李燕紅 王敏 徐燕

金標(biāo)法在無償獻血工作中的應(yīng)用分析

李燕紅 王敏 徐燕

我國是乙型肝炎高度流行區(qū),乙肝表面抗原(HBsAg)攜帶者達(dá) 10%,HBsAg陽性是造成血液檢驗不合格的主要原因之一。為減少因 HBsAg陽性導(dǎo)致的血液報廢,金標(biāo)法已被廣泛用于獻血前 HBsAg檢測。雖然金標(biāo)法在準(zhǔn)確度、敏感度上都不及 ELISA法,但 ELISA法操作費時,程序較為復(fù)雜,適宜作確定實驗用。金標(biāo)法檢測 HBsAg具有簡便、快速、無需特殊儀器設(shè)備、易觀察結(jié)果等優(yōu)點,適合于無償獻血者現(xiàn)場采血前篩查,可有效降低血液報廢率,減少工作人員交叉感染風(fēng)險。但在利用金標(biāo)法檢測 HBsAg過程中,偶爾會出現(xiàn)HBsAg陽性漏檢現(xiàn)象。筆者對漏檢原因進行了分析,現(xiàn)報告如下。

1 加樣量不規(guī)范

試劑說明書規(guī)定加樣量為 50μl,如果血量過少,會造成HBsAg濃度比實際濃度降低,引起漏檢;如果血量過多,會造成血液外溢,且濾膜無法有效阻擋紅細(xì)胞,使紅細(xì)胞和血清一起向檢測線移動,造成檢測背景呈紅色,影響弱陽性結(jié)果判讀。

2 觀察時間過短

采血車上空間相對狹小,人員較為集中,讓大批量獻血者等待 20～30min后再觀察結(jié)果有一定困難,往往等不到規(guī)定的反應(yīng)時間就報告結(jié)果,造成弱陽性標(biāo)本漏檢。

3 溫度、濕度等環(huán)境因素

溫度、濕度過高或過低,都會影響抗原抗體反應(yīng),也可影響血清在濾膜上的層析速度,進而影響試驗結(jié)果。

4 金標(biāo)試劑本身的局限性

金標(biāo)法試劑的靈敏度不及 ELISA法,會造成部分弱陽性標(biāo)本的漏檢,高劑量的陽性標(biāo)本可能存在后帶現(xiàn)象;少數(shù)標(biāo)本可能存在乙肝病毒亞型變異而造成漏檢。另外試劑保存不當(dāng)、受潮,也可導(dǎo)致陽性標(biāo)本的漏檢。

為了揚長避短,更好的應(yīng)用金標(biāo)法,盡量減少金標(biāo)法在應(yīng)用中出現(xiàn)的差錯,筆者認(rèn)為要注意以下幾點:①建立標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP),工作人員必須學(xué)習(xí)、掌握;②選購靈敏度高、特異性好的優(yōu)質(zhì)試劑,并按規(guī)定條件保存、使用;③嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,加樣量要準(zhǔn)確,耐心做好獻血員工作,保證有足夠的反應(yīng)時間;控制環(huán)境條件,盡量保持適宜的溫度、濕度;打開后未用完的試紙條,要密封保存,以防受潮;④嚴(yán)格按操作說明書進行檢測步驟,不能前后顛倒順序,或者多加、少加某一試劑;⑤要保證一人一個加樣管,不能一管多用,否則易造成假陽性;⑥對有些檢測結(jié)果不清楚的,似陰非陰,似陽非陽,一定要重新做,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性;⑦血液標(biāo)本送到血站檢驗科使用ELISA試劑檢測后,如果發(fā)現(xiàn)有漏檢標(biāo)本,應(yīng)分析查找原因,有針對性的采取措施,減少陽性標(biāo)本的漏檢,節(jié)約寶貴的血液資源。

金標(biāo)法由于受實驗條件及方法學(xué)的限制,不能夠完全取代ELISA法。獻血后的血液標(biāo)本,應(yīng)按有關(guān)規(guī)定,送回站內(nèi)使用ELISA法做初檢、復(fù)檢兩次檢測,以保證檢驗質(zhì)量,保證臨床用血安全。

454000河南省焦作市中心血站