中草藥對大菱鲆機體非特異性免疫力的影響

李 惠

(大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務中心，遼寧大連 116000)

大菱鲆(Scophthalmusmaximus)是中國北方主要的海水養(yǎng)殖魚類之一，屬于鰈型目，鲆科、菱鲆屬。它天然分布于大西洋東側(cè)歐洲沿岸，自北歐南部直至北非北部均有分布，黑海和地中海也有分布，主要分布還是北海和黑海西部沿岸。全部歐洲和西亞沿岸年總捕撈量不超過1萬噸。同時，大菱鲆身體扁平近似圓形，雙眼位于身體左側(cè)，有眼側(cè)呈褐色，有點狀黑色素和少量皮刺，無眼側(cè)光滑呈白色，背鰭與臀無硬棘，頭部及尾鰭均較小，身體中部肉厚，內(nèi)臟團小，全部身體的可食用部分比牙鲆多。當前隨著養(yǎng)殖的規(guī)模化、集約化，養(yǎng)殖密度逐漸增大，致使大菱鲆機體的免疫力下降，頻發(fā)疾病[1]。過去養(yǎng)殖生產(chǎn)中，經(jīng)常使用抗生素類藥物預防治療養(yǎng)殖疾病，但飼料端抗生素的禁用，尋找安全、高效、綠色、低殘留、無耐藥性的飼料添加劑迫在眉睫。其中，中草藥具有來源廣泛、天然、安全、綠色的特點被研究者廣泛研究與關注[2]。中草藥具有藥理與營養(yǎng)的雙重作用，作為飼料添加劑不僅可以為動物機體提供營養(yǎng)，還能預防治療一些疾病[3]。研究表明，復方中草藥制劑可以有效抑制大菱鲆養(yǎng)殖中的源哈維氏弧菌[3]。郭萍萍等[4]研究表明，在大菱鲆養(yǎng)殖中使用0.05%的中草藥制劑可以有效提高大菱鲆機體的生長性能。但目前，關于中草藥制劑在大菱鲆機體非特異性免疫功能方面的研究結果甚少。因此，該試驗以大菱鲆為研究對象，探究不同劑量的中草藥制劑對其機體非特異性免疫力的影響，并確定中草藥制劑在大菱鲆生產(chǎn)中的最適添加水平，為中草藥制劑在大菱鲆生產(chǎn)中的科學、合理推廣與應用提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 中草藥制劑

該研究使用的中草藥制劑由黨參(Codonopsispilosula)、茯苓(Wolfiporiacocos)、甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)、五倍子(RhuschinensisMill.)和生姜(ZingiberofficinaleRoscoe)組成，各組分的比例為6∶3∶2∶1∶1，購自大連當?shù)刂兴幉氖袌觯陨?種中草藥粉碎后，過40目篩，備用。

1.2 大菱鲆

該研究選取大小均勻、健康的大菱鲆，體重為(20.10±0.05)g，由大連水產(chǎn)養(yǎng)殖集團有限公司提供。

1.3 試驗方法

試驗選擇120尾體重相近、健康的大菱鲆按照單因素試驗設計，分成4組，每組30尾大菱鲆。對照組大菱鲆投喂基礎飼料，試驗1組大菱鲆投喂基礎飼料+0.5%的中草藥制劑，試驗2組大菱鲆投喂基礎飼料+1.0%的中草藥制劑，試驗3組大菱鲆投喂基礎飼料+1.5%的中草藥制劑。試驗周期為4周。試驗結束檢測各組大菱鲆血清非特異性免疫指標。試驗大菱鲆的基礎飼料原料構成和營養(yǎng)成分含量見表1。

表1 試驗大菱鲆的基礎飼料原料構成和營養(yǎng)成分含量

1.3 大菱鲆日常養(yǎng)殖管理

正式試驗開始前，所有大菱鲆放在水族箱中馴養(yǎng)14d，適應環(huán)境后進行正式試驗。養(yǎng)殖期間，大菱鲆每日投喂2次飼料，分別在早上8:30和晚上18:00投喂，投喂量約為大菱鲆體重的2.5%。每日換水量約為1/3。24hrs供氧，水溫約為16℃，pH值約為8.2，溶解氧大于7mg/L，氨氮含量小于0.5mg/L。

1.4 檢測指標

試驗結束后，每組挑選10尾大菱鲆采集尾靜脈血液，4000轉(zhuǎn)離心5mins后，收集上層血清用于檢測溶菌酶、免疫球蛋白M、補體C3、補體C4、過氧化氫酶等指標。檢測方法參考南京建成生物工程研究所的試劑盒說明書。

1.5 數(shù)據(jù)分析

大菱鲆非特異性免疫指標數(shù)據(jù)采用SPSS26進行顯著性及兩兩比較分析，P<0.05表示數(shù)據(jù)差異顯著。

2 結果

不同劑量的中草藥制劑對大菱鲆機體非特異性免疫指標的影響見表2，由表2數(shù)據(jù)可知，試驗2組大菱鲆血清中的溶菌酶、補體C3和過氧化氫酶水平顯著高于對照組(P<0.05)，而試驗1組和試驗3組大菱鲆血清中的溶菌酶、補體C3和過氧化氫酶水平有比對照組提高的趨勢，但未達到顯著性水平(P>0.05)。結果表明，在大菱鲆生產(chǎn)中使用1.0%的中草藥制劑可以有效提高大菱鲆機體的非特異性免疫功能。

表2 不同劑量的中草藥制劑對大菱鲆機體非特異性免疫指標的影響

3 討論

魚類機體中的非特異性免疫系統(tǒng)是其抵御病原微生物入侵的第一道防線，其功能的強弱關系魚類機體的健康狀態(tài)及生長性能。中草藥中含有多種生物活性成分，如生物堿、多酚、黃酮及氨基酸等，可以通過調(diào)節(jié)動物機體的免疫功能促進機體生長發(fā)育。該試驗中，試驗2組大菱鲆血清中的溶菌酶、補體C3和過氧化氫酶水平顯著高于對照組，試驗1組和試驗3組大菱鲆血清中的溶菌酶、補體C3和過氧化氫酶水平有提高的趨勢，但未達到顯著性水平，結果表明，在大菱鲆生產(chǎn)中使用1.0%的中草藥制劑可以有效提高大菱鲆機體的非特異性免疫功能，但中草藥制劑的添加量不易過大，添加量過高導致機體免疫力略微降低，可能是超出了大菱鲆機體的耐受力。高學政等[5]等研究發(fā)現(xiàn)，在大菱鲆飼料中添加1.0%的中草藥制劑可以有效提高血清中溶菌酶活性及補體C3含量，且改善了大菱鲆的增重率、特定生長率、餌料系數(shù)、肝體比、臟體比等生長性能數(shù)據(jù)。中草藥制劑改善魚類機體的免疫功能與其富含的活性成分有關，中草藥中的生物活性成分可以提高魚類機體內(nèi)吞噬細胞的功能，提高殺菌能力，抵抗細菌、病毒等對機體的危害，提高魚類機體的抗應激能力及抗病力，改善機體健康，進而提高機體的免疫功能。

4 結論

該試驗條件下，在大菱鲆養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用適量的中草藥制劑可以提高大菱鲆血清中溶菌酶、補體C3和過氧化氫酶水平，提高了機體的非特異性免疫功能，且中草藥在大菱鲆飼料中的最適添加水平為1.0%。