紫花苜蓿和飼料桑混合青貯對(duì)發(fā)酵品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分的影響

王 誠(chéng)，董桂紅，何榮彥，范秋蘋(píng)，翟桂玉，劉德娟

（1.山東健源生物科技有限公司，山東泰安 271000；2.山東省畜牧總站，山東濟(jì)南 250100；3.泰安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東泰安 271000）

近年來(lái)隨著人民生活品質(zhì)不斷提升，我國(guó)對(duì)牛羊肉和奶制品等畜產(chǎn)品的需求量大幅度增長(zhǎng)，給畜牧業(yè)帶來(lái)了巨大的挑戰(zhàn)。畜牧業(yè)飼料主要以粗飼料和精料為主，目前飼料供給不足，粗飼料的產(chǎn)量和質(zhì)量急需提高，玉米、大豆等大量依賴進(jìn)口，飼料價(jià)格上漲，養(yǎng)殖成本增加，這些嚴(yán)重制約了畜牧業(yè)的生產(chǎn)與發(fā)展。因此充分開(kāi)發(fā)利用我國(guó)的飼草資源和木本植物資源，研究新型飼料資源已成為畜牧業(yè)飼料研究的一大課題[1,2]。

紫花苜蓿是多年生飼草作物，因適應(yīng)能力強(qiáng)，耐寒耐旱，分布非常廣泛，而且產(chǎn)草量大，粗蛋白、干物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分較高，因此成為重要的青貯原料[3]。但苜蓿在大規(guī)模應(yīng)用時(shí)有以下兩個(gè)限制因素：①傳統(tǒng)牧草加工過(guò)程中，采用曬干或烘干方法會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分大量流失，飼用價(jià)值降低，而且費(fèi)時(shí)費(fèi)力，增加人工和成本[4]；②苜蓿本身可溶性糖含量較低、含水量高、緩沖能高、表面附著乳酸菌數(shù)量少，單獨(dú)青貯時(shí)易造成好氧菌大量繁殖，腐敗變質(zhì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，難以制備優(yōu)質(zhì)青貯飼料。因此苜蓿青貯時(shí)必須要采用一定的青貯技術(shù)，眾多研究表明采用混合青貯的方法能顯著提高發(fā)酵品質(zhì)，比如在苜蓿青貯過(guò)程中添加糖蜜、玉米粉、酒糟或可溶性糖含量較高的禾本科植物等，或者在苜蓿原料中添加對(duì)發(fā)酵有利的青貯添加劑，如乳酸菌、纖維素酶、甲酸等來(lái)制備優(yōu)質(zhì)的青貯飼料[3-5]。

飼料桑是多年生木本植物，與“牧草之王”的紫花苜蓿相比，具有粗蛋白、碳水化合物含量高、纖維素含量低、氨基酸種類(lèi)豐富的特點(diǎn)，同時(shí)含有谷甾醇、異槲皮苷、黃酮類(lèi)等多種生物活性物質(zhì)，具有抗菌消炎、提高畜禽動(dòng)物免疫力等功能[6,7]。因此桑葉可用來(lái)制備優(yōu)質(zhì)青貯飼料，青貯后不僅便于儲(chǔ)存，還可以大幅度降低桑葉中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，顯著提高桑葉青貯的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，有利于畜禽的消化和吸收[8]。

因此，該試驗(yàn)通過(guò)研究不同比例紫花苜蓿與飼料桑制備的混合青貯在發(fā)酵指標(biāo)和營(yíng)養(yǎng)成分上的差異和變化，篩選出紫花苜蓿與飼料桑制備優(yōu)質(zhì)混合青貯的適宜比例，為擴(kuò)大苜蓿與飼料桑青貯的應(yīng)用，緩解畜牧業(yè)飼料短缺，尋找新型飼料資源提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

布氏乳桿菌和植物乳桿菌均由山東健源生物科技有限公司自主分離，經(jīng)發(fā)酵、冷凍干燥制得高活性菌粉，二者混合比例為1∶1，活菌數(shù)為2.0×1010CFU/g。

試驗(yàn)時(shí)間為：2021 年7 月5 日至2022 年8 月19日，苜蓿與飼料桑種植于山東省泰安市管理區(qū)試驗(yàn)地，將飼料桑的枝葉與刈割后的苜蓿晾曬24h，用鍘草機(jī)將其切碎至3～5cm 備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 青貯飼料制備

該研究采用單因素試驗(yàn)，紫花苜蓿與飼料桑按照鮮重比10∶0（CK 組)、7∶3（A 組)、5∶5（B 組)、3∶7（C 組)混合，共計(jì)4 組，每組重復(fù)3 次。將1kg 待青貯原料與1.0×107CFU/g 復(fù)合乳酸菌混合均勻，裝入規(guī)格為24cm×40cm 的聚乙烯袋中，壓實(shí)抽真空后封口，置于室溫陰涼處厭氧發(fā)酵45d 后開(kāi)袋，現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)混合青貯的感官品質(zhì)并進(jìn)行發(fā)酵指標(biāo)、營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定。

1.2.2 青貯發(fā)酵指標(biāo)及營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定

（1)青貯飼料感官評(píng)價(jià)

依據(jù)德國(guó)農(nóng)業(yè)協(xié)會(huì)（DLG)青貯感官相關(guān)的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A的色澤、質(zhì)地和氣味進(jìn)行評(píng)定分級(jí)，并分為優(yōu)、良、中、下4 個(gè)等級(jí)[9]。

（2)青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定

采用精密pH 計(jì)測(cè)定混合青貯的pH，苯酚-次氯酸比色法測(cè)定氨態(tài)氮含量，計(jì)算氨態(tài)氮/總氮，采用高效液相色譜儀檢測(cè)乳酸含量，氣相色譜儀檢測(cè)乙酸、丙酸和丁酸含量[10]。

（3)青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》相關(guān)檢測(cè)方法，分別采用65℃烘干48h 方法和凱氏定氮法檢測(cè)混合青貯中干物質(zhì)和粗蛋白含量[11]。采用范氏法測(cè)定中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量[10,12]。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過(guò)Excel 2010 初步整理并計(jì)算平均值與標(biāo)準(zhǔn)差，再使用SPSS 26.0 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA)和多重比較（Duncan′s)，P＜0.05 表示差異顯著[12]。

2 結(jié)果

2.1 紫花苜蓿與飼料桑混合青貯感官評(píng)價(jià)

由表1 可知，各試驗(yàn)組青貯的色澤、質(zhì)地和氣味各方面表現(xiàn)良好，感官等級(jí)為優(yōu)等，A 組的感官評(píng)分最高為19 分，而CK 組苜蓿單獨(dú)青貯質(zhì)地略黏稠，部分莖葉結(jié)構(gòu)受損，有微弱的丁酸臭味。說(shuō)明紫花苜蓿與飼料桑混合青貯能夠顯著提高青貯整體感官品質(zhì)，且紫花苜蓿與飼料桑比例為7∶3 時(shí)混合青貯感官評(píng)分最高。

表1 紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A的感官評(píng)定

2.2 紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A的發(fā)酵品質(zhì)

由表2 可知，與紫花苜蓿單獨(dú)青貯相比，三組混合青貯的乳酸、乙酸含量顯著增加（P＜0.05)，pH、丁酸、氨態(tài)氮/總氮含量顯著降低（P＜0.05)。其中乳酸含量分別增加了0.58%、0.53%和0.46%；乙酸含量分別增加了0.59%、0.55%和0.47%；pH 分別降低了0.39、0.36 和0.26；氨態(tài)氮/總氮含量分別降低了1.25%、1.15%和0.97%；A 組的丁酸含量未檢出，B組和C 組的丁酸含量分別降低了0.08%和0.05%；A組和B 組的丙酸含量分別增加了0.11%和0.10%，與CK 組差異顯著（P＜0.05)，C 組混合青貯的丙酸含量增加了0.08%，與CK 組差異不顯著。以上數(shù)據(jù)表明，紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A的發(fā)酵品質(zhì)要顯著優(yōu)于紫花苜蓿單獨(dú)青貯，當(dāng)紫花苜蓿與飼料桑比例為7∶3時(shí)混合青貯發(fā)酵品質(zhì)最好。

2.3 紫花苜蓿與飼料桑混合青貯營(yíng)養(yǎng)成分分析

由表3 可知，隨飼料桑添加比例的增加，A 組、B 組與C 組混合青貯的粗蛋白含量顯著高于CK 組（P＜0.05)，干物質(zhì)、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維含量顯著低于CK 組（P＜0.05)。其中三組混合青貯的粗蛋白含量分別提高了2.95%、3.32%和3.59%；干物質(zhì)含量分別降低了2.86%、6.44%和9.48%；中性洗滌纖維含量分別降低了4.12%、4.91 和5.65%；酸性洗滌纖維含量分別降低了3.47%、4.43%和4.95%。三組混合青貯之間的粗蛋白含量無(wú)顯著性差異，C 組的干物質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量顯著低于A組（P＜0.05)。結(jié)果表明采用不同比例紫花苜蓿與飼料桑制備的混合青貯各營(yíng)養(yǎng)成分有不同程度的變化，添加飼料桑能夠明顯改善混合青貯的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。

表3 紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A的營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A對(duì)感官品質(zhì)的影響

紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A的感官品質(zhì)主要采用物理學(xué)評(píng)價(jià)方法，對(duì)色澤、質(zhì)地和氣味三個(gè)方面進(jìn)行評(píng)分。從試驗(yàn)結(jié)果看，試驗(yàn)組的青貯感官品質(zhì)要顯著優(yōu)于苜蓿單獨(dú)青貯，可能原因是紫花苜蓿中可溶性糖含量低，單獨(dú)青貯時(shí)乳酸菌發(fā)酵進(jìn)程較慢，導(dǎo)致有害菌增殖，引起部分青貯腐敗，也證明了紫花苜蓿難以單獨(dú)青貯的特點(diǎn)。添加飼料桑后，青貯中可溶性糖含量有所提高，乳酸菌快速繁殖使pH 降低，抑制了有害菌的增殖，從而改善混合青貯的整體感官品質(zhì)。

3.2 紫花苜蓿與飼料?；旌锨噘A對(duì)發(fā)酵品質(zhì)的影響

該研究主要將pH 值、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸和氨態(tài)氮含量作為衡量青貯發(fā)酵品質(zhì)的指標(biāo)，pH 值越低說(shuō)明青貯發(fā)酵品質(zhì)越好，乳酸是降低pH 的主要物質(zhì)，乙酸有利于降低pH 且延長(zhǎng)有氧穩(wěn)定性，少量丙酸能有效抑制霉菌和酵母菌繁殖。該研究中除CK組，其余各組的pH 均在4.2 以下，表明青貯發(fā)酵效果較好。各試驗(yàn)組的乳酸和乙酸含量顯著高于CK組，丁酸含量顯著低于CK 組，這與萬(wàn)江春、李龍興等[13,14]的研究結(jié)果基本一致，主要因?yàn)轱暳仙Ｖ锌扇苄蕴呛枯^高，能夠促進(jìn)乳酸菌快速繁殖，植物乳桿菌大量產(chǎn)生乳酸，布氏乳桿菌生成乳酸和乙酸等物質(zhì)，有效抑制梭菌、酵母菌等繁殖活動(dòng)[15,16]。

氨態(tài)氮含量用來(lái)指示青貯中粗蛋白質(zhì)的分解程度，其含量越低代表蛋白分解越少，發(fā)酵品質(zhì)越好[9,17]。各試驗(yàn)組的氨態(tài)氮含量顯著低于CK 組，主要原因是混合青貯中乳酸菌迅速繁殖，產(chǎn)生乳酸降低了pH，抑制了梭菌、酵母菌、霉菌的增殖和蛋白酶的活性，減少了粗蛋白的分解[18]。但隨著飼料桑添加比例增大，青貯中粗蛋白含量升高，氨態(tài)氮的生成量會(huì)相對(duì)增多，所以C 組的氨態(tài)氮含量顯著高于A 組，這與付錦濤等[19]的研究結(jié)果一致。

3.3 紫花苜蓿與飼料桑混合青貯對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的影響

各試驗(yàn)組的CP 含量顯著高于CK 組，而干物質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量均顯著低于CK組，隨著飼料桑添加比例增大，混合青貯的干物質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量逐漸降低，粗蛋白含量逐漸上升，這與眾多混合青貯研究的結(jié)果一致[20-22]，原因是飼料桑相對(duì)于紫花苜蓿具有粗蛋白含量高、纖維含量低的特點(diǎn)。因此，采用紫花苜蓿和飼料?；旌锨噘A，既解決了紫花苜蓿單獨(dú)青貯效果不佳的問(wèn)題，又能改善混合青貯營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，提高青貯飼料的消化率和利用率。

4 結(jié)論

將紫花苜蓿與飼料桑進(jìn)行混合青貯，顯著提高了青貯飼料的整體感官品質(zhì)和發(fā)酵品質(zhì)，明顯改善了混合青貯的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，綜合考慮混合青貯的發(fā)酵品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，以苜蓿與飼料桑鮮重比7∶3 為宜。