中谷集團茂名飼料有限公司 池作授
廣東海洋大學水產(chǎn)學院耿旭 郭云學 董曉慧*黃翔鵠 王 輝 陳 剛
廣東省茂名市茂南三高漁業(yè)發(fā)展有限公司 李瑞偉
脂肪是動物組織細胞的組成成分,同時也是重要的能源物質(zhì),在魚類生長、發(fā)育和繁殖過程中不可缺少。飼料脂肪含量過低,不能滿足水產(chǎn)動物的生長需要,尤其是對必需脂肪酸的需要;飼料中脂肪含量過高則會影響魚蝦對飼料的利用率,增加魚蝦體脂肪的含量,損害魚蝦健康,進而影響水產(chǎn)品的品質(zhì)和保存時間。飼料中適量的脂肪含量,不僅可提高飼料蛋白質(zhì)的利用率,還是保證合理的養(yǎng)殖成本、魚體健康和取得良好經(jīng)濟效益所必需。
奧尼羅非魚具有雄性率高,生長快,群體產(chǎn)量高,抗寒力、抗病力強,含肉率高,肉質(zhì)清爽等優(yōu)點(王武,2002)。關(guān)于羅非魚的營養(yǎng)需要和配合飼料的研究,國內(nèi)外已有較多的報道(劉勇等,2009;朱選等,2009;Rawling 等,2009;Lim 等,2009;Wang等,2008;Tran-Duy 等,2008;林仕梅等,2007),但大多是關(guān)于羅非魚幼魚、成魚的研究,對羅非魚仔稚魚營養(yǎng)研究的報道不多。
本試驗研究了不同脂肪水平飼喂條件下,奧尼羅非魚仔稚魚生長、體組成及消化酶活性,了解奧尼羅非魚仔稚魚期脂肪營養(yǎng)生理的變化規(guī)律,為奧尼羅非魚仔稚魚配合飼料的研制提供試驗基礎(chǔ)。
1.1 試驗飼料 以魚粉、豆粕、大豆分離蛋白為蛋白源,豆油為脂肪源,設(shè)計6個等氮等能(45%CP、14 MJ/kg)的飼料,在飼料中添加 0、2%、4%、6%、8%和10%的脂肪,測定飼料中實際粗脂肪含 量 為 2.82% (F1)、5.35% (F2)、7.32% (F3)、8.95%(F4)、10.86%(F5)和 13.04%(F6),日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。飼料在實驗室制備,各種飼料原料粉碎過80目篩,按配方比例準確稱重后混勻,微量組分采用逐級擴大法混合。混勻后飼料用封口袋編號分裝,于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
表1 日糧組成及營養(yǎng)水平%
1.2 試驗用魚與飼養(yǎng)管理 奧尼羅非魚仔稚魚由茂名市茂南三高漁業(yè)發(fā)展有限公司提供,為同一批魚卵人工孵化后暫養(yǎng)10 d的魚苗。魚苗運回實驗室暫養(yǎng)7 d后,挑選規(guī)格一致,體格健壯的魚苗進行分組,魚苗初始體重為(0.032±0.002)g。 試驗共設(shè)6個處理,每個處理3個重復,每個重復一個塑料桶(55 L),每桶放魚苗150尾,試驗期28 d。每天投喂 4 次(07∶30、11∶30、17∶30 和 22∶30),日投喂量約為魚體體重的15%,每周稱量體重一次,根據(jù)體重調(diào)整投餌量。試驗期間每天換水一次,換水量100%,清潔桶一次,每天記錄投喂量和水溫。整個試驗期間充氣養(yǎng)殖,水溫27~30℃,pH 值 7.4~7.6。
1.3 樣品采集和分析 試驗結(jié)束前一天停喂,次日取出羅非魚稱重、記數(shù),計算生長指標。從每個桶中隨機取8尾魚,取其整個腹部供酶活分析。剩下的魚全部放入-20℃冰箱中保存,備測體成分。
1.3.1 生長指標 生長指標用以下公式計算:
增重率(WG)/%=100×(終末均重-初始均重)/初始均重;
特定生長率(SGR)=[ln(終末均重)-ln(初始均重)]/飼養(yǎng)天數(shù);
肥滿度(CF)/%=100×魚體體重/體長3;
成活率/%=100×試驗結(jié)束魚尾數(shù)/試驗開始魚尾數(shù)。
1.3.2 飼料及魚體成分分析 樣品分析參照國際標準方法(AOAC,1995),水分含量采用105℃常壓干燥法測定;粗蛋白質(zhì)含量采用微量凱氏定氮法測定;粗脂肪含量采用索氏抽提法測定,有機提取溶劑為乙醚;灰分含量采用550℃馬弗爐高溫灼燒法測定。
1.3.3 酶活性測定 準確稱取樣品1.0~1.2 g,放入已烘干的玻璃勻漿器中,并加入10倍(體積/重量)預冷的生理鹽水,于冰水浴中勻漿。勻漿液在0~2℃、8000 r/min條件下,離心10 min,取上清液進行酶活測定。可溶性蛋白含量、胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶均使用南京建成科技有限公司的試劑盒進行測定。
1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析。先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA),如有顯著性差異(P<0.05),則進行Duncan’s多重比較。
2.1 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚生長性能的影響 結(jié)果見表2。
由表2可以看出終末重:F5組體重最大,其次是F4組,兩組間無顯著差異,但顯著高于F1、F2組和F3組。F1組脂肪水平最低,終末重也顯著低于F3、F4、F5組和F6組??傮w趨勢為隨飼料脂肪水平的增加,終末重顯著升高,在F5組達到最高點,然后顯著下降(P<0.05)。
表2 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚生長性能的影響
增重率、特定生長率:各組間的增重率和特定生長率的變化趨勢和終末重的變化趨勢基本一致。F1組的增重率和特定生長率與F2組差異不顯著,但顯著低于其他各組(P<0.05)。
肥滿度:各組之間無顯著差異(P>0.05)。
成活率:羅非魚仔稚魚的成活率在脂肪含量從3%到11%之間逐漸增高,但當脂肪含量高于11%時又顯著下降(P<0.05)。
2.2 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚體成分的影響 結(jié)果見表3。從表3中可知,羅非魚仔稚魚魚體的水分含量有隨著脂肪含量的增加呈逐漸下降的趨勢,且 F6和 F5組顯著低于 F1、F2、F3和 F4組。羅非魚仔稚魚魚體的粗脂肪含量隨著飼料中脂肪含量水平的升高而升高,F(xiàn)1組顯著低于其他各組,F(xiàn)3、F4、F5各組之間無顯著差異,F(xiàn)6組最大,并且顯著高于其他各組?;曳蛛S飼料中脂肪含量的升高而顯著下降,F(xiàn)1組最大并且顯著高于其他5組,其次是F2組,而F3和F4組之間無顯著差異,F(xiàn)5和F6之間也無顯著差異并且顯著低于前4組。飼料中脂肪含量的增加使得羅非魚仔稚魚粗蛋白質(zhì)含量降低,兩者關(guān)系呈負相關(guān)性,但是在F3、F4、F5各組無顯著差異。F1、F2組粗蛋白質(zhì)含量顯著高于其他各組,F(xiàn)6組粗蛋白質(zhì)最低并且顯著低于其他各組(P<0.05)。
2.3 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚消化酶的影響 結(jié)果見表4。從表4中可知,飼料中脂肪含量對羅非魚仔稚魚的胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶三種消化酶有顯著影響,其中胃蛋白酶活性隨著脂肪含量的增加而顯著降低,在F6組顯著低于其他各組,F(xiàn)1和F2兩組之間無顯著差異,但是這兩組顯著高于其他各組;F4組和F5組無顯著差異,但是顯著低于F3組。脂肪酶活性變化趨勢與胃蛋白酶相反、隨著飼料脂肪含量的增加,脂肪酶活性顯著升高,F(xiàn)6組最高,但F4、F5和F6三組之間無顯著差異,這三組顯著高于前三組;F1組和F2組之間無差異,但是顯著低于其他各組。淀粉酶活性總體趨勢是隨著飼料中脂肪含量逐漸升高而逐漸降低,F(xiàn)1組最高,顯著高于其他各組,F(xiàn)2組也顯著高于后4組,而在F3組之后下降的趨勢較小,酶活性改變不大,趨于平穩(wěn)。
表3 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚體成分的影響 %
表4 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚消化酶活力的影響U/mg
3.1 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚生長的影響本試驗結(jié)果表明,在飼料脂肪含量為3%~11%時,增重率隨著飼料脂肪的增加而上升,但在超過11%脂肪含量時,增重率顯著下降。羅非魚仔稚魚在飼料脂肪含量為11%時獲得最大的生長。通過對增重率和飼料脂肪含量進行二次回歸分析顯示,羅非魚仔稚魚在飼料脂肪含量為10.98%時到達最快的生長(圖1)。水產(chǎn)動物對脂肪需求量差異主要取決于水產(chǎn)動物的食性,一般來說,草食性和雜食魚類對脂肪需要量比較低,而肉食性魚類對脂肪的需要量高。龐思成(1994)報道,在尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)飼料中添加3% ~5%的豆油,使飼料的總脂肪達到8.8%~10.7%時,羅非魚的生長最佳。這與本試驗的結(jié)果基本一致。王貴英等(2003)研究發(fā)現(xiàn),飼料脂肪水平對鱖魚(Siniperca chuatsi)的生長和蛋白質(zhì)效率有顯著影響,飼料脂肪水平在7%~12%時,鱖魚獲得最佳生長效果。雍文岳等 (1985)報道,草魚(Ctenopharyngodon idella)飼料的脂肪最適含量為3.6%,而毛永慶等(1985)的試驗結(jié)果表明,草魚飼料脂肪的最適含量為8%。庸鰈(Hippoglossus hippoglossus L.)飼料中適宜脂肪含量為14%(Martins等,2007), 飼料脂肪含量為 15.5% ~18%時,石首魚(Atractoscion nobilis)生長效果最好 (López等,2006)。 當飼料蛋白質(zhì)水平為33%時,鯉魚(Cyprinus carpio Linnaeus)對脂肪的需要量為5% ~8%(李愛杰,1996)。王道尊等(1987)試驗表明,青魚(Mylopharyngodon piceus)飼料中脂肪含量為6.5%時,促生長效果最好。黃鱔(Monopterus alba)飼料中脂肪的最適含量為3%~ 4%(楊代勤等,2000);王松等(2008)認為,黃鱔飼料的最適脂肪含量在10%左右。由此可見魚類對脂肪的需要量因品種而異,甚至同一種魚類對脂肪的需要量也可能由于試驗初始重、環(huán)境等因素的不同而不同。本試驗中,特定生長率和成活率變化趨勢呈現(xiàn)出與增重率幾乎相同的變化趨勢,均在飼料脂肪含量11%時有最大值。根據(jù)本試驗結(jié)果和二次回歸的結(jié)果表明:羅非魚仔稚魚獲得最大生長的飼料最適脂肪含量為10.98%。
圖1 羅非魚仔稚魚增重率與飼料脂肪水平的關(guān)系
3.2 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚魚體組成的影響 飼料脂肪含量對羅非魚仔稚魚的體成分影響顯著,在本試驗中,隨著飼料中脂肪水平的升高,試驗魚體水分、粗蛋白質(zhì)、灰分含量顯著下降,粗脂肪含量顯著升高。汪留全等(2003)報道,中華絨螯蟹(Eriochier sinensis)幼蟹的體水分、粗蛋白質(zhì)、灰分隨飼料脂肪含量的增加而降低,體脂肪含量則顯著上升,這與本試驗結(jié)果一致。在飼料蛋白質(zhì)含量為48%和51%的條件下,紅笛鯛(Lutjanus erythropterus)幼魚肌肉中脂肪含量隨飼料脂肪含量的增加而顯著升高(彭志東,2007);隨飼料中脂肪含量的增加,哲羅魚(Hucho taimen)稚魚體脂肪含量上升 (徐奇友等,2007);Bromley(1980)和 Kaushik 等(1989)發(fā)現(xiàn),飼料脂肪水平可提高大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)和虹鱒(Salmo gairdneri R.)的體脂肪含量;石首魚(Sciaenops ocellaturs)(Daniels,1986)、 金頭鯛(Sparus aurata L.)(Santinha 等,1999)和真鯛(Pagrus major)(Ogata 和 Sheaner,2000)幼魚的相關(guān)研究結(jié)果也與本試驗相似。段彪等 (2007)對齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)的研究結(jié)果表明,當飼料脂肪含量升高時,試驗魚魚體粗蛋白質(zhì)含量呈先升高后下降的趨勢,而粗脂肪含量則有先下降后升高的趨勢。Martins等(2007)則報道了隨著飼料脂肪含量的增加,庸鰈魚體粗蛋白質(zhì)含量無明顯變化,而粗脂肪含量顯著升高。本試驗中仔稚魚處于快速生長和發(fā)育的時期,對飼料脂肪需求量較高,因此其體成分受飼料脂肪水平的影響較大。
3.3 飼料脂肪水平對羅非魚仔稚魚消化酶活性的影響 消化酶是消化腺和消化系統(tǒng)分泌的具有消化作用的酶類。在消化酶中,根據(jù)消化對象的不同大致可劃分為蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等幾種(楊惠萍等,1998)。
飼料或活餌中的脂肪也會對消化酶分泌起到刺激作用,金頭鯛仔魚飼喂EPA和DHA強化輪蟲時,中性脂肪酶活性明顯增強 (Izquierdo和Aramtzamendi,2000)。當提高飼料中的沙丁魚油含量時,結(jié)魚(Tor khudree)仔稚魚的脂肪酶含量增加(Muzaffar-Bazaz 和 Keshavanath,1993);高攀等(2009)報道,草魚腸道和肝胰臟的脂肪酶活性在飼料蛋白質(zhì)含量相同的情況下,隨著脂肪含量的升高,呈顯著上升的趨勢;草魚飼料中添加肉堿可顯著提高腸道中脂肪酶的活性(田娟等,2009)。本試驗結(jié)果表明,隨飼料脂肪水平的升高,蛋白酶和淀粉酶活性呈下降趨勢,而脂肪酶活性則不斷升高,脂肪酶的變化趨勢與Muzaffar-Bazaz和Kaeshavanath(1993)的研究結(jié)果相似。
本試驗結(jié)果表明,奧尼羅非魚仔稚魚飼料中脂肪含量為10.98%時,可獲得最大生長。
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