安靜杰 郭江龍 高占林 袁文龍 黨志紅 耿欣月 閆秀 李耀發(fā)

摘要 為了評(píng)價(jià)新煙堿類殺蟲(chóng)劑吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果及安全性，采用田間噴霧法測(cè)定了20%吡蟲(chóng)啉可溶液劑（SL）和30%噻蟲(chóng)嗪懸浮劑（SC）對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果，使用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）測(cè)定了施藥1、2、3次后（間隔7 d），藥劑在苜蓿中的殘留情況。結(jié)果表明，當(dāng)吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪在施藥劑量分別為25.02 g/hm2和18.00 g/hm2時(shí)，藥后3～7 d對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果分別為80.01%～82.01%和77.54%～83.29%。吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪連續(xù)施藥3次后，在苜蓿中的最終殘留量分別為1.90 mg/kg和0.08 mg/kg，吡蟲(chóng)啉已超過(guò)我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2763-2021規(guī)定的果蔬中的最大殘留限量（0.5 mg/kg）。因此建議每茬苜蓿生長(zhǎng)期，可選用吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪防治苜蓿盲蝽，吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪噴施次數(shù)分別不宜超過(guò)2次和3次。

關(guān)鍵詞 紫花苜蓿;?新煙堿類殺蟲(chóng)劑;?苜蓿盲蝽;?防治效果;?農(nóng)藥殘留

中圖分類號(hào)： S 435.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：?A

DOI：?10.16688/j.zwbh.2021642

Abstract In order to evaluate the control effect and safety of neonicotinoid insecticides imidacloprid and thiamethoxam， the control efficacies of imidacloprid 20% SL and thiamethoxam 30% SC on Adelphocoris lineolatus were measured by spray method. After spraying once， twice and three times at seven days intervals， the final residues of imidacloprid and thiamethoxam in alfalfa were determined by liquid chromatography-tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS）. Three to seven days after application， the efficacy of imidacloprid and thiamethoxam against A.lineolatus at application dosage of 25.02 g/hm2 and 18.00 g/hm2 were 80.01%-82.01% and 77.54%-83.29%， respectively. The final residues of imidacloprid and thiamethoxam in alfalfa were 1.90 mg/kg and 0.08 mg/kg， respectively， after three successive applications. The content of imidacloprid has exceeded the maximum residue limit （0.5 mg/kg） of fruits and vegetables in national food safety standard GB 2763-2021. Therefore， it is suggested that imidacloprid and thiamethoxam can be used to control mirid bugs， and their spraying times should not exceed two and three times， respectively， in each alfalfa growth period.

Key words Medicago sativa;?neonicotinoid insecticides;?Adelphocoris lineolatus;?control effect;?residue

紫花苜蓿Medicago sativa為多年生草本豆科牧草，具有較高的蛋白質(zhì)含量和豐富的氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，被譽(yù)為“牧草之王”“綠色黃金”。紫花苜蓿廣泛分布于世界各國(guó)，主要被種植用作畜牧飼料，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［1］。我國(guó)甘肅、陜西、新疆、河北等多個(gè)省份均有種植［2-3］。苜蓿具有多年生長(zhǎng)、枝葉繁茂、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等特性，為昆蟲(chóng)提供了一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定、適宜生存的環(huán)境。

苜蓿盲蝽Adelphocoris lineolatus屬半翅目，盲蝽科，是苜蓿上常發(fā)生的一種主要害蟲(chóng)［4］。其通過(guò)刺吸苜蓿嫩葉、嫩莖和花蕾的汁液，造成植株矮小、葉片卷縮、花蕾脫落［5］，還可以傳播花葉病毒，顯著降低苜蓿的產(chǎn)量和品質(zhì)，嚴(yán)重時(shí)可造成減產(chǎn)50%以上［6］。由于苜蓿盲蝽若蟲(chóng)爬行能力和成蟲(chóng)飛翔能力均較強(qiáng)，擴(kuò)散速度快，在大發(fā)生時(shí)化學(xué)防治仍是重要的治理措施。Liu等［7］在室內(nèi)條件下篩選出高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、啶蟲(chóng)脒、吡蟲(chóng)啉等12種化學(xué)藥劑均對(duì)苜蓿盲蝽2齡若蟲(chóng)有較高毒性，其LC50為0.58～14.85 mg/L。郭志剛等［8］評(píng)估了苯甲酰基脲類殺蟲(chóng)劑對(duì)苜蓿盲蝽種群的控制作用，發(fā)現(xiàn)5%氟鈴脲乳油和5%氟啶脲乳油1 500 mL/hm2在施藥7 d后對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果仍能達(dá)到96%以上。使用氟蟲(chóng)腈或噻蟲(chóng)嗪種衣劑拌種處理后，也可有效防控苜蓿盲蝽的第一代成若蟲(chóng)［9］。高效藥劑的篩選對(duì)苜蓿盲蝽的田間治理具有重要的指導(dǎo)意義。

新煙堿類殺蟲(chóng)劑是天然殺蟲(chóng)化合物煙堿的人工合成衍生物，其殺蟲(chóng)作用機(jī)制主要是通過(guò)選擇性控制昆蟲(chóng)神經(jīng)系統(tǒng)煙堿型乙酰膽堿受體，阻斷昆蟲(chóng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常傳導(dǎo)而導(dǎo)致昆蟲(chóng)死亡［10］。該類殺蟲(chóng)劑具有廣譜、高效、低毒的特點(diǎn)，其獨(dú)特的作用方式和高效的殺蟲(chóng)活性，可以有效地防治多種刺吸式害蟲(chóng)，包括棉蚜Aphis gossypii ［11］、苜蓿蚜蟲(chóng)［12］、綠盲蝽Apolygus lucorum ［13］等。苜蓿作為飼料作物，對(duì)農(nóng)藥的毒性及其殘留要求較為嚴(yán)格。但是很多農(nóng)民在農(nóng)事操作中一味追求較高的防治效果，增加施藥次數(shù)，忽視了農(nóng)藥殘留的問(wèn)題?；瘜W(xué)農(nóng)藥在牧草中的殘留研究有助于保障畜牧類產(chǎn)品安全供給。本研究選擇新煙堿類殺蟲(chóng)劑吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪對(duì)苜蓿盲蝽進(jìn)行了田間防效試驗(yàn)，測(cè)定了不同施藥次數(shù)后藥劑在苜蓿中的殘留量，為苜蓿的科學(xué)栽培管理和藥劑的安全使用提供重要的理論依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?儀器與試劑

藥劑：20%吡蟲(chóng)啉可溶液劑（SL），海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn);30%噻蟲(chóng)嗪懸浮劑（SC），武漢楚強(qiáng)生物有限公司生產(chǎn)。

儀器：超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（UPLC-MS/MS， Qtrap 5500，美國(guó)AB公司）;ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（1.7 μm，2.1 mm×50 mm，Water公司）;超純水發(fā)生器（美國(guó)Millipoke公司）;WA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本Eyela公司）;D3024R臺(tái)式高速離心機(jī)（大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器股份公司）;CP214電子天平（奧豪斯儀器上海有限公司）;Filter Unit濾膜（0.22 μm，Agela Technologies公司）。

試劑：吡蟲(chóng)啉標(biāo)準(zhǔn)品（1 000 μg/mL）、噻蟲(chóng)嗪標(biāo)準(zhǔn)品（1 000 μg/mL）購(gòu)于德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司;乙腈、正己烷均為色譜純。丙酮、甲醇、氯化鈉等均為分析純。

1.2?對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果調(diào)查

試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在河北省黃驊市陳家莊村，苜蓿第二茬苜蓿盲蝽發(fā)生期（5月27日）噴施20%吡蟲(chóng)啉SL和30%噻蟲(chóng)嗪SC，施藥有效成分用量按照推薦用藥量分別為25.02 g/hm2和18.00 g/hm2，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照。每個(gè)小區(qū)面積50 m2，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，采用臺(tái)州市路橋尚家噴霧器廠生產(chǎn)的電動(dòng)噴霧器（3WBD-20型）噴霧，藥液量為450 L/hm2。采用5點(diǎn)隨機(jī)取樣的方法，于當(dāng)天噴藥前和藥后3、7 d和10 d調(diào)查苜蓿盲蝽種群數(shù)量，每點(diǎn)利用盆拍法調(diào)查1 m2的蟲(chóng)量，按以下公式計(jì)算蟲(chóng)口減退率和防治效果：

蟲(chóng)口減退率=（施藥前蟲(chóng)口數(shù)-施藥后蟲(chóng)口數(shù)）/施藥前蟲(chóng)口數(shù)×100%;

防治效果=（處理區(qū)蟲(chóng)口減退率-對(duì)照區(qū)蟲(chóng)口減退率）/（1-對(duì)照區(qū)蟲(chóng)口減退率）×100%。

利用SPSS 16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，顯著性測(cè)定采用新復(fù)極差檢驗(yàn)法（DMRT）和t檢驗(yàn)法。

1.3?農(nóng)藥殘留檢測(cè)

在河北省黃驊市陳家莊村于苜蓿第二茬生長(zhǎng)季進(jìn)行大區(qū)試驗(yàn)，每大區(qū)面積為120 m2。分別設(shè)置吡蟲(chóng)啉1次（5月27日）、2次（5月27日、6月3日）、3次施藥（5月27日、6月3日、6月10日），噻蟲(chóng)嗪1次、2次、3次施藥（施藥時(shí)間同吡蟲(chóng)啉），另設(shè)清水對(duì)照。吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪的有效成分用量按照推薦用藥量分別為25.02 g/hm2和18.00 g/hm2。

取樣：于第二茬苜蓿收獲前（6月24日）分別采集苜蓿樣品，每區(qū)隨機(jī)選取5個(gè)采樣點(diǎn)剪取地上部組織，總共不少于1 kg，切碎混合后裝入塑料袋中于-20℃保存待測(cè)。

提取：參照SN/T 2073-2008［14］，吳緒金等［15］和陳博聰?shù)龋?6］的方法測(cè)定樣品中吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪的殘留量。準(zhǔn)確稱取切碎的苜蓿植株10 g于50 mL聚四氟乙烯離心管中，加入乙腈/水=1/1（V/V）30 mL，振蕩提取1 h，加入5 g NaCl，渦旋5 min，5 000 r/min 離心5 min。取上清液10 mL旋轉(zhuǎn)濃縮至近干，加入甲醇定容至5 mL待凈化。

凈化：用3 mL甲醇、3 mL水預(yù)淋固相萃取柱，將上述5 mL待凈化液分3次轉(zhuǎn)入洗脫柱中洗脫并收集，再用3 mL乙腈淋洗，收集，吹干。用甲醇定容至1 mL經(jīng)0.22 μm微膜過(guò)濾，待測(cè)。

色譜檢測(cè)條件。色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18（1.7 μm，2.1 mm×50 mm）;流動(dòng)相：乙腈/水=30/70 （V/V）;流速為0.5 mL/min; 進(jìn)樣體積為5 μL;柱溫為35℃。噻蟲(chóng)嗪和吡蟲(chóng)啉在此色譜條件下的保留時(shí)間分別為2.5 min和2.45 min。最低檢出濃度為0.01 mg/kg。

質(zhì)譜檢測(cè)條件。電子噴霧離子源，正離子電離（ESI+）模式;離子噴霧電壓5 500 V;毛細(xì)管溫度570℃;檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式;吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪的質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)見(jiàn)表1。

2?結(jié)果與分析

2.1?吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果

20%吡蟲(chóng)啉SL和30%噻蟲(chóng)嗪SC對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果見(jiàn)表2。施藥3 d和7 d后，20%吡蟲(chóng)啉SL有效成分用量25.02 g/hm2的防效分別為82.01%和80.01%，t檢驗(yàn)分析表明與30%噻蟲(chóng)嗪SC有效成分用量18.00 g/hm2的防治效果無(wú)顯著差異（t=0.222 2， P=0.835 0; t=0.344 9， P=0.747 5）。施藥10 d后，20%吡蟲(chóng)啉SL的防效顯著高于30%噻蟲(chóng)嗪SC（t=3.381 6， P=0.027 7）。隨著施藥時(shí)間的延長(zhǎng)，兩種藥劑的防治效果均顯著降低。

2.2?檢測(cè)方法的線性關(guān)系

取一定量的標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶液配制成0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在設(shè)計(jì)的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，以濃度（μg/mL）-峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線。吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪的直線回歸方程分別為y=9 880.67x+7.92×105，r2=0.989 0和y=11 207.74x+1.25×105，r2=0.999 9。其中y為定量離子峰面積，x為基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液濃度。上述回歸方程均線性關(guān)系良好，可以用于樣品中吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪含量的檢測(cè)。相關(guān)譜圖見(jiàn)圖1和圖2。

2.3?吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪在苜蓿植株中的殘留量

在苜蓿田，20%吡蟲(chóng)啉SL和30%噻蟲(chóng)嗪SC按推薦劑量分別噴施1次、2次和3次后，在距第3次施藥14 d后采集樣品測(cè)定兩種藥劑在苜蓿中的殘留量，結(jié)果表明（表3），2種新煙堿類殺蟲(chóng)劑在苜蓿中的殘留量均隨施藥次數(shù)的增加而增加。間隔7 d連續(xù)施藥3次后，第3次施藥后14 d吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪的殘留量分別為1.90 mg/kg和0.08 mg/kg，顯著高于施藥2次和施藥1次的處理。在對(duì)照區(qū)的苜蓿植株中也能檢測(cè)到微量的吡蟲(chóng)啉，但未檢測(cè)到噻蟲(chóng)嗪。

3?結(jié)論與討論

新煙堿類殺蟲(chóng)劑是當(dāng)前應(yīng)用最為廣泛的殺蟲(chóng)劑種類之一，吡蟲(chóng)啉對(duì)金銀花蚜蟲(chóng)［17］、小麥吸漿蟲(chóng) ［18］等害蟲(chóng)均有較好的防效，也可應(yīng)用于糧食儲(chǔ)存中以減少谷蠹Rhyzopertha dominica、米象Sitophilus oryzae等倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)的危害［19］。噻蟲(chóng)嗪在棉蚜［20］、柑橘木虱Diaphorina citri ［21］、茶棍薊馬Dendrothrips minowai ［22］等害蟲(chóng)的防治中也多有應(yīng)用。本研究中2種新煙堿類殺蟲(chóng)劑對(duì)苜蓿盲蝽的田間防治試驗(yàn)表明，20%吡蟲(chóng)啉SL（25.02 g/hm2）和30%噻蟲(chóng)嗪SC（18.00 g/hm2）在施藥3～7 d時(shí)對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果達(dá)到77.54%～83.29%。羅蘭等［12］也報(bào)道了應(yīng)用10%吡蟲(chóng)啉可濕性粉劑35.7 g/hm2時(shí)，對(duì)苜蓿蚜蟲(chóng)和苜蓿薊馬1～7 d的防治效果分別為80.83%～94.78%和78.33%～95.57%。表明以吡蟲(chóng)啉為代表的新煙堿類殺蟲(chóng)劑可作為苜蓿田的適宜藥劑，對(duì)發(fā)生的苜蓿盲蝽、蚜蟲(chóng)、薊馬均有較好的防治效果。

在農(nóng)事生產(chǎn)中，藥劑的劑型、施藥方式、施藥時(shí)期不同都可能會(huì)導(dǎo)致藥劑持效期及防治效果的差異。花生開(kāi)花下針期撒施含吡蟲(chóng)啉毒土，對(duì)地下害蟲(chóng)蠐螬的防治效果和花生的保種效果要優(yōu)于藥劑拌種處理、播種溝施藥劑處理［23］。小麥田中噴施600 g/L吡蟲(chóng)啉懸浮劑（67.5 g/hm2）和20%噻蟲(chóng)嗪懸浮劑（25.2 g/hm2）后，2種藥劑在小麥植株中的殘留消解半衰期分別為4.4～8.7 d和4.6～5.9 d［24-25］。本研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪施藥10 d后，對(duì)苜蓿盲蝽的防治效果顯著降低，這可能與藥劑在環(huán)境或植株中的降解代謝有關(guān)。羅蘭等［12］發(fā)現(xiàn)吡蟲(chóng)啉以35.7 g/hm2的劑量噴施7 d后在苜蓿中的殘留量低于0.5 mg/kg;仝東超等［24］按照推薦劑量在麥蚜發(fā)生期噴施吡蟲(chóng)啉懸浮劑2次，施藥間隔7 d，在第2次施藥14 d后小麥中吡蟲(chóng)啉的殘留量也低于吡蟲(chóng)啉在小麥中的最大殘留限量。但是，我們分別以25.02 g/hm2和18.00 g/hm2的劑量在苜蓿田噴施吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪，間隔7 d連續(xù)施藥3次，最后一次施藥后14 d后吡蟲(chóng)啉殘留量已超過(guò)其在蔬果中的最大殘留限量0.5 mg/kg［26-27］。因此，為了保障牧草安全，建議減少施藥次數(shù)或延長(zhǎng)施藥間隔期，每茬苜蓿生長(zhǎng)期，吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪按照推薦劑量噴施次數(shù)分別不宜超過(guò)2次和3次。

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（責(zé)任編輯：田?喆）