魏 娜，常萬松，薛迪中，沈學飛

糖尿病腎病 (diabetic nephropathy，DN)是糖尿病常見的并發(fā)癥，臨床特征為蛋白尿、漸進性腎功能損害、高血壓、水腫，晚期出現(xiàn)腎衰竭，嚴重影響糖尿病患者的生活質量，是糖尿病患者的主要死亡原因之一。越來越多的研究表明，在DN諸多發(fā)病機制中，氧化應激是重要的共同機制［1－2］。血脂康膠囊作為一種天然他汀類調脂藥，具有調節(jié)血脂、降低尿蛋白排泄率、改善內皮細胞功能等多種作用［3］。本研究旨在觀察血脂康對早期DN患者氧化應激的影響，探討血脂康在DN治療中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年10月—2011年6月在本院住院及?？崎T診長期隨訪的早期DN(DN 3期)患者56例，均符合2000年世界衛(wèi)生組織 (WHO)制訂的糖尿病診斷標準，男24例，女32例;年齡41～68歲，平均50.6歲;糖尿病病程4.5～30.0年，平均11.8年;尿清蛋白排泄率 (UAER)介于30～300 mg/d;排除:酮癥酸中毒、心腦血管疾病、嚴重肝腎疾病、各種急慢性感染以及服用影響尿蛋白排泄藥物者;無風濕、類風濕關節(jié)炎病史，未使用各種止痛劑、類固醇類藥物、他汀類降脂藥、血管緊張素轉換酶抑制劑和血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑。所有入選者糖化血紅蛋白 (HbA1c) ＜9.0%，空腹血糖 (FPG) ＜10.0 mmol/L，肌酐 (Cr) ＜105.0μmol/L，尿素氮 (BUN) ＜7.1 mmol/L。

根據UAER水平，把患者分為:UAER＜100、100～150、151～200、201～250、251～300 mg/d 5檔，然后將每檔內的患者隨機分配到血脂康組和安慰劑組中，以避免兩組患者初始UAER相差懸殊。血脂康組28例，安慰劑組28例，兩組患者的性別構成、年齡及糖尿病病程間有可比性 (P＞0.05，見表1)。另選取20例健康體檢者作為正常對照組，其年齡、性別構成與血脂康組和安慰劑組比較差異無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05);而FPG及HbA1c水平則顯著低于血脂康組和安慰劑組(p＜0.05，見表1)。

1.2 方法 血脂康組給予口服血脂康膠囊0.6 g/次，3次/d;安慰劑組口服與血脂康外形相同的含淀粉的膠囊，0.6 g/次，3次/d，均連續(xù)給藥12周。分別于給藥前和治療12周后留取血標本待測。兩組患者均使用胰島素控制空腹血糖于正常范圍，在干預治療期間避免同時服用具有抗氧化應激作用的藥物，如維生素E、維生素C、β胡蘿卜素、谷胱甘肽等。

1.3 觀察指標 采用羥胺法檢測3組受試者血超氧化物歧化酶 (SOD)，用硫代巴比妥酸比色法檢測丙二醛 (MDA)，試劑盒購自南京建成生物研究所;三酰甘油 (TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇 (LDL－C)、極低密度脂蛋白膽固醇 (VLDL－C)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL－C)均采用全自動生化儀測定。研究開始及結束時分別檢測各組UAER。測定方法:留取當日晨7點至次日晨7點的24 h尿液，用二甲苯作為防腐劑。測量24 h尿容積，混勻后取標本用放射免疫法檢測尿微量清蛋白，計算出UAER。囑患者在留尿的前24 h和留尿過程中不進食高蛋白飲食，不做劇烈運動。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計檢驗。計量資料以表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用t檢驗。UAER呈偏態(tài)分布，取自然對數(shù)后符合正態(tài)分布。以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 治療前后血脂水平的變化 治療前，血脂康組及安慰劑組早期DN患者血脂 (包括TC、TG、LDL－C和VLDL－C)均顯著高于正常對照組，而HDL－C水平則顯著低于正常對照組 (p＜0.05)。血脂康組治療12周后，血清TC、TG、LDLC和VLDL－C水平較本組治療前及安慰劑組治療后顯著降低(p＜0.05)，但仍顯著高于正常對照組 (p＜0.05);而HDL－C水平則較本組治療前及安慰劑組治療后顯著升高 (p＜0.05)，但仍顯著低于正常對照組 (p＜0.05，見表2)。

表1 3組受試者一般資料比較Table 1 Comparison of general information among three groups

表2 3組受試者治療前后血脂水平比較 (，mmol/L)Table 2 Comparison of blood lipid levels among three groups before and after the treatment

表2 3組受試者治療前后血脂水平比較 (，mmol/L)Table 2 Comparison of blood lipid levels among three groups before and after the treatment

注:與正常對照組比較，*p＜0.05;與安慰劑組比較，△p＜0.05;與本組治療前比較，▲p＜0.05;TG=三酰甘油，TC=總膽固醇，HDL－C=高密度脂蛋白膽固醇，LDL－C=低密度脂蛋白膽固醇，VLDL－C=極低密度脂蛋白膽固醇

治療后血脂康組 28 3.86±0.71* 2.15±0.58＊△▲ 7.35±1.67* 4.33±1.38＊△▲ 1.25±0.49* 1.38±0.41＊△▲ 3.89±0.55* 2.32±0.47＊△▲ 2.42±0.53* 1.54±0.43組別 例數(shù) TG治療前 治療后TC治療前 治療后HDL－C治療前 治療后LDL－C治療前 治療后VLDL－C治療前＊△▲安慰劑組 28 3.73±0.64* 3.86±0.82* 6.83±1.46* 6.76±1.27* 1.17±0.36* 1.18±0.35* 3.71±0.63* 3.87±0.51* 2.34±0.46* 2.28±0.51*正常對照組 20 1.87±0.68 － 3.79±1.35 － 1.97±0.42 － 1.78±0.41 － 1.04±0.29 －F 值8 0.027 0.032 2.47 2.95 2.28 4.59 3.14 2.25 5.13 4.42 4.27 3.09 P值 0.021 0.036 0.042 0.017 0.034 0.041 0.014 0.01

2.2 治療前后血清SOD及MDA的變化 與正常對照組比較，治療前血脂康組和安慰劑組早期DN患者血清SOD水平顯著下降，而MDA水平則顯著上升 (p＜0.05)。血脂康組患者治療12周后，其血清SOD水平顯著升高，而MDA水平則顯著下降，與本組治療前及安慰劑組治療后比較差異均有統(tǒng)計學意義 (p＜0.05)。而安慰劑組患者治療前后血清SOD及MDA比較，差異均無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05，見表3)。

2.3 治療前后UAER變化 治療前血脂康組和安慰劑組患者UAER分別為 (157.5±28.6)ng/d和 (165.9±24.1)ng/d，二者比較差異無統(tǒng)計學意義 (t=1.09，P＞0.05);治療12周后，血脂康組和安慰劑組患者UAER分別為 (110.0±21.5)ng/d和 (155.7±23.7)mg/d，二者比較差異有統(tǒng)計學意義(t=2.31，P=0.039);且血脂康組治療后UAER亦顯著低于本組治療前 (p＜0.05)。

表3 3組受試者治療前后血清SOD及MDA水平比較 Table 3 Comparison of serum SOD and MDA levels among the three groups before and after treatment

表3 3組受試者治療前后血清SOD及MDA水平比較 Table 3 Comparison of serum SOD and MDA levels among the three groups before and after treatment

注:*與正常對照組比較，p＜0.05;△與安慰劑組比較，p＜0.05;與本組治療前比較，▲p＜0.05;SOD=血超氧化物歧化酶，MDA=丙二醛

組別 例數(shù) SOD(U/ml)治療前 治療后血脂康組 28 91.4±17.5*98.1±18.9＊△▲ 8.73±0.47* 5.68±0.39治療后MDA(nmol/L)治療前＊△▲安慰劑組 28 89.6±13.4*88.7±16.3* 8.36±0.38*8.26±0.44*正常對照組 20 110.2±21.8 － 4.13±0.72 －F 值0.031 0.047 0.016 0.023 3.72 3.96 5.84 4.26 P值

3 討論

DN是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥之一，其確切的發(fā)病機制尚未完全闡明。近年來，氧化應激在DN發(fā)病機制中的作用日益引起人們的關注［4］。氧化應激是指活性氧簇 (ROS)或活性氮簇產生增多和 (或)清除減少，導致ROS在體內蓄積而引起的分子、細胞和機體的損傷。研究顯示，高糖環(huán)境可通過晚期糖基化終末產物 (AGEs)形成、葡萄糖自身氧化、多元醇通路 (PP)的活性增高、蛋白激酶C(PKC)活化等機制，引起體內ROS產生增加［5］。ROS作為細胞內信號分子，介導了多種信號轉導通路、轉錄因子的激活，參與了糖尿病腎組織損害的發(fā)生、發(fā)展。Aksun等［6］指出 ROS可通過一氧化氮(NO)參與腎小球高灌注和高濾過;Susztak等［7］研究表明，高糖通過ROS啟動足細胞凋亡，誘導其從基底膜上脫落，使腎小球內足細胞數(shù)目減少。由于ROS能迅速與周圍物質發(fā)生反應，其t1/2短暫，難以直接檢測其水平。但ROS與DNA、脂質、蛋白質反應后生成的產物可作為檢測氧化應激的指標。本研究結果顯示，早期DN患者治療前血清MDA水平較健康者顯著升高，而血清SOD水平則顯著下降，反映DN患者體內脂質過氧化程度增高和機體清除自由基的能力下降，與國內外研究一致。

高脂血癥是2型糖尿病患者代謝紊亂的常見癥狀，也是促進DN進展的重要因素。血脂異常時，氧化應激使脂蛋白被氧化修飾，特別是低密度脂蛋白 (LDL)在體內被氧化修飾形成氧化型脂蛋白 (OX－LDL)，OX－LDL具有細胞毒性作用，可以直接損傷內皮細胞本身［8］，還可使血管內皮產生的超氧化物陰離子增加，細胞外NO的滅活增加［9］。最近研究表明OX－LDL可以顯著抑制內皮細胞、巨噬細胞一氧化氮合酶(NOS)基因表達，從而抑制NO合成，增加活性氧的產生［10］。因此積極調脂治療，減少過氧化脂質的產生，可能對減輕糖尿病內皮細胞損傷、減緩微血管并發(fā)癥的發(fā)生有積極意義。

血脂康是由中藥紅曲精煉而成的一種調脂藥，其有效成分是HMG－CoA還原酶抑制劑，包含以洛伐他汀為主的13種天然他汀，同時含有多種不飽和脂肪酸、必需氨基酸、生物堿以及黃酮類物質。本研究結果顯示，早期DN患者存在血脂紊亂，血脂康組患者在連續(xù)治療12周后血清TC、TG、LDL－C水平較治療前顯著降低，表明血脂康具有良好的降脂作用。研究顯示，血脂康組治療后血清SOD水平顯著上升、MDA水平顯著下降，提示血脂康具有清除自由基、增加SOD活性、降低脂質過氧化物作用。同時血脂康組治療后UAER顯著降低，這可能與血脂康調節(jié)血脂，減少LDL水平，使氧化應激的脂質底物減少，OX－LDL的產生相應減少，從而減輕對內皮細胞的損傷并抑制活性氧的產生有關。此外，血脂康含有的多種他汀類物質、生物堿以及黃酮類物質，對改善氧化應激也有促進作用。

綜上所述，早期DN患者體內存在氧化－抗氧化平衡失調所致的氧化應激。氧化應激可通過損傷血管內皮細胞，在DN的發(fā)病過程中起一定的作用。血脂康能夠降低早期DN患者血中TC、TG和LDL－C水平，并顯著降低MDA水平，增加SOD活性，降低UAER，對早期DN的治療有積極意義。

1 Xu M，Dai DZ，Dai Y，et al.Normalizing NADPH oxidase contributes to attenuating diabetic nephropathy by the dual endothelin receptor antagonist CPU0213 in rats［J］.Am J Nephrol，2009，29(3):252 －256.

2 Haidara MA，Mikhailidis DP，Rateb MA，et al.Evaluation of the effect of oxidative stress and vitamin E supplementation on renal function in rats with streptozotocin－induced Type 1 diabetes［J］.J Diabetes Complications，2009，23(2):130－136.

3 丁俊蓉，周益?zhèn)ィS華強.血脂康對2型糖尿病腎病血脂和微量白蛋白的影響［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2008，17(10):1461－1462.

4 Browlee M.The pathobiology of diabetic complications，a unifying mechanism［J］.Diabetes，2005，54(6):1615 －1625.

5 Brownlee M.Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications［J］.Nature，2001，414(6865):813－820.

6 Aksun AS，Ozmen B，Ozmen D，et al.Serum and urinary nitric oxide in type 2 diabetes with or without microalbuminuria:relation to glomerular hyperfihration ［J］.J Diabetes Complications，2003，17(6):343－348.

7 Susztak K，Raft AC，Schiffer M，et al.Glucose－induced reactive oxygen species cause apoptosis of podocytes and podocyte depletion at the onset of diabetic nephropathy［J］.Diabetes，2006，55(1):225 －233.

8 Hadi HA，Carr CS，Suwaidi JAI.Endothelial dysfunction:cardiovascular risk factors，therapy，and outcome ［J］.Vasc Health Risk Manag，2005，1:183－198.

9 Naseem KM.The role of nitric oxide in cardiovascular diseases［J］.Mol Aspects Med，2005，26:33－65.

10 Jiang Y，Zhang J，Xiong J，et al.Ligands of peroxisome proliferatoractivated receptor inhibit homocysteine－induced DNA methylation of inducible nitric oxide synthase gene［J］.Acta Biochim Biophys Sin(Shanghai)，2007，39:366－376.