(yàn)將納米氧化鋅負(fù)載在蒙脫石上制備出新型改性蒙脫石——蒙脫石負(fù)載型氧化鋅,旨在研究普通氧化鋅、納米氧化鋅和蒙脫石負(fù)載型氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腹瀉率、腸黏膜形態(tài)及腸道菌群多樣性的影響,為蒙脫石負(fù)載型氧化鋅在斷奶仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù),為高鋅飼糧替代品的研發(fā)提供理論和實(shí)踐指導(dǎo)。

      1 材料與方法

      1.1 試驗(yàn)材料 普通氧化鋅(飼料級(jí),鋅含量≥76.3%)由石家莊百勝化工有限公司提供;納米氧化鋅(飼料級(jí),鋅含量≥77%)由濟(jì)源魯泰納米材料有限公司提供;蒙脫石負(fù)載型氧化鋅(飼料級(jí),鋅含量≥30%)由北京桃古圖新材料有限公司提供。

      1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)日糧 選擇144 頭體重(7.0±0.2)kg的杜× 長(zhǎng)× 大三元雜交仔豬,按胎次一致、體重相近原則,采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)分為4 組,每組6 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6 頭(公母各半)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加3 000 mg/kg 普通氧化鋅、1 500 mg/kg 納米氧化鋅、600 mg/kg 蒙脫石負(fù)載型氧化鋅(均以鋅計(jì))。預(yù)試期7 d,試驗(yàn)期14 d?;A(chǔ)日糧參照NRC(2012)斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)需要配制成粉狀全價(jià)料,基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

      表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))

      1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗(yàn)于2021 年4 月—2021 年5 月在如皋博益牧業(yè)有限公司進(jìn)行。豬場(chǎng)具有規(guī)?;a(chǎn)設(shè)備,防疫和飼養(yǎng)管理科學(xué)規(guī)范,完全滿足試驗(yàn)要求。仔豬在保育床上飼養(yǎng),自由采食和飲水,按時(shí)清理衛(wèi)生,從7 日齡開始誘食并哺乳至21 日齡斷奶,按常規(guī)程序?qū)ψ胸i進(jìn)行免疫和定期消毒。

      1.4 樣品采集與保存 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束稱重后,從各組中隨機(jī)選取體重接近平均體重的試驗(yàn)豬各12 頭(每個(gè)重復(fù)2 頭,公母各半),繼續(xù)飼喂0.5 h,仔豬采食2 h 后屠宰。各組斷奶仔豬屠宰后無(wú)菌操作取出回腸和結(jié)腸內(nèi)容物各約2 g,消毒結(jié)扎后其中1 g 放入消毒容器中,4℃立即運(yùn)回?zé)o菌操作室,無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)將腸道內(nèi)容物充分與生理鹽水混合,對(duì)其所含微生物(如大腸桿菌、沙門氏菌)數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)。另外1 g 放入5 mL 凍存管并迅速置于液氮中,用于腸道菌群多樣性分析。

      屠宰后,分別在各斷奶仔豬十二指腸、空腸、回腸相同部位取長(zhǎng)度約1~2 cm 的腸道組織,切開小腸于相同位置分別取0.5 cm×0.5 cm 的組織,用生理鹽水清洗干凈后,置于10%甲醛溶液中固定,4℃保存,用于光鏡分析其形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。

      1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

      1.5.1 生長(zhǎng)性能及腹瀉率 試驗(yàn)期間每天精確記錄采食量和腹瀉狀況。試驗(yàn)結(jié)束后,禁食12 h(自由飲水)后稱重,按每個(gè)重復(fù)計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、耗料增重比(F/G)。每天定時(shí)記錄仔豬腹瀉情況,于試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算每個(gè)處理組的腹瀉率。計(jì)算公式:

      腹瀉率=(腹瀉頭數(shù)× 腹瀉天數(shù))/(試驗(yàn)頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù))×100%

      1.5.2 腸道內(nèi)鋅含量 稱取0.2 g 左右腸道內(nèi)容物,將樣品分別加入洗凈的聚四氟乙烯消解管中,并用移液槍加入5 mL 65% HNO3和2 mL HF。之后密閉并按微波消解儀(CEM-MARS6,美國(guó))的相應(yīng)要求及消解程序進(jìn)行消解。消解后,待消解液冷卻到60℃以下,取出消解罐,將消解液置于50 mL 容量瓶中,用少量超純水清洗消解管3 次,清洗液倒入容量瓶中,用超純水定容、搖勻,取適量用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS,賽默飛世爾科技有限公司)檢測(cè)鋅含量。

      1.5.3 腸黏膜形態(tài) 用Leica 組織切片機(jī)將腸段樣品經(jīng)固定、修整、沖洗、脫水、切片(厚度約5 μm)和蘇木精-伊紅(HE)染色制成切片,每個(gè)樣品制作3 個(gè)非連續(xù)性的縱切片和橫切片。用 Leica Qwin 圖像分析儀對(duì)絨毛高度、隱窩深度進(jìn)行顯微測(cè)量和分析,每張縱切片測(cè)定10 個(gè)絨毛高度和隱窩深度,取其平均值作為1 個(gè)測(cè)定數(shù)據(jù),并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度。

      1.5.4 腸道菌群 在無(wú)菌工作臺(tái)中將取出的回腸和結(jié)腸內(nèi)容物各取0.5 g 放入無(wú)菌試管中,并加入4.5 mL 無(wú)菌稀釋液,在磁力震蕩器上震蕩3~5 min,記此液為10-1稀釋液;隨后吸取0.5 mL 稀釋液(10-1)加入到含有4.5 mL無(wú)菌稀釋液的無(wú)菌試管中,震蕩后記為10-2稀釋液,再依次進(jìn)行10-3到10-6倍稀釋。分別將不同腸段、不同稀釋度的稀釋液涂布在各培養(yǎng)基上,采用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),用每克腸道內(nèi)容物中細(xì)菌個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)(Log10CFU/g)表示。每個(gè)稀釋度均設(shè)3 個(gè)重復(fù)。檢測(cè)致病菌大腸桿菌、沙門氏菌的數(shù)量。根據(jù)菌群和細(xì)胞形態(tài)、革蘭氏染色、耗氧性來(lái)鑒定細(xì)菌種類。

      1.5.5 腸道菌群多樣性 將樣品送至上海派森諾生物技術(shù)公司,使用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)回腸和結(jié)腸內(nèi)容物進(jìn)行16S rRNA 基因測(cè)序。

      1.6 統(tǒng)計(jì)分析 所有的數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 進(jìn)行方差分析,采用Duncan's 多重檢驗(yàn)分析組間差異,以P<0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn),結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

      2 結(jié)果

      2.1 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉率的影響 由表2 可知,普通氧化鋅組、納米氧化鋅組和蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組斷奶仔豬平均日增重較對(duì)照組分別提高了19.2%、38.5% 和65.9%(P<0.05);耗料增重比較對(duì)照組分別降低了17.1%、26.7% 和32.7%(P<0.05);腹瀉率分別降低了54.4%、62.5%和87.4%(P<0.05)。

      表2 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉率的影響(n=6)

      2.2 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬回腸食糜中鋅含量的影響 由圖1 可見(jiàn),普通氧化鋅組、納米氧化鋅組和蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組仔豬回腸食糜中鋅含量較對(duì)照組分別提高了16.87%、72.37%和83.97%(P<0.05)。蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組仔豬回腸食糜中鋅含量最高,高達(dá)2 713 mg/kg,高于納米氧化鋅組和普通氧化鋅組(P<0.05)。

      圖1 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬回腸食糜鋅含量的影響(n=6)

      2.3 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道常見(jiàn)致病菌數(shù)量的影響由表3 可見(jiàn),與對(duì)照組相比,蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組斷奶仔豬回腸和結(jié)腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量分別降低了100%、100% 和77.8%、100%(P<0.05);與納米氧化鋅組和普通氧化鋅組相比,蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組回腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量均降低了100%(P<0.05),結(jié)腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量分別降低了52.7%、68.8%和100%、100%(P<0.05)。

      表3 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道中常見(jiàn)致病菌數(shù)量的影響(n=6) log10 CFU/g

      2.4 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)的影響 由表4 可知,與對(duì)照組相比,蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度分別提高了36.8%、43.5% 和61.9%(P<0.05);十二指腸、空腸和回腸絨毛高度/隱窩深度分別提高了92.5%、90.0%和91.4%(P<0.05),且優(yōu)于普通氧化鋅組和納米氧化鋅組(P<0.05)。

      表4 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道絨毛高度和隱窩深度的影響(n=6)

      2.5 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道菌群多樣性的影響 由圖2A 可知,在門水平上,仔豬回腸內(nèi)容物菌群主要由厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteria)、藍(lán)藻菌門(Cyanobacteria)和變形菌門(Proteobacteria)等組成,各組均以厚壁菌門豐度最高,普通氧化鋅組和納米氧化鋅組放線菌門豐度也較高。由圖2B 可知,仔豬結(jié)腸內(nèi)容物菌群主要由厚壁菌門、擬桿菌門(Bacteroidetes)、放線菌門和變形菌門等組成,各組中厚壁菌門豐度最高??梢?jiàn),不同鋅源對(duì)仔豬腸道內(nèi)容物在門水平上的組成差異不顯著,優(yōu)勢(shì)菌群均是厚壁菌門,占比超過(guò)90%。

      由圖2C 可知,在屬水平上,對(duì)照組仔豬回腸以梭菌屬(Clostridium_sensu_stricto_1)為主要優(yōu)勢(shì)菌群,而在試驗(yàn)組仔豬回腸的優(yōu)勢(shì)菌群是乳桿菌屬(Lactobacillus)和鏈球菌屬(Streptococcus)。其中,蒙脫石負(fù)載型氧化鋅組中優(yōu)勢(shì)菌群為乳桿菌屬,占菌群總豐度80% 以上,遠(yuǎn)高于對(duì)照組、普通氧化鋅組和納米氧化鋅組。4 個(gè)組仔豬的結(jié)腸微生物菌群差異不顯著,主要優(yōu)勢(shì)菌群為乳桿菌屬(Lactobacillus)(圖2D)。

      圖2 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道菌群的影響(n=6)

      3 討 論

      3.1 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉率的影響 斷奶仔豬早期因腸道發(fā)育尚未成熟,對(duì)由母乳轉(zhuǎn)變?yōu)楣腆w飼料的消化吸收能力差,易導(dǎo)致腹瀉,生產(chǎn)性能降低。氧化鋅是防止腹瀉常用的飼料添加劑。大量研究表明,高劑量氧化鋅能促進(jìn)仔豬生長(zhǎng),減少腹瀉率,但由于其生物利用率低,會(huì)造成鋅源浪費(fèi)和對(duì)環(huán)境產(chǎn)生污染而被禁用[16]。納米氧化鋅具有粒徑小、比表面積高和高化學(xué)活性等特點(diǎn),可提高對(duì)腸黏膜的吸附性和停留時(shí)間,從而提高鋅的生物利用率[17]。但近年來(lái)發(fā)現(xiàn),納米氧化鋅對(duì)動(dòng)物可能存在一定的毒性作用[18]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,斷奶仔豬日糧中添加1 500 mg/kg 納米氧化鋅提高仔豬平均日增重和降低腹瀉率的效果優(yōu)于3 000 mg/kg普通氧化鋅,并未發(fā)現(xiàn)仔豬表觀上出現(xiàn)異常;日糧中添加600 mg/kg 蒙脫石負(fù)載型氧化鋅在提高仔豬平均日增重和降低腹瀉率方面顯著優(yōu)于3 000 mg/kg 普通氧化鋅和1 500 mg/kg 納米氧化鋅。王彬等[19]研究也表明,飼糧中添加納米氧化鋅可顯著提高斷奶仔豬平均日采食量和平均日增重,降低耗料增重比和腹瀉率。劉漢鎖等[3]研究表明,與普通氧化鋅相比,飼糧中添加1 600 mg/kg納米氧化鋅可顯著降低斷奶仔豬腹瀉率。究其原因可能是由于蒙脫石具有強(qiáng)大的吸附和緩釋、控釋特性,氧化鋅具有強(qiáng)大的殺菌作用,蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅后增強(qiáng)了納米氧化鋅與細(xì)菌的親和力,使其通過(guò)抑制細(xì)菌電子傳遞鏈中酶活性的方式達(dá)到抗菌目的[20]。同時(shí),蒙脫石負(fù)載的納米氧化鋅微粒可在仔豬腸道緩慢釋放,增加微粒與腸壁的接觸面積,延長(zhǎng)接觸時(shí)間,使納米氧化鋅的生物利用率大大提高,因而促進(jìn)了仔豬生長(zhǎng)并降低了腹瀉率[14]。本研究結(jié)果提示,日糧中添加600 mg/kg蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅既能降低鋅的添加量、減輕高鋅給環(huán)境帶來(lái)的壓力,又能促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)、降低腹瀉率,且無(wú)毒無(wú)害,是高鋅日糧理想的替代品。

      3.2 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬回腸食糜中鋅含量的影響 腸道是動(dòng)物生長(zhǎng)的重要保障,是防止病原菌入侵的第一道防線。腸道的健康主要與其免疫功能有關(guān)。鋅對(duì)動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育、免疫功能和腸道健康等方面均具有重要的調(diào)節(jié)作用[21]。腸道食糜鋅含量與其生物利用率關(guān)系密切。Davin 等[22]研究表明,在斷奶仔豬日糧中添加高劑量氧化鋅,回腸、結(jié)腸食糜中鋅含量顯著增加。劉漢鎖等[3]研究表明,納米氧化鋅組斷奶仔豬盲腸和結(jié)腸

      食糜中鋅含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異。而本試驗(yàn)結(jié)果表明,納米氧化鋅在回腸食糜中的鋅含量顯著高于對(duì)照組。可能是納米氧化鋅微粒粒徑小,增加了與斷奶仔豬腸壁的接觸時(shí)間和面積,延長(zhǎng)了與腸道黏膜的作用時(shí)間[25],使其在回腸食糜中鋅含量顯著高于對(duì)照組。本試驗(yàn)結(jié)果表明,蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅組斷奶仔豬回腸食糜中鋅含量顯著高于普通氧化鋅組和納米氧化鋅組,可能與蒙脫石作為載體有關(guān)。首先,斷奶仔豬采食蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅的飼糧進(jìn)入胃之后減少了胃酸對(duì)氧化鋅的破壞,提高了其耐酸性,使其到達(dá)腸道的有效成分多于普通氧化鋅和納米氧化鋅[23]。其次,蒙脫石硅氧四面體片中的硅離子和鋁氧八面體片中的鋁離子在晶體形成中常被低價(jià)的陽(yáng)離子同晶替代,使晶體帶有大量負(fù)電荷,為平衡負(fù)電荷使晶體保持中性,層間會(huì)吸附可交換的陽(yáng)離子,使得蒙脫石具有強(qiáng)大的靜電吸附能力。通過(guò)靜電結(jié)合,蒙脫石吸附于消化道黏膜并與消化道黏液蛋白結(jié)合,提高了消化道黏液的分泌量,并增加其在腸道中的停留時(shí)間[14];同時(shí)蒙脫石具有一定緩釋作用,可使層間納米氧化鋅緩慢釋放,兩者協(xié)同作用,最終提高了其在腸道中的濃度[24]。

      3.3 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道常見(jiàn)致病菌數(shù)量的影響病原微生物的感染和繼發(fā)性感染會(huì)加劇斷奶仔豬腹瀉的發(fā)病率和致死率。研究表明,高劑量氧化鋅可降低小腸的細(xì)菌移位[26],提高腸道菌群的穩(wěn)定性和均勻性。Hu等[27]研究表明,斷奶仔豬飼糧中添加2 000 mg/kg 氧化鋅降低了回腸中梭狀芽孢桿菌的數(shù)量,但對(duì)大腸桿菌無(wú)影響,而添加500 mg/kg 載鋅蒙脫石可降低斷奶仔豬腸道梭狀芽孢桿菌和大腸桿菌的數(shù)量。本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅可殺滅回腸和結(jié)腸中的大腸桿菌和沙門氏菌,其殺菌效果明顯優(yōu)于普通氧化鋅和納米氧化鋅,其原因主要是由于蒙脫石本身有強(qiáng)大的吸附細(xì)菌的能力,氧化鋅有殺菌作用,氧化鋅載入蒙脫石后,使蒙脫石失去了電子平衡后帶有過(guò)剩的正電荷,而大腸桿菌和沙門氏菌在生理pH 條件下呈負(fù)電荷[26]。通過(guò)靜電吸引,細(xì)菌被吸附到蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅上,使富集在蒙脫石表面的氧化鋅直接殺滅細(xì)菌[24]。這也是蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅能顯著降低早期斷奶仔豬腹瀉率的原因之一。

      3.4 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)的影響 鋅作為腸道上皮細(xì)胞發(fā)育成熟的必需微量元素,有利于改善腸道形態(tài),增加蛋白質(zhì)合成和腸道細(xì)胞增殖[28]。機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收主要在小腸,吸收能力的高低與小腸的絨毛高度、隱窩深度以及兩者的比值有關(guān)。小腸絨毛越高,腸道上皮細(xì)胞越多,腸道的吸收能力越強(qiáng)。隱窩深度可反映腸上皮細(xì)胞的形成速率。隱窩深度越淺,表明成熟細(xì)胞向上移動(dòng)速率越高。而絨毛高度/隱窩深度值則可綜合反映腸道的功能狀況。Wang 等[5]研究表明,添加納米氧化鋅可改善斷奶仔豬腸道形態(tài),增加十二指腸和回腸絨毛長(zhǎng)度和絨毛表面積,降低隱窩深度。Hu 等[27]研究表明,斷奶仔豬飼糧中添加500 mg/kg 載鋅蒙脫石和2 000 mg/kg 氧化鋅使空腸黏膜絨毛高度和絨毛高度/ 隱窩深度值顯著增加。本試驗(yàn)結(jié)果也表明,3 種鋅源飼料對(duì)腸黏膜形態(tài)均有改善作用,且蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅組斷奶仔豬十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度、絨毛高度/隱窩深度值顯著優(yōu)于普通氧化鋅組和納米氧化鋅組。分析其原因,一方面是由于蒙脫石本身可在消化道內(nèi)形成一層保護(hù)膜,對(duì)各種病毒、細(xì)菌及所產(chǎn)生的毒素等有良好的吸附能力,阻止病原菌對(duì)腸上皮細(xì)胞的侵入,從而保護(hù)腸黏膜[24];另一方面,蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅能顯著降低腸道內(nèi)大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量,且氧化鋅可以在腸道內(nèi)持續(xù)緩釋,從而保護(hù)了腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性。此外,蒙脫石能夠與腸道黏液蛋白靜電結(jié)合,增加黏膜厚度,促進(jìn)腸上皮細(xì)胞增殖和黏液分泌,增加黏液量,改善黏液質(zhì)量[14],從而對(duì)消化道黏膜起保護(hù)和修復(fù)作用,促進(jìn)腸道發(fā)育。

      3.5 不同鋅源對(duì)斷奶仔豬腸道微生物多樣性的影響 在正常情況下,仔豬腸道內(nèi)的有害菌群和有益菌群相互制約、相互依賴,以維持腸道菌群動(dòng)態(tài)平衡。仔豬斷奶產(chǎn)生應(yīng)激會(huì)造成腸道菌群失調(diào)[29],導(dǎo)致仔豬腹瀉、飼料轉(zhuǎn)化率下降。焦樂(lè)飛[15]研究表明,在門水平上,添加2 g/kg 載銅/鋅蒙脫石顯著提高了斷奶仔豬結(jié)腸厚壁菌門相對(duì)豐度,降低了擬桿菌門和變形菌門相對(duì)豐度;在屬水平上,顯著提高了乳桿菌屬、雙歧桿菌屬和優(yōu)桿菌屬等有益菌屬相對(duì)豐度,顯著降低了梭菌屬和鏈球菌屬等有害菌屬相對(duì)豐度。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在門水平上,3 種鋅源組回腸和結(jié)腸中均以厚壁菌門相對(duì)豐度較高;在屬水平上,3 種鋅源組優(yōu)勢(shì)細(xì)菌種屬為乳桿菌屬、雙歧桿菌屬,大大降低了回腸和結(jié)腸中梭菌屬和鏈球菌屬的相對(duì)豐度。飼糧中添加蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅能夠有效降低仔豬回腸和結(jié)腸中梭菌屬和鏈球菌屬等致病菌的豐度,顯著提高優(yōu)勢(shì)菌群——乳桿菌屬的豐度,分析其原因可能與形成蒙脫石-有益菌生物膜有關(guān)。雙歧桿菌和乳酸桿菌可通過(guò)代謝產(chǎn)生乳酸,乳酸在蒙脫石和益生菌之間形成酸性微環(huán)境,使細(xì)菌表面上帶負(fù)電的磷酸被蒙脫石表面的陽(yáng)離子吸引,促進(jìn)細(xì)菌聚集而形成蒙脫石-有益菌生物膜[15],減少益生菌受腸道內(nèi)消化酶、膽鹽等破壞,進(jìn)而利于有益菌繁殖。綜上,蒙脫石負(fù)載納米氧化鋅在一定程度上具有優(yōu)化和平衡腸道菌群結(jié)構(gòu)、增強(qiáng)腸道菌群穩(wěn)定性、保護(hù)腸黏膜形態(tài)完整性、降低仔豬腹瀉、促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)的作用。

      4 結(jié) 論

      本研究結(jié)果表明,斷奶仔豬日糧中添加600 mg/kg蒙脫石負(fù)載型氧化鋅能提高仔豬生長(zhǎng)性能,降低腹瀉率,改善腸黏膜形態(tài)和腸道菌群組成,其效果優(yōu)于添加3 000 mg/kg 普通氧化鋅和1 500 mg/kg 納米氧化鋅,是高鋅日糧中鋅源理想的替代品。

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