曹 翔, 曹春燕

南通市通州區(qū)人民醫(yī)院 血液內(nèi)科,江蘇 南通 226000

再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA)是一種T細(xì)胞免疫異常介導(dǎo)的自身免疫性疾病,其中,異常T細(xì)胞活化與AA中T細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的不平衡有關(guān)。有研究報(bào)道,細(xì)胞免疫功能紊亂在AA發(fā)病中起重要作用。γδT細(xì)胞是大顆粒淋巴細(xì)胞,屬T細(xì)胞亞群之一[1]。有研究發(fā)現(xiàn),AA患者在得到有效治療且造血功能恢復(fù)后,γδT細(xì)胞亞群減少,提示其或可通過直接細(xì)胞毒作用或分泌抑制因子影響機(jī)體造血功能[2]。AA患者存在血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、紅細(xì)胞生成素(erythrogenin,EPO)異常表達(dá)現(xiàn)象[3]。TPO是近年來發(fā)現(xiàn)的具調(diào)節(jié)血小板生成及骨髓巨噬細(xì)胞生長(zhǎng)作用的造血生長(zhǎng)因子。EPO是一種由腎及肝分泌產(chǎn)生的造血正調(diào)控因子,與紅細(xì)胞表面的EPO受體結(jié)合后,刺激骨髓紅細(xì)胞生成。目前,TPO、EPO與AA患者病情嚴(yán)重程度及γδT細(xì)胞亞群的關(guān)系尚無定論。本研究旨在探討AA患者外周血γδT細(xì)胞亞群與EPO、TPO水平的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2019年2月至2023年2月于通州區(qū)人民醫(yī)院門診及住院部治療的193例AA患者納入AA組。納入標(biāo)準(zhǔn):符合AA的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):合并嚴(yán)重心腦血管疾病及肝腎功能不全;合并自身免疫性疾病;合并惡性腫瘤;合并骨髓增生異常綜合征等其他血液系統(tǒng)疾病;合并出血性疾病;合并其他類型貧血性疾病。另選取同期58例健康體檢者納入健康組。AA組中,男性113例,女性80例;年齡(51.89±10.72)歲;吸煙史58例,飲酒史64例;合并糖尿病36例,高血壓45例,高脂血癥50例。健康組中,男性31例,女性27例;年齡(52.05±11.34)歲;吸煙史13例,飲酒史15例;合并糖尿病10例,高血壓12例,高脂血癥13例。兩組研究對(duì)象一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 研究方法

1.2.1 外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平檢測(cè) 應(yīng)用美國(guó)Coulter公司ELITEESP流式細(xì)胞儀,用三色免疫熒光標(biāo)記法及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者外周血γδT細(xì)胞亞群;采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)患者血清EPO、TPO水平,試劑盒由美國(guó)R&D公司提供。

1.2.2 治療方法 所有AA患者均給予鹿龍?jiān)偕鷾委?主要包括黨參、黃芪、鹿角膠、仙鶴草、熟地等,應(yīng)用本院自動(dòng)煎藥機(jī)煎煮,真空袋包裝,每日1劑,分早晚2次服用。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較AA組、健康組的外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平,并分析患者外周血γδT細(xì)胞亞群與EPO、TPO水平的相關(guān)性。(2)比較不同病情嚴(yán)重程度患者外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平,分析各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AA病情嚴(yán)重程度的評(píng)估價(jià)值及對(duì)患者病情加重的影響。(3)于治療3個(gè)月后參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》(第二版)[4]將患者分為有效組(n=154)與無效組(n=39),比較兩組治療后γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平。

2 結(jié)果

2.1 AA組與健康組外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平比較 AA組γδT細(xì)胞、CD4+γδT細(xì)胞、CD8+γδT細(xì)胞、EPO、TPO水平高于健康組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 AA組與健康組外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平比較

2.2 AA患者外周血γδT細(xì)胞亞群與EPO、TPO水平相關(guān)性 AA患者外周血γδT細(xì)胞、CD8+γδT細(xì)胞與EPO、TPO水平呈正相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 AA患者外周血γδT細(xì)胞亞群與EPO、TPO水平相關(guān)性

2.3 重型組與非重型組外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平比較 重型組γδT細(xì)胞、CD4+γδT細(xì)胞、CD8+γδT細(xì)胞、EPO、TPO水平高于非重型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 重型組與非重型組外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平比較

2.4 ROC曲線分析 聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線下面積高于外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO單獨(dú)檢測(cè),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4、圖1。

圖1 ROC曲線分析

2.5 多因素Logistic分析結(jié)果 多因素分析結(jié)果顯示,合并血流感染、反復(fù)出血、γδT細(xì)胞>9.25%、CD4+γδT細(xì)胞>0.83%、CD8+γδT細(xì)胞>4.28%、EPO>73.10 mU/ml、TPO>486.37 pg/ml是影響AA患者病情的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表5。

表5 多因素Logistic分析結(jié)果

2.6 有效組與無效組外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平比較 有效組治療后γδT細(xì)胞、CD8+γδT細(xì)胞、EPO、TPO水平低于無效組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表6。

表6 有效組與無效組外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO水平比較

3 討論

AA是由多種病因引起的,以骨髓造血功能衰竭及全血細(xì)胞減少為特征的血液系統(tǒng)疾病,表現(xiàn)為貧血、神疲乏力等[5]。有研究報(bào)道,AA患者中性粒細(xì)胞長(zhǎng)期低下且機(jī)體免疫功能紊亂,易并發(fā)細(xì)菌及病毒感染,導(dǎo)致病情反復(fù)或加重。

分析患者免疫功能變化對(duì)于該疾病病情評(píng)估至關(guān)重要[6]。γδT細(xì)胞是大顆粒淋巴細(xì)胞,為T細(xì)胞亞群。有研究報(bào)道,AA患者造血功能恢復(fù)后,γδT細(xì)胞T細(xì)胞亞群減少,提示其或可影響機(jī)體造血功能[7]。血小板減少是引起AA患者出血的主要原因,患者發(fā)病時(shí),血小板減少除了與血小板生成減少直接相關(guān),還可能與再生障礙性免疫機(jī)制異?；蛴捎谳斞鹜N免疫反應(yīng)導(dǎo)致血小板減少有關(guān)[8-9]。EPO、TPO是與骨髓造血功能密切相關(guān)的指標(biāo)。EPO是一種造血正調(diào)控因子,與主要表達(dá)于紅細(xì)胞表面的EPO受體結(jié)合,刺激骨髓紅細(xì)胞的生成和釋放;TPO是調(diào)節(jié)血小板生成及骨髓巨噬細(xì)胞生長(zhǎng)的造血生長(zhǎng)因子,可直接影響骨髓造血功能[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn),AA組中γδT細(xì)胞、CD4+γδT細(xì)胞、CD8+γδT細(xì)胞、EPO、TPO水平高于健康組,表明AA患者存在γδT細(xì)胞亞群及EPO、TPO水平異常升高現(xiàn)象,這主要與AA患者存在細(xì)胞免疫功能紊亂及造血功能異常有關(guān)。

AA的發(fā)病機(jī)制尚未闡明。目前認(rèn)為,其主要與藥物、化學(xué)毒物、電離輻射等有關(guān)[12]。有研究報(bào)道,病毒對(duì)造血干細(xì)胞影響較大,會(huì)導(dǎo)致AA發(fā)生及疾病進(jìn)展[13]。動(dòng)物研究證實(shí),病毒對(duì)造血干細(xì)胞的增殖、分化具有直接抑制作用[14]。病毒部分遺傳物質(zhì)可與骨髓造血細(xì)胞的遺傳物質(zhì)整合,直接損害骨髓造血干細(xì)胞,并通過對(duì)骨髓造血細(xì)胞增殖、分化負(fù)調(diào)控,導(dǎo)致骨髓造血功能障礙[15]。本研究結(jié)果顯示,合并血流感染、反復(fù)出血、γδT>9.25%、CD4+γδT>0.83%、CD8+γδT>4.28%、EPO>73.10 mU/ml、TPO>486.37 pg/ml是影響AA患者病情加重的危險(xiǎn)因素,提示患者病情加重與感染、細(xì)胞免疫功能紊亂等有關(guān),這主要是因?yàn)榛颊邫C(jī)體自身免疫性細(xì)胞功能異常,引起骨髓造血組織免疫損傷,從而引發(fā)造血細(xì)胞過度凋亡,加重疾病嚴(yán)重程度[16]。AA患者反復(fù)出血,加重?fù)p傷微血管,引起出血風(fēng)險(xiǎn)增加及血液丟失,進(jìn)而導(dǎo)致貧血加重。本研究結(jié)果顯示,聯(lián)合檢測(cè)評(píng)估AA嚴(yán)重程度的ROC曲線下面積>0.9,表明各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AA嚴(yán)重程度具有評(píng)估價(jià)值。有效組治療后γδT細(xì)胞、CD8+γδT細(xì)胞、EPO、TPO水平低于無效組,提示各指標(biāo)變化與AA治療療效有關(guān),這主要與患者得到有效治療后造血功能恢復(fù)有關(guān),提示這些指標(biāo)或可用于AA治療療效的臨床評(píng)估。

綜上所述,AA患者外周血γδT細(xì)胞亞群、EPO、TPO異常升高是病情加重的危險(xiǎn)因素,各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)患者病情嚴(yán)重程度具有評(píng)估價(jià)值。