原代
- 4種品系小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞原代培養(yǎng)比較研究
物實(shí)驗(yàn)中[4]。原代KC提取方法主要包括:中性蛋白酶消化法、胰蛋白酶消化法、中性蛋白酶和胰蛋白酶聯(lián)合消化法以及嗜熱菌蛋白酶消化法[5-7]。 胰蛋白酶作用于基底層細(xì)胞和棘層細(xì)胞,作用強(qiáng)度大,經(jīng)濟(jì)有效且操作最為簡(jiǎn)單方便。選擇哪種品系的小鼠提取原代KC最合適尚未有明確的研究,該研究選用4種品系的成年小鼠背部皮膚,使用胰蛋白酶消化法獲取原代KC,比較其增殖和分化能力,為皮膚相關(guān)疾病模型小鼠的品系選擇提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物8周齡BALB
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2023年6期2023-07-05
- 黃連生物堿改善小鼠原代肝細(xì)胞糖異生與脂質(zhì)蓄積
。本研究使用小鼠原代肝細(xì)胞建立糖異生模型與脂質(zhì)蓄積模型,篩選能改善小鼠原代肝細(xì)胞糖異生與脂質(zhì)蓄積的黃連生物堿單體成分,并探討其作用機(jī)制,為其用于防治代謝性疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 主要試劑:黃連總生物堿、黃連堿、小檗堿、表小檗堿、巴馬汀、藥根堿、非洲防己堿、木蘭花堿(成都曼斯特生物科技公司);DMEM培養(yǎng)基(Corning公司);胎牛血清(Gibco公司);Ⅳ型膠原酶(Sigma公司);CCK-8試劑盒(北京聚地安泰科技有限公
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床 2023年6期2023-06-05
- 合肥：我國(guó)首家“癌細(xì)胞銀行”投入運(yùn)行
司的“可再生癌癥原代細(xì)胞生物銀行”近日通過審批，正式投入運(yùn)行，成為中國(guó)首家獲批的以腫瘤原代細(xì)胞為特色的“活體”生物樣本庫(kù)?？稍偕┌Y原代細(xì)胞生物銀行，會(huì)在征得患者同意后簽署協(xié)議采集腫瘤樣本，根據(jù)要求建立不同的細(xì)胞生物模型。模型在經(jīng)過生物學(xué)特性等各類標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)合格后，就會(huì)存儲(chǔ)到液氮罐中。該生物樣本庫(kù)依托腫瘤原代細(xì)胞體外擴(kuò)增技術(shù)，可以模擬出腫瘤在體內(nèi)的生存環(huán)境，將腫瘤患者新鮮癌組織樣本變?yōu)榭稍偕?span id="j5i0abt0b" class="hl">原代癌細(xì)胞，作為基礎(chǔ)科學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)化細(xì)胞庫(kù)資源。研究人員表示，該生
康復(fù) 2023年10期2023-05-06
- 視黃醇結(jié)合蛋白1通過激活TAK1促進(jìn)大鼠乳鼠原代心肌細(xì)胞肥大*
K1促進(jìn)大鼠乳鼠原代心肌細(xì)胞肥大*謝菁， 周艷麗， 陳思思， 王繼春， 江洪△（武漢大學(xué)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，武漢大學(xué)心血管病研究所，心血管病湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430000）探究視黃醇結(jié)合蛋白1（retinol binding protein 1， Rbp1）在大鼠乳鼠原代心肌細(xì)胞肥大中的功能和機(jī)制。本研究通過聯(lián)合分析基因表達(dá)數(shù)據(jù)庫(kù)（Gene Expression Omnibus， GEO）中的小鼠心肌肥厚基因芯片數(shù)據(jù)，尋找在心肌肥厚發(fā)生過程中的
中國(guó)病理生理雜志 2023年2期2023-03-10
- miR-200c 對(duì)顱咽管瘤侵襲性的影響及作用機(jī)制
建國(guó)等[2]利用原代培養(yǎng)建立了能穩(wěn)定傳代的顱咽管瘤細(xì)胞系，為開展顱咽管瘤的基礎(chǔ)研究提供了新的方法。本研究擬初步探討miRNA-200家族在顱咽管瘤中的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。1 材料與方法1.1 研究對(duì)象 原代細(xì)胞培養(yǎng)所需標(biāo)本來自2017 年6 月-2018 年12 月在四川大學(xué)華西醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)切除的無菌新鮮顱咽管瘤組織各5 例。1.2 主要實(shí)驗(yàn)材料 SYBR Green PCR 試劑盒（Ther mo，F(xiàn)-415XL），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Thermo，#K16
醫(yī)學(xué)信息 2023年2期2023-03-10
- 原代肝細(xì)胞外泌體對(duì)肝星狀細(xì)胞活化的影響
本研究擬分離培養(yǎng)原代肝細(xì)胞，提取肝細(xì)胞外泌體、并與活化的HSC共培養(yǎng)，觀察HSC活化及纖維化相關(guān)基因的表達(dá)，初步探索正常肝細(xì)胞外泌體對(duì)HSC活化的影響。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、試劑及儀器1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)C57BL/6雄性小鼠，7～8周齡，體質(zhì)量約20 g，購(gòu)于廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作過程均符合《中華人民共和國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》及倫理要求。1.1.2主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器 實(shí)驗(yàn)所用主要試劑包括：D-Hanks液，小鼠肝細(xì)胞專用培
貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年11期2022-12-23
- 福建酸竹提取物通過調(diào)節(jié)硫氧還蛋白1減輕紫外線誘導(dǎo)的皮膚光損傷的研究
培養(yǎng)和紫外線輻射原代人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞在含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/鏈霉素/谷氨酰胺的杜氏改良Eagle培養(yǎng)基（Invitrogen Life Technologies，Carlsbad，CA，USA）中培養(yǎng)，保存于37 ℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。UV輻射設(shè)備和步驟參照文獻(xiàn)[21]～[25]。1.2.2 抗體和試劑Cleaved caspase 3 （#9661，1∶1000）、β-肌動(dòng)蛋白（#3700，1∶3000）、硫氧還蛋白1（#24
福建輕紡 2022年11期2022-11-23
- 獼猴原代腎小球系膜細(xì)胞分離提取培養(yǎng)與鑒定
和GMCs組成。原代腎組織中細(xì)胞提取培養(yǎng)中，與內(nèi)皮細(xì)胞與上皮細(xì)胞相比，GMCs是較易生長(zhǎng)的腎小球細(xì)胞，因?yàn)樗鼈兊纳L(zhǎng)需求最小，增殖能力較強(qiáng)[4]。目前已有對(duì)大鼠、小鼠、兔、人及豬的GMCs分離方法的報(bào)道[5]，但尚未見對(duì)獼猴原代GMCs分離方法的報(bào)道。有文獻(xiàn)[6]報(bào)道稱，可以利用小鼠腎臟進(jìn)行GMCs培養(yǎng)，但其操作步驟繁瑣，利用50、100目和200目三道篩網(wǎng)才能篩出純度較高的腎小球組織。腎小球位于腎臟腎皮質(zhì)部位，小鼠腎皮質(zhì)部位小，需要足夠量的小鼠腎組織才能
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年8期2022-09-21
- 利用NASH大鼠原代肝細(xì)胞與原代Kupffer細(xì)胞共培養(yǎng)建立NASH原代細(xì)胞模型*
提純NASH大鼠原代肝細(xì)胞以及原代肝Kupffer細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，建立NASH大鼠體外細(xì)胞模型，為之后的NASH相關(guān)藥物研究提供技術(shù)支持。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇SPF級(jí)雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量( 180±20) g，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由西南醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證，SCXK(川)2018-17)，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證，SYXK(川)2018-065)，隨機(jī)分為NASH組和對(duì)照組，每組各20只，NASH組大鼠采用高脂飼
中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志 2022年2期2022-08-29
- TRPC6通過GSK-3β/β-catenin通路調(diào)控EMT減輕TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷*
驗(yàn)對(duì)象，分離培養(yǎng)原代TEC，從細(xì)胞水平研究TRPC6通過調(diào)控EMT減輕腎纖維化損傷的分子機(jī)制。1 材料與方法1.1 動(dòng)物與試劑本實(shí)驗(yàn)以SPF級(jí)成年雄性TRPC6-/-和WT小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。其中WT小鼠為構(gòu)建TRPC6-/-小鼠的背景小鼠129 SvEv，購(gòu)買于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，TRPC6-/-小鼠由美國(guó)NIH/NIEHS Lutz Birnbaumer實(shí)驗(yàn)室提供。EMT分子標(biāo)記和通路相關(guān)抗體購(gòu)買于CST公司。1.2 分離培養(yǎng)TEC與實(shí)驗(yàn)分組
- 獼猴冠狀動(dòng)脈原代內(nèi)皮細(xì)胞分離和培養(yǎng)及其功能驗(yàn)證
鼠和豬的冠狀動(dòng)脈原代內(nèi)皮細(xì)胞分離方法，尚未見獼猴相關(guān)方法報(bào)道[5-7]。與其他動(dòng)物相比，獼猴表現(xiàn)出與人類遺傳、免疫和代謝的高度相似性，是基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用之間一個(gè)理想的轉(zhuǎn)化模型[8]。在體外實(shí)驗(yàn)中，為更好模擬人體細(xì)胞的病理生理狀態(tài)，探索一種簡(jiǎn)便可行的獼猴冠狀動(dòng)脈原代內(nèi)皮細(xì)胞分離方法十分必要。該研究成功建立了獼猴冠狀動(dòng)脈原代內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法，并對(duì)其進(jìn)行鑒定和功能研究。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取3～5歲普通級(jí)實(shí)驗(yàn)獼猴，飼養(yǎng)于安徽醫(yī)科大學(xué)臨床藥理研
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年6期2022-07-13
- 原代滑膜細(xì)胞培養(yǎng)及同時(shí)提取微量總RNA和蛋白質(zhì)的方法在體外細(xì)胞分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用
，曹福洋，許建中原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是廣泛應(yīng)用于疾病體外研究的重要方法之一[1,2]，對(duì)原代培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行分子生物學(xué)研究，可以排除其他細(xì)胞干擾，提高生物信息的準(zhǔn)確性和特異性，進(jìn)一步保證研究結(jié)論的可靠性。但原代細(xì)胞培養(yǎng)成功率低，有時(shí)純度達(dá)標(biāo)困難。解決了純度問題，又會(huì)出現(xiàn)可用于實(shí)驗(yàn)研究材料的原代細(xì)胞的代數(shù)不多，僅2～3代可用[3,4]，傳至4代以后的細(xì)胞就老化的問題，不能保持原代細(xì)胞原有的特征和功能。采用傳代的原代細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行體外分子生物學(xué)研究，必須保證傳代細(xì)胞具
中華骨與關(guān)節(jié)外科雜志 2022年4期2022-06-30
- 瘦素對(duì)豬原代脂肪細(xì)胞脂滴相關(guān)基因mRNA 表達(dá)的影響*
較少。本研究以豬原代脂肪細(xì)胞為材料，通過不同質(zhì)量濃度LEP 處理豬原代脂肪細(xì)胞，以TAG 含量以及PLIN1、PLIN2和FITM2mRNA 表達(dá)水平為分析指標(biāo)，探究LEP 對(duì)脂滴相關(guān)基因表達(dá)的影響。1 材料與方法1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及處理麻醉放血處死3 頭15 日齡健康狀況良好的三元雜交仔豬（Duroc×Landrace×Yorkshire，DLY），取背部皮下脂肪。試驗(yàn)動(dòng)物來自云南農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)豬場(chǎng)。1.2 豬原代脂肪細(xì)胞分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化參照李永能等[15
云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)) 2022年1期2022-01-24
- 改良法分離培養(yǎng)SD新生乳鼠原代心肌細(xì)胞*
315040)原代心肌細(xì)胞由于不受機(jī)體神經(jīng)體液因素干擾，同時(shí)保持著眾多在體心肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能特點(diǎn)，是心血管疾病臨床和基礎(chǔ)研究無可替代的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀Ｗ?0世紀(jì)60年代，Harary等[1]成功分離培養(yǎng)心肌細(xì)胞以來，關(guān)于原代心肌細(xì)胞純化培養(yǎng)的方法不斷改進(jìn)和完善[2-4]，但仍舊存在操作繁瑣、耗時(shí)較長(zhǎng)、存活率不高、結(jié)構(gòu)破壞等諸多缺陷[5]，且心肌細(xì)胞近乎是終末分化細(xì)胞無法傳代培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)時(shí)必須每次從頭分離純化。因此，如何實(shí)現(xiàn)原代心肌細(xì)胞的簡(jiǎn)單快捷、高純度、高
中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志 2021年6期2021-12-08
- 良性腦膜瘤原代細(xì)胞培養(yǎng)及脂多糖對(duì)其增殖的影響
性腦膜瘤及柔腦膜原代細(xì)胞，并用脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，檢測(cè)細(xì)胞的增殖活力及炎癥因子表達(dá)水平；以探討良性腦膜瘤及柔腦膜原代細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)和LPS對(duì)細(xì)胞增殖的影響，以及炎癥與良性腦膜瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制。1 材料與方法1.1 材料 孕19 d的SD大鼠(購(gòu)于西譜爾-必凱公司)，飼養(yǎng)于SPF級(jí)環(huán)境，人工晝夜節(jié)律，自由飲食。待娩出新生鼠后，將新生1 d的SD大鼠用于提取柔腦膜原代細(xì)胞。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵循上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物倫理
臨床神經(jīng)外科雜志 2021年5期2021-11-11
- AFB1對(duì)犬肝細(xì)胞的毒性作用及NAC的保護(hù)效應(yīng)
關(guān)于AFB1對(duì)犬原代肝細(xì)胞的毒性研究尚未見報(bào)道。N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)，簡(jiǎn)稱乙酰半胱氨酸，是氨基酸L-半胱氨酸的N-乙酰衍生物。NAC含有的巰基具有抗氧化作用，能夠減少自由基的產(chǎn)生[11]。同時(shí)NAC也是半胱氨酸的供體，半胱氨酸是谷胱甘肽形成時(shí)的必需氨基酸，因此NAC還能夠維持動(dòng)物體內(nèi)抗氧化物谷胱甘肽水平[12-13]。有研究表明，NAC對(duì)肝臟具有保護(hù)作用，可調(diào)節(jié)大鼠肝細(xì)胞凋亡基因[14-15]。薛畫眉等[16]研究了NAC對(duì)玉米赤霉烯酮致大鼠睪
西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） 2021年7期2021-08-09
- 褪黑素上調(diào)SIRT1改善高糖誘導(dǎo)原代心肌細(xì)胞損傷的機(jī)制研究
黑素在高糖誘導(dǎo)的原代心肌細(xì)胞損傷的作用以及機(jī)制,為糖尿病心肌病的治療提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論依據(jù)。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與試劑C57BL/6乳鼠,出生1-3 d,購(gòu)自第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;褪黑素、膠原酶Ⅱ購(gòu)自美國(guó)Sigma公司、沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(sirtuin1,SIRT1)、Beclin1和自噬相關(guān)5同源物(autophagy related 5 homolog,Atg5)購(gòu)自美國(guó)CST公司;cleaved Caspase-3、Bcl
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2021年5期2021-06-18
- 人用狂犬病疫苗原代地鼠腎細(xì)胞蛋白質(zhì)國(guó)家對(duì)照品的建立
病毒固定毒株，在原代地鼠腎細(xì)胞適應(yīng)傳代，研制成功原代地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)的人用狂犬病滅活疫苗，至今為止，在我國(guó)已有50多年的使用歷史［1-3］。目前該類疫苗仍在市場(chǎng)流通，為我國(guó)狂犬病的預(yù)防做出了卓越的貢獻(xiàn)。狂犬病是致死性疾病，全世界每年因其死亡約59 000人［4］，我國(guó)近年的狂犬病疫情雖有所緩解，但情況仍不容樂觀。我國(guó)人用狂犬病疫苗市場(chǎng)需求量較大，2015—2019年連續(xù)5年人用狂犬病疫苗（地鼠腎細(xì)胞）的批簽發(fā)量就分別達(dá)到了80萬、80萬、100萬、120萬和
中國(guó)生物制品學(xué)雜志 2021年5期2021-05-19
- 青錢柳中5種三萜酸成分對(duì)肝細(xì)胞糖異生的影響
三萜酸成分對(duì)小鼠原代肝細(xì)胞糖異生及磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6Pase)的影響，以期發(fā)現(xiàn)抑制肝糖異生的先導(dǎo)化合物，為青錢柳降糖提供更充分的科學(xué)依據(jù)。1 材料1.1 試劑與藥物D-Hanks緩沖液、DMEM高糖、噻唑蘭(MTT)、PBS溶液(江蘇凱基生物技術(shù)股份有限公司)；氯化鈣、ITS(Insulin、Transferrin、Selenium)細(xì)胞培養(yǎng)添加物、丙酮酸鈉、乳酸鈉、Ⅳ型膠原酶、地塞米松(美國(guó)Sigma公司)
中醫(yī)藥信息 2021年3期2021-05-14
- 大鼠股動(dòng)脈血管原代內(nèi)皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
較小血管如股動(dòng)脈原代內(nèi)皮細(xì)胞分離、培養(yǎng)方法及功能研究鮮有報(bào)道。大鼠股動(dòng)脈位于腹股溝恥骨聯(lián)合處，管徑窄小，分離其原代內(nèi)皮細(xì)胞有一定難度。所以，探索一種簡(jiǎn)便可行的提取、分離、培養(yǎng)方法十分必要。該研究綜合股動(dòng)脈生理特性與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)需求，制備出一種有效、簡(jiǎn)便的內(nèi)皮細(xì)胞分離與培養(yǎng)方法，并對(duì)其進(jìn)行了鑒定和功能研究。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取7～8周齡SPF級(jí)雄性Wistar大鼠，并飼喂于安徽醫(yī)科大學(xué)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。溫度：20～26 ℃；日溫差：≤
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2021年4期2021-04-09
- CYP450蛋白在HepG2細(xì)胞與小鼠原代肝細(xì)胞中的表達(dá)差異*
胞模型主要有小鼠原代肝細(xì)胞、肝細(xì)胞系等。小鼠原代肝細(xì)胞來源于小鼠肝組織，其肝臟藥物代謝酶的表達(dá)情況最接近于機(jī)體，被廣泛應(yīng)用于藥物代謝途徑、代謝效率、藥物代謝酶的抑制和誘導(dǎo)等方面的研究[7-8]。HepG2細(xì)胞來源于肝細(xì)胞，是一種表型與肝細(xì)胞極為相似的肝胚胎瘤細(xì)胞株，保留了肝細(xì)胞的許多生物學(xué)特性[9-10]。細(xì)胞模型的選擇在體外代謝實(shí)驗(yàn)中及其重要，且細(xì)胞中CYP450表達(dá)豐度直接影響到相關(guān)研究的科學(xué)性，故本研究旨在分析HepG2細(xì)胞和小鼠原代肝細(xì)胞中CYP4
貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2020年10期2020-11-03
- 兩株自篩酵母衰退性對(duì)葡萄酒發(fā)酵原酒品質(zhì)的影響
個(gè)發(fā)酵罐分別接入原代酵母和傳代酵母進(jìn)行平行試驗(yàn)，通過對(duì)發(fā)酵過程和發(fā)酵結(jié)果的對(duì)比，從發(fā)酵性能、理化分析、感官品評(píng)等方面綜合分析原代酵母與傳代酵母的差異，從而進(jìn)一步研究自篩酵母衰退性對(duì)原酒品質(zhì)的影響。1 材料與方法1.1 材料、試劑及儀器1.1.1 試驗(yàn)菌株來自河北昌黎產(chǎn)區(qū)釀酒葡萄自然發(fā)酵液中篩選的兩株優(yōu)良酵母CC17 和SC5，經(jīng)過中試試驗(yàn)，在生產(chǎn)發(fā)酵中有良好的表現(xiàn)，并取得了國(guó)家專利[11-12]；原代酵母菌種采用甘油管冷凍法[13]保藏于中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)
釀酒科技 2020年9期2020-11-02
- 法舒地爾通過調(diào)控糖酵解通路對(duì)原代小膠質(zhì)細(xì)胞的影響
糖（LPS）激活原代小膠質(zhì)細(xì)胞來研究法舒地爾對(duì)細(xì)胞炎癥水平的影響，以及對(duì)Aβ的吞噬作用，并研究其可能的作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)法舒地爾可以降低原代小膠質(zhì)細(xì)胞的促炎因子水平，提高原代小膠質(zhì)細(xì)胞的Aβ吞噬能力，下調(diào)小膠質(zhì)細(xì)胞HIF-1α的轉(zhuǎn)錄活性來降低糖酵解過程相關(guān)酶的相對(duì)表達(dá)量，抑制糖酵解的過程，從而增加ATP的產(chǎn)生，提示法舒地爾是治療AD的潛在藥物。1 材料與方法1.1 材料原代小膠質(zhì)細(xì)胞由山西大同大學(xué)腦科學(xué)研究所分離培養(yǎng)。DMEM(Gibco)培養(yǎng)基購(gòu)自Lif
- STING 蛋白在綿羊原代肺泡巨噬細(xì)胞的表達(dá)與生物信息學(xué)分析
核周。但有關(guān)綿羊原代肺泡巨噬細(xì)胞中的STING 蛋白還未見報(bào)道。寧夏地處西北，養(yǎng)殖業(yè)資源豐富，綿羊是其主要的養(yǎng)殖物種，但疾病的發(fā)生阻礙了綿羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，特別是羊傳染性胸膜肺炎的發(fā)生給羊養(yǎng)殖業(yè)帶來重大的經(jīng)濟(jì)損失，因此對(duì)綿羊抗感染相關(guān)基因的探究特別是針對(duì)其呼吸道第一道防線——綿羊肺泡巨噬細(xì)胞中抗感染基因的發(fā)現(xiàn)對(duì)于該病的防控具有重要意義。為此，本研究首先證明了綿羊原代肺泡巨噬細(xì)胞中含有sting 基因，明確了STING 蛋白在綿羊原代肺泡巨噬細(xì)胞中的表達(dá)；利用
中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2020年3期2020-07-01
- 丙泊酚對(duì)高糖誘導(dǎo)大鼠原代成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響研究
丙泊酚對(duì)高糖誘導(dǎo)原代成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響，為高血糖所致骨骼系統(tǒng)相關(guān)疾病的預(yù)防與治療提供新的思路。1 材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 胎牛血清、α-MEM培養(yǎng)基均購(gòu)于Hyclone公司；CCK-8檢測(cè)試劑盒購(gòu)于Dojindo Molecular Technologies公司；ROS檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：20170115)購(gòu)自碧云天生物技術(shù)研究所；丙泊酚(批號(hào)：01708271)購(gòu)自北京費(fèi)森尤斯卡比醫(yī)藥有限公司；葡萄糖購(gòu)于美國(guó)Sigma公司；0.25%胰酶購(gòu)
解放軍醫(yī)藥雜志 2020年3期2020-04-08
- 小鼠原代肝細(xì)胞糖異生研究模型的建立
主要器官[8]。原代肝細(xì)胞是體內(nèi)肝細(xì)胞的良好代表，是在體外研究肝功能的有用工具，如基因表達(dá)的變化、內(nèi)源性物質(zhì)的代謝以及外源性藥物的藥理特性，新分離的肝細(xì)胞比肝臟來源的細(xì)胞株更能反映正常肝臟在體內(nèi)的功能[9]。原代肝細(xì)胞的分離方法包括非灌流的機(jī)械分離法、胰酶消化法和膠原酶消化法，采用灌流的離體膠原酶灌流法、Seglen兩步灌流法、下腔靜脈逆向膠原酶灌流法和Gerlach五步膠原酶灌流法。迄今，Seglen兩步灌流法是分離大量高活性原代肝細(xì)胞的首選方法。在第一
生物技術(shù)通訊 2020年6期2020-03-10
- 狂犬病病毒感染小鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立
力的RABV感染原代神經(jīng)元細(xì)胞，建立了RABV感染原代神經(jīng)元細(xì)胞模型，確定了兩種不同毒力病毒的最佳感染條件。在最佳感染條件下，檢測(cè)了突觸循環(huán)相關(guān)核心蛋白SNARE主要復(fù)合物（synaptobrevin/VAMP、syntaxin及SNAP 25）的蛋白表達(dá)情況，為進(jìn)一步了解RABV致神經(jīng)性癥狀提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1 毒株、細(xì)胞系與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物RABV弱毒株SAD、固定毒株CVS 11由本實(shí)驗(yàn)室保存；m NA細(xì)胞由內(nèi)蒙古大學(xué)楊洋副教授惠贈(zèng)；懷孕
中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào) 2019年5期2019-12-16
- 人乳腺癌原代細(xì)胞組織塊培養(yǎng)方法的改良及其鑒定
所以，建立體外的原代人乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)模型，用于人乳腺癌細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究，其重要性日顯突出。研究表明，原代培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞的常見方法包括組織塊貼壁法、酶消化法和細(xì)胞培養(yǎng)法，與酶消化法和細(xì)胞培養(yǎng)法相比較，組織塊貼壁法實(shí)驗(yàn)成本更低廉，細(xì)胞存活率更高[7]。但其在實(shí)際應(yīng)用中也存在自身的缺點(diǎn)，如易污染，在剪碎組織培養(yǎng)細(xì)胞過程中，易造成組織損傷及失活，不利于細(xì)胞爬出，耗時(shí)較長(zhǎng)等，尤其是成纖維細(xì)胞的生存和適應(yīng)能力強(qiáng)，較早于腫瘤細(xì)胞從組織塊中爬出，進(jìn)一步包繞組織塊
遵義醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2019年4期2019-10-22
- 青蒿虎酯對(duì)人急性髓系白血病原代細(xì)胞及其細(xì)胞株K562增殖和凋亡的影響研究
青蒿琥酯對(duì)AML原代細(xì)胞與細(xì)胞株K562的增殖抑制及促凋亡作用，以期為進(jìn)一步明確AML的發(fā)病機(jī)制及青蒿琥酯的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。1 材料與方法1.1 研究材料 AML兒童納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)、組織化學(xué)染色及流式細(xì)胞免疫學(xué)分型確診；（2）初治或復(fù)發(fā)AML；（3）患兒家屬均對(duì)本研究?jī)?nèi)容知情且簽署知情同意書；（4）臨床診治資料完善。采用密度梯度法分離2016年10月—2018年10月于河南省兒童醫(yī)院血液科就診的符合納入標(biāo)準(zhǔn)的24例初治或復(fù)發(fā)AML患兒的
中國(guó)全科醫(yī)學(xué) 2019年30期2019-10-09
- PGE2/PGE2-R介導(dǎo)的RAS/ERK及PI3K/AKT信號(hào)途徑與子宮肌瘤發(fā)病機(jī)制的研究
達(dá)。培養(yǎng)子宮肌瘤原代細(xì)胞，同時(shí)加入PGE2-R(EP1受體)抑制劑sc-51322或激動(dòng)劑17-PT-PGE2，分為原代細(xì)胞組、原代+sc-51322組和原代+17-PT-PGE2組。1.3.2細(xì)胞培養(yǎng) 子宮肌瘤組織置于1%雙抗(青鏈霉素混合液)的HBSS中；0.4%膠原酶8 ml(內(nèi)含DNase I)，37 ℃搖床消化；消化結(jié)束后后用含10%的DMEM-F12重懸細(xì)胞，置細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，置于37 ℃、5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育培養(yǎng)。每隔20 min將沒
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2019年5期2019-06-12
- PTEN基因沉默對(duì)小鼠原代肝細(xì)胞Akt/GSK-3β信號(hào)通路的影響*
丙泊酚可引起小鼠原代肝細(xì)胞蛋白激酶B(Akt)和糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化水平降低，抑制小鼠原代肝細(xì)胞磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt/GSK-3β信號(hào)通路，抑制小鼠原代肝細(xì)胞糖原合成，從而引起小鼠原代肝細(xì)胞胰島素抵抗[4]。第10號(hào)染色體缺失性磷酸酶-張力蛋白同源物蛋白(PTEN)可從上游調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路[5-7]，在先前研究的基礎(chǔ)上[4]，筆者推測(cè)PTEN參與了丙泊酚所致的胰島素抵抗。本實(shí)驗(yàn)將通過基因沉默，探討PTEN
重慶醫(yī)學(xué) 2019年7期2019-04-25
- 一種腸肌間神經(jīng)叢膠質(zhì)細(xì)胞無血清原代培養(yǎng)法的建立
制目前仍不清楚。原代EGC培養(yǎng)可排除在體環(huán)境下的神經(jīng)體液因素，是深入探討EGC功能特性的重要方法。目前已有腸道肌間神經(jīng)叢EGC原代培養(yǎng)方法的報(bào)道[9-11]，但關(guān)于培養(yǎng)過程中成纖維細(xì)胞污染的去除，現(xiàn)有方法尚需改進(jìn)。有研究者嘗試應(yīng)用無血清法去除雪旺細(xì)胞培養(yǎng)中成纖維細(xì)胞的污染，效果良好[12-13]，但此方法尚未運(yùn)用于EGC的原代培養(yǎng)。本實(shí)驗(yàn)方法結(jié)合無血清培養(yǎng)改進(jìn)現(xiàn)有的肌間神經(jīng)叢EGC原代培養(yǎng)法，有效去除了成纖維細(xì)胞污染，獲得了純度較高，活性良好的結(jié)腸肌間神經(jīng)
首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2019年2期2019-04-22
- 原代豬肝細(xì)胞及主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的提取和培養(yǎng)
細(xì)胞浸潤(rùn)。傳統(tǒng)的原代肝細(xì)胞的提取方法主要有機(jī)械破碎法和膠原酶消化法，提取的原代肝細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞活力有限，若應(yīng)用于珍稀動(dòng)物，如轉(zhuǎn)基因豬的原代肝細(xì)胞提取就會(huì)表現(xiàn)出不足，本研究在Seglen［5］經(jīng)典的兩步法提取原代肝細(xì)胞基礎(chǔ)上做了一些改進(jìn)，采用蠕動(dòng)泵灌注膠原酶消化的方法提取到了大量高活力的原代豬肝細(xì)胞［6］。目前血管內(nèi)皮細(xì)胞原代提取方法中，一般采用酶消化法及組織貼壁法，所獲得的血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量和純度已經(jīng)不能滿足科研實(shí)驗(yàn)的需要。本研究采用膠原酶血管管腔灌注消化的
實(shí)用器官移植電子雜志 2018年5期2018-11-09
- 應(yīng)用原代軟骨細(xì)胞與SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系建立體外骨關(guān)節(jié)炎模型的效果評(píng)價(jià)
實(shí)驗(yàn)研究大多采用原代細(xì)胞或細(xì)胞系來進(jìn)行[7,8]，如正常軟骨細(xì)胞、OA軟骨細(xì)胞或軟骨肉瘤細(xì)胞系（如SW1353細(xì)胞系）等。但以上細(xì)胞在作為OA體外實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象時(shí)，細(xì)胞的病理變化及對(duì)炎癥的反應(yīng)程度存在一定的差異。因此，本研究通過比較白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）處理下，來源于OA患者的原代軟骨細(xì)胞及SW1353軟骨肉瘤細(xì)胞系的增殖活力、OA的炎癥標(biāo)志性產(chǎn)物白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）及基質(zhì)金屬蛋白酶-13
中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志 2018年5期2018-11-07
- 紫杉醇對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2和大鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用的研究
細(xì)胞HepG2和原代肝細(xì)胞的影響，本研究以肝癌細(xì)胞HepG2和原代肝細(xì)胞為研究對(duì)象，通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞活性和細(xì)胞凋亡檢測(cè)等來比較分析紫杉醇對(duì)這兩種細(xì)胞的毒性作用。初步探討紫杉醇對(duì)兩種細(xì)胞的凋亡影響，為探索其抗肝癌作用機(jī)制提供理論依據(jù)。1 材料與方法1.1材料1.1.1細(xì)胞株 肝癌細(xì)胞株HepG2購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心。1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與試劑 SD大鼠♂，3只, 體質(zhì)量(50±5)g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。DMEM高糖培養(yǎng)
中國(guó)藥理學(xué)通報(bào) 2018年7期2018-07-04
- 特異性Aurora激酶抑制劑對(duì)人乳腺癌原代細(xì)胞增殖、周期、自噬、凋亡的影響及其機(jī)制
前關(guān)于其在乳腺癌原代細(xì)胞中的作用相關(guān)研究報(bào)道較少。2015年5月～2016年8月，我們觀察了AT9283對(duì)乳腺癌原代細(xì)胞增殖、周期、自噬、凋亡的影響，并探討其可能作用機(jī)制。1 材料與方法1.1 細(xì)胞、試劑及儀器 人乳腺癌瘤組織來自河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院乳腺外科，采用細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)原代細(xì)胞。在無菌條件下收集乳腺癌原發(fā)病灶標(biāo)本，去除壞死組織，用含有青霉素和鏈霉素的PBS漂洗2～3次，將組織剪碎，1 000 r/min離心5～10 min，棄上清液，加入含20
山東醫(yī)藥 2018年15期2018-06-01
- 醛固酮瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的建立及細(xì)胞鑒定
。醛固酮瘤細(xì)胞的原代培養(yǎng)對(duì)研究腫瘤的致病背景及下游功能有十分重要的作用。然而，大部分醛固酮瘤直徑在2 cm以內(nèi)，這對(duì)醛固酮瘤細(xì)胞的原代培養(yǎng)造成了很大的困難。目前國(guó)際上僅有個(gè)別文獻(xiàn)報(bào)道了APA的原代培養(yǎng)[6- 7]，國(guó)內(nèi)尚無相關(guān)報(bào)道。本研究的目的即是建立醛固酮瘤細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法及培養(yǎng)細(xì)胞的鑒定。1 材料與方法1.1 材料Ⅰ型膠原酶(Gibco公司)；DMEM/F12培養(yǎng)基(Hyclone公司)；標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)；青鏈霉素(×
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床 2018年6期2018-05-30
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)七氟烷所致的原代神經(jīng)元凋亡及細(xì)胞活性的影響
處理干預(yù)七氟烷對(duì)原代神經(jīng)元的凋亡和細(xì)胞活性產(chǎn)生的影響，探索BMSCs在緩解神經(jīng)毒性損傷中起的作用；并通過檢測(cè)培養(yǎng)液上清中的炎癥因子TNFα水平，探索BMSCs通過抗炎、抗免疫失調(diào)機(jī)制產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用的可能性，為防治七氟烷造成的神經(jīng)毒性損傷提供新的思路。1 材料和方法1.1 主要試劑與儀器DMEM培養(yǎng)基、Neuron-basal培養(yǎng)基、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶（Gibco公司，美國(guó)）；多聚賴氨酸（Sigma公司， 美國(guó)）；caspase-3 抗體、β-a
組織工程與重建外科雜志 2018年1期2018-04-09
- 原代人黑素細(xì)胞Wnt5A基因沉默的研究
9南京）·論著·原代人黑素細(xì)胞Wnt5A基因沉默的研究粟倩雅 林彤 張孟麗 彭霖210042南京，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 皮膚病醫(yī)院激光科（第一作者現(xiàn)在東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院皮膚科，210009南京）目的 優(yōu)化Wnt5A特異性siRNA轉(zhuǎn)染原代人黑素細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)條件，建立沉默Wnt5A基因的模型。方法 培養(yǎng)原代人黑素細(xì)胞，將不同濃度（0、20.0、33.3、40.0、60.0 nmol/L）的陽性參照基因GAPDH特異性siRNA通過脂質(zhì)體法介導(dǎo)轉(zhuǎn)染原
中華皮膚科雜志 2017年10期2017-12-12
- 正常宮頸上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)體系的改良*
正常宮頸上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)體系的改良*李 雅，榮守華，智艷芳，樊婷婷，邱 翠，李肖甫#鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院細(xì)胞室 鄭州 450052#通信作者，男，1964 年7 月生，碩士，教授，研究方向：腫瘤細(xì)胞病理學(xué)，E-mail：lixiaofu1964@163.com原代培養(yǎng)；宮頸上皮細(xì)胞；中性蛋白酶；角質(zhì)細(xì)胞無血清培養(yǎng)基目的：探索一種高效、可重復(fù)的正常宮頸上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法。方法：取60例正常宮頸組織，分成2組，分別采用Ⅱ型中性蛋白酶聯(lián)合0.25 g/mL胰蛋
- Matrigel三維細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)的原代乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)情況及對(duì)阿霉素敏感性觀察
胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)的原代乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)情況及對(duì)阿霉素敏感性觀察張震1,2,3，齊曉敏1,2,3，張薇1,2,3，張培1,2,3，曹旭晨1,2,3，肖春花1,2,3(1天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院，國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心,天津300060；2天津市“腫瘤防治”重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；3天津市惡性腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心；4乳腺癌防治教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)目的 觀察Matrigel三維細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)的原代乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)情況及其對(duì)阿霉素的敏感性。方法 分別采用二維單層培養(yǎng)法、Matrige
山東醫(yī)藥 2017年19期2017-06-05
- EV71病毒對(duì)樹鼩原代腎上皮細(xì)胞感染模型的建立
V71病毒對(duì)樹鼩原代腎上皮細(xì)胞感染模型的建立楊銘1，胡曉星1，王文廣2，張莉1，董書維1，馮悅1，代解杰2*，夏雪山1*(1. 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，昆明 650500；2. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所樹鼩標(biāo)準(zhǔn)化研究與疾病動(dòng)物模型創(chuàng)建省創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)，昆明 650118)目的 建立EV71對(duì)樹鼩原代腎細(xì)胞的感染模型。方法 胰蛋白酶消化法獲得樹鼩的原代腎細(xì)胞，用EV71感染樹鼩腎細(xì)胞，測(cè)定1、2、4、6和8 d培養(yǎng)上清病毒滴度，分別用
- 人輪狀病毒G1P[8]型感染樹鼩原代小腸上皮細(xì)胞模型的建立
[8]型感染樹鼩原代小腸上皮細(xì)胞模型的建立李道群1，彭杰1，甸子芩1,2，王文廣3，張阿梅1，馮悅1，牛華2，代解杰3*，夏雪山1*(1. 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，昆明 650500；2. 昆明理工大學(xué)附屬醫(yī)院(云南省第一人民醫(yī)院)，昆明 650032；3. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所樹鼩標(biāo)準(zhǔn)化研究與疾病動(dòng)物模型創(chuàng)建省創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)，昆明 650118)目的 探究樹鼩原代小腸上皮細(xì)胞的增殖特性，建立人輪狀G1P[8]型病毒體外感染樹鼩
- 用megaTAL 核酸酶對(duì)原代人T 細(xì)胞CCR5 基因座進(jìn)行有效修飾可建立HIV-1 抵抗力
TAL 核酸酶對(duì)原代人T 細(xì)胞CCR5 基因座進(jìn)行有效修飾可建立HIV-1 抵抗力已有研究表明，HIV-1 協(xié)同受體( co-receptor) CCR5 基因中自然發(fā)生的32 個(gè)堿基對(duì)缺失( 32-base pair deletion)可保護(hù)人CD4+T細(xì)胞，對(duì)抗HIV感染。最近，用工程化核酸酶干擾該基因和模擬此突變的基因工程方法展示了HIV 治療獲得成功的跡象。Romano Ibarra 等研制了一個(gè)靶向CCR5 基因第3 細(xì)胞外莖環(huán)( extrace
中國(guó)病理生理雜志 2017年2期2017-01-17
- 家族型帕金森病α-突觸核蛋白突變體寡聚化對(duì)神經(jīng)元毒性的影響
0P聚集體對(duì)大鼠原代神經(jīng)元的神經(jīng)毒性。方法 取大鼠前腦皮質(zhì)神經(jīng)元進(jìn)行原代培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入體外孵育的α-Syn聚集體。培養(yǎng)14 d后，MTT法和神經(jīng)元流式細(xì)胞術(shù)觀察神經(jīng)元的細(xì)胞活力。免疫熒光染色后以激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)聚集體的分布。硫磺素S染色觀察細(xì)胞內(nèi)包涵體的形成。結(jié)果 加入α-Syn聚集體各組的原代神經(jīng)元細(xì)胞活力較對(duì)照組降低(P帕金森??；α-突觸核蛋白；寡聚體；原代神經(jīng)元；神經(jīng)毒性目前研究認(rèn)為，老化、遺傳和環(huán)境因素的相互作用是帕金森病(PD)發(fā)
中國(guó)老年學(xué)雜志 2016年23期2016-12-23
- 乳源免疫調(diào)節(jié)肽提高DDP對(duì)卵巢癌細(xì)胞的影響
合PGPIPN對(duì)原代卵巢癌細(xì)胞增殖抑制情況，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DDP聯(lián)合PGPIPN對(duì)原代卵巢癌細(xì)胞凋亡率和周期的影響，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力。結(jié)果MTS實(shí)驗(yàn)表明PGPIPN聯(lián)合DDP處理組對(duì)卵巢癌細(xì)胞抑制率顯著高于單獨(dú)用DDP組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P人原代卵巢癌細(xì)胞；聯(lián)合用藥；免疫調(diào)節(jié)肽；順鉑卵巢癌是死亡率最高的婦科惡性腫瘤，其發(fā)病率位于女性生殖道惡性腫瘤的前列[1-2]?，F(xiàn)有的治療主要是手術(shù)和化療兩種方式，但化療很容易出現(xiàn)耐藥性，進(jìn)而治療效果逐漸降低
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2016年10期2016-11-25
- 原代小鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)方法的比較
，陳 雯，陳麗萍原代小鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)方法的比較王珊，柏青，王方萍，李慧瑤，陳燊，何志妮，王慶，陳雯，陳麗萍*（中山大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系，廣東廣州510080）目的： 比較3種不同培養(yǎng)條件下原代小鼠肝細(xì)胞的形態(tài)以及肝細(xì)胞功能，尋找適合于原代小鼠肝細(xì)胞體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方。方法：采用改良Seglen兩步膠原酶灌注法分離原代小鼠肝細(xì)胞，糖原染色觀察細(xì)胞純度，在貼壁4 h后用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基加DMSO(DMSO組)、基礎(chǔ)培養(yǎng)基加DMSO和EGF(DMSO
癌變·畸變·突變 2016年2期2016-09-02
- 改良人牙齦上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法
良人牙齦上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法余婧婷1,2， 孟煥新1△， 劉凱寧1(北京大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·口腔醫(yī)院1.牙周科，2.綜合科口腔數(shù)字化醫(yī)療技術(shù)和材料國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室口腔數(shù)字醫(yī)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 北京100081)目的：建立穩(wěn)定的人牙齦上皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法，為牙周組織的細(xì)胞學(xué)研究提供可靠的細(xì)胞來源，對(duì)原有的原代培養(yǎng)方法進(jìn)行了改良，期望達(dá)到培養(yǎng)成功率高、原代培養(yǎng)時(shí)間短且操作簡(jiǎn)便的效果。方法： 選擇行“冠延長(zhǎng)術(shù)”的牙周相對(duì)健康者9人，取冠延長(zhǎng)術(shù)切除的領(lǐng)圈牙齦組織進(jìn)行
- 不同消化時(shí)間對(duì)原代心肌細(xì)胞的影響
楊曉敏0 引 言原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)重要的體外實(shí)驗(yàn)技術(shù)，其為建造心血管疾病發(fā)生發(fā)展過程的模型及探討基因、蛋白質(zhì)及信號(hào)通路的變化提供重要的基礎(chǔ)保障。此外，在體內(nèi)心肌細(xì)胞的活動(dòng)受到神經(jīng)、體液等多方因素的影響，限制對(duì)其病理變化的過程的研究。而體外培養(yǎng)的原代心肌細(xì)胞不僅具有心肌細(xì)胞固有的活性，而且還有不受神經(jīng)、體液等因素的影響的可控制性。因此，原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)的好壞，是影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的關(guān)鍵因素之一。本研究通過比較不同消化時(shí)間對(duì)原代心肌細(xì)胞的影響，探討一套簡(jiǎn)便易行
醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào) 2015年6期2015-05-07
- 新生鼠肺成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的比較與體外肌成纖維細(xì)胞分化模型的建立
貼壁法2種不同的原代培養(yǎng)方法，分別進(jìn)行新生乳鼠FB的培養(yǎng)，觀察并分析采用不同培養(yǎng)方法的優(yōu)缺點(diǎn)，探討新生乳鼠肺FB原代培養(yǎng)的最佳方法;并采用TGF-β1誘導(dǎo)肺 FB向肌FB分化，為建立體外肌FB分化模型、更好地研究矽肺纖維化提供進(jìn)一步的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 材料與方法1.1 動(dòng)物 SRF級(jí)SD大鼠雌雄各2只(北京華阜康公司，許可證號(hào):SCXK京20090004)，6～8周齡，體重160～180g，自由交配，于河北聯(lián)合大學(xué)動(dòng)物中心屏障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)，室溫27
醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào) 2014年2期2014-09-28
- EA.HY926人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株與原代細(xì)胞生物特性的比較研究
內(nèi)皮細(xì)胞，主要有原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVECs)和EA.HY926人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株。本實(shí)驗(yàn)在建立原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞體外分離和培養(yǎng)方法的同時(shí)，比較原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與 EA.HY926人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株的生物特性，為血管性疾病研究的細(xì)胞來源的選擇提供理論支撐。1 材料與方法1.1材料原代細(xì)胞：來源于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院產(chǎn)科健康剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦分娩后所取的新生胎兒臍帶，長(zhǎng)度15～
新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2014年1期2014-07-13
- 羊睪丸原代細(xì)胞傳代試驗(yàn)
0011）羊睪丸原代細(xì)胞傳代試驗(yàn)張玉紅，何玉仙，井蓮娜，王玉紅（新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司，新疆 烏魯木齊830011）生產(chǎn)山羊痘活疫苗時(shí)，羊睪丸采集工作量大，易污染，費(fèi)時(shí)費(fèi)事，是否有辦法減少人員外出采集羊睪丸次數(shù)，值得摸索，本實(shí)驗(yàn)將長(zhǎng)成單層的羊睪丸細(xì)胞進(jìn)行傳代，長(zhǎng)成致密單層后進(jìn)行接毒，收獲毒液，并對(duì)毒液及疫苗成品進(jìn)行病毒含量測(cè)定，結(jié)果表明，羊睪丸細(xì)胞完全可以傳一代，細(xì)胞形態(tài)良好，毒液、疫苗成品毒價(jià)均達(dá)到規(guī)程要求，羊睪丸原代細(xì)胞傳代可以大大提高睪丸組
草食家畜 2013年3期2013-06-05
- 體外培養(yǎng)不同代角膜緣干細(xì)胞特性分析△
免疫熒光染色分析原代、第1代和第2代角膜緣細(xì)胞形態(tài)學(xué)特性;流式細(xì)胞技術(shù)定量檢測(cè)原代、第1代和第2代角膜緣細(xì)胞ABCG2表達(dá);MTT比色法測(cè)定體外培養(yǎng)原代、第1代和第2代角膜緣干細(xì)胞的增殖活性變化。結(jié)果倒置相差顯微鏡下可見原代細(xì)胞培養(yǎng)24 h有單個(gè)細(xì)胞從組織塊邊緣遷出，48 h細(xì)胞局部可見拉網(wǎng)樣生長(zhǎng)趨勢(shì)，72 h出現(xiàn)大片細(xì)胞，細(xì)胞呈現(xiàn)多邊形或多角形，96 h細(xì)胞幾乎鋪滿整個(gè)培養(yǎng)板。隨著傳代次數(shù)的增加，細(xì)胞形態(tài)變得不規(guī)則，CK3單克隆抗體表達(dá)陽性率逐漸增強(qiáng);p
眼科新進(jìn)展 2012年7期2012-01-17
- 體外培養(yǎng)樹鼩視網(wǎng)膜Mǜller細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究*
Mǜller細(xì)胞原代培養(yǎng)的技術(shù)方法。方法:將樹鼩大鼠視網(wǎng)膜原代培養(yǎng),換液時(shí)用胰蛋白酶流經(jīng)培養(yǎng)面洗脫神經(jīng)元。免疫組化和電鏡鑒定分次胰蛋白酶清洗后原代培養(yǎng)細(xì)胞的純度。結(jié)果:原代培養(yǎng)的細(xì)胞有大量神經(jīng)元混雜, 經(jīng)多次低濃度胰蛋白酶清洗可將附著在Mǜller細(xì)胞上的神經(jīng)元洗脫,通過電鏡證實(shí)培養(yǎng)的為Mǜller細(xì)胞,GFAP顯示Mǜller細(xì)胞純度可達(dá)95%以上。結(jié)論:分次胰蛋白酶清洗是一種簡(jiǎn)便有效的純化原代視網(wǎng)膜Mǜller細(xì)胞的方法。
中國(guó)病理生理雜志 2010年10期2010-02-11