肖 先，荊 云，李春燕，張 楠，郭 超

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院,河南 新鄉(xiāng) 453003;2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院生物與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心,河南 新鄉(xiāng) 453003)

澤瀉(AlismaRhizoma)為澤瀉科植物東方澤瀉[Alismaorientale(Sam.)Juzep.]或澤瀉(Alismaplantago-aquaticaLinn.)的干燥塊莖,其味甘且淡,性寒,具有利水滲濕、泄熱、化濁降脂等藥理作用,多用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛和高脂血癥的治療[1]。中國植物志記載澤瀉主要產(chǎn)于黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山西、陜西、新疆、云南等地。澤瀉具有悠久的使用歷史,在方劑配伍中發(fā)揮著舉足輕重的作用;國醫(yī)典藏中醫(yī)數(shù)據(jù)庫中記載了配伍澤瀉使用的眾多經(jīng)典名方,如澤瀉湯、澤瀉散、蒼術(shù)澤瀉丸和茯苓澤瀉散等[2]。澤瀉的炮制方法眾多,南北朝《雷公炮炙論》首次記載了澤瀉的炮制方法,廣泛用于臨床的現(xiàn)代炮制方法包括鹽澤瀉、麩炒澤瀉、炒澤瀉、土澤瀉等[3]。澤瀉的化學(xué)成分主要包括三萜類、倍半萜類、苯丙素類、二萜類、糖類和揮發(fā)油等多種成分,其中三萜類化合物為其主要藥效成分[4]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,澤瀉具有利尿、抗腫瘤、抗炎和調(diào)脂等藥理作用,對糖尿病、肝病及骨質(zhì)疏松等疾病有較好的治療作用[5]。本文對澤瀉的的主要化學(xué)成分以及藥理作用進(jìn)行歸納總結(jié),旨在為澤瀉的深入研究開發(fā)和臨床應(yīng)用提供一定的參考。

1 澤瀉的化學(xué)成分

澤瀉的化學(xué)成分主要有三萜類化合物、倍半萜類化合物、苯丙素類化合物及其他化合物等。

1.1 三萜類化合物

三萜類化合物在澤瀉中研究的最多,也最為深入。三萜類化合物結(jié)構(gòu)多為原烷型四環(huán)三萜。有學(xué)者從澤瀉中分離得到了21個(gè)結(jié)構(gòu)各異的原烷型三萜,其中Alisolide A～E為新的C-17螺旋體原烷型三萜,由1個(gè)氧基偶聯(lián)到1個(gè)五元環(huán)上形成;Alisolide H是一種新型三萜,含有未見報(bào)道過的內(nèi)過氧化物橋;Alisolide I是首個(gè)從澤瀉中分離到的23,24-縮醛三萜[6]。MAI等[7]從澤瀉根莖中分離到了12個(gè)新的原烷三萜,包括Alismanol A～G、3-oxo-16-oxo-11-anhydroalisol A、20-hydroxyalisol C、Alisol A、11-deoxy-25-anhydroalisol E及15,16-dihydroalisol A。TAO等[8]采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法測定了粗制和鹽制澤瀉中6種與利尿活性密切相關(guān)的三萜類化合物Alisol A、Alisol A-24-acetate、Alisol B、Alisol B-23-acetate、Alisol C-23-acetate 和Alisol F的含量,結(jié)果表明,鹽處理可以提高利尿活性三萜的溶出速度。張春彬等[9]使用高效液相一測多評法測定了48 批澤瀉飲片中2,3-乙酰澤瀉醇 C、澤瀉醇 A、2,4-乙酰澤瀉醇 A、2,5-乙酰澤瀉醇 A、澤瀉醇 B 及2,3-乙酰澤瀉醇 B 共6種三萜類成分的含量,并結(jié)合聚類分析、主成分分析方法,明確了不同產(chǎn)地澤瀉飲片中三萜類成分的含量差異,結(jié)果發(fā)現(xiàn), 2,3-乙酰澤瀉醇 C在川澤瀉中的含量較在建澤瀉生飲片中含量高,而其他5種化學(xué)成分含量相近,因此,為市場上川澤瀉飲片的質(zhì)量控制提供了一定的參考。

1.2 倍半萜類化合物

倍半萜類化合物是從澤瀉中分離出的第2大成分[10]。ZHAO等[11]首次在澤瀉中分離得到了1個(gè)新的倍半萜類化合物:(10S)-11-羥基-β-cyperone。LI等[12]采用體積分?jǐn)?shù)95%乙酸乙酯提取澤瀉粉,利用多種柱層析純化乙酸乙酯,得到10-O-methyl-orientalol A、10-O-ethyl-alismoxide、3β,4β-expoxy-chrysothol、orientalol G～H、Alismol、 orientalols A～C、orientalol E、 alismoxide和4-epi-alismoxide等12種愈創(chuàng)烷型倍半萜化合物。

1.3 苯丙素類化合物

苯丙素類化合物可以與糖或多元醇結(jié)合,并以糖苷或酯的形式存在于植物中,具有較強(qiáng)的生理活性。澤瀉中分離得到的苯丙素類化合物主要有N-trans-feruloyl-N′-cis-feruloyl-cadaverine、N,N′-trans-diferuloyl-3-oxo-cadaverine、N-trans-feruloyl-N′-cis-feruloyl-3-hydroxy-cadaverine、N,N′-cis-diferuloyl-3-hydroxy-cadaverine、N-trans-p-coumaroyl-N′-trans-feruloyl-3-hydroxy-cadaverine、plantain A、cis-2,4,5-trihydroxycinnamic acid 和 cis-aconitic anhydride ethyl ester[13]。

1.4 其他

澤瀉中除三萜類化合物、倍半萜類化合物和苯丙素類化合物外,還包括二萜類化合物、糖類及揮發(fā)油類成分等。有學(xué)者采用硅膠柱色譜對澤瀉的乙醇提取物進(jìn)行分離純化,得到2個(gè)新的二萜類化合物,分別命名為澤瀉二萜醇及澤瀉二萜苷[14]。朱懷昌等[15]從澤瀉水提物中鑒定了8個(gè)糖類化合物,包括:β-D-呋喃果糖、β-D-乙基呋喃果糖苷、5-羥甲基糖醛、蔗糖、棉子糖、水蘇糖、毛蕊花糖和甘露三糖。MIYAZAWA等[16]采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法鑒定出澤瀉揮發(fā)油的主要成分為胡烯醇(36.2%)和δ -欖香烯(12.4%)。王雅琴等[4]將不同產(chǎn)地澤瀉的揮發(fā)油化合物進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)其共同存在的揮發(fā)油化合物為δ-欖香烯、β-欖香烯、α-欖香烯、異長葉烯、斯巴醇、γ-古蕓烯、2-戊基呋喃、蛇麻烯、γ-木羅烯、氧化石竹烯、香樹烯、紫羅烯、十六烷酸乙酯、棕櫚酸、巴倫西亞烯等。

2 澤瀉的藥理作用

《中國藥典》2020 版中記載澤瀉主要用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛和高脂血癥的治療。現(xiàn)代藥理學(xué)研究主要圍繞澤瀉的利尿、抗腫瘤、抗炎等作用展開研究,此外,還包括澤瀉降低血糖、保護(hù)肝臟以及治療骨質(zhì)疏松等藥理活性。

2.1 利尿

研究證明,澤瀉具有良好的利尿作用,其利尿主要活性成分為三萜類化合物[17]。澤瀉中多個(gè)化學(xué)成分含量的比例關(guān)系可能是影響其利尿作用的關(guān)鍵,不同產(chǎn)地的澤瀉化學(xué)成分含量的比例關(guān)系各不一樣,其中以福建產(chǎn)的澤瀉品質(zhì)最好;動物實(shí)驗(yàn)分析了福建、江西、四川、湖北、廣西、河南、河北等7個(gè)產(chǎn)地的澤瀉的利尿效果,研究結(jié)果表明,不同產(chǎn)地的鹽制澤瀉干預(yù)均能增加大鼠尿量,其中福建澤瀉的利尿作用最為顯著[18]。有研究報(bào)道,澤瀉總?cè)铺崛∥镲@著增加了大鼠尿量和電解質(zhì)排泄,而三萜組分混合物Alisol B 23-acetate：Alisol B：Alisol A 24-acetate：Alisol A：Alisol C 23-acetate 7.2：0.6：2.8：3.0：6.4的利尿作用最佳,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),澤瀉總?cè)铺崛∥锞哂酗@著利尿作用的可能作用機(jī)制為增加Na+、K+和Cl-的轉(zhuǎn)運(yùn)[19]。FENG等[20]研究報(bào)道,澤瀉醇提物和澤瀉水提物均具有一定的利尿活性,但澤瀉醇提物增加尿量效果更顯著;此外,澤瀉醇提物對腎功能具有低劑量促進(jìn)利尿活性和高劑量抑制利尿活性的雙重作用,其作用機(jī)制可能與腎遠(yuǎn)曲小管中的氯化鈉共轉(zhuǎn)運(yùn)體有關(guān)。

2.2 抗腫瘤

細(xì)胞凋亡在維持細(xì)胞死亡和分裂的平衡中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,已成為癌癥治療的關(guān)鍵工具。caspase級聯(lián)反應(yīng)在細(xì)胞凋亡過程中起關(guān)鍵作用,絲裂原活化蛋白激酶也被證明與細(xì)胞凋亡有關(guān)。澤瀉提取物可通過降低抗凋亡蛋白B淋巴細(xì)胞瘤-2(B-cell lymphoma1,Bcl-2)基因和survivin水平以及升高促凋亡蛋白Bcl-2相關(guān)X蛋白水平誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡并激活caspase級聯(lián)反應(yīng)和絲裂原活化蛋白激酶。此外,澤瀉提取物可阻滯人胃腺癌細(xì)胞AGS G1期細(xì)胞周期,并使線粒體的膜電位去極化,從而抑制癌細(xì)胞的增長[21]。KWON等[22]研究表明,澤瀉提取物中的三萜化合物Alisol B 23-acetate同樣也是通過以上機(jī)制發(fā)揮抗癌作用。此外,有研究報(bào)道,Alisol B 23-acetate還可以通過降低腸道菌群中某些致病菌的比例,增加有益菌的比例,改善結(jié)腸炎相關(guān)癌癥小鼠的臨床癥狀和腸道微環(huán)境,改善腸道通透性,從而減少腸道致病細(xì)菌的進(jìn)入來發(fā)揮抗結(jié)腸癌作用[23]。

2.3 抗炎

炎癥是對損傷和感染的正常生物反應(yīng),炎癥的發(fā)生發(fā)展與多種疾病密切相關(guān)[24]。一氧化氮是一種由精氨酸通過一氧化氮合酶產(chǎn)生的細(xì)胞信號分子,一氧化氮水平通常被用作炎癥生物標(biāo)志物[25]。當(dāng)產(chǎn)生急性炎癥時(shí),巨噬細(xì)胞向神經(jīng)突起區(qū)快速遷移,因此,通過評估神經(jīng)突起區(qū)巨噬細(xì)胞的數(shù)量可評估藥物的抗炎活性。LIU等[26]通過硫酸銅誘導(dǎo)斑馬魚急性炎癥探究澤瀉中16S,24S-二羥基-24-去乙酰烯醇和syringaldehyde的抗炎作用,結(jié)果表明,二者可顯著抑制硫酸銅誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞向神經(jīng)突起的遷移;Griess實(shí)驗(yàn)表明,較低濃度的16S,24S-二羥基-24-去乙酰烯醇和syringaldehyde對脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7巨噬細(xì)胞中一氧化氮的產(chǎn)生具有較強(qiáng)的抑制作用且呈劑量依賴性。澤瀉中的三萜類化合物是其抗炎作用的主要活性成分,JIN 等[6]從澤瀉中分離鑒定了21個(gè)結(jié)構(gòu)各異的原烷型三萜,這些三萜類化合物對脂多糖誘導(dǎo)的Caco-2細(xì)胞中一氧化氮生成均有明顯的抑制作用,且半數(shù)抑制濃度均在 0.76～38.20 mmol·L-1之間。ZHAO等[27]研究表明,Alisol B可顯著降低非酒精性脂肪性肝炎小鼠原代肝細(xì)胞炎癥因子腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β和白細(xì)胞介素-6 的轉(zhuǎn)錄水平,顯著抑制小鼠原代肝細(xì)胞中炎癥的關(guān)鍵介質(zhì)c-Jun氨基末端激酶1/2和核因子-κB蛋白的磷酸化,從而減輕棕櫚酸誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎小鼠原代肝細(xì)胞的炎癥。

2.4 調(diào)節(jié)血脂

當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷時(shí),脂質(zhì)侵襲促進(jìn)巨噬細(xì)胞形成泡沫細(xì)胞,使血管平滑肌細(xì)胞由穩(wěn)定狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)椴±硇栽鲋碃顟B(tài),血管平滑肌細(xì)胞通過內(nèi)部彈性層從血管中層遷移到內(nèi)膜,導(dǎo)致其在內(nèi)膜內(nèi)大量積聚,最終導(dǎo)致結(jié)締組織的形成,這種積累又促進(jìn)了動脈粥樣硬化的發(fā)展和形成。研究表明,澤瀉提取物可恢復(fù)血管內(nèi)皮細(xì)胞活力,有效拮抗動脈粥樣硬化[28]。YAN等[29]研究表明,澤瀉乙腈提取物可顯著逆轉(zhuǎn)高脂飲食誘導(dǎo)的高脂血癥小鼠血漿中總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇水平,并有向正常水平改善的趨勢;與高脂血癥組相比,澤瀉乙腈提取物干預(yù)組大鼠動脈粥樣硬化指數(shù)(atherogenic index,AI)顯著降低,而AI指數(shù)可以評估心臟、冠狀動脈、主動脈和肝臟中泡沫細(xì)胞、血小板和脂質(zhì)的沉積情況;小鼠肝臟油紅染色結(jié)果顯示,澤瀉乙腈提取物和辛伐他汀治療顯著減少了肝臟脂滴的數(shù)量和大小。以上結(jié)果表明,澤瀉的乙腈提取物可能具有降脂作用。

前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草桿菌蛋白酶(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9) 可以降低低密度脂蛋白水平,ZHANG等[30]分析了澤瀉中的40種三萜類化合物對PCSK9的抑制活性,以及它們對低密度脂蛋白的影響,結(jié)果表明,17種三萜類化合物具有顯著促進(jìn)HepG2對低密度脂蛋白攝取的活性;6種三萜類化合物可通過抑制PCSK9來改善HepG2細(xì)胞對低密度脂蛋白的攝取;其中,Alisol G能顯著提高低密度脂蛋白膽固醇mRNA或蛋白水平,同時(shí)顯著降低PCSK9 mRNA或蛋白水平。膽固醇是膽汁酸的前體,法尼醇X受體(farnesoid X receptor,FXR)是調(diào)控膽汁酸合成、轉(zhuǎn)運(yùn)、排泄、重吸收等代謝過程的關(guān)鍵靶點(diǎn)。有研究報(bào)道, Alisol B 23-acetate可通過調(diào)節(jié)FXR來增加膽汁酸和膽固醇排泄,降低血漿膽固醇水平,從而預(yù)防動脈粥樣硬化[31]。脂滴相關(guān)蛋白的主要功能是保護(hù)脂滴免受脂酶的降解,過氧化物酶體增殖激活受體-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma,PPAR-γ)是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,對于脂類代謝過程起著重要調(diào)控作用;有研究表明,Alisol A 24-acetate可誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞中性脂肪脂解,蛋白激酶A特異性抑制劑預(yù)處理可減弱Alisol A 24-acetate誘導(dǎo)的激素敏感脂肪酶Ser660位點(diǎn)的磷酸化,而細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶抑制劑預(yù)處理可減弱澤瀉醇 A 24-醋酸酯誘導(dǎo)的PPAR-γ的激活以及脂滴相關(guān)蛋白的下調(diào);說明,澤瀉醇 A 24-醋酸酯可能通過激活蛋白激酶A介導(dǎo)的PPAR-γ磷酸化和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶介導(dǎo)的脂滴相關(guān)蛋白表達(dá)下調(diào),促進(jìn)3T3-L1脂肪細(xì)胞的中性脂肪分解[32]。

2.5 降低血糖

糖尿病是一種以慢性高血糖為特征的第3大慢性疾病,大部分糖尿病患者為2型糖尿病患者,2型糖尿病主要是由于胰島素分泌減少,靶組織(肝臟、骨骼肌和脂肪組織)出現(xiàn)胰島素抵抗而導(dǎo)致的一種疾病[33]。

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(recombinant glucose transporter 4,GLUT4)易位是葡萄糖代謝的核心,GLUT4從胞內(nèi)囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到質(zhì)膜是調(diào)節(jié)葡萄糖攝取的最重要步驟。進(jìn)食后,胰島β細(xì)胞釋放胰島素,胰島素與GLUT4的特定受體結(jié)合,導(dǎo)致GLUT4從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上,細(xì)胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)通道增加,從而促進(jìn)細(xì)胞膜上的葡萄糖攝取;有研究表明,澤瀉的主要化學(xué)成分Alisol A-24-acetate可顯著促進(jìn)小鼠C2C12細(xì)胞中GLUT4從囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到質(zhì)膜,促進(jìn)葡萄糖的攝取,進(jìn)而降低血糖[34]。JIA等[35]研究結(jié)果也表明,澤瀉中的三萜類成分可呈劑量依賴性地增加GLUT4表達(dá)水平及骨骼肌細(xì)胞對葡萄糖的攝取,從而增加糖代謝而發(fā)揮降血糖作用。α-葡萄糖苷酶主要存在于小腸中,其可將淀粉和其他多糖類物質(zhì)水解為葡萄糖;有研究表明,澤瀉醇提物可顯著抑制α-葡萄糖苷酶活性,從而降低葡萄糖生成以及促進(jìn)葡萄糖攝取而表現(xiàn)出顯著的降糖活性[36]。

2.6 保護(hù)肝臟

澤瀉疏肝湯是由蒼術(shù)配伍澤瀉而成的經(jīng)典傳統(tǒng)方劑。有研究報(bào)道,澤瀉疏肝湯可顯著減輕對硫乙酰胺誘導(dǎo)的大鼠肝損傷和纖維化,并降低肝損傷大鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平,改善對硫乙酰胺導(dǎo)致的肝損傷大鼠的肝毒性和相關(guān)肝功能障礙,提高了大鼠的存活率[37]。HUR等[38]研究表明,澤瀉甲醇提取物及其主要成分澤瀉醇B乙酸酯可顯著逆轉(zhuǎn)溴苯引起的肝臟環(huán)氧化物水解酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的減少,從而發(fā)揮一定的肝臟保護(hù)作用。李二穩(wěn)等[39]研究報(bào)道,澤瀉湯可抑制非酒精性脂肪性肝病小鼠肝細(xì)胞鐵死亡從而改善非酒精性脂肪性肝的癥狀,其作用機(jī)制可能與激活核因子E2相關(guān)因子有關(guān)。油酸會引起肝細(xì)胞脂肪堆積。DU等[40]研究表明,澤瀉提取物可顯著逆轉(zhuǎn)油酸所致的肝功能損傷指標(biāo)天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶增加,降低肝細(xì)胞中三酰甘油和總膽固醇水平,減少肝細(xì)胞中脂肪堆積,降低丙二醛和超氧化物歧化酶水平,從而減輕肝細(xì)胞氧化應(yīng)激水平。綜上,澤瀉提取物具有一定的肝保護(hù)作用。

2.7 抗骨質(zhì)疏松

骨骼的健康依賴于破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞活動的平衡,內(nèi)源性雌激素缺乏會導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥。 JIA等[41]研究表明,澤瀉醇C-23-乙酸酯可降低卵巢切除大鼠血清中骨吸收標(biāo)志物的含量,但不影響大鼠血清中骨形成標(biāo)志物含量;提示,澤瀉醇C-23-乙酸酯的成骨作用不明顯,但會抑制破骨細(xì)胞的產(chǎn)生和功能,從而發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用。

2.8 其他

有研究報(bào)道,澤瀉醇提物可改善SCH母鼠甲狀腺功能,促進(jìn)仔鼠神經(jīng)因子表達(dá),并提高仔鼠的學(xué)習(xí)與記憶功能[42]。

3 結(jié)論

澤瀉作為一味常用的傳統(tǒng)中藥,其在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品,澤瀉有“養(yǎng)五臟,益氣力”之功,其化學(xué)成分多樣,包括三萜類化合物、倍半萜類化合物、苯丙素類化合物、二萜類化合物、糖類和揮發(fā)油等多種成分。澤瀉的三萜類化合物和倍半萜類化合物研究較多,其他類型的化合物研究相對較少,未來可進(jìn)一步加強(qiáng)澤瀉化學(xué)成分的研究,為澤瀉的藥材基源和加工方法提供一定的參考。澤瀉的臨床應(yīng)用廣泛,具有利尿、抗癌、抗心腦血管疾病、抗炎、降糖以及改善肝功能和抗骨質(zhì)疏松等藥理作用。但澤瀉的藥理作用多集中在澤瀉粗提取物,澤瀉中單體化學(xué)成分藥理作用的研究較少。