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      基于文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)的白酒釀造微生物研究現(xiàn)狀及可視化分析

      2023-08-15 01:10:54趙巧珍張夢(mèng)夢(mèng)繆坤辰李小杰任廣花呂曉鳳胥鑫鈺
      食品工業(yè)科技 2023年15期
      關(guān)鍵詞:己酸大曲釀造

      趙巧珍,張夢(mèng)夢(mèng),繆坤辰,李小杰,任廣花,呂曉鳳,胥鑫鈺,孟 武

      (1.齊魯工業(yè)大學(xué)(山東省科學(xué)院)生物工程學(xué)院,山東濟(jì)南 250353;2.濟(jì)南趵突泉釀酒有限責(zé)任公司技術(shù)質(zhì)量部,山東濟(jì)南 250115)

      白酒釀造微生物是指存在于生產(chǎn)環(huán)境及整個(gè)白酒釀造過(guò)程中微生物的總稱,既包括純天然接種的微生物,也包括人工選育的微生物[1]。白酒釀造過(guò)程實(shí)質(zhì)上是大量微生物代謝的過(guò)程,其微生物主要來(lái)源于酒曲、窖泥和酒醅等,參與酒精及風(fēng)味物質(zhì)的形成。釀造微生物的種類、生態(tài)分布、數(shù)量及其代謝過(guò)程等對(duì)酒精的發(fā)酵和風(fēng)味物質(zhì)的生成都有著重要作用,也是影響白酒香型的重要因素[2?3]。因此,白酒釀造微生物的研究水平與白酒工業(yè)的技術(shù)創(chuàng)新息息相關(guān),不僅影響著白酒的產(chǎn)量、質(zhì)量,對(duì)其風(fēng)格特征也有較大的影響,尤其是風(fēng)味功能微生物,對(duì)白酒的風(fēng)格、品質(zhì)等均起到關(guān)鍵作用[4]。

      白酒釀造微生物主要包括可利用小分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生酒精的發(fā)酵微生物,可將淀粉質(zhì)原料分解為可發(fā)酵糖的起糖化作用的微生物,以及能利用多種營(yíng)養(yǎng)素產(chǎn)生酯類、醇類和醛類等風(fēng)味物質(zhì)的產(chǎn)香微生物[5?7]。目前解析白酒風(fēng)味物質(zhì)生成機(jī)理以及白酒發(fā)酵機(jī)制的主要途徑,是對(duì)白酒釀造微生物進(jìn)行分離并研究其代謝特性,基于代謝特性研究,可以針對(duì)性的優(yōu)化白酒生產(chǎn)工藝,從根本上改善白酒的風(fēng)味、提高白酒的質(zhì)量[8?9]。

      文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)分析是以文獻(xiàn)體系及其計(jì)量特征為研究對(duì)象,采用數(shù)學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法研究文獻(xiàn)的分布結(jié)構(gòu)、數(shù)量關(guān)系及變化規(guī)律,進(jìn)而分析、評(píng)價(jià)和預(yù)測(cè)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展特征和規(guī)律,已被廣泛應(yīng)用于生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)、微生物學(xué)、醫(yī)藥學(xué)、合成生物學(xué)等領(lǐng)域[10?12]。白酒領(lǐng)域關(guān)于文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)的文章較少,而白酒釀造微生物領(lǐng)域未見(jiàn)報(bào)道。因此,本文基于中國(guó)知網(wǎng)學(xué)術(shù)期刊數(shù)據(jù)庫(kù)及Web of Science(WOS)核心合集數(shù)據(jù)庫(kù),利用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)原理和可視化分析技術(shù),探究白酒釀造微生物領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì),并借助對(duì)關(guān)鍵詞網(wǎng)絡(luò)和關(guān)鍵文獻(xiàn)對(duì)該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)進(jìn)行可視化分析,以期方便研究者準(zhǔn)確把握白酒釀造微生物的發(fā)展態(tài)勢(shì)。

      1 數(shù)據(jù)來(lái)源與研究方法

      1.1 數(shù)據(jù)來(lái)源

      選取中國(guó)知網(wǎng)(CNKI)學(xué)術(shù)期刊中的北大核心數(shù)據(jù)庫(kù)作為中文文獻(xiàn)來(lái)源。在CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.cnki.net/)中采用高級(jí)檢索式:主題="白酒"*"微生物"+"白酒"*"菌",來(lái)源類別選擇北大核心期刊數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,通過(guò)檢索并對(duì)不相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行剔除,共獲得879 篇中文文獻(xiàn)。選取Web of Sciences 核心合集數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.webofscience.com/)作為英文文獻(xiàn)來(lái)源,采取高級(jí)檢索式:(TS=enzyme or TS=microorganism or TS=bacteria)and(TS=Chinese liquor or TS=baijiu)進(jìn)行檢索,通過(guò)檢索并剔除不相關(guān)文獻(xiàn),共獲得349 篇英文文獻(xiàn)。

      1.2 研究方法

      本研究主要采用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)和知識(shí)圖譜可視化分析等方法,對(duì)所獲取的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多維度的分析和解讀。利用Excel 2019 軟件,統(tǒng)計(jì)發(fā)文量、作者、機(jī)構(gòu)等數(shù)據(jù),然后用Origin 2019 軟件對(duì)年度發(fā)文量和作者發(fā)文量進(jìn)行發(fā)展趨勢(shì)分析。同時(shí)借助Cite Space 6.1.R3 和VOS viewer 1.6.18 等文獻(xiàn)計(jì)量可視化軟件,繪制知識(shí)圖譜網(wǎng)絡(luò),展示國(guó)內(nèi)白酒微生物領(lǐng)域研究成果的知識(shí)結(jié)構(gòu),揭示當(dāng)前該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)和學(xué)術(shù)前沿。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 CNKI 與WOS 發(fā)文時(shí)間分析

      分析相關(guān)發(fā)文量可以反映出該領(lǐng)域的研究活躍情況。從圖1 可以看出,CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)的文獻(xiàn)數(shù)量在1992 年至2003 年這段時(shí)期內(nèi)較少,主要研究己酸菌的特性及其對(duì)濃香型白酒質(zhì)量的影響。在2004 年至2011 年,隨著現(xiàn)代微生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,學(xué)者們開(kāi)始利用PCR-DGGE 等技術(shù)研究白酒大曲和窖泥中的微生物多樣性和群落結(jié)構(gòu)[13?14],以及對(duì)白酒香氣與微生物之間的關(guān)系也進(jìn)行了初步研究[15]。2012 以來(lái),隨著高通量測(cè)序以及質(zhì)譜檢測(cè)等技術(shù)在白酒領(lǐng)域的推廣應(yīng)用,CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)和WOS 數(shù)據(jù)庫(kù)中白酒釀造微生物方向的發(fā)文量出現(xiàn)爆發(fā)式增長(zhǎng),學(xué)者對(duì)于白酒釀造微生物的研究進(jìn)入了全新的階段。這一階段主要方向是將白酒中微量的香氣成分與微生物進(jìn)行關(guān)聯(lián),分離鑒定功能菌株,研究其生理特性、代謝途徑及代謝產(chǎn)物,以此豐富白酒的風(fēng)味成分[16?18]、解析白酒風(fēng)味形成機(jī)理。近年來(lái),通過(guò)高通量測(cè)序研究微生物的群落結(jié)構(gòu)成為新的熱點(diǎn)方向[19?21]。

      圖1 CNKI 和WOS 年度發(fā)文量趨勢(shì)Fig.1 The trend of annual publications in CNKI and WOS

      2.2 關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖譜

      分析文獻(xiàn)的關(guān)鍵詞關(guān)聯(lián)性可以發(fā)現(xiàn)該領(lǐng)域的熱門(mén)研究方向。由圖2 可知,出現(xiàn)頻率較高的關(guān)鍵詞依次為:微生物、白酒、窖泥、大曲、酒醅。從圖3 來(lái)看,出現(xiàn)次數(shù)較多的關(guān)鍵詞有“fermentatioan(發(fā)酵)”、“daqu(大曲)”、“bacterium(細(xì)菌)”、“pit mud(窖泥)”、“microbial community(微生物群落)”等。綜合兩者關(guān)鍵詞可以發(fā)現(xiàn)目前白酒微生物的研究載體主要集中在窖泥、大曲和酒醅上。窖泥是濃香型白酒中重要的微生物載體,窖泥中以細(xì)菌、放線菌和真菌為主,窖泥的質(zhì)量決定了濃香型白酒的感官風(fēng)味[22?23]。大曲在制曲過(guò)程中富集了大量來(lái)自原料和環(huán)境中的微生物,由于不同的制曲工藝,其富集的微生物種類也不盡相同,主要為細(xì)菌、霉菌和酵母菌[24?26]。酒醅作為微生物的最終共同作用場(chǎng)所,來(lái)自不同地方的微生物在此生長(zhǎng)繁殖,代謝出醇、醛、酸、酯等白酒組成物質(zhì)[27?28]。從載體上進(jìn)行菌種分離篩選和研究其微生物多樣性及群落結(jié)構(gòu)也是必不可少的方向[29?30]。己酸乙酯、乳酸乙酯和乙酸乙酯是出現(xiàn)頻率較多的微生物代謝產(chǎn)物,酯類物質(zhì)對(duì)白酒的口感和風(fēng)味起到非常重要的作用,己酸菌和乳酸菌分別是白酒中產(chǎn)己酸及乳酸的主要細(xì)菌,在酶類作用下,己酸、乳酸與酒精進(jìn)一步生成己酸乙酯、乳酸乙酯,所以己酸菌與乳酸菌也就成為了白酒中較為關(guān)注的微生物[31?32]。

      圖2 CNKI 關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖譜Fig.2 Keyword co-occurrence map in CNKI

      圖3 WOS 關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖譜Fig.3 Keyword co-occurrence map in WOS

      2.3 機(jī)構(gòu)發(fā)文量分析

      我國(guó)有眾多科研機(jī)構(gòu)致力于白酒釀造微生物研究,表1 和表2 分別是CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)與WOS 數(shù)據(jù)庫(kù)里白酒微生物領(lǐng)域發(fā)文量排名前10 的機(jī)構(gòu)。在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中,四川輕化工大學(xué)以發(fā)文量106 篇排名第一,該機(jī)構(gòu)研究人員重點(diǎn)關(guān)注濃香型白酒釀造過(guò)程中的微生物,其下《基于免培養(yǎng)法研究瀘州地區(qū)濃香型白酒窖泥原核微生物群落結(jié)構(gòu)》一文,通過(guò)構(gòu)建細(xì)菌和古菌16S rRNA 基因克隆文庫(kù)、測(cè)序和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析,發(fā)現(xiàn)窖泥內(nèi)細(xì)菌種群豐富,其中梭菌綱為窖泥內(nèi)細(xì)菌群落的絕對(duì)優(yōu)勢(shì)種群[33]。江南大學(xué)以發(fā)文量88 篇排名第二,該機(jī)構(gòu)下研究人員2012 年發(fā)表于《釀酒科技》的《風(fēng)味技術(shù)導(dǎo)向白酒釀造基礎(chǔ)研究的進(jìn)展》,以風(fēng)味物質(zhì)為研究對(duì)象,論述了主要微生物及其風(fēng)味物質(zhì)的代謝途徑,為后續(xù)的研究發(fā)展方向奠定了基礎(chǔ)[34]。貴州大學(xué)以81 篇發(fā)文量位居第三,該機(jī)構(gòu)側(cè)重于醬香型白酒,其下學(xué)者所發(fā)表的《醬香大曲微生物菌群結(jié)構(gòu)及微生物功能研究概述》,綜述了醬香型白酒高溫大曲中的微生物群落結(jié)構(gòu)及其產(chǎn)酶情況和代謝產(chǎn)物[35]。

      表1 CNKI 白酒微生物領(lǐng)域發(fā)文量前10 的機(jī)構(gòu)Table 1 The top 10 institutions in the field of Baijiu brewing microorganism in CNKI

      表2 WOS 白酒微生物領(lǐng)域發(fā)文量前10 的機(jī)構(gòu)Table 2 The top 10 institutions in the field of Baijiu brewing microorganism in WOS

      在WOS 數(shù)據(jù)庫(kù)中,JIANGNAN UNIVERSITY(江南大學(xué))以81 篇發(fā)文量位居第一,該機(jī)構(gòu)于2017年發(fā)表在《FRONTIERS IN MICROBIOLOGY》的《Environmental Microbiota Drives Microbial Succession and Metabolic Profiles during Chinese Liquor Fermentation》一文,利用高通量測(cè)序和靶向代謝組學(xué)分析白酒發(fā)酵過(guò)程中微生物群落結(jié)構(gòu)和代謝過(guò)程,發(fā)現(xiàn)在不同環(huán)境中微生物群落的變化會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵過(guò)程中乙酸、乳酸和乙酸乙酯的增加,以及乳酸乙酯的減少[36]。SICHUAN UNIVERSITY(四川大學(xué))以45 篇發(fā)文量排名第二,該機(jī)構(gòu)于2005 年發(fā)表在《JOURNAL OF THE INSTITUTE OF BREWING》的《Analysis of the bacterial community in zaopei during production of Chinese luzhou-flavor liquor》一文,運(yùn)用PCR-DGGE 和16s RNA 基因測(cè)序?qū)庀阈桶拙瓢l(fā)酵過(guò)程細(xì)菌的群落變化進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)隨著發(fā)酵時(shí)間的增加,乳酸桿菌屬的細(xì)菌開(kāi)始成為優(yōu)勢(shì)菌群[37]。SICHUAN UNIVERSITY OF SCIENCE ENGINEERING(四川輕化工大學(xué))以35 篇發(fā)文量排名第三,該機(jī)構(gòu)于2017 年發(fā)表在《FRONTIERS IN MICROBIOLOGY》上的《Metatranscriptomics Reveals the Functions and Enzyme Profiles of the Microbial Community in Chinese Nong-Flavor Liquor Starter》一文運(yùn)用宏轉(zhuǎn)錄組學(xué)對(duì)濃香型白酒大曲培養(yǎng)全過(guò)程的微生物代謝和功能酶進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)在不同培養(yǎng)溫度下微生物豐富的代謝物質(zhì)對(duì)大曲風(fēng)味的形成至關(guān)重要[38]。

      瀘州老窖股份有限公司及其所屬的NATL ENGN RES CTR SOLID STATE BREWING(國(guó)家固態(tài)釀造工程技術(shù)研究中心)在中英文領(lǐng)域均有著較高的影響,該公司發(fā)表的《瀘州老窖窖泥中重要功能菌群分布及代謝產(chǎn)物研究》,發(fā)現(xiàn)隨著窖池窖齡增加,窖泥中甲烷菌、己酸菌、丁酸菌的數(shù)量和己酸、己酸乙酯等微量化學(xué)成分含量和種類也同步增加[39]。

      總體來(lái)看,目前白酒微生物主要是以高校院所為研究中堅(jiān)力量,校企結(jié)合協(xié)同創(chuàng)新會(huì)是發(fā)展的趨勢(shì),校企合作有利于培養(yǎng)高層次人才,提高企業(yè)的科研水平,促進(jìn)科研成果轉(zhuǎn)化和白酒行業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展。

      2.4 作者發(fā)文量及合作關(guān)系

      圖4 是CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)作者發(fā)文量,圖5 為CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)作者間合作關(guān)系。在CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)中,白酒微生物領(lǐng)域形成了以徐巖、黃治國(guó)、邱樹(shù)毅、黃永光、張文學(xué)為核心的5 支研究團(tuán)隊(duì)。徐巖團(tuán)隊(duì)是白酒微生物領(lǐng)域最為活躍且產(chǎn)出頗豐的團(tuán)隊(duì),所發(fā)文章質(zhì)量較高,位居總被引頻次首位。其團(tuán)隊(duì)于2018 年發(fā)表在《微生物學(xué)通報(bào)》的《中國(guó)白酒發(fā)酵過(guò)程中的核心微生物群及其與環(huán)境因子的關(guān)系》,發(fā)現(xiàn)對(duì)釀造過(guò)程核心微生物群演替有影響較大的環(huán)境因素是水分、酸度、溫度、還原糖和乙醇,為白酒生產(chǎn)的定向調(diào)控提供了一定的理論基礎(chǔ)[40]。黃治國(guó)、羅惠波、衛(wèi)春會(huì)和鄧杰之間的合作關(guān)系較為密切,也是較為活躍的研究團(tuán)隊(duì),四人共同于2015 年發(fā)表在《現(xiàn)代食品科技》的《基于高通量測(cè)序的濃香型白酒窖池細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析》,相較于其他研究,該文章首次運(yùn)用高通量測(cè)序進(jìn)行窖泥細(xì)菌群落的分析,高通量測(cè)序不僅能了解窖池中重要功能菌,得到其優(yōu)勢(shì)度,同時(shí)還能發(fā)現(xiàn)窖池中部分未知微生物,基于測(cè)序結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)濃香型白酒窖泥中的細(xì)菌主要分布于Firmicutes(厚壁菌門(mén))、Bacteroidetes(擬桿菌門(mén))和Synergistetes(互養(yǎng)菌門(mén))等8 個(gè)門(mén),13 個(gè)科,16 個(gè)屬,F(xiàn)irmicutes(厚壁菌門(mén))為優(yōu)勢(shì)菌門(mén),其中Clostridiales(梭菌科)占一定優(yōu)勢(shì)[41]。邱樹(shù)毅團(tuán)隊(duì)主要研究方向?yàn)獒u香型白酒微生物,于2011 年發(fā)表在《中國(guó)釀造》的《醬香白酒生產(chǎn)中產(chǎn)香微生物研究》,綜述了醬香型白酒生產(chǎn)過(guò)程中細(xì)菌、酵母菌、霉菌和放線菌與主要香氣成分之間的關(guān)系[15],該研究為醬香型白酒風(fēng)味的研究提供了豐富的理論知識(shí),有助于進(jìn)一步地剖析醬香型白酒風(fēng)味物質(zhì)。黃永光團(tuán)隊(duì)也是醬香型白酒微生物方向的重要研究隊(duì)伍,該團(tuán)隊(duì)于2017 年發(fā)表在《中國(guó)釀造》的《醬香型白酒第二輪次酒發(fā)酵過(guò)程微生物多樣性研究》,分析了細(xì)菌和真菌在醬香型白酒堆積和發(fā)酵過(guò)程中的多樣性,發(fā)現(xiàn)在堆積過(guò)程中主要細(xì)菌有Bacillus、Enterococcus、Lactococcus、Lactobacillus,真菌有Thermoascus、Thermomyces、Eurotiales,在窖池發(fā)酵過(guò)程中細(xì)菌主要為L(zhǎng)actobacillus,真菌主要為Saccharomyces、Candida、Penicillium[42],該研究為深入認(rèn)識(shí)醬香型白酒釀造過(guò)程的微生物的多樣性及其所形成的發(fā)酵機(jī)理提供了一定的參考。張文學(xué)團(tuán)隊(duì)對(duì)于濃香型白酒微生物多樣性方向研究較多,相關(guān)文章共計(jì)被引用近800 次,位居總被引次數(shù)第二。其團(tuán)隊(duì)于2019 年發(fā)表在《中國(guó)釀造》的《老化窖泥己酸代謝的研究》,對(duì)己酸在窖泥中的代謝途徑進(jìn)行了闡述,并運(yùn)用宏轉(zhuǎn)錄組技術(shù)將產(chǎn)己酸關(guān)鍵酶基因在老化窖泥中進(jìn)行表達(dá),發(fā)現(xiàn)窖泥中的己酸合成是多種微生物共同作用的結(jié)果,為濃香型白酒生產(chǎn)企業(yè)及時(shí)養(yǎng)窖護(hù)窖、提高白酒品質(zhì)提供了理論依據(jù)[43]。

      圖4 CNKI 作者發(fā)文量Fig.4 Number of CNKI authors' publications

      圖5 CNKI 作者間合作關(guān)系Fig.5 Cooperation between CNKI authors

      圖6 為WOS 數(shù)據(jù)庫(kù)作者發(fā)文量,在WOS 數(shù)據(jù)庫(kù)中,發(fā)文量較高的作者有XU Yan(徐巖)、SUN Baoguo(孫寶國(guó))、WU Qun(吳群)、SHEN Caihong(沈才洪)、HAN Beizhong(韓北忠)等。其中XU Yan(徐巖)團(tuán)隊(duì)的發(fā)文量和總被引頻次遙遙領(lǐng)先,其團(tuán)隊(duì)于2017 年發(fā)表在《FRONTIERS IN MICROBIOLOGY》上的《Unraveling Core Functional Microbiota in Traditional Solid-State Fermentation by High-Throughput Amplicons and Meta transcriptomics Sequencing》,運(yùn)用高通量測(cè)序和宏轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技揭示了醬香型白酒在發(fā)酵過(guò)程的核心微生物,包括10 個(gè)真菌屬和11 個(gè)細(xì)菌屬的微生物,并發(fā)現(xiàn)發(fā)酵過(guò)程微生物群落的變化與最終白酒的風(fēng)味息息相關(guān)[44]。SUN Baoguo(孫寶國(guó))團(tuán)隊(duì)的發(fā)文量位居第二,其團(tuán)隊(duì)于2017 年發(fā)表在《JOURNAL OF THE INSTITUTE OF BREWING》上的《The brewing process and microbial diversity of strong flavour Chinese spirits: A review》一文從大曲、酒醅、窖泥的角度綜述了濃香型白酒釀造微生物的研究現(xiàn)狀。作者認(rèn)為釀造微生物多樣性及其對(duì)白酒的貢獻(xiàn)將是一個(gè)重要且持續(xù)的研究領(lǐng)域,可以從尋找微生物與白酒品質(zhì)和產(chǎn)量的關(guān)系,改進(jìn)大曲制作和酒醅發(fā)酵工藝,調(diào)控發(fā)酵過(guò)程等角度來(lái)提高白酒的品質(zhì)與產(chǎn)量[45]。

      圖6 WOS 作者發(fā)文量Fig.6 Number of WOS authors' publications

      2.5 高被引文獻(xiàn)分析

      文獻(xiàn)被引次數(shù)的高低能反映出文獻(xiàn)所具有的參考價(jià)值及影響力。由表3 可知,江南大學(xué)徐巖教授及其團(tuán)隊(duì)于2012 年發(fā)表在《微生物學(xué)通報(bào)》上的《釀酒酵母和異常畢赤酵母混菌發(fā)酵對(duì)白酒液態(tài)發(fā)酵效率和風(fēng)味物質(zhì)的影響》一文被引用了135 次,該文章將釀酒酵母和異常畢赤酵母進(jìn)行混菌液態(tài)發(fā)酵,研究發(fā)現(xiàn)釀酒酵母發(fā)酵產(chǎn)乙醇,異常畢赤酵母以酯酶合成途徑將醇和酸轉(zhuǎn)化為酯,提高了風(fēng)味物質(zhì)的含量,為豐富發(fā)酵產(chǎn)物的風(fēng)味復(fù)雜性和增強(qiáng)風(fēng)格的獨(dú)特性提供了一條有效的途徑[46]。同樣出自徐巖團(tuán)隊(duì)的《利用PCR-DGGE 未培養(yǎng)技術(shù)對(duì)中國(guó)白酒高溫和中溫大曲細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的分析》一文也被引用135 次。該文章報(bào)道了運(yùn)用PCR-DGGE 技術(shù)研究白酒大曲中的微生物,并成功鑒定出傳統(tǒng)培養(yǎng)方法未發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌菌株[47],將其與傳統(tǒng)的菌種分離鑒定、白酒風(fēng)味組成分析等手段相結(jié)合,對(duì)判斷和鑒定白酒生產(chǎn)中與特征風(fēng)味物質(zhì)相關(guān)的關(guān)鍵微生物、指導(dǎo)生產(chǎn)工藝改進(jìn),具有重要的理論和實(shí)踐意義。被引次數(shù)位居第三的是楊代永于2007 年發(fā)表的《高溫大曲中的微生物研究進(jìn)展》一文,共被引用了134 次,該文章從茅臺(tái)高溫大曲中篩選出了6 種酵母,41 種細(xì)菌和51 種霉菌,并研究了在制曲培養(yǎng)過(guò)程中微生物的消長(zhǎng)變化,研究發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)中前期以細(xì)菌為主,霉菌在中后期大幅度增多[48],對(duì)大曲培養(yǎng)工藝的優(yōu)化具有重要意義。在這10 篇文獻(xiàn)中有5 篇是探究白酒微生物的群落結(jié)構(gòu)及其多樣性,說(shuō)明當(dāng)前的關(guān)注熱點(diǎn)在于微生物的群落結(jié)構(gòu)。研究群落結(jié)構(gòu)的變化可以實(shí)現(xiàn)通過(guò)調(diào)整工藝參數(shù)來(lái)調(diào)控微生物的生長(zhǎng)代謝,控制其代謝產(chǎn)物在合理的范圍內(nèi),以期對(duì)發(fā)酵產(chǎn)酒及最終酒體風(fēng)格的形成作出積極的貢獻(xiàn)。

      表3 CNKI 白酒釀造微生物領(lǐng)域引用次數(shù)前10 的文獻(xiàn)Table 3 Top 10 cited CNKI literatures in the field of Baijiu brewing microorganism

      由表4 可知,被引頻次最高的WOS 數(shù)據(jù)庫(kù)文獻(xiàn)是XU Yan(徐巖)團(tuán)隊(duì)于2017 年發(fā)表在《TRENDS IN FOOD SCIENCE &TECHNOLOGY》上的《Mystery Behind Chinese Liquor Fermentation》,該文被引用267次,文章從風(fēng)味化學(xué)、微生物、工藝多角度解析了中國(guó)白酒傳統(tǒng)發(fā)酵的研究進(jìn)展[49],總結(jié)出白酒的兩大研究方向:白酒風(fēng)味成分和白酒釀造微生物,提出了目前存在的問(wèn)題和未來(lái)的研究需求,以期實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化的、標(biāo)準(zhǔn)化的白酒生產(chǎn)技術(shù)。其次是ZHENG Xiaowei等2011 年發(fā)表在《JOURNAL OF THE INSTITUTE OF BREWING》 的《Daqu-A Traditional Chinese Liquor Fermentation Starter》,研究了大曲中重要的功能微生物及其對(duì)白酒風(fēng)味的貢獻(xiàn),絲狀真菌(Rhizopus、Rhizomucor、Aspergillus等屬)、酵母(Saccharomyces、Candida、Hansenula等屬)和細(xì)菌(醋酸桿菌,乳酸桿菌和Bacillus spp.)被認(rèn)為是功能性微生物群,負(fù)責(zé)一系列裂解酶的形成、酒精發(fā)酵底物的形成和風(fēng)味化合物的形成[50],對(duì)大曲微生物及其功能作了詳細(xì)討論。同樣是來(lái)自ZHENG Xiaowei等的《Complex Microbiota of a Chinese ‘Fen’ Liquor Fermentation Starter (Fen-Daqu),Revealed by Culture-Dependent and Culture-Independent Methods》一文,運(yùn)用傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法和PCR-DGGE 技術(shù)研究清香型白酒大曲中的微生物多樣性,共分離和鑒定出了190 種微生物菌株[51],結(jié)果表明運(yùn)用聯(lián)合方法比單一方法更有助于分析微生物的種群分布情況。

      表4 WOS 白酒釀造微生物領(lǐng)域引用次數(shù)前10 的文獻(xiàn)Table 4 Top 10 cited WOS literatures in the field of Baijiu brewing microorganism

      3 結(jié)論

      在白酒釀造過(guò)程中,微生物的體系決定了白酒的風(fēng)格。本文運(yùn)用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)手段,對(duì)來(lái)自中國(guó)知網(wǎng)北大核心數(shù)據(jù)庫(kù)以及Web of Science 核心合集數(shù)據(jù)庫(kù)的白酒微生物領(lǐng)域的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行了可視化分析。自2010 以來(lái),該領(lǐng)域研究一直較為活躍,中英文文獻(xiàn)發(fā)文量整體呈上升趨勢(shì),研究隊(duì)伍不斷壯大,科研成果愈發(fā)豐碩。因?yàn)榘拙剖侵袊?guó)特有的釀造產(chǎn)業(yè),所以中國(guó)學(xué)者為白酒釀造微生物領(lǐng)域的研究主體。徐巖、孫寶國(guó)、吳群、黃治國(guó)、邱樹(shù)毅、江南大學(xué)、四川大學(xué)、四川輕化工大學(xué)、貴州大學(xué)等作者或機(jī)構(gòu)是該研究領(lǐng)域的主要貢獻(xiàn)者,所取得的科研成果極大地促進(jìn)了該領(lǐng)域研究水平的提高,為學(xué)者們提供了大量高水平的文獻(xiàn)參考。《利用PCR-DGGE 未培養(yǎng)技術(shù)對(duì)中國(guó)白酒高溫和中溫大曲細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的分析》及《釀酒酵母和異常畢赤酵母混菌發(fā)酵對(duì)白酒液態(tài)發(fā)酵效率和風(fēng)味物質(zhì)的影響》兩篇文章是目前被引次數(shù)最多的中文文獻(xiàn),《Mystery Behind Chinese Liquor Fermentation》一文是目前被引次數(shù)最多的英文文獻(xiàn)。對(duì)白酒釀造微生物的研究早期主要集中在對(duì)微生物的分離篩選及鑒定,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,對(duì)白酒微生物的群落結(jié)構(gòu)和演替規(guī)律的研究成為熱點(diǎn)方向。目前,白酒釀造微生物菌群的解析與高通量測(cè)序、宏基因組學(xué)和代謝組學(xué)以及各種微量成分檢測(cè)手段等緊密聯(lián)系,有效促進(jìn)了白酒釀造微生物群落和白酒中微量成分關(guān)聯(lián)作用機(jī)制研究工作的開(kāi)展,相信這些深層次的理論研究對(duì)白酒釀造微生物的探索會(huì)進(jìn)入新的發(fā)展階段,這也是未來(lái)白酒釀造微生物領(lǐng)域的發(fā)展方向。我國(guó)社會(huì)發(fā)展已進(jìn)入新時(shí)代,人們的飲酒價(jià)值觀念也從僅關(guān)注口感,轉(zhuǎn)向?yàn)槌缟酗L(fēng)味和健康的雙導(dǎo)向,因此,開(kāi)展針對(duì)白酒釀造微生物的科學(xué)研究對(duì)提升白酒釀造行業(yè)的生產(chǎn)水平和產(chǎn)品質(zhì)量具有重要的作用,也為我國(guó)白酒釀造行業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

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