肉鴨感染新城疫病毒的診斷

姜文萍

（山東省昌邑市都昌畜牧獸醫(yī)管理站，昌邑 261300）

2011年2 月份濰坊某肉鴨場(chǎng)30日齡的肉鴨出現(xiàn)精神沉郁，排出白色或黃色水樣稀糞、頭頸扭轉(zhuǎn)、角弓反張、斜頸、左右搖擺、站立不穩(wěn)、癱瘓等癥狀。死亡率達(dá)到10%。

筆者采用血凝和血凝抑制的方法鑒定該病毒為新城疫病毒。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用SPF雞胚、鴨胚均購于山東省農(nóng)科院家禽研究所；H7亞型、H5亞型、H9亞型標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、ND、EDS-76血清均購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。

1%紅細(xì)胞。

1.2 方法

（1）由雞心臟或翅靜脈采血，放入加有抗凝劑的離心管內(nèi)（按抗凝劑∶全血為1∶2的比例），迅速混勻。在離心機(jī)中以3000 r/min離心5 min，用吸管吸去上清液和紅細(xì)胞上層的白細(xì)胞薄膜，將沉淀的紅細(xì)胞加生理鹽水，慢慢混合均勻，再在離心機(jī)中3 000 r/min離心5 min，棄去上清液，再加生理鹽水混勻，如此反復(fù)離心4～5次，最后1次離心后的紅細(xì)胞，棄去上清液，即為紅細(xì)胞泥。放入4℃冰箱中可保存2～3 d。使用時(shí)用1ml吸管吸取0.1ml紅細(xì)胞泥，然后加入9.9ml的生理鹽水，此即1%紅細(xì)胞懸液。現(xiàn)用現(xiàn)配。

（2）無菌采集疑病死鴨的肺臟、氣管等組織，研碎后用pH7.4的PBS按1∶4的比例制成懸液；反復(fù)凍融3次，3 000 r/min離心30 min，取上清；加入5 000 U/ml青霉素和0.5 mg/ml鏈霉素，4 ℃過夜，無菌檢驗(yàn)合格后保存?zhèn)溆谩?/p>

（3）將上述制備的病毒液以0.2ml/胚的劑量，尿囊腔接種9～11日齡SPF雞胚；棄24h內(nèi)死胚，36h后收集尿囊液備用。

（4）將收集雞胚尿囊液與1%的紅細(xì)胞進(jìn)行血凝試驗(yàn)。

（5）將收集的雞胚尿囊液與H7亞型、H5亞型、H9亞型標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、ND、EDS-76血清進(jìn)行血凝抑制

（6）采健康公雞的血液作血瓊脂培養(yǎng)基，從病鴨肝臟中分離致病菌接種于血瓊脂培養(yǎng)基上，37 ℃溫箱中培養(yǎng)。

2 結(jié)果

（1）將上述病料處理后所得病毒做健康公雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，結(jié)果顯示該病毒具有血凝性?？梢詰岩渗喨夯夹鲁且?、禽流感或EDS-76。

（2）收集的尿囊液能凝集雞的紅細(xì)胞，并能被ND抗血清所抑制，不能被禽流感病毒H7亞型、H5亞型、H9亞型的標(biāo)準(zhǔn)血清和EDS-76血清抑制，證明了該病毒為新城疫病毒，而不是禽流感病毒或EDS-76。即該鴨群感染了新城疫病毒。

（3）細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果，血瓊脂培養(yǎng)基上無細(xì)菌生長，說明該鴨群還沒有繼發(fā)感染細(xì)菌性疾病。

綜上所述，該鴨群爆發(fā)了新城疫。鴨新城疫對(duì)于雞新城疫來說沒有養(yǎng)殖戶的足夠重視，但給養(yǎng)殖業(yè)帶來的巨大經(jīng)濟(jì)損失是不容忽視的。因此，獸醫(yī)工作者應(yīng)對(duì)這些方面進(jìn)行更詳細(xì)、更深入的研究，可提供有效的控制、預(yù)防、治療此疾病的依據(jù)和方法。