中山大學附屬第一醫(yī)院于君教授團隊揭示非酒精性脂肪肝炎導(dǎo)致肝癌的機制

近日，中山大學附屬第一醫(yī)院精準醫(yī)學研究院名譽院長于君教授團隊研究成果“Targeting N6-methyladenosine reader YTHDF1 with siRNA boosts anti-tumor immunity in NASH-HCC by inhibiting EZH2-IL-6 axis”發(fā)表于肝臟疾病領(lǐng)域頂級期刊Journal of Hepatology雜志（IF=26）。該研究首次揭示了YTHDF1在非酒精性脂肪肝炎導(dǎo)致的肝細胞癌（NASH-HCC）中的功能作用、分子機制及其與腫瘤免疫微環(huán)境的相互作用，為改善NASHHCC抗PD-1耐藥提供了聯(lián)合治療新策略。

肝細胞癌（HCC）是世界上第六大最常見的癌癥，也是第三大癌癥死亡原因。非酒精性脂肪肝炎（NASH）是指除酒精和其他明確的肝損因素之外導(dǎo)致的肝細胞內(nèi)脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征，與肥胖、胰島素抵抗和高脂血癥有關(guān)，最終可能發(fā)展為肝纖維化、肝硬化和肝癌。隨著人們生活水平的提高，NASH相關(guān)的肝癌（NASH-HCC）占肝癌患者的比例也越來越高。然而，NASH-HCC的發(fā)生機制目前尚不清楚，仍缺乏有效的靶向藥物對NASH-HCC進行治療，臨床也尚未有NASH-HCC的藥物或者生物療法。利用單克隆抗體靶向免疫檢查點阻斷（ICB）已成為HCC的一種新興治療手段，然而NASHHCC對ICB治療沒有響應(yīng)，因此亟須探究NASH-HCC對ICB治療耐藥的原因，尋找NASH-HCC潛在的治療靶點，從而克服NASH-HCC對ICB治療耐藥。

m6A是真核mRNA中最豐富的化學修飾，參與調(diào)節(jié)RNA的穩(wěn)定性、核加工、轉(zhuǎn)運、定位、翻譯，它和RNA-蛋白相互作用來調(diào)節(jié)RNA的命運。YTH N6-甲基腺苷RNA結(jié)合蛋白1（YTHDF1）是RNA m6A修飾的“閱讀器”蛋白，可以通過YTH結(jié)構(gòu)域特異性地識別RNA上m6A修飾的位點，促進核糖體附著在含有m6A修飾的mRNA上。然而對于YTHDF1在HCC，特別是NASH-HCC發(fā)病機制中的作用，以及對腫瘤免疫微環(huán)境的調(diào)節(jié)功能，目前還知之甚少。

該研究發(fā)現(xiàn)YTHDF1在NASH-HCC患者腫瘤組織中相較于腫瘤周圍組織顯著升高，利用YTHDF1肝臟特異性過表達小鼠以及飲食模型誘導(dǎo)的NASH-HCC自發(fā)成瘤模型，發(fā)現(xiàn)YTHDF1可以促進NASH-HCC的發(fā)生和發(fā)展。RNA seq結(jié)果提示YTHDF1主要影響免疫系統(tǒng)相關(guān)信號通路，sc-RNA seq和流式分析結(jié)果顯示YTHDF1誘導(dǎo)髓源性抑制細胞（MDSCs）的積累并抑制細胞毒性CD8+T細胞的功能。

MDSCs的募集和功能主要受到細胞因子的調(diào)控，為了研究YTHDF1如何影響MDSCs的功能，該研究通過細胞因子ELISA array結(jié)合腫瘤細胞與免疫細胞體外共培養(yǎng)實驗發(fā)現(xiàn)YTHDF1通過誘導(dǎo)IL-6的分泌，介導(dǎo)MDSCs的募集和激活，導(dǎo)致細胞毒性CD8+T細胞功能障礙。

通過m6A-seq，RIP-seq，ribo-seq和蛋白質(zhì)組等多組學研究鑒定出EZH2 mRNA是YTHDF1的關(guān)鍵下游靶點。YTHDF1識別EZH2 mRNA上m6A修飾位點促進EZH2的翻譯，EZH2進一步促進IL-6的表達和分泌。LNP包裹siRNA治療是FDA批準的可用于臨床治療的方案，LNP-siRNA或者YTHDF1基因敲除靶向YTHDF1聯(lián)合anti-PD-1治療可顯著提高NASH-HCC腫瘤對ICB治療的敏感性。

該研究首次發(fā)現(xiàn)YTHDF1-EZH2-IL-6信號軸可以招募和激活MDSCs，導(dǎo)致細胞毒性CD8+T細胞功能障礙，從而促進NASHHCC的發(fā)生和發(fā)展。靶向YTHDF1可以提高NASH-HCC抗anti-PD1免疫治療應(yīng)答新靶點的敏感度。

中山大學附屬第一醫(yī)院精準醫(yī)學研究院名譽院長于君教授為該論文通訊作者，特聘副研究員王莉娜為第一作者。