瓊脂糖
- 綜合創(chuàng)新設(shè)計實驗:自修復(fù)水凝膠的制備及性能測試
能力;網(wǎng)絡(luò)二是瓊脂糖網(wǎng)絡(luò),依靠氫鍵作用物理交聯(lián),瓊脂糖網(wǎng)絡(luò)可提供額外的平臺以承受應(yīng)力并穩(wěn)固結(jié)構(gòu),從而提高水凝膠的強度、韌性和穩(wěn)定性。因此,瓊脂糖/PVA雙網(wǎng)絡(luò)水凝膠顯示出優(yōu)異的自愈能力,并在水下表現(xiàn)出優(yōu)異的自修復(fù)性能。此外,水凝膠還表現(xiàn)出可循環(huán)成型的特性(反復(fù)膠凝后形成多種形狀)。而且,PVA和瓊脂糖具有良好的生物相容性,已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域。該實驗可用于應(yīng)用化學(xué)及高分子專業(yè)高年級本科生課堂教學(xué),通過實驗教學(xué),訓(xùn)練學(xué)生對化學(xué)理論及實驗技術(shù)的綜合運用能力,
大學(xué)化學(xué) 2023年9期2023-11-02
- 細(xì)述基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程
——由一道江蘇高考題引發(fā)的思考
、PCR技術(shù)與瓊脂糖凝膠電泳是教學(xué)難點,在習(xí)題中也常出現(xiàn)錯誤,本文將通過瓊脂糖凝膠電泳在雙酶切產(chǎn)物分離中的作用對其進(jìn)行分析。1.背景知識,追根溯源在使用單酶切的載體或者平端載體時,載體本身的兩個DNA末端可以匹配,產(chǎn)生自身連接的產(chǎn)物。如果載體濃度和插入DNA片段濃度均較低,則載體DNA兩個末端之間碰撞的機會大于和目的DNA末端碰撞的機會,就會導(dǎo)致載體DNA分子的自身連接,形成環(huán)化的載體分子。在將目的基因片段插入到載體中的時候,由于酶切位點序列的回文特征,若
教學(xué)考試(高考生物) 2023年1期2023-04-14
- 仿生樹葉模型的制作及在瓊脂糖微流控芯片中的應(yīng)用
經(jīng)濟、易操作的瓊脂糖微流控芯片鮮見報道.本文利用仿生樹葉模板制作的瓊脂糖微流控芯片對大腸桿菌的趨化性進(jìn)行了研究.建立一級、二級、三級脈序,最大脈序尺寸值可達(dá)1038.02 μm,最小脈序尺寸為36.32 μm,寬度不一的通道構(gòu)建為細(xì)菌趨化性實驗提供了穩(wěn)定可靠的梯度空間.此外,構(gòu)建瓊脂糖微流控芯片具有巨大優(yōu)勢.由于瓊脂糖通道具有毛細(xì)力,瓊脂糖具有親水性,不需要借助外力就可以讓細(xì)菌順利地進(jìn)入瓊脂糖微流控芯片,實現(xiàn)對細(xì)菌趨化性的定性檢測,與傳統(tǒng)檢測方法相比,可以
高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報 2022年11期2022-11-15
- 高效安全的核酸染料在瓊脂糖凝膠電泳中的應(yīng)用
00)0 引言瓊脂糖凝膠電泳是DNA片段分離、檢測最常用的技術(shù)之一[1],也是高校生物類專業(yè)實踐教學(xué)的重要環(huán)節(jié)。核酸染料與瓊脂糖凝膠中DNA片段結(jié)合后,在特定光譜照射下發(fā)出熒光條帶,從而指示DNA片段大小和質(zhì)量。溴化乙錠(EB)是瓊脂糖凝膠電泳最早使用也是最常用的核酸染料,其含有一個插入DNA堆積堿基之間的三環(huán)平面基團,經(jīng)艾姆斯實驗證實具有高度致癌性和致突變能力,對長期使用EB的實驗人員和環(huán)境存在危害性[2]。隨著對核酸染料研究的深入以及化學(xué)合成技術(shù)的發(fā)展
實驗室研究與探索 2022年7期2022-10-26
- 不同檢測方法對甜菜SCoT和DAMD擴增產(chǎn)物多態(tài)性的影響
辨率高,都可用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳分離。早有研究表明不同的凝膠電泳對PCR擴增產(chǎn)物的多態(tài)性存在一定的影響。李新海等[21]首先利用3% 瓊脂糖凝膠和12%的聚丙烯凝膠酰胺電泳對SSR 擴增產(chǎn)物進(jìn)行分離,結(jié)果表明瓊脂糖凝膠電泳更適于遺傳作圖和基因定位的研究,聚丙烯酰胺凝膠電泳則可用于遺傳多樣性和構(gòu)建指紋圖譜的研究;而孫燕紅等[22]利用26條DAMD 引物和12個甜菜品種,對比2%的瓊脂糖凝膠和6%聚丙烯酰胺凝膠電泳對擴增產(chǎn)物多態(tài)性的影響時,則發(fā)現(xiàn)
中國甜菜糖業(yè) 2022年3期2022-10-20
- pH值響應(yīng)性羧甲基瓊脂糖-聚多巴胺水凝膠制備及緩釋性能
質(zhì)的可控釋放。瓊脂糖是提取自紅藻的一種線性聚合物,由交替的-半乳糖和3,6-脫水--半乳糖組成。瓊脂糖具有良好的生物相容性,被用作組織工程材料和遞送載體。而瓊脂糖在室溫下水溶性較差,導(dǎo)致其應(yīng)用受到了一定限制。為解決這一問題,需對瓊脂糖進(jìn)行改性修飾,其中一種方法是向瓊脂糖中引入羧甲基,改變瓊脂糖的構(gòu)象,提高水溶性,從而改善生物活性。目前,已有相關(guān)文獻(xiàn)報道了羧甲基瓊脂糖(carboxymethyl agarose,CMA)的合成及表征,但將CMA用于構(gòu)建水凝膠
食品科學(xué) 2022年10期2022-06-02
- 海洋弧菌HN897 β-瓊脂糖酶基因vas1-1339 異源表達(dá)及活性分析
類膠狀多糖, 瓊脂糖(Agarose)是其主要組成成分之一(Park et al,2020)。瓊脂糖是由α-L-半乳糖和β-D-半乳糖重復(fù)單元構(gòu)成的瓊脂多糖; 部分微生物可通過瓊脂糖酶(Agarase)生化酶解作用將瓊脂糖水解為更小分子量的瓊脂寡糖, 從而可被生物體進(jìn)一步分解利用, 這也是海洋微生物碳源利用的方式之一(Wang et al,2020; Park et al, 2020)。依據(jù)水解糖苷鍵的不同, 瓊脂糖酶分為α-瓊脂糖酶和β-瓊脂糖酶, 其中
熱帶海洋學(xué)報 2022年2期2022-03-31
- 一種具有方向性微結(jié)構(gòu)的聚乙烯醇-瓊脂糖水凝膠的制備方法及應(yīng)用
構(gòu)的聚乙烯醇-瓊脂糖水凝膠的制備方法及應(yīng)用,屬于人造組織/器官修復(fù)材料領(lǐng)域。以聚乙烯醇和瓊脂糖為基體材料,利用瓊脂糖的交聯(lián)特性,形成瓊脂糖大分子糖鏈,依靠前驅(qū)液的流動引導(dǎo)瓊脂糖大分子鏈在前驅(qū)液內(nèi)產(chǎn)生方向性,在冷凍循環(huán)的過程中聚乙烯醇圍繞瓊脂糖的糖鏈結(jié)晶,形成具有方向性的纖維狀微結(jié)構(gòu)的水凝膠。該制備方法無需借助外加物理場的作用,制備的水凝膠具有各向異性,而且制備流程簡單,可重復(fù)性高,對設(shè)備要求低。制備的水凝膠具有均勻方向性的纖維狀微結(jié)構(gòu),提升了材料的抗拉伸性
合成樹脂及塑料 2022年6期2022-03-14
- 化膿隱秘桿菌肝素結(jié)合蛋白的提取及鐵結(jié)合蛋白的黏附特性分析
最近,利用肝素瓊脂糖凝膠從化膿隱秘桿菌菌體蛋白中提取到包含鐵結(jié)合蛋白(iron-binding protein, IBP)在內(nèi)的多種ATP結(jié)合盒(ATP binding cassette, ABC)轉(zhuǎn)運體的底物結(jié)合蛋白(substrate binding proteins, SBPs)。IBP是化膿隱秘桿菌的1種抗原[14],在化膿隱秘桿菌自然感染的山羊血清中能檢測到針對IBP的抗體,提示其在感染中會表達(dá)。目前尚無關(guān)于IBP參與化膿隱秘桿菌黏附宿主細(xì)胞的研
畜牧獸醫(yī)學(xué)報 2022年1期2022-03-08
- 基于瓊脂糖-中性紅法的簡易空斑試驗應(yīng)用研究*
基纖維素相比,瓊脂糖更容易覆蓋細(xì)胞單層[3-4],但方法不當(dāng)時,不易形成空斑。本研究應(yīng)用瓊脂糖覆蓋細(xì)胞單層、中性甲醛固定及中性紅染色的試驗流程檢測病毒滴度,能形成合適的空斑,方法簡單且重復(fù)性較好,為進(jìn)一步進(jìn)行RSV相關(guān)基礎(chǔ)研究打下了基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1主要材料 人喉上皮癌細(xì)胞Hep-2及RSV A2標(biāo)準(zhǔn)株由重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸病研究室惠贈。胎牛血清購自澳大利亞AusGeneX公司;DMEM液體培養(yǎng)基和干粉培養(yǎng)基分別購自美國Gibco公司和Hy
現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生 2022年2期2022-02-17
- 基于膠原-瓊脂糖的組織工程表皮替代物構(gòu)建研究
殼聚糖、明膠、瓊脂糖等生物材料構(gòu)建表皮替代物,但其生物相容性均低于膠原。因此,選用復(fù)合型生物材料更有利于表皮替代物的構(gòu)建[13]。膠原是人體皮膚的主要組成成分,維持著人類皮膚的彈性和韌性,同時具有支撐和保護作用,而且主動參與細(xì)胞的遷移、分化和增殖代謝,具有良好的生物相容性[14]。在皮膚組織工程方面已經(jīng)有了大量的應(yīng)用與研究,但其存在降解速度較快,機械性能較弱的問題[15-16]。瓊脂糖作為一種天然多糖材料,是一種高親水性聚合物,具有細(xì)胞無毒性、降解緩慢、材
太原理工大學(xué)學(xué)報 2021年6期2021-11-25
- 雛麻雞死后腦組織中DNA電泳觀察
提取DNA 做瓊脂糖凝膠電泳。根據(jù)電泳圖譜,觀察禽死后腦組織DNA變化的規(guī)律與特征。1 材料與方法1.1 實驗材料1.1.1 實驗動物健康雛麻雞6 只,31日齡,雌雄不限,實驗動物均為大慶市讓胡路區(qū)某養(yǎng)殖場提供。1.1.2 主要試劑PBS 液、液氮、裂解液、緩沖液GA、緩沖液GB、緩沖液GD、RNaseA 溶液、蛋白酶K、無水乙醇、漂洗液PW、洗脫緩沖液TE、吸附柱CB3、收集管、5×TBE 電泳緩沖液、6×電泳載樣緩沖液、溴化乙錠(EB)溶液母液、瓊脂糖
中獸醫(yī)學(xué)雜志 2021年6期2021-08-31
- 瓊脂糖酶產(chǎn)生菌的篩選和培養(yǎng)基優(yōu)化
族構(gòu)成,組分為瓊脂糖和瓊脂膠[1]。瓊脂糖是接近中性的多糖,是由1,3糖苷鍵連接的β-D-半乳糖(G)和由1,4糖苷鍵連接的3,6-內(nèi)醚-α-L-半乳糖(LA)殘基重復(fù)交替連接成的線性多糖分子,因其具有穩(wěn)定性和凝膠特性而受到廣泛應(yīng)用,例如作為食品添加劑、生物能源的原料、微生物生長培養(yǎng)基、糖果以及瓊脂果凍[2]。瓊脂膠的半乳聚糖主鏈上常有硫酸酯基團等其他基團,并結(jié)合著鈣、鎂等無機元素[3]。瓊脂糖酶由瓊脂分解細(xì)菌產(chǎn)生,幫助瓊脂解聚,將其降解成低聚合度的寡糖中
食品與生物技術(shù)學(xué)報 2021年6期2021-07-29
- 3D打印瓊脂糖和海藻酸鈉復(fù)合水凝膠組織與性能研究
鈉復(fù)合凝膠以及瓊脂糖/海藻酸鈉復(fù)合凝膠3D打印軟骨支架的性能。結(jié)果表明,相對純海藻酸鈉凝膠,膠原/海藻酸鈉復(fù)合凝膠和瓊脂糖/海藻酸鈉復(fù)合凝膠制備的支架力學(xué)性能均有所改善。且在3種支架中,膠原/海藻酸鈉復(fù)合凝膠在促進(jìn)細(xì)胞黏附、加速細(xì)胞增殖和增強軟骨特異性基因的表達(dá)上具有顯著優(yōu)勢。Lopez-marcial等[13]比較了Pluronic F-127水凝膠、不同濃度的瓊脂糖以及不同比例的瓊脂糖-海藻酸鈉復(fù)合水凝膠作為軟骨組織工程生物材料的性能,包括力學(xué)性能、打
材料工程 2021年5期2021-05-21
- 瓊脂糖明膠在組織脫水前預(yù)包埋中的應(yīng)用
實驗發(fā)現(xiàn),使用瓊脂糖明膠在脫水前對組織標(biāo)本進(jìn)行預(yù)包埋,脫水后不影響組織原固有形態(tài),包埋省時、省力,對HE及免疫組化無影響,現(xiàn)介紹如下。1 材料與方法1.1 標(biāo)本收集日常工作中息肉或腫瘤與組織粘連處較小的標(biāo)本,如腫瘤與周圍組織粘連處較小、膽囊息肉等標(biāo)本,以及ESD標(biāo)本、婦科刮宮、腦科手術(shù)室等細(xì)小零碎的標(biāo)本。1.2 儀器櫻花VP1脫水機,Leica切片機,Roche HE 600單獨滴染染色機,DAKO全自動免疫組化機Link 48,冰箱,一次性藥碗,電熱恒溫
臨床與實驗病理學(xué)雜志 2021年3期2021-04-25
- 纖維素/瓊脂糖復(fù)合膜的制備、表征及其形狀記憶性能研究*
1]。纖維素和瓊脂糖具有可持續(xù)性、可生物降解性等諸多優(yōu)點,目前,極少有報道提到用瓊脂糖來制備形狀記憶聚合物材料。在此工作中,選取堿/尿素水溶劑溶解纖維素和瓊脂糖,環(huán)氧氯丙烷作為交聯(lián)劑[12],制備具有良好共混相容性的纖維素/瓊脂糖復(fù)合膜,該膜通過氫鍵的形成和斷裂表現(xiàn)出良好的對水和熱的形狀記憶行為。1 實驗部分1.1 原料和試劑纖維素,棉絨短漿,Mη=10.0×104,湖北金環(huán)新材料科技有限公司;瓊脂糖,分析純,Mη=5.5×104,上海麥克林生化有限公司;
功能材料 2021年3期2021-04-20
- 氣管切開法銅綠假單胞菌肺部感染動物模型的建立及評價*
使用改良低熔點瓊脂糖包裹PA,以氣管切開方式注入大鼠肺部,建立大鼠PA肺部感染模型,并根據(jù)細(xì)菌學(xué)、病理學(xué)特點和炎癥因子含量來對模型進(jìn)行評價分析,從而為PA 肺部感染的研究提供理想的動物模型。1 材料與方法1.1 菌株 PA標(biāo)準(zhǔn)菌株P(guān)AO1,由丹麥哥本哈根大學(xué)醫(yī)院臨床微生物科惠贈。1.2 實驗動物 6~8 周齡健康清潔級雄性SD 大鼠36只,體重190~210 g,由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,動物使用許可證號:SYXK桂2020-0004;動物生產(chǎn)許可證
廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2021年3期2021-04-17
- 瓊脂糖凝膠電泳法測定小麥中長穗偃麥草的基因
、PCR擴增、瓊脂糖凝膠電泳法等方法,對長穗偃麥草雜交的幾個組合小麥進(jìn)行了檢測,檢測其抗白粉病基因,并驗證了方法的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性,以期后續(xù)相關(guān)研究提供參考依據(jù)。1 材料與方法1.1 試驗材料本試驗所采用的實驗材料均由中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所提供,具體組合為新春37∕XC(長穗偃麥草雜交后代)10、新春37∕XC31、新春37∕XC351.2 試驗步驟1.2.1 播種 組合新春37∕XC10取63粒種子、新春37∕XC31取15粒、新春37∕XC35
安徽農(nóng)學(xué)通報 2020年21期2020-11-19
- 絮凝劑-樹脂聯(lián)合法從瓊膠中制備瓊脂糖工藝研究
膠主要由中性的瓊脂糖(agarose)和硫瓊膠(agaropectin) 組成。瓊脂糖是不含有硫酸基的非離子型線性半乳聚糖,由1, 3 連接的β-D-半乳糖和1, 4 連接的α-3, 6-內(nèi)醚半乳糖構(gòu)成的瓊二糖線性交替連接形成的共聚物,具有凝膠功能[2]; 硫瓊膠[3]是瓊膠中部分硫酸化的復(fù)雜多糖且不具有凝膠功能。瓊脂糖具有相對較低的電內(nèi)滲作用并且不吸附堿性染料和蛋白質(zhì), 常用于電泳[4]和色譜法[5]。同時, 瓊脂糖因具有良好的物理、化學(xué)和熱穩(wěn)定性而廣泛
海洋科學(xué) 2020年9期2020-10-09
- 瓊脂糖基兩性離子聚合物合成及其反聚電解質(zhì)行為研究
楊志偉,李俊杰瓊脂糖基兩性離子聚合物合成及其反聚電解質(zhì)行為研究姚芳蓮1,郭?旗1,羅巧悅1,田?苗1,王進(jìn)美1,胡?劍2,楊志偉2,李俊杰1(1. 天津大學(xué)化工學(xué)院,天津 300350;2. 華東交通大學(xué)材料學(xué)院,南昌 330013)分子結(jié)構(gòu)中含有甜菜堿基團的兩性離子聚合物,由于獨特的反聚電解質(zhì)性質(zhì)使其在藥物釋放、抗蛋白吸附、抗血栓材料等領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用前景. 但傳統(tǒng)兩性離子聚合物的可降解性較差,致使其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用受到一定限制. 本文以具有良好
- 不同載體微球在p300與RORγt Co-IP實驗效率的比較
in A/G-瓊脂糖珠很難做出真正顯示出其蛋白表達(dá)量且清晰準(zhǔn)確的目的蛋白條帶,因此為解決此問題,本文選取p300與RORγt兩目的蛋白探究如何準(zhǔn)確選取Protein A/G-磁珠或者Protein A/G-瓊脂糖珠進(jìn)行Co-IP試驗。1 材料與方法1.1 材料來源Myc-RORγt、Flag-p300等相關(guān)質(zhì)粒由中國科學(xué)院上海巴斯德研究所李斌研究員提供。1.2 主要試劑抗-RORγt(# 14-6988-82)購自上海EB生物公司;抗-p300(sc-48
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2019年11期2019-12-06
- 卡拉膠對瓊脂糖凝膠不同貯存時間的滲透性及脫水效應(yīng)的影響
應(yīng)和滲透力。在瓊脂糖混合凝膠的貯存過程中,脫水效應(yīng)隨著時間增加而增加。當(dāng)瓊脂糖凝膠加入卡拉膠后,脫水效應(yīng)減弱,滲透性減弱,當(dāng)瓊脂糖凝膠加入無機鹽-卡拉膠后脫水效應(yīng)進(jìn)一步減弱,滲透性進(jìn)一步減弱。關(guān)鍵詞:脫水效應(yīng);瓊脂糖;滲透性Abstract:In this paper, the study of Storage time dependence on water permeability and water exudation under compressi
現(xiàn)代食品·下 2019年12期2019-10-21
- ZrOCl2催化瓊脂糖制備5-羥甲基糠醛和乙酰丙酸
[9-12]。瓊脂糖是一種源于水生植物的生物質(zhì),其具有線性結(jié)構(gòu),由D-半乳糖和3,6-脫水半乳糖通過β-1,4和α-1,3糖苷鍵連接交替形成重復(fù)雙糖單位[13]。近年來,關(guān)于采用瓊脂糖制備5-HMF和LA的報道不少[13-15]。Kim等[13]采用Dowex樹脂和CrCl2在DMSO中110 ℃下5 h可轉(zhuǎn)化瓊脂糖制備5-HMF,產(chǎn)物得率約為22%;Yan等[14]以瓊脂糖為原料,采用MgCl2為催化劑,在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的硫酸水溶液中200 ℃方可獲得5
生物質(zhì)化學(xué)工程 2019年5期2019-09-28
- 自制超薄型瓊脂糖凝膠板電泳分離檢測血清LDH同工酶及成年人參考范圍的建立*
在制備了超薄型瓊脂糖凝膠板的基礎(chǔ)上[5],建立瓊脂糖凝膠電泳的方法來分離和檢測血清中的LDH同工酶,也為排除血清中影響LDH總活性及同工酶結(jié)果的干擾因素提供了鑒定方法。1材料與方法1.1 研究對象 方法學(xué)建立采用檢驗實驗室所檢測用的新鮮患者血清。參考區(qū)間的建立采用133例體檢正常的成年人新鮮血清。1.2 試劑和儀器1.2.1 試劑1.2.1.1 電泳緩沖液:稱取巴比妥鈉15.4 g,巴比妥2.76 g,乙二胺四乙酸0.29 g,加超純水約800 ml,加熱
現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2019年4期2019-08-20
- 水乳化法制備羅丹明B接枝瓊脂糖熒光微球?
來越多的關(guān)注。瓊脂糖,是一種可以被廣泛應(yīng)用到生物醫(yī)藥和生物工程中的一種紅藻多糖。由于其獨特的性質(zhì),例如親水性、多孔性、長時間穩(wěn)定性以及無毒性[2,19],瓊脂糖成為一種理想的制備微球的材料。瓊脂糖的基本二糖單元包括1,3連接的β-D-半乳糖和1,4連接的α-L-3,6-脫水半乳糖[20]。目前,對于熒光瓊脂糖的研究有將瓊脂糖與色氨酸接枝[21],利用色氨酸的天然熒光特性使之具有熒光,另外還可將與萘乙酰[22]、腺嘌呤[23]等物質(zhì)與瓊脂糖接枝使之具有熒光,
中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2019年7期2019-05-21
- 單學(xué)時完成PCR與瓊脂糖電泳實驗的探索
, PCR)與瓊脂糖電泳是分子生物學(xué)和基因工程實驗中的常規(guī)實驗[1,2]。一次實驗課的課時為1~3學(xué)時(45min~2h),常規(guī)PCR反應(yīng)至少需要1.5~2h;瓊脂糖電泳中制膠、制樣、點樣、電泳等過程至少需要1h;實驗原理、操作步驟的講述、學(xué)生動手操作、結(jié)果點評等過程至少需1h;總體一次PCR與瓊脂糖電泳實驗需要4h,無法滿足教學(xué)需要。2 問題解決途徑通過改良PCR反應(yīng)體系、縮短儀器運行及電泳時間,從而做到在單學(xué)時內(nèi)順利完成PCR及電泳實驗,以便教師有足夠
生物學(xué)教學(xué) 2019年2期2019-03-01
- 水乳化法制備羅丹明B接枝瓊脂糖熒光微球?
來越多的關(guān)注。瓊脂糖,是一種可以被廣泛應(yīng)用到生物醫(yī)藥和生物工程中的一種紅藻多糖。由于其獨特的性質(zhì),例如親水性、多孔性、長時間穩(wěn)定性以及無毒性[2,19],瓊脂糖成為一種理想的制備微球的材料。瓊脂糖的基本二糖單元包括1,3連接的β-D-半乳糖和1,4連接的α-L-3,6-脫水半乳糖[20]。目前,對于熒光瓊脂糖的研究有將瓊脂糖與色氨酸接枝[21],利用色氨酸的天然熒光特性使之具有熒光,另外還可將與萘乙酰[22]、腺嘌呤[23]等物質(zhì)與瓊脂糖接枝使之具有熒光,
中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2019年7期2019-01-04
- 殼聚糖/瓊脂糖雙組份水凝膠的制備及其保濕緩釋性能研究
來越多的關(guān)注。瓊脂糖是從紅藻中提取的一種中性線性的多聚物,基本結(jié)構(gòu)是1,3連接的β-D-半乳糖和1,4連接的3,6-內(nèi)醚-L-半乳糖交替連接起來的長鏈,其結(jié)構(gòu)如圖1b所示。瓊脂糖具有顯著的溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變行為,室溫條件下,瓊脂糖分子鏈之間通過氫鍵締合形成螺旋鏈構(gòu)象,進(jìn)而發(fā)生凝膠化,而在高溫時,瓊脂糖分子鏈解螺旋,形成高度溶劑化的無規(guī)則線團,從而轉(zhuǎn)變?yōu)槿芤篬15,16]。目前,瓊脂糖已被廣泛地應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。基于本課題組在凝膠制備領(lǐng)域的研究基礎(chǔ)[17~
現(xiàn)代食品科技 2018年11期2018-12-22
- 瓊脂糖凝膠尿免疫固定電泳高蛋白尿標(biāo)本稀釋作用的探討
夠,檢出率低。瓊脂糖免疫固定電泳技術(shù)是一種利用蛋白電泳和抗原抗體相結(jié)合的一種特異性、敏感性及分辨率高的鑒別單克隆免疫球蛋白的方法,比骨髓細(xì)胞學(xué)檢出更早,有利于多發(fā)性骨髓瘤的早期診斷[3]。瓊脂糖免疫固定電泳是一種分子篩分離技術(shù),樣本濃度的高低對結(jié)果的準(zhǔn)確性有重要的影響。日常工作中常遇到尿蛋白偏高的樣本,這些標(biāo)本由于蛋白含量太高,各區(qū)帶堆積一起不能分區(qū),且α區(qū)帶由于含量太高而易被洗脫,由此給結(jié)果的判讀帶來極大的困惑或漏診,給病人的診治有可能造成損害。廠家操作
醫(yī)藥前沿 2018年33期2018-11-09
- 大腸桿菌質(zhì)粒DNA提取方法的研究
。2.1.2 瓊脂糖凝膠電泳檢測上述的溶液與EB混合染色進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳,電泳后在紫外分析儀下觀察,并且進(jìn)行拍照檢測。2.2 堿裂解法提取大腸桿菌質(zhì)粒DNA2.2.1 DNA提取方法(1)在適當(dāng)?shù)暮股氐?5mL LB培養(yǎng)基中接種單一的大腸桿菌菌落,振蕩培養(yǎng)至對數(shù)生長晚期以250r/min培養(yǎng)12-16 h;(2)取4.5mL大腸桿菌菌液以12000r/min離心 9min,棄去上清夜,盡量棄去干凈,可以用小的槍頭移去;(3)再加入100 μl冰預(yù)
資源節(jié)約與環(huán)保 2018年6期2018-07-09
- 瓊脂糖自組裝膜基底型免疫芯片載體制備及抗體固定研究①
多糖中水溶性的瓊脂糖為基質(zhì),利用分子自組裝技術(shù),在玻片表面制成具有三維結(jié)構(gòu)的自組裝多糖納米膜,其經(jīng)高碘酸鈉氧化,制備出表面帶醛基的免疫芯片載體。從而建立了多糖納米膜基底型芯片載體制備的新方法,為后續(xù)免疫芯片的制備和應(yīng)用提供實驗參考和理論支持。1 材料與方法1.1材料 瓊脂糖、3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTES)(Sigma公司,美國),高碘酸鈉、戊二醛、36%冰乙酸、無水乙醇等均為分析純(國藥集團化學(xué)試劑有限公司);FITC標(biāo)記的驢抗兔抗體(上海生工),
中國免疫學(xué)雜志 2018年6期2018-07-06
- Krüppel樣因子6對于TGF-β1誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞纖維化的調(diào)控作用研究
所得擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離,于紫外透射儀下觀察結(jié)果。表1 RT-PCR引物表2 RT-PCR反應(yīng)條件q-PCR:引物選擇見表3。將2μl模板cDNA,2 μl上下游引物的等比混合物,4μl SYBR熒光染料,最終體積8μl,依次加入384孔板(避光冰上操作),每組3個復(fù)孔,實驗重復(fù)3次,放入Real-time PCR儀內(nèi)反應(yīng),調(diào)整擴增參數(shù)為:50℃2 min孵育,95℃10 min變性,重復(fù)40次循環(huán):95℃15 s變性、55℃30 s退火、72℃3
中國中醫(yī)眼科雜志 2018年1期2018-06-13
- 甜菜SRAP擴增產(chǎn)物不同檢測方法的比對研究
;另外就是通過瓊脂糖凝膠電泳檢測[15-16],使用的緩沖液是1倍的TAE。吳則東等人比較了變性聚丙烯酰胺凝膠和非變性聚丙烯酰胺凝膠的區(qū)別,發(fā)現(xiàn)兩者之間差異不大,但非變性聚丙烯酰胺凝膠無論是制膠還是檢測都要比變性聚丙烯酰胺凝膠更加簡單,故推薦非變性聚丙烯酰胺凝膠替代變性聚丙烯酰胺凝膠[22];目前SRAP分子標(biāo)記在甜菜上一般都是使用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行檢測[6,18,20-21],那么甜菜SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在使用聚丙烯酰胺凝膠電泳和瓊脂糖凝膠電
中國糖料 2018年3期2018-01-17
- 新城疫病毒在雞胚成纖維細(xì)胞中的培養(yǎng)及純化
接種濃度、覆蓋瓊脂糖濃度、蝕斑形成時間等條件進(jìn)行優(yōu)化摸索,最終獲得產(chǎn)斑時間一致,蝕斑大小一致、出斑整齊的純化新城疫毒株,并使原病毒血凝效價提高2個滴度,為后續(xù)實驗奠定基礎(chǔ)。新城疫病毒; 雞胚成纖維細(xì)胞; 蝕斑純化近年來,科研工作者在新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)遺傳變異、進(jìn)化流行趨勢及疫苗開發(fā)利用等方面做了大量的工作,而獲取大量純化的NDV的流行株是開展這些工作的基礎(chǔ)與前提。研究發(fā)現(xiàn),由于疫苗的普遍使用和野毒株的廣泛存
浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年12期2018-01-05
- 鮑魚內(nèi)臟β-葡萄糖苷酶中試規(guī)模制備研究
、 DEAE-瓊脂糖離子交換層析和CM-瓊脂糖離子交換層析的中試制備工藝, 從鮑魚內(nèi)臟中分離純化得到β-葡萄糖苷酶. 研究發(fā)現(xiàn): 膠體磨勻漿所得勻漿液總酶活為12 174.21 U, 比活力為0.158 U·mg-1; 高速管式離心兩次后得到粗酶液, 酶比活力為0.247 U·mg-1; 陶瓷復(fù)合膜過濾后所得清液的酶比活力為0.133 U·mg-1; 超濾濃縮脫鹽后所得濃縮液的酶比活力為0.249 U·mg-1; DEAE-瓊脂糖陰離子交換層析洗脫緩沖液的
福州大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2017年5期2017-12-19
- 利用纖維素酶降解瓊脂糖的條件優(yōu)化
用纖維素酶降解瓊脂糖的條件優(yōu)化李慶旺1,2,熊 瑤1,2,蔡坤淇1,2,MIAO Song1,2,3,張龍濤1,2,*,鄭寶東1,2 (1.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,福建福州 350002; 2.中愛國際合作食品物質(zhì)學(xué)與結(jié)構(gòu)設(shè)計研究中心,福建福州 350002; 3.替格斯食品研究中心,愛爾蘭科克市 999014)本文以還原糖生成量為指標(biāo),研究纖維素酶降解瓊脂糖的條件。在單因素實驗的基礎(chǔ)上,通過Box-Behnken實驗設(shè)計和響應(yīng)面分析對瓊脂糖酶解條件進(jìn)行
食品工業(yè)科技 2017年14期2017-08-09
- 瓊脂糖凝膠中樹枝狀銀的生長研究
430205瓊脂糖凝膠中樹枝狀銀的生長研究楊婉,王映桂,孫鵬,葉均章,吳江渝*武漢工程大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院,湖北 武漢 430205以瓊脂糖凝膠作為模板、還原劑和穩(wěn)定劑,通過溶膠-凝膠法制備瓊脂糖/納米銀復(fù)合凝膠,對所得到的銀納米粒子進(jìn)行了表征.在復(fù)合凝膠外側(cè)使用鋁箔破壞凝膠中銀納米粒子的平衡狀態(tài),實現(xiàn)銀納米粒子在凝膠中的聚集并生成三維樹枝狀結(jié)構(gòu),并對樹枝狀銀進(jìn)行了表征.結(jié)果表明,銀納米粒子為球形,粒徑在20 nm左右,分散性好.以瓊脂糖凝膠為模板生長
武漢工程大學(xué)學(xué)報 2017年3期2017-07-18
- DEAE-瓊脂糖LB膜的制備與表征
0)DEAE-瓊脂糖LB膜的制備與表征李雯露1, 孔英俊2, 康躋耀2, 高建萍2, 張貴鋒2, 王明林1(1. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院, 泰安 271018;2. 中國科學(xué)院 過程工程研究所 生化工程國家重點實驗室, 北京 100190)由于單分子膜性能獨特,受到關(guān)注度越來越高,利用LB膜技術(shù)制備了二乙氨乙基(DEAE)-瓊脂糖單分子層。分析其表面壓(π)-面積(A)曲線,崩潰壓較高,成膜過程明顯。研究濃度對DEAE-瓊脂糖成膜情況的影響,確定
生物學(xué)雜志 2017年1期2017-02-18
- 基于NMR技術(shù)的溶菌酶在瓊脂糖凝膠中的動力學(xué)研究
技術(shù)的溶菌酶在瓊脂糖凝膠中的動力學(xué)研究鄒亞娟,代博娜(上海交通大學(xué) 分析測試中心,上海200240)運用脈沖梯度場測量自擴散系數(shù)及自旋自旋弛豫時間測量核磁共振技術(shù)對雞蛋清溶菌酶(HEWL)在瓊脂糖凝膠中的動力學(xué)進(jìn)行了研究.試驗結(jié)果表明,HEWL在瓊脂糖凝膠中的自擴散系數(shù)及自旋自旋弛豫時間較其在純乙酸鈉溶液中變小,說明瓊脂糖凝膠的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)使HEWL分子整體運動及局部運動都受到阻礙. 并且隨著瓊脂糖濃度的增大,凝膠網(wǎng)孔尺寸不斷減小,HEWL分子運動受限程度
分析測試技術(shù)與儀器 2016年2期2016-09-21
- 瓊脂糖以及高分辨率瓊脂糖制備方法研究進(jìn)展*
61021)?瓊脂糖以及高分辨率瓊脂糖制備方法研究進(jìn)展*王江林,林福娣,賀煌煌,熊仁杰,趙鵬(華僑大學(xué)化工學(xué)院,福建廈門361021)瓊脂糖作為電泳介質(zhì)應(yīng)用廣泛,本文綜述了瓊脂糖和高分辨率瓊脂糖的制備方法。瓊脂糖的制備方法有乙?;?、離子交換法、沉淀法、絡(luò)合法、鹽析法以及離子液體法,高分辨率瓊脂糖的衍生化制備方法有引入低分子量基團、高分子量基團法以及瓊脂糖與瓊脂糖衍生物組合法。對上述制備方法的原理、工藝優(yōu)劣以及產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行初步總結(jié)和比較,為瓊脂糖及高分辨率
廣州化工 2016年11期2016-09-02
- 瓊脂糖凝膠注模成型制備氧化鋁陶瓷的研究
要:本文利用瓊脂糖做凝膠劑,對凝膠注模成型所需的水性無毒氧化鋁陶瓷漿料進(jìn)行了正交實驗,分析了各因素對凝膠注模成型漿料制備的影響,經(jīng)實驗確定了形成較好瓊脂糖凝膠注模成型的技術(shù)條件,所得陶瓷坯體具有較高的強度和較好的表面質(zhì)量。關(guān)鍵詞:瓊脂糖;凝膠;氧化鋁陶瓷;注模成型1 引言凝膠注模成型能將化學(xué)聚合物與傳統(tǒng)的陶瓷巧妙地結(jié)合起來,是一門制備高品質(zhì)復(fù)雜陶瓷部件的新穎技術(shù)。其物料的基本組分為粉體、溶劑、分散劑、引發(fā)劑、有機單體和催化劑,根據(jù)所用的溶劑又可分為水基體
佛山陶瓷 2016年9期2016-05-14
- 絲素蛋白/瓊脂糖水凝膠的制備及性能研究*
6)絲素蛋白/瓊脂糖水凝膠的制備及性能研究*陳思皓1舒 浩1劉祖蘭1李 智1代方銀1,2(1.重慶市生物質(zhì)纖維材料與現(xiàn)代紡織工程技術(shù)研究中心, 西南大學(xué)紡織服裝學(xué)院, 重慶 400716;2.農(nóng)業(yè)部蠶桑生物學(xué)與遺傳育種重點實驗室, 西南大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院, 重慶 400716)本研究利用絲素蛋白與不同濃度的瓊脂糖混合的方法,制備成絲素蛋白/瓊脂糖混合水凝膠,這種多孔結(jié)構(gòu)的水凝膠,硬度最高可達(dá)1 050g,吸水溶脹率可高達(dá)700%,表明瓊脂糖/絲素蛋白混合水凝
蠶學(xué)通訊 2016年4期2016-03-31
- 瓊脂糖- Zn(II)親和層析分離純化羅非魚水解多肽初探
10006)?瓊脂糖- Zn(II)親和層析分離純化羅非魚水解多肽初探張錦捷,曾慶祝* (廣州大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,廣東廣州510006)摘要:以廣州大學(xué)生化課題組自制瓊脂糖微球為載體、環(huán)氧氯丙烷(ECH)為活化劑、亞氨基二乙酸(IDA)為螯合配基、Zn(II)為螯合金屬制備瓊脂糖-Zn(II)親和層析介質(zhì)。最佳活化工藝:DMSO 6 mL、ECH 10 mL、活化溫度35℃、活化時間3.0 h;最佳螯合工藝:IDA 0.9 g、反應(yīng)時間4.0 h、ZnSO4
食品研究與開發(fā) 2016年1期2016-03-17
- 質(zhì)粒抽提策略對雙酶切鑒定的影響
m)雙酶切聯(lián)合瓊脂糖凝膠電泳是鑒定DNA重組成功與否的重要方法[1],瓊脂糖凝膠電泳圖像質(zhì)量直接影響鑒定結(jié)果的判讀、論文發(fā)表。條帶彌散是圖像質(zhì)量不佳的主要表現(xiàn)之一,研究者多將其歸咎于不合理的酶切和不規(guī)范的電泳操作[2],而很少報道質(zhì)粒抽提策略對彌散的影響。筆者在雙酶切鑒定葡萄糖6-磷酸脫氫酶(glucose 6-phosphate dehydrogenase,G6PD)重組質(zhì)粒pET-28a-G6PD時,發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒抽提策略對雙酶切后瓊脂糖凝膠電泳彌散有顯著影
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2015年6期2015-12-16
- 磁性瓊脂糖微球活化條件的研究
3000)磁性瓊脂糖微球活化條件的研究吳明慧 譚 堅 梁 晨(廣西梧州市環(huán)境監(jiān)察支隊,廣西 梧州 543000)對環(huán)氧氯丙烷活化瓊脂糖磁性微球的活化條件進(jìn)行了研究。以微球表面的環(huán)氧基密度為指標(biāo),考察了活化時間、NaOH濃度、環(huán)氧氯丙烷體積分?jǐn)?shù)、NaBH4濃度和活化溫度等因素對瓊脂糖磁性微球活性的影響。實驗結(jié)果表明,環(huán)氧氯丙烷活化瓊脂糖磁性微球的最優(yōu)條件為活化時間為4 h ,NaOH濃度為0.9 mol/L,環(huán)氧氯丙烷體積分?jǐn)?shù)為40%,NaBH4的濃度為0.
大眾科技 2015年6期2015-11-22
- 海洋細(xì)菌 Agarivorans sp.HZ105的瓊膠降解酶系
膠酶HZ1降解瓊脂糖以及高聚合度新瓊寡糖(聚合度為8、10、12和14)得到新瓊二糖和新瓊四糖;瓊膠酶HZ3降解瓊脂糖的終產(chǎn)物是高聚合度新瓊寡糖;瓊膠酶HZ4降解瓊脂糖和高聚合度新瓊寡糖為新瓊四糖和新瓊六糖。因此推測菌株HZ105主要先用瓊膠酶HZ3和HZ4降解瓊脂糖為較高聚合度的新瓊寡糖,隨后這些寡糖被瓊膠酶HZ1和HZ2(課題組先前報道的另一個瓊膠酶)降解為低聚合度新瓊寡糖。首次研究報道了Agarivorans屬中能產(chǎn)生4個瓊膠酶的細(xì)菌菌株及其瓊膠降解
生物技術(shù)通報 2015年1期2015-10-25
- 瓊脂糖—纖維蛋白平板法測定納豆凍干粉中納豆激酶活性
鄧月新摘要:用瓊脂糖-纖維蛋白平板法對納豆凍干粉中納豆激酶活性進(jìn)行測定,在檢測酶濃度單位在2000~10000U/ml時呈現(xiàn)很好的2次曲線關(guān)系,蚓激酶濃度單位-兩垂直直徑的乘積回歸方程為y=-0.0000004839 x2+0.02203 x-12.2715,相關(guān)系數(shù)r2=0.9993。本法回收率范圍在89.53%~100.75%,平均回收率為94.7%,RSD為4.2%。關(guān)鍵詞:瓊脂糖;纖維蛋白;納豆激酶;蚓激酶;平板法。Activities of Na
醫(yī)學(xué)信息 2015年5期2015-03-31
- 黃嘌呤氧化酶酶學(xué)性質(zhì)及共價交聯(lián)固定化
,并利用修飾的瓊脂糖介質(zhì)及大孔陰離子交換樹脂固定化黃嘌呤氧化酶。提供有效增強黃嘌呤氧化酶穩(wěn)定性的固定化方法,也為其它酶類的穩(wěn)定性研究提供參考。1 材料與方法1.1 菌種來源Arthrobacter M3:作者所在實驗室保藏菌種。1.2 主要材料黃嘌呤氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品(相對分子質(zhì)量160 000):近岸蛋白質(zhì)科技有限公司提供;大孔陰離子交換樹脂 (D201、201×4), 浙江爭光實業(yè)股份有限公司提供;Sepharose 4B:通用電氣醫(yī)療中國有限公司提供;乙基
食品與生物技術(shù)學(xué)報 2014年1期2014-12-25
- 毛細(xì)管電泳在β地中海貧血中的應(yīng)用研究
用毛細(xì)管電泳和瓊脂糖凝膠電泳 (agarose gel electrophoresis,AGE)進(jìn)行檢測,并與基因診斷結(jié)果進(jìn)行比較,分析兩種方法的靈敏度和特異度,現(xiàn)將結(jié)果報告如下。1 資料與方法1.1 研究對象 2010年10月至2013年9月來我院進(jìn)行產(chǎn)檢、婚檢或體檢的人群,年齡20至40歲之間,大致可分為4類:①血常規(guī)檢查發(fā)現(xiàn)MCV或MCH減少;②紅細(xì)胞脆性篩查1.2 儀器與試劑 毛細(xì)管電泳采用法國Sebia公司生產(chǎn)的Minicap全自動毛細(xì)管電泳儀及
實驗與檢驗醫(yī)學(xué) 2014年5期2014-11-14
- 鎳化磁性瓊脂糖凝膠微球的制備及其在蛋白純化中的應(yīng)用研究
擬以自制的磁性瓊脂糖凝膠微球為載體,亞氨基乙二胺為鰲合劑制備表面螯合Ni2+的金屬鰲合親和磁性微球,用于六聚組氨酸融合蛋白的純化,并與商品化鎳鰲合次氨基三乙酸瓊脂糖微球(NTA-Ni)的性能進(jìn)行比較.本研究的開展為了尋求價廉物美的新型蛋白純化試劑以代替價格昂貴的進(jìn)口產(chǎn)品,具有重要的現(xiàn)實意義.1 實驗部分1.1 試劑氯化鐵、氯化亞鐵、HCl、NaOH、Tween-20、NaCl、NaH2PO4、Na2HPO4等均為天津大茂化學(xué)試劑廠產(chǎn)品(分析純);瓊脂糖、1
杭州師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2014年4期2014-08-25
- 納米金/瓊脂糖復(fù)合凝膠制備及其催化性能
9-20]等.瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構(gòu)成的中性物質(zhì),常溫下在水中不溶,加熱到約90 ℃時逐漸溶解形成澄清透明的溶液,當(dāng)溫度下降到約40 ℃時形成半固體狀凝膠.瓊脂糖具有親水性,并且?guī)缀跬耆淮嬖趲щ娀鶊F,對敏感的生物大分子極少引起變性和吸附,是理想的惰性載體[21-22]. 此外,瓊脂糖凝膠具有多孔結(jié)構(gòu),分子鏈上有較多的羥基.多孔結(jié)構(gòu)可以作為制備納米材料的模板,而羥基具有一定還原性,能在不使用其他還原劑的條件下實現(xiàn)氯金酸的還原,合成出納米金材料.因此,
武漢工程大學(xué)學(xué)報 2014年9期2014-02-27
- 從非變性聚丙烯酰胺凝膠中快速高效回收DNA片段
段[1]。鑒于瓊脂糖凝膠電泳的分辨率在回收小片段DNA時存在較大的局限性[2,3],小片段DNA的回收純化往往需要借助于分辨率更高的聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)或高效液相色譜(HPLC),以滿足分子生物學(xué)中要求較高的試驗[4,5]。雖然高效液相色譜是一個強有力的分析工具,但使用其回收DNA耗時長,價格昂貴且只能單線程操作[6],而聚丙烯酰胺凝膠電泳由于耗時短,價格經(jīng)濟,同時可操作回收多個樣品且易掌握,被廣泛應(yīng)用于小片段DNA的回收純化[7,8]。針對從聚
生物技術(shù)通報 2013年5期2013-12-23
- 兩種電泳方法血紅蛋白分析一致性的比較
asys LC瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)(簡稱瓊脂糖凝膠電泳)替代醋酸纖維素薄膜電泳對地中海貧血進(jìn)行篩查。為比較2種電泳方法的一致性,我們進(jìn)行了相關(guān)實驗。材料和方法一、一般資料4126例臨床標(biāo)本來自2009年5月至2011年5月期間橫縣人民醫(yī)院門診和住院患者及其他體檢人員。男1862例,女2264例,年齡5個月~75歲。二、儀器與試劑1.瓊脂糖凝膠電泳 法國Sebia公司生產(chǎn)的Sebia Hydrasys LC全自動瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)及其配套的HYRYS掃描系統(tǒng),
檢驗醫(yī)學(xué) 2013年3期2013-09-11
- 新型核酸染料在甜菜分子實驗瓊脂糖電泳中的應(yīng)用
在甜菜分子實驗瓊脂糖電泳中的應(yīng)用吳則東1,2,3,徐艷麗4,王華忠1,2,3(1.黑龍江省普通高等學(xué)校甜菜遺傳育種重點實驗室/黑龍江大學(xué),哈爾濱150080;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院甜菜研究所/黑龍江大學(xué)農(nóng)作物研究院,哈爾濱150080;3.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北方糖料作物資源與利用重點開放實驗室,哈爾濱150080;4.新疆博樂市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心,博樂833400)通過對兩種核酸染料Goldview(GV)和EB(溴化乙錠)對甜菜基因組DNA及Lambda DNA的
中國糖料 2013年2期2013-03-03
- 改良TRIzol法提取腫瘤細(xì)胞瓊脂克隆的總RNA
脂克隆RNA被瓊脂糖嚴(yán)重污染,瓊脂糖又阻礙逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的進(jìn)行[4-5],使所提RNA難以用于基因表達(dá)分析。本實驗將F9細(xì)胞與瓊脂糖凝膠混合以模擬瓊脂克隆,以建立有效去除瓊脂糖污染、提取高質(zhì)量RNA的方法,并通過提取M5076瓊脂克隆的RNA進(jìn)行驗證。材料和方法材料F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞株購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院細(xì)胞中心;M5076小鼠卵巢網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞株由美國癌癥研究所贈送; PBS、細(xì)胞培養(yǎng)基及血清購自Hyclone公司; TRIzol 總RNA提取試劑、低熔點超
中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報 2012年2期2012-11-21
- 瓊脂糖電泳中核酸染料Goldview最佳使用方案的建立
519041)瓊脂糖電泳中核酸染料Goldview最佳使用方案的建立王 燕,彭莉萍,羅鎮(zhèn)明(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū) 生物化學(xué)與細(xì)胞分子生物學(xué)教研室,廣東 珠海 519041)目的確定瓊脂糖凝膠電泳中使用核酸染料Goldview的最佳濃度和方法,盡可能減少實驗中Goldview用量,控制其對實驗室環(huán)境的污染。方法配置含不同濃度Goldview的上樣緩沖液,混合不同濃度 DNA溶液的瓊脂糖凝膠電泳,然后對比預(yù)染樣品法、前染法及后染法的染色效果。結(jié)果實驗結(jié)果顯示上樣
遵義醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2012年4期2012-11-14
- 瓊脂糖凝膠中DNA檢測方法的研究進(jìn)展
—核酸的工具,瓊脂糖凝膠電泳已成為高效分離和分析核酸分子的必備手段,而在電泳后對 DNA 的檢測是關(guān)鍵環(huán)節(jié),因為它直接關(guān)系到實驗結(jié)果顯現(xiàn)與否。目前,常用的瓊脂糖凝膠上 DNA 檢測方法有熒光染色法、染料染色法、金屬離子染色法、負(fù)染法等。近幾十年來,許多研究者對染色方法進(jìn)行了改進(jìn),使靈敏度和線性動態(tài)范圍都有較大程度提高。本文主要對瓊脂糖凝膠電泳后的 DNA 檢測技術(shù)方面的研究歷程進(jìn)行總結(jié),并展望其未來的發(fā)展方向。1 各種 DNA 染色方法1.1 熒光染色法熒
中國醫(yī)藥生物技術(shù) 2012年1期2012-01-24
- 自組裝山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤組織工程纖維軟骨模型的構(gòu)建
m×深10mm瓊脂糖井內(nèi),每天換液,培養(yǎng)2周,觀察和檢測顳下頜關(guān)節(jié)盤形態(tài)和成分的變化。結(jié)果 接種后1 d,山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤細(xì)胞在瓊脂糖井內(nèi)聚集,開始自組裝成一圓盤狀基體,后來逐漸變成圓球形。培養(yǎng)2周時,蘇木精-伊紅染色可觀察到纖維軟骨細(xì)胞呈圓形,周圍有基質(zhì)包繞;Safranin-O/fast green染色顯示自組裝基體內(nèi)纖維軟骨細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)氨基多糖;picro-sirius red染色可見自組裝基體內(nèi)有大量膠原纖維。Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色可見胞漿
華西口腔醫(yī)學(xué)雜志 2011年3期2011-03-07
- NaCl對瓊脂糖凝膠電泳法分離單壁碳納米管的影響
5)NaCl對瓊脂糖凝膠電泳法分離單壁碳納米管的影響溫曉南1,2張 靜1,2顧文秀1,*金赫華2李紅波2李清文2,*(1江南大學(xué)化學(xué)與材料工程學(xué)院,江蘇無錫 214122;2中國科學(xué)院蘇州納米技術(shù)與納米仿生研究所,江蘇蘇州 215125)如何獲得單一導(dǎo)電屬性的單壁碳納米管(SWCNT),使其在各領(lǐng)域得到更廣泛的應(yīng)用,引起了科研人員越來越多的關(guān)注.瓊脂糖凝膠電泳(AGE)法以其簡便,低成本,可規(guī)?;葍?yōu)點在分離金屬型(m-)和半導(dǎo)體型(s-)單壁碳納米管的諸
物理化學(xué)學(xué)報 2010年10期2010-11-06
- 大麥高分子量基因組DNA提取的優(yōu)化
先輩建立了先用瓊脂糖包埋酵母細(xì)胞,然后進(jìn)行分解提取酵母基因組 HMW DNA的方法。瓊脂糖包埋法可使大分子DNA不被分解液及后續(xù)操作所降解,保持DNA完整?;?span id="j5i0abt0b" class="hl">瓊脂糖包埋法,從擬南芥、番茄等生物中分離基因組高分子DNA的方法也已建立。Cheung和Gale[4]報道了基于瓊脂糖包埋法制備小麥、大麥和黒麥基因組HMW DNA方法。該方法用于大麥基因組DNA制備還存在著DNA產(chǎn)量低,時間長等不足。迄今,還沒有一種較好的提取大麥基因組完整的高分子量DNA的方法。