夏幫坤 張杏杏 劉婷婷

作者單位： 236000 安徽阜陽 阜陽市人民醫(yī)院輸血科

新生兒溶血病(hemolytic disease of the newborn，HDN)指由于母嬰血型不合，母體產(chǎn)生的血型抗體通過胎盤與胎兒體內(nèi)的血型抗原結(jié)合而發(fā)生的免疫性溶血病變，若不及時治療，可能會誘發(fā)新生兒膽汁粘稠綜合征等疾病，嚴(yán)重威脅患兒的生命健康[1-2]。目前，臨床常通過溶血三項對HDN進(jìn)行診斷，臨床參考價值較高。研究[3-5]顯示，因溶血三項易受血液抽取時間、存放條件等因素的影響，通過單一檢測溶血三項診斷HDN存在一定的缺陷。網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平為臨床評估新生兒黃疸、進(jìn)行性貧血的常用指標(biāo)，有研究[6-7]發(fā)現(xiàn)，網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素對HDN的診斷具有一定的積極作用。本文以136例疑似HDN的新生兒為研究對象，探討溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血清總膽紅素三者聯(lián)合檢測對HDN的診斷價值，旨為臨床探尋便捷、有效的HDN診斷方法提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析阜陽市人民醫(yī)院2020年2月至2021年12月收治的136例疑似HDN的新生兒患者的臨床資料，其中男患兒74例，女患兒62例；日齡2 h～20 d，平均(6.91±1.85)d；血型：A型61例，B型44例，O型31例；以臨床診斷為標(biāo)準(zhǔn)，分為HDN組(102例)和非HDN組(34例)，HDN組：男患兒52例，女患兒50例；日齡2 h～18 d，平均(6.83±1.62)d；非HDN組：男患兒22例，女患兒12例；日齡2 h～20 d，平均(7.16±1.94)d；兩組基線資料對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：HDN患兒符合臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]：依據(jù)溶血三項檢測結(jié)果并結(jié)合臨床黃疸、貧血癥狀確診；男患兒日齡<28 d；母親血型均為O型RhD陽性，且新生兒血型與母親血型不合；單胎妊娠；患兒家屬對本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：顱內(nèi)出血、頭顱血腫史者；先天性膽/肝系統(tǒng)疾??；合并嚴(yán)重感染或重要臟器功能不全者。

1.2 方法 比較兩組網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平；繪制溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血清總膽紅素單檢及三者聯(lián)合檢測診斷HDN的受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線，比較上述各指標(biāo)的曲線下面積(area under the curve，AUC)。

1.2.1 溶血三項檢測 抽取所有研究對象靜脈血2 mL，采用酸放散法并使用抗人球蛋白檢測卡、人ABO血型正/反定型及Rh(D)血型檢測卡、專用檢測卡離心機(jī)及37℃試劑卡孵育器依次行直抗試驗、游離試驗及釋放試驗，試劑盒均購于長春博迅生物技術(shù)公司；溶血三項判定HDN[8]：溶血三項檢測結(jié)果均為陰性[直抗試驗(-)、游離試驗(-)、釋放試驗(-)],可判定為HDN；僅直抗或游離試驗單項陽性，可判定為疑似HDN；釋放試驗陽性或任何兩項或兩項以上陽性，可判定為非HDN。

1.2.2 網(wǎng)織紅細(xì)胞及總膽紅素檢測 采用全自動血液分析儀(型號：邁瑞bc-6900，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)。采用全自動生化分析儀(型號：XC8001，四川新健康成生物股份有限公司)檢測血清總膽紅素水平(重氮法)。

2 結(jié)果

2.1 溶血三項檢測與臨床診斷HDN結(jié)果比較 依據(jù)溶血三項檢測結(jié)果，診斷HDN患兒103例，非HDN患兒33例。溶血三項診斷HDN的靈敏度、特異度分別為90.20%(92/102)、67.65%(23/34)。見表1、2。

表1 溶血三項檢測結(jié)果

表2 溶血三項檢測與臨床確診HDN結(jié)果比較

2.2 兩組患兒網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平比較 HDN組網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平均高于非HDN組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患兒網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平比較

2.3 溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血清總膽紅素單檢及三者聯(lián)合檢測對HDN的診斷價值 繪制溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血清總膽紅素聯(lián)合檢測診斷HDN的ROC曲線[病理診斷為HDN以1表示，病理診斷為非HDN以0表示；溶血三項檢測結(jié)果為真陽(病理診斷為HDN，溶血三項檢測結(jié)果也為HDN)用1表示，真陰用0表示(病理診斷為非HDN，溶血三項檢測結(jié)果也為非HDN)，假陽用0表示(病理診斷為HDN，而溶血三項檢測結(jié)果為非HDN)，假陰(病理診斷為非HDN，而溶血三項檢測結(jié)果為HDN)用1表示]，結(jié)果顯示，網(wǎng)織紅細(xì)胞與血清總膽紅素對HDN早期診斷的最佳截斷點(diǎn)分別為5.06 %、200.43 μmol/L，溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞與血清總膽紅素三者聯(lián)合的靈敏度、特異度及AUC分別為96.08%、88.24%和0.937。見圖1、表4。

圖1 溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞與血清總膽紅素聯(lián)合檢測診斷HDN的ROC

表4 溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血清總膽紅素聯(lián)合對HDN診斷的ROC分析

3 討論

HDN是致使新生兒病理性黃疸常見病因，病因主要為妊娠或分娩過程中母親免疫球蛋白G抗體由胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)而引發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)，致使紅細(xì)胞生理結(jié)構(gòu)被破壞[10-12]。臨床多依賴溶血三項試驗結(jié)果診斷HDN，但單一依據(jù)溶血三項診斷的準(zhǔn)確度有待提高[13]。研究[14]發(fā)現(xiàn)，網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素均與HDN的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。本文探討溶血三項聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素檢測對HDN的早期診斷價值，旨為提高臨床早期診斷HDN的思路及提高診斷準(zhǔn)確性提供參考依據(jù)。

本研究顯示，溶血三項診斷HDN的靈敏度、特異度分別為90.20%、67.65%，提示溶血三項檢測結(jié)果中存在假陰性情況，有漏診風(fēng)險，與江藍(lán)玉等[15]研究結(jié)果相近，分析原因可能是由于血液抽取時間、抽血后樣本保存時間、檢測操作等因素的影響[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，HDN組網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平均高于非HDN組(P<0.05)，表明HDN患兒網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素水平明顯偏高。分析原因：網(wǎng)織紅細(xì)胞為一種不成熟的細(xì)胞，其水平可直接反映骨髓紅細(xì)胞的生成能力，且還與HDN的發(fā)生具有一定的相關(guān)性[17]。HDN早期癥狀多表現(xiàn)為黃疸，新生兒機(jī)體中血清總膽紅素可明顯升高；同時新生兒出生后由于自身清除膽紅素的能力較低，致使血液中膽紅素未能得到及時清除而聚集，近而致使HDN血清總膽紅素水平異常偏高[18-19]。ROC分析顯示，網(wǎng)織紅細(xì)胞與血清總膽紅素對HDN早期診斷的最佳截斷點(diǎn)分別為5.06%、200.43 μmol/L，溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞與血清總膽紅素三者聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度及AUC分別為96.08%、88.24%和0.937，提示溶血三項、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血清總膽紅素聯(lián)合檢測診斷HDN有較高的診斷價值。此可能是溶血三項主要包括直抗試驗、游離試驗及釋放試驗，其中釋放試驗為三項中較為重要的，由于其采用間接的檢測方法具有較高的準(zhǔn)確度，陽性即可診斷[20]。網(wǎng)織紅細(xì)胞為血液中新生紅細(xì)胞的標(biāo)志，能夠反映骨髓紅系的生成狀態(tài)，同時也是新生紅細(xì)胞的標(biāo)志[21]。在新生兒期過高的血清總膽紅素水平可致使膽紅素在體內(nèi)蓄積，并透過血腦屏障沉積于神經(jīng)系統(tǒng)中，其毒性常會致使基底神經(jīng)節(jié)、海馬、及下丘腦神經(jīng)核壞死，且可對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘造成一定的損傷，同時還可能嚴(yán)重影響神經(jīng)元的正常能量代謝[22]。

綜上所述，溶血三項聯(lián)合網(wǎng)織紅細(xì)胞與血清總膽紅素對HDN早期診斷效能較高，可作為臨床HDN早期診斷的重要參考指標(biāo)，建議在臨床中對疑似HDN患兒進(jìn)行溶血三項檢測的同時，還應(yīng)加強(qiáng)對網(wǎng)織紅細(xì)胞、血清總膽紅素，以提高臨床診斷的準(zhǔn)確性。由于本研究樣本量不大，對結(jié)果可能有一定的偏倚，擬在后續(xù)的研究中擴(kuò)大樣本量，對本結(jié)果進(jìn)行近一步的驗證。