李秀娟 劉 霞
(①齊魯動物保健品有限公司 山東 濟(jì)南 250100 ②山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院)
鴨病毒性肝炎是由鴨病毒性肝炎病毒引起雛鴨的一種急性、烈性和致死性傳染病,該病的特征是發(fā)病急、傳播迅速、死亡率高。2010年3月,本公司研究所購進(jìn)100只1日齡雛鴨,飼喂條件適宜,雛鴨精神狀態(tài)良好,飲食糞便均正常,但在17日齡時突然有5只雛鴨相繼死亡。開始時無明顯癥狀,后仰頭踢腿、即后出現(xiàn)全身性抽搐,倒向一側(cè)而突然死亡。第2d又有10只死亡,均呈角弓反張狀。死亡鴨及時剖檢,肝臟均腫大,有岀血點(diǎn),懷疑是鴨肝炎,進(jìn)行緊急治療,效果非常好。
病鴨精神極度沉郁,縮頸拱背,昏睡呆立或行動遲滯,翅膀下垂,減食或廢食,排黃白或綠色稀糞,多見呼吸困難,不久,病鴨出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,運(yùn)動失調(diào),身體歪向一側(cè),全身抽搐,頭向后仰,背部著地,轉(zhuǎn)圈下蹲,兩腳痙攣性踢蹬,呈角弓反張姿勢,常在出現(xiàn)神經(jīng)癥狀數(shù)小時或數(shù)分鐘后死亡。死后喙端和爪尖瘀血,呈暗紫色,少數(shù)病雛死前出現(xiàn)腹瀉,排黃白色或綠色稀糞。
所有剖檢病例肝臟均腫大、質(zhì)地脆、易碎,有的肝臟表面有大小不等的出血斑點(diǎn)或刷狀出血,有的色暗淡或發(fā)黃,呈斑駁狀;膽囊腫大,充滿膽汁,充滿褐色或淡綠色的膽汁;脾臟腫大,心肌質(zhì)軟,腎臟輕度腫大,有的腦充血,其它器官無明顯變化。
將無菌采集發(fā)病鴨的肝臟組織用剪刀剪碎,用滅菌生理鹽水按照1:4體積攪拌制成勻漿懸液,置-20℃反復(fù)凍融3次,5000r/min離心10min棄沉淀,取上清液加入2000IU/ml的青、鏈霉素,4℃作用4h,尿囊腔接種10日齡SPF雞胚,置37℃孵化器內(nèi)繼續(xù)孵化。結(jié)果均在雞胚72~96h內(nèi)死亡,收獲尿囊液保存?zhèn)溆?。剖檢胚體皮下出血和水腫發(fā)育不良,肝臟多腫脹呈黃綠色且有壞死灶。
3.2.1 血凝性試驗(yàn) 將研磨的病料上清液液用1%的雞紅細(xì)胞懸液作凝集試驗(yàn),放置室溫,觀察30min,結(jié)果無紅細(xì)胞凝集。
3.2.2 特異性檢驗(yàn) 將研磨的病料上清液用滅菌生理鹽水稀釋1000倍,與等量標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ型病毒性鴨肝炎陽性血清混合后,在37℃放置中和30min,尿囊腔接種SPF雞胚5個,每胚0.1ml。同時設(shè)陽性對照組。觀察培養(yǎng)至120h,逐個剖檢觀察雞胚病變。剖檢結(jié)果陽性對照組有4/5雞胚出現(xiàn)鴨肝炎典型病變,中和組5/5雞胚未出現(xiàn)鴨肝炎典型病變。
3.2.3 RT-PCR檢測 將提取的DHV標(biāo)準(zhǔn)株和病料上清液核酸進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增,兩者均擴(kuò)增出了440bp特異性片段,證實(shí)QL株為一株鴨肝炎病毒。
從病死鴨肝臟無菌操作取樣接種于普通瓊脂平板、巧克力瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板,分別于37℃ CO2培養(yǎng)箱和37℃恒溫箱中培養(yǎng)96h,結(jié)果均無細(xì)菌生長。
根據(jù)發(fā)病情況、臨診癥狀和病理變化初步診斷為鴨病毒性肝炎,在采取綜合治療措施的同時,經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)最終得到了確診。
防止病情進(jìn)一步擴(kuò)散,在發(fā)病第2天取一瓶齊魯動物保健品有限公司生產(chǎn)的替奧福[頭孢噻呋鈉凍干粉,批準(zhǔn)文號為獸藥字(2007)150252022],用專用稀釋液稀釋后,加入到50ml鴨肝炎陽性血清中混勻,立即對所有鴨逐只腿部肌肉注射,0.2ml/只。接種完成后對整個鴨舍用2%的苯酚溶液噴霧消毒。在第2天剩余雛鴨全部存活,未出現(xiàn)死亡。再取一瓶替奧福用專用稀釋液稀釋后,加入到100ml生理鹽水中,對所有鴨逐只腿部肌肉注射,0.3ml/只。同時在飼喂過程中增加飲水次數(shù)。雛鴨再未出現(xiàn)死亡,2d后,鴨群精神、飲水和采食趨于正常。
在發(fā)病初期用抗生素和鴨肝炎陽性血清進(jìn)行緊急接種可以有效地防止病情的擴(kuò)散。但本病重在預(yù)防,若想預(yù)防鴨病毒性肝炎病的發(fā)生,應(yīng)在母鴨開產(chǎn)前2~4周接種適量的病毒性肝炎疫苗可使雛鴨獲得一定的免疫力,養(yǎng)殖戶在購入雛鴨后要根據(jù)種鴨的免疫情況分別在2~3日齡或10日齡給雛鴨接種鴨病毒性肝炎弱毒疫苗。 其次要注意雛鴨育雛室溫度一般控制在32℃左右,過熱或過冷都可能誘發(fā)本病的發(fā)生。最后要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,凈化飼養(yǎng)環(huán)境,實(shí)行定期清毒制度。