鄭 偉,薛 玲,鄭 敏,于 瀟,劉金星

(1. 山東青島中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院,山東 青島 266002;2. 棗莊市中醫(yī)醫(yī)院,山東 棗莊 277000;3. 山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,山東 濟(jì)南 250014)

卵巢是女性重要的生殖腺,卵巢內(nèi)原始卵泡的儲(chǔ)備反映了女性的生殖和內(nèi)分泌潛能,遺傳、年齡、社會(huì)心理、藥物及手術(shù)創(chuàng)傷等因素會(huì)引起卵巢儲(chǔ)備功能減退(diminished ovarian reserve,DOR)。DOR引起的月經(jīng)模式紊亂、生育能力降低及不良妊娠結(jié)局等問(wèn)題嚴(yán)重困擾著育齡女性的生殖內(nèi)分泌功能。近年來(lái)本病低齡化趨勢(shì)顯著增加,其發(fā)病率約占卵巢疾病的20%[1]。隨著細(xì)胞自噬學(xué)說(shuō)的深入研究,越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為DOR的發(fā)生與顆粒細(xì)胞(granulosa cells,GCs)自噬活性異常引起的卵泡異常募集和閉鎖相關(guān)[2-3]。以調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬為基點(diǎn),探討不同藥物治療DOR的藥效學(xué)研究是目前DOR實(shí)驗(yàn)研究的熱點(diǎn)。多數(shù)中醫(yī)學(xué)者認(rèn)為DOR的病機(jī)是腎虛,臨床辨治本病從補(bǔ)腎填精入手以平調(diào)腎中陰陽(yáng)[4]。筆者研讀中醫(yī)基礎(chǔ)理論,認(rèn)為細(xì)胞自噬的過(guò)程和DOR的發(fā)生符合精氣、陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)的理論要點(diǎn)。本文擬以中醫(yī)基礎(chǔ)理論釋意細(xì)胞自噬為出發(fā)點(diǎn),運(yùn)用傳統(tǒng)的中醫(yī)學(xué)概念來(lái)解釋現(xiàn)代分子生物學(xué)的知識(shí),且淺議中醫(yī)藥調(diào)控細(xì)胞自噬治療DOR的研究現(xiàn)況,以期為中醫(yī)藥治療DOR提供新的理論依據(jù)及參考思路。

1 細(xì)胞自噬對(duì)DOR發(fā)生的影響

DOR的發(fā)生以卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞的數(shù)量減少和(或)質(zhì)量下降為主要特征,這與卵泡過(guò)度閉鎖和異常募集相關(guān)[5]。氧化應(yīng)激(oxidative stress,OS)條件下,GCs自噬活性的異常引起卵泡的異常募集和發(fā)育損傷,可能是引起DOR發(fā)生的機(jī)制之一[6]。

1.1GCS自噬對(duì)卵泡發(fā)育的影響 卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育是卵母細(xì)胞、GCs及卵泡膜細(xì)胞相互作用的結(jié)果。其中,GCs環(huán)繞著卵丘和卵泡膜內(nèi)壁,其形態(tài)和功能的變化影響著卵母細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂。另外,GCs參與性激素的合成與分泌,調(diào)控卵巢內(nèi)細(xì)胞因子(如激活素A、抑制素B)的表達(dá),對(duì)卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育起著重要的作用。GCS自噬對(duì)卵泡的發(fā)育有兩種作用機(jī)制:一是保護(hù)性自噬,即基礎(chǔ)的細(xì)胞自噬有助于維持原始卵泡的數(shù)量、生殖細(xì)胞的存活以及去除黃體殘留[3];二是死亡性自噬,即高水平的細(xì)胞自噬誘發(fā)原始卵泡的提前募集及生長(zhǎng)卵泡的異常閉鎖。Delcour等[6]認(rèn)為自噬相關(guān)蛋白(autophagy-related protein,ATG)ATG7和ATG9A的缺失會(huì)引起自噬體生物合成減少,進(jìn)而出現(xiàn)自噬功能受損,影響原始卵泡的保存和卵巢儲(chǔ)備。邵童[7]通過(guò)mRNA表達(dá)芯片分析發(fā)現(xiàn)DOR患者GCs中存在著自噬缺陷,該缺陷一方面阻礙了GCs的分化進(jìn)程,另一方面影響GCs損傷后的增殖和修復(fù)能力,引起GCs的過(guò)度衰老,導(dǎo)致卵泡的提前閉鎖。

1.2OS是GCs自噬的主要原因 OS是細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species, ROS)大量累積后破壞機(jī)體的氧化還原平衡,引起脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子的氧化損傷。卵巢GCs中性類(lèi)固醇的生物合成需要大量能量消耗,細(xì)胞內(nèi)會(huì)產(chǎn)生高水平的ROS,生殖過(guò)程中加速的代謝率也會(huì)產(chǎn)生大量的氧自由基,因此,有學(xué)者認(rèn)為OS誘導(dǎo)的GCs過(guò)度自噬是引起卵泡異常閉鎖和DOR發(fā)生的主要驅(qū)動(dòng)力[8]。生理環(huán)境下,ROS的產(chǎn)生和清除處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài),GCs分泌大量的始基卵泡活化抑制因子(如bFGF、GDF-9、BMPs、FOXOs),抑制卵泡的過(guò)度募集,使卵泡池內(nèi)原始卵泡數(shù)量維持在正常范圍[9]。然而發(fā)生OS時(shí),生長(zhǎng)卵泡不能進(jìn)行成熟分裂而過(guò)度自噬或凋亡,會(huì)直接或間接損傷卵巢原始卵泡池的儲(chǔ)備。究其原因,一方面,始基卵泡缺少卵泡抑制因子調(diào)控,始基卵泡的激活和募集過(guò)度增加,另一方面過(guò)度的ROS活性會(huì)引起耐受力弱的始基卵泡直接凋亡[10]。高強(qiáng)氧化應(yīng)激狀態(tài)下,為了保護(hù)快速減少的始基卵泡,卵巢自噬活性過(guò)度增加,通過(guò)不同的信號(hào)途徑觸發(fā)細(xì)胞自噬性死亡。

1.3調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬水平可以緩解GCs的異常凋亡目前研究證實(shí)褪黑素(melatonin,MT)、白藜蘆醇、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH )等制劑可以通過(guò)減輕OS引起的GCs自噬性損傷,減少GCs的異常凋亡。MT是一種強(qiáng)大的抗氧化劑,通過(guò)上調(diào)其他抗氧化酶的活性直接或間接地清除ROS。Xie等[11]實(shí)驗(yàn)證實(shí)MT通過(guò)下調(diào)ERK途徑緩解了線粒體和卵巢儲(chǔ)備功能的損傷,防止過(guò)度自噬導(dǎo)致的抗苗勒管激素表達(dá)下降、細(xì)胞周期停滯和線粒體膜電位的損傷。李琰珉[12]實(shí)驗(yàn)證實(shí):通過(guò)血清饑餓法體外誘導(dǎo)GCs自噬,加入MT干預(yù)后可以通過(guò)激活PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路抑制自噬相關(guān)蛋白的表達(dá),繼而抑制GCs自噬,增加原始卵泡和生長(zhǎng)卵泡的數(shù)量,減少閉鎖卵泡。Yong等[13]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,有機(jī)磷農(nóng)藥馬拉硫磷(Malathion)暴露誘導(dǎo)的OS會(huì)引起卵巢生殖功能損傷,其中使卵巢組織中ROS增加,GCs自噬增加,小鼠動(dòng)情周期明顯紊亂,而白藜蘆醇通過(guò)調(diào)節(jié)PI3K/AKT信號(hào)通路活性減輕卵巢組織的毒性,激活下游抗氧化酶活性,降低GCs的氧化應(yīng)激,抑制卵泡GCs的過(guò)度自噬。Shen等[14]研究了FSH對(duì)小鼠GCs自噬的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)FSH可以抑制OS誘導(dǎo)的GCs自噬作用。FSH干預(yù)后可以阻斷缺氧誘導(dǎo)因子1-a減弱自噬信號(hào),顯著抑制MAP1LC3B-Ⅰ向MAP1LC3B-Ⅱ的轉(zhuǎn)化、mTOR去磷酸化、SQSTM1降解和BECN1表達(dá),進(jìn)而改善體內(nèi)OS條件下的巨自噬/自噬的通量受損。

2 中醫(yī)基礎(chǔ)理論釋議DOR與細(xì)胞自噬

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為宇宙的一切事物都是由精或氣構(gòu)成的,而相互關(guān)聯(lián)的事物或同一事物內(nèi)部又存在著陰、陽(yáng)兩個(gè)相互對(duì)立又相關(guān)的方面。用中醫(yī)基礎(chǔ)理論釋議DOR與細(xì)胞自噬,一方面細(xì)胞自噬符合中醫(yī)學(xué)精氣學(xué)說(shuō)及陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)的基本內(nèi)容,另一方面DOR的發(fā)生存在著精氣、陰陽(yáng)失調(diào)的基本病機(jī)。

2.1中醫(yī)基礎(chǔ)理論釋議自噬

2.1.1精氣學(xué)說(shuō)與自噬 精氣學(xué)說(shuō)是研究宇宙生成及世界本原的學(xué)術(shù)思想,認(rèn)為世界萬(wàn)物的生成皆是精氣自身運(yùn)動(dòng)的結(jié)果;精氣通過(guò)不停的升、降、聚、散的運(yùn)動(dòng),使得自然界在無(wú)形之氣及有形之體之間不斷地變化;精氣維系著天地萬(wàn)物的相互聯(lián)系,使事物之間相互感動(dòng),相互作用?！吨芤住酚涊d“精氣為物”;《管子》記載“一氣能變?cè)痪?《素問(wèn)·六微旨大論》記載“非升降則無(wú)以壯老矣,非出入則無(wú)以化收藏”。

自噬起源于希臘文“autophagy”,原意是“自己吃掉自己”。自噬雖然需要通過(guò)熒光顯微鏡或透射電鏡來(lái)驗(yàn)證,但縱觀其全過(guò)程,在不同方面都體現(xiàn)著精氣的特性。①物質(zhì)性:精氣是占有一定空間的精微物質(zhì);自噬以一定物質(zhì)結(jié)構(gòu)存在于細(xì)胞內(nèi);如透射電鏡下吞噬泡呈雙層或多層膜結(jié)構(gòu)的新月?tīng)罨虮瓲?有包繞胞漿成分的趨勢(shì);自噬小體是雙層或多層膜的液泡狀結(jié)構(gòu),內(nèi)含胞漿成分;自噬溶酶體為單層膜結(jié)構(gòu),胞漿成分已降解。②彌散性:精氣彌散連續(xù)、無(wú)處不在;自噬作為Ⅱ型程序性死亡的方式廣泛地存在于真核細(xì)胞內(nèi),依賴溶酶體途徑自我清除受損的、衰老的細(xì)胞器和不需要的大分子物質(zhì),以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞自身的代謝需求。③能動(dòng)性:精氣處于永恒的自發(fā)運(yùn)動(dòng)中;自噬也是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程;自吞噬體(雙層膜結(jié)構(gòu))包裹待降解的細(xì)胞器(線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)),與胞內(nèi)體融合形成自體吞噬泡,由溶酶體降解吞噬泡轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容物,變成可溶性的小分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)基因繼續(xù)參與細(xì)胞的物質(zhì)代謝[15]。④關(guān)聯(lián)性:精氣是天地萬(wàn)物相互聯(lián)系的中介;自噬與凋亡、焦亡等其他細(xì)胞死亡方式共同存在,相互調(diào)控并參與疾病的發(fā)生發(fā)展。如實(shí)驗(yàn)證實(shí):大腦中動(dòng)脈閉塞模型大鼠腦缺血再灌注后12 h內(nèi)細(xì)胞自噬和凋亡同時(shí)被激活,而在2 d后可能存在從細(xì)胞凋亡到自噬的轉(zhuǎn)換[16];H9C2心肌細(xì)胞在缺氧復(fù)氧損傷過(guò)程中細(xì)胞自噬、焦亡、凋亡同時(shí)存在,其中自噬被抑制,細(xì)胞焦亡及凋亡增加[17]。

2.1.2陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)與自噬 陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)是用“陰”和“陽(yáng)”兩個(gè)對(duì)立且相關(guān)的屬性概括自然界相互關(guān)聯(lián)的事物或現(xiàn)象,并闡釋事物發(fā)生、發(fā)展、變化的思維方法。陰陽(yáng)兩個(gè)方面既對(duì)立制約又相互為用,在消長(zhǎng)變化中可以相互轉(zhuǎn)化,在不斷運(yùn)動(dòng)中相互作用維持著自然界的協(xié)調(diào)平衡?！端貑?wèn)·陰陽(yáng)應(yīng)象大論》記載:“陰陽(yáng)者,天地之道也,萬(wàn)物之綱紀(jì),變化之父母,生殺之本始,神明之府也?！?/p>

用陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)釋議細(xì)胞自噬,源于細(xì)胞內(nèi)環(huán)境與細(xì)胞自噬之間,以及自噬運(yùn)動(dòng)本身都不是靜態(tài)不變的,而是屬陰和屬陽(yáng)的兩個(gè)方面相互制約、相互為用、相互消長(zhǎng)的結(jié)果。①對(duì)立制約:筆者認(rèn)為細(xì)胞自噬與細(xì)胞內(nèi)環(huán)境是相互對(duì)立、相互約束的,表現(xiàn)出陽(yáng)勝陰退、陰強(qiáng)陽(yáng)弱的動(dòng)態(tài)聯(lián)系。其中,細(xì)胞內(nèi)環(huán)境是有形的、短期內(nèi)相對(duì)靜止和內(nèi)守的,屬陰;而自噬的發(fā)生是無(wú)形的、運(yùn)動(dòng)的、興奮的,屬陽(yáng)。自噬本身是個(gè)推陳出新的過(guò)程,其中降解廢棄的蛋白質(zhì)和受損的細(xì)胞器的過(guò)程相對(duì)衰退、下降、抑制屬陰,而產(chǎn)生氨基酸、核苷糖酸的過(guò)程相對(duì)亢進(jìn)、上升、興奮屬陽(yáng)。②互根互用:自噬以細(xì)胞內(nèi)環(huán)境為載體,是細(xì)胞自身防御和應(yīng)激的調(diào)控機(jī)制;自噬通過(guò)消除、降解或消化受損、變性、衰老的細(xì)胞器及變性蛋白質(zhì),可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞器自我更新,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性。生理狀態(tài)下,細(xì)胞內(nèi)存在著低水平的基礎(chǔ)性自噬,以維持細(xì)胞自身結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。當(dāng)機(jī)體受到外源性刺激或機(jī)械損傷時(shí),細(xì)胞自吞噬活性增加,誘發(fā)保護(hù)性自噬。③消長(zhǎng)平衡:細(xì)胞的自噬水平是隨著機(jī)體的動(dòng)靜狀態(tài)及細(xì)胞因子調(diào)控水平而消長(zhǎng)變化,代謝后大分子物質(zhì)生成氨基酸、核苷糖酸被細(xì)胞重新利用,為細(xì)胞的功能活動(dòng)提供能量,使細(xì)胞內(nèi)環(huán)境及自噬進(jìn)程均保持著相對(duì)的動(dòng)態(tài)平衡,即“陰平陽(yáng)秘”。然而當(dāng)細(xì)胞受到持久或過(guò)強(qiáng)的刺激,細(xì)胞自噬水平過(guò)度增高或相對(duì)不足時(shí),或者調(diào)節(jié)信號(hào)因子調(diào)控細(xì)胞自噬相對(duì)異常時(shí),破壞了細(xì)胞內(nèi)環(huán)境及細(xì)胞自噬的動(dòng)態(tài)平衡,則出現(xiàn)“陰陽(yáng)失調(diào)”的病理變化。如卵巢GCs自噬缺陷可能會(huì)造成GCs基礎(chǔ)狀態(tài)異?；驊?yīng)激損傷后細(xì)胞穩(wěn)態(tài)維持障礙,引起了DOR、PCOS等疾病的發(fā)生[18]。邵童[7]研究發(fā)現(xiàn)DOR患者不僅存在GCs自噬缺陷,而且GCs的自噬水平較低。馬智等[19]通過(guò)皮下注射脫氫表雄酮制備PCOS模型大鼠,通過(guò)透射電鏡及細(xì)胞學(xué)檢測(cè)證實(shí):PCOS 模型大鼠卵巢GCs中同時(shí)存在細(xì)胞增殖率降低和過(guò)度自噬的現(xiàn)象。張光云等[20]研究發(fā)現(xiàn)卵巢過(guò)度刺激后,通過(guò)誘導(dǎo)ROS的累積而引起保護(hù)性自噬的發(fā)生,自噬和Nrf2蛋白可以同時(shí)發(fā)揮抗氧化作用、抑制GCs的凋亡。

2.2DOR的中醫(yī)學(xué)病因病機(jī) 中醫(yī)學(xué)沒(méi)有“卵巢儲(chǔ)備功能減退”的記載,但此證符合清·傅山《傅青主女科》“年未老經(jīng)水?dāng)唷钡恼撌?。此外,該病引起的月經(jīng)異常、生育能力下降的表現(xiàn)歸屬于中醫(yī)學(xué)“血枯”“血滯”“經(jīng)閉”“無(wú)子”等范疇?，F(xiàn)代學(xué)者多認(rèn)為DOR的發(fā)生與腎中精氣虧虛密切相關(guān),存在腎陰、腎陽(yáng)的虛衰,病位在沖任胞宮,變化在氣血,表現(xiàn)為經(jīng)水漸斷,胎孕難成[21]。

腎中所藏的精氣,不僅是構(gòu)成和維持人體生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ),也是月經(jīng)的產(chǎn)生和胎孕進(jìn)程的關(guān)鍵因素。古代醫(yī)家多認(rèn)為“經(jīng)水出諸腎”(《傅青主女科》),“經(jīng)候不調(diào),病皆在腎經(jīng)”(《婦人規(guī)》),“腎者,主蟄,封藏之本,精之處也”(《素問(wèn)·六節(jié)藏象論》)。女性生殖機(jī)能的盛衰以腎為主導(dǎo),若腎精充盛,天癸成熟,沖任氣血滿溢胞宮,則“月事以時(shí)下,故有子”;然腎精虛衰,天癸枯竭,沖任氣血衰少,經(jīng)斷其流,則“地道不通,形壞而無(wú)子”。

腎藏精,精化氣,氣分陰陽(yáng),腎中精氣陰陽(yáng)對(duì)于卵子的發(fā)育成熟起著重要的作用。卵泡是腎中所藏之“陰精”,腎陰是其生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ),腎陽(yáng)是其充盛排出的動(dòng)力。腎中精氣充盛,腎陰濡潤(rùn)卵泡使其不斷地生長(zhǎng)發(fā)育至成熟,腎陽(yáng)溫煦卵泡并鼓動(dòng)推進(jìn)其排卵,施泄為生殖之精。然先天不足、后天失養(yǎng)、房事不節(jié)、大病失養(yǎng)或經(jīng)產(chǎn)不慎等因素消耗腎中精氣。腎虛精虧,沖任虛衰,女性年未至七七而出現(xiàn)月水不行、胎孕不成,甚至早絕經(jīng)癥狀。

因此,中醫(yī)藥辨治DOR多在補(bǔ)腎填精的基礎(chǔ)上兼以辛溫祛寒、滋陰清熱,調(diào)補(bǔ)腎中陰陽(yáng),促進(jìn)卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育和順利排出。陸海美等[22]崇“女子陰常不足”的理論,認(rèn)為DOR系腎陰不足,天癸乏源所致,沖任氣血虧虛,則難以化生經(jīng)血,卵泡生長(zhǎng)發(fā)育遲緩,而致月經(jīng)過(guò)少、稀發(fā)甚至閉經(jīng)。李善霞等[23]認(rèn)為DOR的病機(jī)是腎陰涸乏、氣血虧虛,治宜補(bǔ)腎養(yǎng)陰、益氣養(yǎng)血,以左歸丸為基礎(chǔ)方加減治療本癥,可以顯著改善DOR患者腎陰虛的臨床癥狀和卵巢儲(chǔ)備功能,降低FSH和E2水平,增加竇卵泡數(shù)量,改善生育功能。王娜娜等[24]認(rèn)為本病系腎中陽(yáng)氣虧虛,下焦虛寒所致,無(wú)法溫煦沖任氣血,陽(yáng)虛不能鼓動(dòng)腎中精氣蒸騰氣化,影響卵母細(xì)胞的質(zhì)量,阻礙卵泡順利排出。江涵等[25]認(rèn)為DOR的發(fā)生與腎陽(yáng)不足、沖任衰少相關(guān),毓麟珠能補(bǔ)腎助陽(yáng)益精,連續(xù)給藥6個(gè)月可以有效降低血清FSH和FSH/LH水平,提高E2水平,恢復(fù)患者的月經(jīng)周期。

3 中醫(yī)藥調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬治療DOR的研究進(jìn)展

近年來(lái),許多學(xué)者將細(xì)胞自噬與中醫(yī)學(xué)相聯(lián)系,從不同的角度探究中醫(yī)藥干預(yù)對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)作用和對(duì)疾病發(fā)生的影響。以細(xì)胞自噬調(diào)控卵泡發(fā)育為切入點(diǎn),是目前探討中醫(yī)藥治療DOR的新的研究方向。孫曉彤[26]實(shí)驗(yàn)證實(shí):二仙湯溫腎陽(yáng)、瀉腎火,通過(guò)調(diào)節(jié)自噬相關(guān)基因的表達(dá)干預(yù)GCs的自噬過(guò)程,進(jìn)而有效減少環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的DOR模型大鼠的卵泡閉鎖,增加各級(jí)卵泡數(shù)量,并改善黃體發(fā)育。朱芳芳等[27]研究發(fā)現(xiàn):麒麟丸可以保護(hù)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的DOR模型小鼠的卵巢儲(chǔ)備,抑制始基卵泡的過(guò)度激活,減少卵泡閉鎖,該藥補(bǔ)腎健脾,益氣養(yǎng)血,負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞的自噬水平,抑制卵巢內(nèi)細(xì)胞的過(guò)度自噬。孫曉峰等[28]探討左歸丸對(duì)磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)誘導(dǎo)損傷的卵巢GCs影響及作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),大鼠卵巢GCs被30 μmol/L的PM干預(yù)后,GCs的自噬水平顯著升高,進(jìn)而誘導(dǎo)GCs的凋亡,而10%左歸丸含藥血清可以通過(guò)抑制GCs自噬/溶酶體降解途徑,減輕GCs的凋亡。白俊等[29]研究雷公藤甲素(triptolide,TP)誘導(dǎo)卵巢GCs自噬所需的濃度、時(shí)間,結(jié)果顯示:濃度為100 nmol/L的TP作用GCs 8 h后產(chǎn)生自噬現(xiàn)象,作用12 h后成功誘導(dǎo)自噬的發(fā)生。該過(guò)程是通過(guò)抑制PI3/AKT/m TOR信號(hào)通路調(diào)控自噬相關(guān)基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。復(fù)方新加歸腎丸可以通過(guò)激活 PI3K/AKT/m TOR 通路,下調(diào)自噬效應(yīng)分子Beclin1、 LC3 的表達(dá)并減少 p62 的消耗來(lái)修復(fù) TP導(dǎo)致的大鼠卵巢 GCs 的自噬損傷[30]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究也充分證實(shí):杜仲總黃酮可能通過(guò)激活PI3K/AKT/mTOR通路參與卵巢組織細(xì)胞自噬,降低PCOS大鼠GCs的自噬水平,進(jìn)而減少囊狀擴(kuò)張卵泡,降低血清AMH、LH、T的水平,增加黃體,升高FSH水平[31]。淫羊藿素亦通過(guò)激活PI3K/Akt通路抑制PCOS大鼠GCs的凋亡和自噬,提高Gs的增殖率,細(xì)胞增殖活性與藥物濃度成正比[32]。

從腎論治DOR不僅可以使腎中精氣充盛,促進(jìn)生殖功能的恢復(fù),還可以和調(diào)五臟氣血,從多系統(tǒng)、多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)調(diào)節(jié)整體功能[33]。縱觀細(xì)胞自噬的功能活動(dòng),亦是通過(guò)細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)交換和自我更新實(shí)現(xiàn)機(jī)體陰陽(yáng)氣血的平衡協(xié)調(diào),根據(jù)感邪輕重及屬性,治以扶正祛邪、調(diào)整陰陽(yáng)?！端貑?wèn)·至真要大論》謂“客者除之,勞者溫之……損者溫之”,補(bǔ)腎填精有助于提高DOR患者腎-天癸-沖任-胞宮的生殖功能,改善卵巢儲(chǔ)備,以至“正勝邪退”。補(bǔ)腎的同時(shí),亦應(yīng)注重調(diào)整機(jī)體陰陽(yáng)的盛衰及氣血的失調(diào)?！爸?jǐn)察陰陽(yáng)所在而調(diào)之,以之平期”,從調(diào)補(bǔ)腎陰腎陽(yáng)著手,陽(yáng)生陰長(zhǎng),則腎精自足。調(diào)理氣血要明辨疾病在氣、在血、屬虛、屬實(shí)的不平衡狀態(tài),使氣血和順,沖任調(diào)達(dá)。

4 小 結(jié)

細(xì)胞自噬廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi),可以通過(guò)溶酶體途徑實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的自我更新,對(duì)于卵泡的發(fā)育和閉鎖有著重要的作用。本文首次從中醫(yī)基礎(chǔ)理論釋意細(xì)胞自噬為出發(fā)點(diǎn),探討細(xì)胞自噬與DOR發(fā)生發(fā)展的聯(lián)系。筆者認(rèn)為自噬過(guò)程體現(xiàn)著精氣學(xué)說(shuō)及陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)的主要內(nèi)容,而且DOR的發(fā)生也存在著精氣陰陽(yáng)的失調(diào)。然而,目前相關(guān)中醫(yī)藥通過(guò)調(diào)控細(xì)胞自噬治療DOR的作用機(jī)制和中醫(yī)檢測(cè)指標(biāo)尚不完全明確,還缺乏清晰的臨床研究資料。因此,正確理解細(xì)胞自噬與中醫(yī)學(xué)的聯(lián)系,有利于開(kāi)展中醫(yī)藥通過(guò)細(xì)胞自噬參與卵泡發(fā)育及卵巢儲(chǔ)備功能的調(diào)節(jié),對(duì)于中醫(yī)藥治療DOR提供新的研究方向。

利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。