于秀艷，朱 華，高海燕

（吉林省腫瘤醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130012）

血細(xì)胞分析儀假性血小板減少原因分析及處理

于秀艷，朱 華，高海燕

（吉林省腫瘤醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130012）

血細(xì)胞分析儀因其快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好等特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用，但其中血小板計(jì)數(shù)假性減少時(shí)有發(fā)生。為探討假性血小板減少的影響因素，我們采用LH750全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對(duì)血小板計(jì)數(shù)值異常偏低的患者進(jìn)行血小板手工計(jì)數(shù)，血涂片觀察血小板分布情況等方法進(jìn)行復(fù)檢。發(fā)現(xiàn)假性血小板減少203例標(biāo)本，現(xiàn)將結(jié)果分析報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料自2009年11月－2010年11月間吉林省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科住院及門(mén)診患者血小板計(jì)數(shù)減少共30400例，其中假性血小板減少203例。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材美國(guó)貝克曼-庫(kù)爾特LH750五分類血細(xì)胞分析儀，所用溶血?jiǎng)?、稀釋液及清洗液均為貝克曼公司生產(chǎn)，全血質(zhì)控品由貝克曼公司提供，日本奧林巴斯顯微鏡，BD公司EDTA-K2真空抗凝管，血小板草酸銨稀釋液。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法對(duì)血小板異常減少的患者（如血小板數(shù)量偏低、直方圖及散點(diǎn)圖出現(xiàn)異常、儀器相關(guān)的報(bào)警提示），依據(jù)全國(guó)血液學(xué)的復(fù)檢規(guī)則，對(duì)血小板數(shù)量、形態(tài)以及分布進(jìn)行鏡檢、并計(jì)數(shù)3次取均值；具體操作嚴(yán)格按照衛(wèi)生部第三版《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》草酸銨法血小板鏡檢要求進(jìn)行。

2 結(jié)果

假性血小板減少的203例標(biāo)本經(jīng)瑞氏染色后，鏡下觀察血小板的數(shù)量、分布及形態(tài)特點(diǎn)，其中51例標(biāo)本血小板形態(tài)及分布未見(jiàn)異常。86例血小板大小不等聚集團(tuán)塊。44例“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”。22例巨大血小板體積。

3 討論

乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）與血液中Ca2＋形成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，從而抑制血液凝固，EDTA抗凝劑因其不影響血細(xì)胞形態(tài)，并且能夠抑制血小板的聚集。國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)將其認(rèn)定為血細(xì)胞分析的抗凝劑得到廣泛應(yīng)用，但Onder等學(xué)者早在1980年就報(bào)道了EDTA可以導(dǎo)致血小板聚集而致假性血小板減少的病例。目前病理機(jī)制仍未明確，可能的原因是血小板表面存在某種隱匿性抗原［1］，與EDTA鹽作為抗凝劑時(shí)免疫介導(dǎo)的冷抗血小板自身抗體反應(yīng)所致。

假性血小板減少的203例標(biāo)本中，61例標(biāo)本涂片見(jiàn)血小板形態(tài)及分布未見(jiàn)異常，多因采血時(shí)進(jìn)針部位組織損傷、組織凝血因子進(jìn)入血標(biāo)本中產(chǎn)生凝塊，采血后未充分混勻，采血量過(guò)多抗凝劑相對(duì)不足，造成血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板假性減少，抗凝靜脈血標(biāo)本中的EDTA-K2一定時(shí)間內(nèi)隨著標(biāo)本放置時(shí)間延長(zhǎng)可使離體后聚集的血小板逐漸離散，標(biāo)本室溫放置30min充分混勻后進(jìn)行血細(xì)胞分析可避免血小板假性減少的發(fā)生。對(duì)于采血不當(dāng)引起的假性血小板減少，應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)前的質(zhì)量控制讓采血者了解標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)及標(biāo)準(zhǔn)操作程序，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。96例標(biāo)本涂片見(jiàn)血小板呈大小不等聚集團(tuán)塊，多見(jiàn)于腫瘤患者、自身免疫病、肝病、高脂血癥［2］等，當(dāng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)利用電阻抗原理，測(cè)定血小板的體積范圍在2－30fl，當(dāng)被測(cè)血小板體積超過(guò)30fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀將這些凝集團(tuán)塊當(dāng)作白細(xì)胞或小紅細(xì)胞；當(dāng)血小板體積低于2fl時(shí)，儀器默認(rèn)為噪音不計(jì)數(shù)，這樣血小板計(jì)數(shù)結(jié)果將假性減少，白細(xì)胞數(shù)量有所增加；庫(kù)爾特LH750血細(xì)胞分析儀的散點(diǎn)圖、直方圖異常，在血小板區(qū)細(xì)胞分布密度向右延伸，提示有血小板凝集。工作中應(yīng)將這類標(biāo)本草酸銨法血小板計(jì)數(shù)再報(bào)告。24例標(biāo)本涂片見(jiàn)“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”。血小板黏附、圍繞于中性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞，這是由于EDTA依賴的冷抗血小板自身抗體與血小板表面的膜糖蛋白的Ⅱb／Ⅲa作用，自身抗體Fc段同時(shí)與淋巴細(xì)胞或單核細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體結(jié)合出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象。這種現(xiàn)象的血小板會(huì)被儀器誤當(dāng)做白細(xì)胞，造成血小板假性減少［3］，應(yīng)對(duì)這類標(biāo)本手工復(fù)檢。魯家才曾報(bào)道，氟化鈉可以抑制EDTA依賴的血小板聚集，在臨床上可以用于此類患者的檢測(cè)［4］。22例標(biāo)本涂片見(jiàn)巨大血小板體積，多見(jiàn)于巨核細(xì)胞白血病和脾切除術(shù)后患者。LH750五分類血細(xì)胞分析儀將這樣的血小板誤認(rèn)為白細(xì)胞，出現(xiàn)血小板減少的假象。

綜上所述，血液分析儀血小板計(jì)數(shù)應(yīng)將血小板計(jì)數(shù)范圍、儀器警示、直方圖及散點(diǎn)圖的分布結(jié)合起來(lái)進(jìn)行具體分析，血小板聚集及時(shí)通知臨床重新采血。當(dāng)有潛在干擾因素如黃疸、脂血出現(xiàn)時(shí)，須手工顯微鏡計(jì)數(shù)復(fù)查，綜合判斷，避免影響臨床診斷及治療。

［1］Yamaguchi M，Mayumi M，Kasuya T.A patient with EDTA dependent pseudo thrombocytopenia who underwent clipping surgery for a ruptured aneurysm［J］.Hematol，1998，68（2）：93.

［2］鐘素萍，馬粵健.Svsmex KX-21型血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的影響因素的探討［J］.海南醫(yī)學(xué)，2007，18（8）：132.

［3］周小棉，鄒 曉.假性血小板減少癥研究進(jìn)展［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2007，30（9）：1065.

［4］魯家才.兩種藥物對(duì)EDTA依賴性血小板聚集的抑制作用［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2004，22（3）：198.

1007－4287（2012）02－0337－02

2011－01－04）