陳麗麗 李明 王文怡

【摘要】 目的：探究非小細(xì)胞肺癌患者血清長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)變化及相關(guān)性。方法：2020年1月—2023年5月武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院收治的90例非小細(xì)胞肺癌患者為觀察組，同時(shí)期收治的40例肺部良性病變患者為對(duì)照組。檢測(cè)及比較兩組血清lncRNA（lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL）及VEGF（VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D）的表達(dá)水平，并比較觀察組中不同性別、年齡、疾病分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的血清lncRNA及VEGF表達(dá)水平，采用Pearson相關(guān)性分析非小細(xì)胞肺癌患者上述血清lncRNA與VEGF的相關(guān)性。結(jié)果：觀察組血清lncRNA與血清VEGF均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；觀察組中不同疾病分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的血清lncRNA與VEGF比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Pearson相關(guān)性分析顯示，非小細(xì)胞肺癌患者的血清lncRNA與VEGF均呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：非小細(xì)胞肺癌患者lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL及VEGF均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且上述lncRNA與VEGF均呈正相關(guān)，在非小細(xì)胞肺癌早期診斷中具有一定價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 非小細(xì)胞肺癌 長(zhǎng)鏈非編碼RNA 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 相關(guān)性

Study on the Expression Changes and Correlation of Serum Long Non-coding RNA and Vascular Endothelial Growth Factor in Patients with Non-small Cell Lung Carcinoma/CHEN Lili， LI Ming， WANG Wenyi. //Medical Innovation of China， 2024， 21（15）： -147

[Abstract] Objective： To investigate the expression changes and correlation of serum long non-coding RNA （lncRNA） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in patients with non-small cell lung carcinoma. Method： A total of 90 patients with non-small cell lung carcinoma admitted to Tianyou Hospital Affiliated to Wuhan University of Science & Technology from January 2020 to May 2023 were included in the observation group， and 40 patients with benign lung lesions admitted during the same period were included in the control group. The expression levels of serum lncRNA （lncRNA H19， lncRNA DANCR and lncRNA ANRIL） and VEGF （VEGF-A， VEGF-C and VEGF-D） were detected and compared between the two groups. The expression levels of serum lncRNA and VEGF in patients with different gender， age， disease staging， differentiation degree and lymph node metastasis situation were compared in the observation group. Pearson correlation was used to analyze the correlation between serum lncRNA and VEGF in patients with non-small cell lung carcinoma. Result： Serum lncRNA and VEGF in observation group were significantly higher than those in control group （P<0.05）. There were significant differences in serum lncRNA and VEGF in patients with disease staging and lymph node metastasis situation in the observation group （P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that serum lncRNA were positively correlated with VEGF in patients with non-small cell lung carcinoma （P<0.05）. Conclusion： lncRNA H19， lncRNA DANCR， lncRNA ANRIL and VEGF are all highly expressed in patients with non-small cell lung carcinoma， and the above lncRNA are positively correlated with VEGF， which have certain value in the early diagnosis of non-small cell lung carcinoma.

[Key words] Non-small cell lung carcinoma Long non-coding RNA Vascular endothelial growth factor Correlation

First-author's address： Department of Laboratory， Tianyou Hospital Affiliated to Wuhan University of Science & Technology， Wuhan 430064， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.15.034

肺癌為呼吸系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，我國(guó)惡性腫瘤中肺癌發(fā)病率及死亡率位居首位，且發(fā)病率仍呈逐年上升的進(jìn)展趨勢(shì)[1-2]。其中大部分為非小細(xì)胞肺癌，占80%以上，該病早期不易察覺，多數(shù)患者確診時(shí)已步入中晚期。晚期非小細(xì)胞肺癌患者5年生存率較低，且具較高復(fù)發(fā)率[3]。病理活檢是非小細(xì)胞肺癌確診的金標(biāo)準(zhǔn)，但其具有一定創(chuàng)傷性，并可能引發(fā)相關(guān)并發(fā)癥，臨床中受到一定限制。腫瘤標(biāo)志物可作為早期診斷肺癌的輔助手段已成為專家共識(shí)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）為促血管生成因子，在多種惡性腫瘤的發(fā)展中有重要作用[4]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）參與腫瘤發(fā)生發(fā)展過程，且其可穩(wěn)定存在于血清中。相關(guān)研究已證實(shí)，lncRNA H19、lncRNA DANCR、lncRNA ANRIL在胃癌、前列腺癌、甲狀腺癌等惡性腫瘤中表達(dá)水平升高，并與腫瘤的侵襲、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)密切相關(guān)[5-7]。故本研究現(xiàn)探究非小細(xì)胞肺癌患者血清lncRNA及VEGF的表達(dá)變化及相關(guān)性，并報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月—2023年5月武漢科技大學(xué)附屬天佑醫(yī)院收治的90例非小細(xì)胞肺癌患者為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：非小細(xì)胞肺癌符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]，經(jīng)病理學(xué)及影像檢查確診；未接受放化療治療；生存期評(píng)估大于3個(gè)月；依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤；有心肌梗死、腦梗死病史；合并心力衰竭、高血壓、糖尿??；妊娠期或哺乳期；臨床資料不完整。選取本院同時(shí)期收治的40例肺部良性病變患者為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理確診為肺部良性病變；依從性良好；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：惡性腫瘤；心肌梗死、腦梗死病史；合并心力衰竭、高血壓、糖尿?。蝗焉锲诨虿溉槠?。本次研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)?；颊吆?或家屬均知情同意本研究。

1.2 方法

采集兩組研究對(duì)象的晨起空腹血，采集量為5.0 mL，離心半徑10 cm，按照每分鐘3 500 r的速度離心10 min，取血清采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法進(jìn)行l(wèi)ncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL的檢測(cè)。首先進(jìn)行總RNA的提取，檢測(cè)總RNA的濃度及純度，反轉(zhuǎn)錄處理后，定量PCR檢測(cè)，每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)量3次取平均值，以2-ΔΔCt進(jìn)行上述指標(biāo)相對(duì)表達(dá)量的計(jì)算；另取血標(biāo)本5.0 mL，按照每分鐘3 500 r的速度離心10 min，取血清采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行VEGF（VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D）的定量檢測(cè)。上述檢測(cè)均由兩名專業(yè)人員嚴(yán)格按照操作標(biāo)準(zhǔn)及步驟進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)及比較兩組血清lncRNA（lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL）及VEGF（VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D）的表達(dá)情況，并比較觀察組不同性別、年齡、疾病分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的血清lncRNA及VEGF表達(dá)水平，采用Pearson相關(guān)性分析非小細(xì)胞肺癌患者上述血清lncRNA與VEGF的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究中的數(shù)據(jù)檢驗(yàn)軟件為SPSS 23.0。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，進(jìn)行字2檢驗(yàn)處理；計(jì)量資料以（x±s）表示，兩組間進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)處理，多組間比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析，相關(guān)性分析則采用Pearson相關(guān)性分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料比較

觀察組男52例，女38例；年齡40～78歲，平均（59.91±11.63）歲；<65歲50例，≥65歲40例。

對(duì)照組男23例，女17例，年齡41～77歲，平均（59.96±11.35）歲；<65歲22例，≥65歲18例。

兩組性別與年齡比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組血清lncRNA表達(dá)比較

觀察組血清lncRNA表達(dá)均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；觀察組中不同性別、年齡及分化程度患者的血清lncRNA表達(dá)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但不同疾病分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的血清lncRNA表達(dá)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1、表2。

2.3 兩組VEGF表達(dá)比較

觀察組血清VEGF表達(dá)均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；觀察組中不同性別、年齡及分化程度患者的血清VEGF表達(dá)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但不同疾病分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的血清VEGF表達(dá)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3、表4。

2.4 非小細(xì)胞肺癌患者血清lncRNA與VEGF的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，非小細(xì)胞肺癌患者血清lncRNA與VEGF均呈正相關(guān)（P<0.05），見表5。

3 討論

非小細(xì)胞肺癌是肺癌常見類型，起病早期較隱匿，據(jù)相關(guān)研究統(tǒng)計(jì)，約有2/3的非小細(xì)胞肺癌在中晚期確診[9]。晚期非小細(xì)胞肺癌術(shù)后生存率仍較低，因此，關(guān)于非小細(xì)胞肺癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)指標(biāo)的研究具有重要臨床價(jià)值。

惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程中，VEGF是已被證實(shí)與惡性腫瘤發(fā)展密切相關(guān)的指標(biāo)，VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D作為其亞型，在惡性腫瘤新生血管形成中具有促進(jìn)作用，同時(shí)其可使毛細(xì)血管通透性增加，而這也是腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移等的重要原因[10]。lncRNA作為近年來臨床研究較熱的項(xiàng)目[11-13]，其在調(diào)控細(xì)胞周期及細(xì)胞分化方面具有積極的作用，而其中的lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL，在肺癌患者中多呈現(xiàn)高表達(dá)，且有研究認(rèn)為其對(duì)惡性腫瘤的部分miR及VEGF具有一定的調(diào)控作用[14-16]，但是其與非小細(xì)胞肺癌患者上述VEGF亞型的關(guān)系研究較為匱乏，因此仍有較大的研究空間。

本研究結(jié)果顯示，非小細(xì)胞肺癌患者lncRNA H19、lncRNA DANCR、lncRNA ANRIL及VEGF的表達(dá)均顯著高肺部良性病變患者（P<0.05），提示lncRNA H19、lncRNA DANCR、lncRNA ANRIL及VEGF與非小細(xì)胞肺癌發(fā)生有一定關(guān)系。同時(shí)不同疾病分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的非小細(xì)胞肺癌患者lncRNA與VEGF存在顯著差異（P<0.05），說明lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL及VEGF在非小細(xì)胞肺癌發(fā)展中也起著重要作用。經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌患者的血清lncRNA與VEGF均呈正相關(guān)（P<0.05），因此肯定了上述血液指標(biāo)在非小細(xì)胞肺癌患者中的表達(dá)變化及相關(guān)性。分析原因，lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL等lncRNA不僅對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期具有一定影響[17-18]，且對(duì)于血管生成能力具有增強(qiáng)作用，而這也是腫瘤增殖及血管生成的重要影響因素，與之相關(guān)的上述VEGF亞型表達(dá)隨之變化[19-20]。

綜上所述，非小細(xì)胞肺癌患者lncRNA H19、lncRNA DANCR及l(fā)ncRNA ANRIL及VEGF均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且上述lncRNA與VEGF均呈正相關(guān)性，在非小細(xì)胞肺癌患者早期診斷中具有一定價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]陳宇，張艷亮.長(zhǎng)鏈非編碼RNA對(duì)肺癌發(fā)生、發(fā)展、診斷及預(yù)后評(píng)估作用的研究進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2022，43（22）：2793-2797.

[2]方麗蘭，余更生，龐景灼.等.非小細(xì)胞肺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞與臨床病理特征和血清CEA、NSE、Cyfra21-1、pro-GRP的關(guān)系分析[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2022，22（3）：510-514.

[3]徐建群，王紅娟，郭紅榮.等.貝伐單抗結(jié)合培美曲塞與順鉑化療對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者血清lncRNA H19及l(fā)ncRNA HOTAIR表達(dá)的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2023，43（2）：283-287.

[4]石遠(yuǎn)凱，孫燕，于金明.等.中國(guó)晚期原發(fā)性肺癌診治專家共識(shí)（2016年版）[J].中國(guó)肺癌雜志，2016，19（1）：1-15.

[5]張曉敏，徐坤，胡彩虹.等.利用UALCAN與ENCORI數(shù)據(jù)庫分析lncRNA H19在甲狀腺癌中的表達(dá)及其作用機(jī)制[J].甘肅科技，2022，38（12）：103-108.

[6]王賀賀，張玉芝，李建婷.等.LncRNA DANCR通過miR-33a-5p/C-MYC調(diào)控前列腺癌增殖、遷移和侵襲的作用機(jī)制[J].濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2021，43（1）：16-18，22.

[7]陳濤.中晚期胃癌患者血清lncRNA-ANRIL和lncRNA H19表達(dá)及與預(yù)后相關(guān)性[J].浙江醫(yī)學(xué)，2022，44（3）：241-245.

[8]中華醫(yī)學(xué)會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)雜志社.中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南（2018版）[J].中華腫瘤雜志，2018，40（12）：935-964.

[9]陳煥，王偉，陳郭珍.VEGF蛋白表達(dá)及VEGF-2578C/A等位基因頻率與非小細(xì)胞肺癌臨床特征、預(yù)后的關(guān)系[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2021，28（8）：922-925.

[10]孫娟子，孫蘇娟，宋舒曼，等.循環(huán)血VEGF和MIC-1的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系分析[J].實(shí)用癌癥雜志，2022，37（3）：355-357.

[11] LIU T，HAN C，F(xiàn)ANG P，et al.Long non-coding RNAs in lung cancer： implications for lineage plasticity-mediated TKI resistance[J].Cell Mol Life Sci，2021，78（5）：1983-2000.

[12]楊冉，韓金利，侯建彬，等.非小細(xì)胞肺癌手術(shù)前后長(zhǎng)鏈非編碼RNA水平變化及其與預(yù)后的關(guān)系[J].實(shí)用醫(yī)院臨床雜志，2021，18（6）：75-78.

[13] TANG P，SUN D，XU W，et al.Long non?coding RNAs as potential therapeutic targets in non?small cell lung cancer （Review）[J].Int J Mol Med，2023，52（2）：68.

[14] HUANMG Z，LEI W，HU H B，et al.H19 promotes non-small-cell lung cancer （NSCLC） development through STAT3 signaling via sponging miR-17[J].J Cell Physiol，2018，233（10）：6768-6776.

[15] HUANG Y F，ZHANG Y，F(xiàn)U X.Long non-coding RNA DANCR promoted non-small cell lung cancer cells metastasis via modulating of miR-1225-3p/ErbB2 signal[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2021，25（2）：758-769.

[16]秦妮娜，陳鍇，劉磊.丙泊酚通過抑制lncRNA ANRIL抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖與遷移[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2019，34（4）：335-337，357.

[17]杜偉，王山水，張煥煥.LncRNA H19通過海綿miR-675和上調(diào)CDH13的表達(dá)促進(jìn)肺癌的增殖、侵襲和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[J].西部醫(yī)學(xué)，2022，34（8）：1121-1127.

[18]陳志，韓書山，文潔，等.長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肺癌中的研究進(jìn)展[J].中國(guó)臨床實(shí)用醫(yī)學(xué)，2021，12（2）：64-67.

[19]趙麗霞，任成波，馬峰，等.肺癌組織MTA1、VEGF-C表達(dá)變化及與患者臨床病理特征、預(yù)后關(guān)系[J].廣東藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，38（1）：103-108.

[20]曹國(guó)磊，范佩文，王清鶴，等.肺腺癌合并肺栓塞患者差異長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)分析[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2020，37（7）：1328-1330.

（收稿日期：2023-10-23） （本文編輯：陳韻）