宮傲磊，陳 東，王家輝，鄭小挺，王那欽

（1. 海南醫(yī)學(xué)院，海南 ?？?571199；2. 南昌市醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所附屬醫(yī)院/南昌市生殖醫(yī)院，江西 南昌 330001；3. 海南省中醫(yī)院，海南 ?？?570203）

miRNA 是一類長度約19～24 nt 的非編碼單鏈RNA，其在高等真核生物進化過程中具有高度保守性，研究表明占人類基因組3%的miRNA，參與調(diào)控大約90% 的基因表達，miRNA 同其靶基因mRNA 的3'-UTR 區(qū)堿基配對（動物主為不完全配對），主要通過調(diào)控靶mRNA 的翻譯來沉默基因的表達，與機體代謝、免疫、炎癥、腫瘤等生理病理過程有密切聯(lián)系［1，2］。文獻研究表明以miRNA 為切入點去闡明諸種疾病的發(fā)病、診斷及治療等各個環(huán)節(jié)的作用是一個熱點話題［3，4］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為CNP 發(fā)病機制復(fù)雜多樣，尚未達成統(tǒng)一認知，每種假說都試圖在某一層面闡釋CNP 發(fā)病機制，具有一定的局限性，對其發(fā)病機制尚不能全面概括，CNP 的發(fā)病過程可能是多種機制綜合作用結(jié)果或者某種因素起主導(dǎo)作用［5-8］。介于對CNP 發(fā)病機制尚未達成統(tǒng)一認識，臨床上主要根據(jù)患者癥狀、體征及EPS 檢查等進行診斷與治療［9-12］，難以收到滿意療效。目前研究表明CNP 患者與健康男性EPS 中的miRNA存在差異性表達，顯著差異表達的miRNA 對CNP發(fā)病相關(guān)的免疫、炎癥、氧化應(yīng)激等過程具有一定的調(diào)節(jié)作用。因此，miRNA 在CNP 發(fā)病過程中可能具有重要的調(diào)節(jié)作用［13］。近年，以轉(zhuǎn)錄組miRNA為切入點去探究CNP 的發(fā)病機制或者作為診斷標(biāo)志物及藥物靶標(biāo)的報道逐漸受到重視［14］。本文就近年來miRNA 與CNP 相關(guān)的研究進展綜述如下。

1 CNP 與miRNA 表 達 譜

miRNA 表達具有時空特異性，miRNA 在不同的組織、細胞、不同干預(yù)措施或相同干預(yù)措施不同狀態(tài)下表達譜會有明顯的改變［2］。國內(nèi)外研究顯示，miRNA 在CNP 發(fā)病過程中表達譜發(fā)生明顯改變，可能與CNP 發(fā)病機制之間存在一定的關(guān)聯(lián)性。

1.1 CNP 患 者EPS 中miRNA 表 達譜

目前前列腺炎的分類及診斷標(biāo)準是根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院（national institutes of health，NIH）確定的，其中CNP 占臨床前列腺炎的90%以上［15］。根據(jù)患者有無細菌感染及EPS 中白細胞計數(shù)診斷及治療前列腺炎具有一定的局限性，實際臨床工作中主要還是根據(jù)患者的癥狀、體征及肛門指診對CNP 進行診斷治療，目前還未有特異而靈敏的生化指標(biāo)。

miRNA 表達具有時空特異性，不同病理條件下其表達譜會有明顯的不同，這些特異表達的miRNA或許能夠成為CNP 的分型診斷指標(biāo)［16］。Chen 等［17］采用新一代測序技術(shù)（next generation sequencing，NGS）鑒定EPS 中miRNA 的特征表達譜，得出40名健康男性和39 名CNP 患者EPS 中分別發(fā)現(xiàn)41和43 個主要的EPS-miRNA。其中與20 名健康男性相比，20 名患者中22 個豐富的EPS-miRNA 上調(diào)≥2 倍，其是miR-21-5p 對ⅢA 型前列腺炎患者具有較高的診斷準確率，同時發(fā)現(xiàn)miR-141-3p、miR-21-5p、miR-103a-3p 與ⅢA 型前列腺炎患者疼痛評分具有密切關(guān)聯(lián)性。實驗通過NGS 對患者EPS 中分泌的miRNA 表達譜進行全面的分析，發(fā)現(xiàn)分泌的miRNA 能夠在EPS 中大量而穩(wěn)定地存在。研究提供了EPS 中存在分泌的miRNA 表達異常與前列腺炎相關(guān)的證據(jù)。

1.2 CNP 患者精液中miRNA 表達譜

EPS 是精液的重要組成部分，約占精液量的1/4，與精液質(zhì)量和精子活力之間具有密切關(guān)聯(lián)性［18］。EPS 變化必然引起精液發(fā)生改變，在前列腺發(fā)生炎癥等病變時對精液會產(chǎn)生一定的影響，CNP 患者精液的變化可間接反映EPS 的情況。CNP 患者精液中的miRNA 存在差異性表達，檢測患者精液中的miRNA 對CNP 的診療可能具有參考價值。

郭 秀 全 等［19］研 究 表 明ⅢA 型CNP 患 者 精 液 非編碼RNA（non-coding RNA，ncRNA）中某些miRNA 具有較高濃度，可作為研究CNP 患者的檢測指標(biāo)；研究者對CNP 患者精液中miRNA 表達譜進行差異篩選，共486 個miRNA 被納入分析系統(tǒng)，通過實驗組與對照組進行差異分析，發(fā)現(xiàn)表達上調(diào)的共52 個miRNA，表達下調(diào)的共156 個miRNA，其余278 個miRNA 經(jīng)差異分析未發(fā)現(xiàn)明顯變化。結(jié)果表明ⅢA 型CNP 患者精液ncRNA 中miRNA 具有較高含量，可作為研究ⅢA 型CNP 患者的檢測指標(biāo)。

1.3 血清miRNA 表達譜

通過文獻檢索發(fā)現(xiàn)有研究者試圖通過血清中某些miRNA 變化對前列腺相關(guān)疾病進行鑒別診斷。Yakup 等［20］在前列腺癌與良性前列腺疾病鑒別診斷的實驗中從miR-375， miR-125b-5p， miR-30c-5p 等11 個miRNA 當(dāng)中，篩選其中5 個miRNA 作為候選生物標(biāo)記，發(fā)現(xiàn)這些miRNA 單獨或組合都可以用于區(qū)分前列腺癌和前列腺良性疾病。其中CNP 組患者血清中的miR-26b-5p 和let-7c-5p 水平與前列腺增生患者相比具有明顯的差異。研究者認為這些特異的miRNA 可能作為前列腺病種診斷及鑒別的生物學(xué)標(biāo)記物。

1.4 CNP 大鼠模型前列腺組織miRNA 表達譜

Zhang 等［21］研究者通過NGS 測序技術(shù)，對角叉菜膠誘導(dǎo)的CNP 大鼠模型前列腺組織中miRNA 表達譜進行定量及定性研究，并通過基因本體（gene ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）等數(shù)據(jù)庫進行生物信息學(xué)分析，得出特定的miRNA 和免疫因子在CNP 發(fā)生、發(fā)展和診斷過程中的具體作用，初步得出miRNA 在正常及炎癥前列腺組織中的差異表達譜和其靶基因潛在的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

以上研究表明miRNA 表達譜在CNP 患者EPS、精液、血清及動物模型中與正常前列腺相比存在明顯差異，在CNP 發(fā)病過程中客觀存在著某些特定miRNA 的表達上調(diào)或下調(diào)，可能與CNP 發(fā)病有著密切的關(guān)系，隨著生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，某些miRNA 可能成為CNP 新的標(biāo)志物，為CNP 診斷提供一種新的可能［22］。

2 miRNA 對CNP 患者或模型炎癥因子的影響

目前研究表明某些特定miRNA 在不同自身免疫性炎癥疾病中有異常表達，miRNA 可通過影響免疫細胞的分化、成熟以及功能來調(diào)節(jié)自身免疫和炎癥反應(yīng)，從而參與多種炎癥相關(guān)性疾病的發(fā)病機制，miRNA 參與調(diào)節(jié)各種免疫細胞像B 細胞、T 細胞等的功能及各種細胞因子和趨化因子分泌的調(diào)節(jié)等［23-25］。而關(guān)于CNP 發(fā)病機制的常見的假說為病理或生理產(chǎn)物逆流侵襲前列腺，引發(fā)前列腺組織局部的自身免疫性炎癥反應(yīng)，目前miRNA 在該領(lǐng)域的研究也有部分報道。

黃 玉 敏 等［26］研 究 發(fā) 現(xiàn)CNP 患 者EPS 中miR-150 表達下調(diào)可引起轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平的升高，而TGF-β1與白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細胞介素-10（interleukin-10，IL-10）及腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等炎癥因子之間存在明顯正相關(guān)性，進而促進前列腺炎癥的進展變化。鄭玲等［27］研究發(fā)現(xiàn)坦索羅辛能夠上調(diào)大鼠前列腺組織中的miR-141 表達，同時抑制前列腺組織彌漫性炎癥、膠原聚集及TNF-α，TGF-β1 及α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）等的表達，進而達到改善前列腺炎癥狀的目的。

上述實驗表明某些特定miRNA 表達的上調(diào)或下調(diào)與CNP 發(fā)病相關(guān)的各類炎癥因子之間存在密切的關(guān)聯(lián)性，可能具有促進或抑制前列腺組織炎癥反應(yīng)過程的作用。

3 miRNA 與CNP 發(fā)病相關(guān)信號通路

目前研究表明miRNA 家族是許多疾病基因表達調(diào)控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，參與影響多條信號傳導(dǎo)通路或作為信號通路過程中的關(guān)鍵一環(huán)［28，29］。近年，有關(guān)miRNA 與CNP 發(fā)病相關(guān)信號通路關(guān)聯(lián)性的研究逐漸受到重視。

Wang 等［30］研究發(fā)現(xiàn)NAC（N-乙酰半胱氨酸，N-Acetyl-L-cysteine）能夠促進角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠CNP 模型前列腺組織中miR-141 的表達，而miR-141 能夠激活Keap1/Nrf2 信號通路，進而改善角叉菜膠引起的大鼠前列腺炎癥狀。

目前研究表明人體組織存在多種途徑調(diào)節(jié)miR-155 表 達［31］。Park 等［32］研 究 發(fā) 現(xiàn) 重 組IL-10 可以通過STAT3 信號，抑制原代骨髓源巨噬細胞和人外周血單核細胞中miR-155 的表達，減輕CNP 炎癥反應(yīng)。Fu 等［33］研究表明在CNP 模型大鼠前列腺組織中，miR-155 隨著TLR4/NF-KB 信號通路的激活而上調(diào)，通過干預(yù)手段使miR-155 降低時，組織中TLR4/NF-KB 信號通路被抑制，從而減輕了前列腺組織中的炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)。

Chen 等［17］在 關(guān) 于CNP 大 鼠 模 型miRNA 表 達譜KEGG pathway 分析中發(fā)現(xiàn)幾種與CNP 發(fā)病相關(guān)的信號通路，如“MAPK 信號通路”、“cAMP 信號通 路”、“內(nèi) 吞 通 路”、“mTOR 信 號 通 路”、“FoxO 信號通路”，某些特定的miRNA 與其中一條或幾條信號通路之間存在明顯的關(guān)聯(lián)性，或者直接參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。

上述實驗表明miRNA 可能對CNP 發(fā)生發(fā)展過程中相關(guān)信號傳導(dǎo)途徑起到重要調(diào)節(jié)作用，是炎癥、免疫、氧化應(yīng)激等過程中的重要調(diào)節(jié)因子。

4 中藥藥物干預(yù)對CNP 大鼠模型miRNA 的影響

目前miRNA 與中醫(yī)藥治療CNP 關(guān)聯(lián)性的研究報告較少，通過文獻檢索發(fā)現(xiàn)Zhang 等［34］基于miRNA 表達譜研究解毒活血湯對CNP 大鼠模型影響的實驗中得出，實驗組與對照組比較CNP 大鼠模型前列腺組織中495 個mRNA 表達變化明顯，其中211 個差異顯著，37 個與前列腺相關(guān)；模型組和高劑量解毒活血湯組有181 個差異表達的miRNA，其中23 個與對照組和模型組相同；與對照組相比，模型組中miR-146a、miR-423 和miR-205 表達顯著增加。實驗研究表明有效的中藥干預(yù)措施能夠調(diào)節(jié)CNP大鼠模型中某些特定miRNA 的濃度，這些特定miRNA 濃度的變化與CNP 癥狀的變化存在密切關(guān)聯(lián)性。通過有效的中藥干預(yù)措施可能能夠影響CNP 大鼠模型前列腺組織中某些特定miRNA 的濃度，達到治療CNP 的目的，可能為探究中藥治療CNP 的作用機制提供一種新的方向。

5 miRNA 與前列腺炎并發(fā)癥的研究

目前研究表明前列腺炎能夠引起多種男性泌尿生殖系統(tǒng)的并發(fā)癥，如不育癥、尿道炎、勃起功能障礙（erectile dysfunction，ED）等。目前miRNA 與前列腺炎并發(fā)癥相關(guān)研究也有部分文獻報告。

Ding 等［35］應(yīng)用熒光素酶測定證實神經(jīng)型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，NOS1）是miR-146a 的靶基因，并通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RTPCR）及免疫印跡法（Western blot）分析發(fā)現(xiàn)攜帶miR-146a rs2910164 C 等位基因的CNP 患者發(fā)生ED 的風(fēng)險降低?？赡芘c其能夠破壞miR-146a 的表達，從而增加其靶基因NOS1 的表達有關(guān)。熊標(biāo)等［36］研究者在分析因前列腺炎誘發(fā)不育癥的患者EPS 中彈性蛋白酶、miR-551b 表達水平及其對疾病的診斷意義實驗中表明：彈性蛋白酶和miR-551b 表達水平在前列腺炎合并不育癥患者EPS 中具有明顯的變化，兩者聯(lián)合檢測對診斷前列腺炎伴不育癥患者具有較高的特異度和靈敏度，有望成為診斷前列腺炎不育癥患者的分子標(biāo)志物。

上述研究表明某些特定miRNA 在CNP 或其他類型前列腺炎患者并合其他生殖泌尿疾病中具有一定的生物學(xué)意義，目前相關(guān)研究較少，有待進一步的研究發(fā)現(xiàn)。

6 總結(jié)和展望

目前miRNA 與各種疾病關(guān)聯(lián)性的研究是個熱點話題，涉及疾病的病因病機、診斷、治療等各個方面。miRNA 與CNP 關(guān)聯(lián)性的研究涉及發(fā)病機制、診斷、治療等方面，但目前CNP 與miRNA 關(guān)聯(lián)性的研究報告較少，無系統(tǒng)性的研究，miRNA 在CNP 發(fā)病過程中的具體機制還尚不明確。主要報道為miRNA 表達譜在健康男性和CNP 患者EPS 或者不同處理組雄性大鼠前列腺組織中存在明顯差異，可作為CNP 診斷或鑒別診斷的生物學(xué)標(biāo)志物；有效的藥物干預(yù)措施能夠調(diào)控CNP 患者EPS 或雄性大鼠前列腺組織中某種特定miRNA 的濃度，達到改善CNP 癥 狀 目 的；CNP 發(fā) 病 過 程 中 伴 隨 著miRNA 的異常表達，某種或某些特定miRNA 表達上調(diào)或下調(diào)與CNP 發(fā)病過程相關(guān)的炎癥因子或炎癥、免疫、氧化應(yīng)激等信號通路之間具有密切關(guān)聯(lián)性。

CNP 發(fā)病過程應(yīng)該是各種致病因素綜合作用的結(jié)果，某種單一因素或某種假說很難全面闡釋CNP 發(fā)病過程。目前miRNA 與CNP 發(fā)病過程相關(guān)性研究還不夠深入，miRNA 對CNP 確切功能、目標(biāo)靶、作用機制等研究還未有明確說法。隨著對miRNA 作用機理不斷的深入研究，以及利用NGS等現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)對于CNP 發(fā)病過程與miRNA 之間相關(guān)性的深入挖掘，將會使我們對CNP 發(fā)病過程中相關(guān)基因表達調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的理解提高到一個新的水平。當(dāng)然，miRNA 只是影響基因表達調(diào)控的其中一個環(huán)節(jié)，從轉(zhuǎn)錄組的角度最終的落點還是與CNP發(fā)病相關(guān)的mRNA，因為mRNA 決定了最終蛋白的輸出。探究miRNA-mRNA-靶基因-基因功能相關(guān)性，有助于從微觀層次去發(fā)掘CNP 發(fā)病的本質(zhì)內(nèi)涵，有助于CNP 的診斷與治療。miRNA 對人體生理、病理的發(fā)生、發(fā)展過程有著重要的影響，未來的研究過程中miRNA 可能成為CNP 診斷的新的生物學(xué)標(biāo)記，還可能使得這一分子成為藥靶的潛質(zhì)，或是模擬這一分子進行新藥研發(fā)，這將可能會為CNP疾病的診斷與治療提供一種新的手段［37-39］。

綜上所述，前列腺組織中的miRNA 水平，可能能夠在一定程度上反映病情及預(yù)后情況，通過對前列腺組織中miRNA 表達譜的檢測，以及對miRNA與CNP 之間關(guān)聯(lián)性的深入研究，可能實現(xiàn)對CNP的早發(fā)現(xiàn)和早治療，再通過相應(yīng)的干預(yù)措施，從而實現(xiàn)降低CNP 發(fā)生和發(fā)展的概率，有助于對疾病的預(yù)防、診斷和治療。

作者貢獻度說明：

通訊作者王家輝、陳東提供方向，指導(dǎo)論文寫作過程；第一作者宮傲磊主要查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻，組織寫作；王那欽，鄭小挺輔助查找相關(guān)文獻，對論文進行了很好的補充，提出了各自的寶貴意見。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。