張 梅，張雅婧，武青青

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院 檢驗科，陜西 延安 716000)

目前，大多數(shù)醫(yī)院都采用血液分析儀來測定血小板。這些儀器因為操作簡單、測定快捷已成為臨床實驗室最常用的分析儀器之一。血液分析儀的普及，很大程度上減輕了工作人員的勞動強度，提高了工作效率和實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。但即便是最先進的分析儀器，當(dāng)其出現(xiàn)血小板計數(shù)值偏高或偏低以及其他報警信號時，仍需檢驗人員加以準(zhǔn)確判斷、綜合分析后發(fā)放報告單。血小板由于體積小，特別容易發(fā)生粘附、聚集和變性破壞，所以在計數(shù)時最易受干擾，經(jīng)常難以準(zhǔn)確計數(shù)。為了全面了解和研究血液分析儀與手工計數(shù)血小板的一致性，本文就延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科使用的ADVIA2120、XS－800i五分類血液分析儀進行對比，以便及時、準(zhǔn)確的為臨床作出輔助參考。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

SysmexXS－800i五分類血液分析儀(日本sysmex公司)，SiemensADVIA2120五分類血液分析儀(德國西門子公司)，MDI－9702多功能超高倍顯微儀和改良牛鮑血細胞計數(shù)板。儀器所用試劑均為相應(yīng)公司提供的配套試劑，手工法所用試劑為WHO推薦的草酸銨稀釋液，該稀釋液按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版要求嚴格配制。

1.2 標(biāo)本采集

2010－10～2011－01門診及住院患者128例，采用抗凝真空管，嚴格按照要求(抗凝劑與血液比例嚴格控制)采集肘靜脈全血2 ml，血流通暢，無凝塊和溶血。

1.3 方法

1.3.1 質(zhì)量控制 兩臺血液分析儀每天用配套的全血質(zhì)控品作室內(nèi)質(zhì)控，各參數(shù)檢測值均在規(guī)定的限值范圍內(nèi);牛鮑計數(shù)板經(jīng)過校正。

1.3.2 檢測方法 128例標(biāo)本分別用ADVIA2120、XS－800i兩臺儀器和手工計數(shù)法檢測血小板數(shù)并記錄。全部測定在2 h內(nèi)測定完畢。注意在儀器測定時將標(biāo)本混勻。手工計數(shù)法是配制好的10 g/L草酸銨稀釋液吸取0.38 ml置于潔凈無污染的小試管中，另取標(biāo)本20 ul加入稀釋液中，并將二者充分混勻。靜置30 min后取混勻的血小板懸液1滴充入計數(shù)池內(nèi)，再靜置10 min，使血小板充分下沉。在高倍鏡下計數(shù)中央大方格的四角和中央共5個中方格內(nèi)的血小板數(shù)量。由一名經(jīng)驗豐富的主管檢驗師手工計數(shù)血小板2次，取平均值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

用Spass13.0軟件包進行數(shù)據(jù)的處理。結(jié)果之間的比較采用變異系數(shù)和相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 儀器法與手工計數(shù)法檢測血小板的平均水平及變異系數(shù)(%)的比較

XS－800i、ADVIA2120和手工計數(shù)法的變異系數(shù)分別為1.07%、1.11%、1.02%?？梢钥闯?XS－800i的變異系數(shù)與ADVIA2120的相比，前者與手工計數(shù)法的變異系數(shù)接近，說明二者的同質(zhì)性較好。同時，XS－800i的靠近手工計數(shù)法的，說明在檢測血小板時，XS－800i的準(zhǔn)確性高于ADVIA2120，更接近手工計數(shù)。用ADVIA2120檢測血小板時，檢測出的數(shù)值會比實際的數(shù)值高。

表1 儀器法與手工計數(shù)法檢測血小板的平均水平及變異系數(shù)(%)的比較

2.2 兩臺血液分析儀與手工計數(shù)法的相關(guān)性分析

XS－800i與手工計數(shù)法的相關(guān)性實驗結(jié)果見圖1，相關(guān)系數(shù) r=0.963，P＜0.001，兩者的回歸方程為y=14.274+0.911x(x為 XS－800i，y為手工計數(shù)法。從相關(guān)系數(shù)看，XS－800i與手工計數(shù)法有較好的相關(guān)性。

圖1 XS－800i與手工計數(shù)法的相關(guān)性分析

圖2 ADVIA2120與手工計數(shù)法的相關(guān)性分析

ADVIA2120與手工計數(shù)法的相關(guān)性實驗結(jié)果見圖2，相關(guān)系數(shù) r=0.953，P＜0.001，兩者的回歸方程為 y=21.868+0.758x(x為 ADVIA2120，y為手工計數(shù)法)。從回歸系數(shù)可以看出:ADVIA2120與手工法檢測血小板比XS－800i與手工法檢測血小板差異要大。

3 討論

XS－800i為全自動血液分析儀，是sysmex最新研發(fā)的緊湊型五分類血液分析儀，它采用半導(dǎo)體激光流式細胞術(shù)、核酸染色技術(shù)和流體力學(xué)聚焦原理對血液細胞進行分析。無論靜脈血模式還是末梢血模式都只需要20ul微量血，從而滿足兒童、腫瘤化療病人等采血困難病人的特殊采血要求。XS－800i是采用鞘流電阻原理來計數(shù)血小板的。當(dāng)血液中存在大PLT或細胞碎片時，儀器利用散射光和側(cè)向熒光參數(shù)進行PLT計數(shù)。同時儀器配備的鞘流機制使PLT計數(shù)有著優(yōu)越的準(zhǔn)確性和重復(fù)性[1]。在臨床上，當(dāng)疾病導(dǎo)致血小板破壞增多，血小板減少到一定程度時，就可能引起血小板形態(tài)及功能發(fā)生反應(yīng)性變化，如出現(xiàn)不同比例的大血小板，而這些大血小板可被誤認為是紅、白細胞而不被血液分析儀所識別，從而造成血小板計數(shù)假性降低[2]。另外，當(dāng)測定靜脈血標(biāo)本時，操作者的混勻時間、方式和力度的差異，也在一定程度上影響PLT的檢測結(jié)果。實驗結(jié)果顯示:XS－800i無論是變異系數(shù)還是與手工計數(shù)的相關(guān)性分析，都說明XS－800i檢測血小板結(jié)果比較準(zhǔn)確，與手工檢測的結(jié)果接近。

ADVIA2120全自動血液分析儀是德國西門子生產(chǎn)推出的。每小時可測120份標(biāo)本，可以滿足臨床不同標(biāo)本檢測的需求并節(jié)約試劑成本。ADVIA2120有手動和自動兩種模式，應(yīng)用專用的WBC/BASO和WBCDIFF檢測通道，采用二維光散射分析法對PLT進行檢測。一維決定體積(低角度散射)，一維決定密度(高角度散射)，能準(zhǔn)確區(qū)分小紅細胞、紅細胞鬼影、大血小板、紅細胞碎片和雜質(zhì)等，可測量體積大至60 fl的血小板[3]。從實驗結(jié)果分析顯示:相比XS－800i而言，ADVIA2120與手工計數(shù)PLT的一致性較差。對于ADVIA2120來說，RBC和PLT的檢測在同一通道，所以會有一些紅細胞碎片以及其他大小類似于血小板的污染顆粒會被誤認為血小板而計數(shù)在內(nèi)，進而造成計數(shù)結(jié)果偏高;而一些體積過小的血小板無法被機器識別造成漏檢[4]。所以，在與手工計數(shù)法作相關(guān)性分析時，相關(guān)系數(shù)r=0.953，同時由回歸方程可以得到，ADVIA2120與手工計數(shù)法的相關(guān)性不如XS－800i理想，所測的結(jié)果比實際的血小板數(shù)值高。在儀器計數(shù)結(jié)果出現(xiàn)偏差的時候，均應(yīng)進行手工復(fù)檢，盡可能的為臨床提供一個反應(yīng)病人真實情況的檢測結(jié)果，以確保臨床正確的診療方向。

綜上所述，雖然XS－800i和ADVIA2120兩臺儀器的主要性能都很好，但在血小板計數(shù)方面，XS－800i較ADVIA2120與手工計數(shù)法有著較好的一致性，計數(shù)結(jié)果較為準(zhǔn)確。然而在自動化分析儀飛速發(fā)展的今天，盡管它快速簡便、精密度高、重復(fù)性好，但這僅是種過篩手段，并不能完全取代手工法[5]。當(dāng)PLT計數(shù)結(jié)果出現(xiàn)異常時，還需進行手工復(fù)檢，從而得出準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果。

[1]焦瑞寶，唐吉斌，曹春鸞.兩種血細胞分析儀與鏡檢法血小板計數(shù)的比較[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2009;18(6):1526－1527.

[2]鞏惠蕓，顧曉菁.相差顯微鏡血小板計數(shù)法對血細胞分析儀測定“血小板計數(shù)減少”結(jié)果的復(fù)核作用[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2004;19(6):524－527.

[3]陳梅，黃麗云，方偉禎等.XE－2100全自動血細胞分析儀兩種血細胞計數(shù)方法與鏡檢法計數(shù)血小板的比較[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，7(3):99－100.

[4]杜明，夏和鳳，紀桂香.五分類血細胞分析儀與手工鏡檢測定結(jié)果比較[J].中國誤診學(xué)雜志.2008，12(8):2853－2854.

[5]秦海秋，郭輝.分析儀法測定血小板的影響因素分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2007;22(8):123－124.