喻禮懷 王夢(mèng)芝 萬(wàn)小穎 王劍飛 王洪榮

(揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州 225009)

多不飽和脂肪酸(poly unsaturated fatty acids，PUFA)具有許多重要的生理功能，如促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、調(diào)節(jié)人體的脂質(zhì)代謝、預(yù)防心血管疾病等[1]，而n-3系列的PUFA與人類(lèi)的健康免疫密切相關(guān)[2]，富含PUFA的產(chǎn)品已逐漸為消費(fèi)者所關(guān)注。而鑒于n-6和n-3 PUFA在機(jī)體生理代謝與免疫等功能中的活性作用，其之間的合理比例及含有其合理比例的動(dòng)物保健產(chǎn)品的研發(fā)成了近年來(lái)研究者關(guān)注的熱點(diǎn)之一。蘇曉鷗[3]研究表明，提高飼糧中的脂肪含量可促進(jìn)畜禽增重，提高飼料報(bào)酬。當(dāng)畜禽飼糧中含較多的不飽和脂肪酸時(shí)，體脂肪中的不飽和脂肪酸含量也增加，沉積脂肪的組成更類(lèi)似于飼糧脂肪的構(gòu)成，更符合保健食品的要求。Shang等[4]報(bào)道蛋雞飼糧中添加共軛亞油酸與不添加組相比，蛋黃、血清和肝臟中PUFA的含量顯著提高。在生長(zhǎng)雞飼糧中添加富含不飽和脂肪酸的橄欖油、花生油及亞麻油，可顯著降低其腹部脂肪和血清膽固醇、甘油三酯的含量，降低各腿肌和胸肌中飽和脂肪酸與單不飽和脂肪酸的比例，增加 PUFA 的含量[5]。Gatlin 等[6]研究表明，隨著飼糧中PUFA含量的降低，肌肉中PUFA的含量線(xiàn)性降低。齊珂珂[7]研究表明，飼糧 n-6/n-3 PUFA比例降低，n-3 PUFA中α-亞麻酸(α-linolenic acid，ALA)、二十碳五烯酸(eicosapentaenoic，EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic，DHA)顯著增加。對(duì)畜產(chǎn)品脂肪酸組成的研究表明，家禽肌肉脂肪酸中不飽和脂肪酸的比例相對(duì)較高[8]，而且家禽機(jī)體脂質(zhì)組成也是比較容易調(diào)控的[9]。又鑒于禽肉為人們所普遍消費(fèi)，家禽肌肉脂肪酸組成的調(diào)控逐漸成為人們獲取健康脂肪酸產(chǎn)品的研究熱點(diǎn)之一[10-13]。但迄今為止，PUFA結(jié)構(gòu)對(duì)家禽肌肉脂肪酸組成的影響尚不明確，為此，本試驗(yàn)在飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、PUFA 1∶1∶1的前提下，旨在通過(guò)在飼糧中添加不同比例的n-6和n-3 PUFA，研究飼糧n-6/n-3 PUFA比例對(duì)揚(yáng)州鵝肌肉脂肪酸組成的影響，以探求一個(gè)合理的飼糧PUFA結(jié)構(gòu)，為生產(chǎn)健康的畜禽產(chǎn)品提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

從江蘇高郵揚(yáng)州鵝養(yǎng)殖基地選擇160只同批出雛、體質(zhì)健壯、體重接近、飼養(yǎng)管理一致的21日齡揚(yáng)州小鵝，隨機(jī)分成4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只鵝(公母各占1/2)。用花生油、葵花籽油、亞麻油、棕櫚酸和油酸作為飼糧PUFA的來(lái)源，在飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、PUFA含量1∶1∶1的前提下，調(diào)節(jié)飼糧 n-6/n-3 PUFA 的比例，配制4種亞油酸(linolenic acid，LA)和α-亞麻酸的比例分別為 12∶1、9∶1、6∶1 和 3∶1 的飼糧，并將 4種飼糧隨機(jī)分配給4組仔鵝。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table1 Composition and nutrient levels of experimental diets %

試驗(yàn)鵝從基礎(chǔ)飼糧經(jīng)7 d過(guò)渡(22～24日齡，替換1/3基礎(chǔ)飼糧;25～26日齡，替換1/2基礎(chǔ)飼糧;27～28日齡，替換2/3基礎(chǔ)飼糧)為試驗(yàn)飼糧，29日齡開(kāi)始正式試驗(yàn)。4組試驗(yàn)鵝處于同一舍中，以重復(fù)為單位分隔于相同的小圈中，供暖、飼養(yǎng)管理皆一致。為了盡量減少試驗(yàn)的影響因素，試驗(yàn)期間沒(méi)有安排免疫接種。

1.2 采樣處理

在試驗(yàn)鵝飼養(yǎng)至70日齡時(shí)，每組分別隨機(jī)選取8只鵝，空腹24 h后取其胸肌和腿肌，真空干燥48 h，研磨成粉狀，用于脂肪酸組成的測(cè)定。

1.3 樣品測(cè)定方法

樣品的處理:稱(chēng)取0.5 g干樣，置于15 mL的指形管中，加入3 mL等體積混合的苯和石油醚的混合溶液，混勻靜置24 h;加入3 mL 0.5 mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，混合均勻后放到30℃水浴鍋甲酯化20 min，甲酯化后向指形管中加入蒸餾水至13 mL，使溶液分層，取1 mL上清液用氣相色譜儀進(jìn)行分析。

脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品的處理:用1 mL正庚烷稀釋后，取1 μL用氣相色譜儀進(jìn)行分析。

氣相色譜條件:色譜柱為 Alltech，ECONOCAP EC100(FFAP)，30 m ×0.25 mm ×0.25 μm;載氣為氮?dú)?氣體流量為1.0 mL/min，恒流，氮?dú)?0 mL/min，氫氣 35 mL/min，空氣 350 mL/min;氣化室溫度為280℃，分流比50∶1;氫離子火焰檢測(cè)器(FID)溫度為300℃;柱溫的起始溫度為140℃，以5℃/min升溫至230℃，維持10 min;進(jìn)樣量為 1 μL。

脂肪酸組成的計(jì)算:采用峰面積歸一法計(jì)算脂肪酸各組分的相對(duì)含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05、P＜0.01作為差異顯著、極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。用 SPSS 15.0軟件Correlate過(guò)程的Bivarate進(jìn)行變量間的相關(guān)分析，以2-tailed＜0.05、2-tailed＜0.01作為差異顯著、極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧n-6/n-3 PUFA比例對(duì)胸肌脂肪酸組成的影響

由表2可以看出，在胸肌的脂肪酸中，飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例對(duì)亞油酸的含量有顯著影響，其中9∶1組亞油酸的含量顯著高于3∶1組(P＜0.05)，而與其他各組之間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例對(duì)α-亞麻酸的含量也有顯著影響，其中3∶1組α-亞麻酸的含量顯著高于6∶1和9∶1組(P＜0.05)，極顯著高于12∶1組(P ＜0.01)。對(duì)于棕櫚油酸，3∶1組的含量顯著高于 9∶1 和 12∶1 組(P ＜0.05)，而與6∶1 組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。對(duì)于其他脂肪酸，飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例組之間差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 飼糧n-6/n-3 PUFA比例對(duì)腿肌脂肪酸組成的影響

由表3可以看出，在腿肌的脂肪酸中，飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例對(duì)亞油酸的含量有顯著差異影響，其中12∶1和6∶1組亞油酸的含量均顯著高于3∶1組(P ＜0.05)，而與 9∶1組沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例對(duì)α-亞麻酸的含量也有顯著影響，其中3∶1組α-亞麻酸的含量顯著高于6∶1組(P＜0.05)，極顯著高于12∶1 和9∶1 組(P ＜0.01)。對(duì)于油酸，12∶1 組的含量顯著高于 3∶1 組(P ＜0.05)，而與 9∶1 和 6∶1 組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。對(duì)于其他脂肪酸，飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例組之間差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 飼糧與肌肉中亞油酸和α-亞麻酸的相關(guān)性分析

由表4可以看出，飼糧亞油酸含量與胸肌亞油酸含量極顯著相關(guān)(2-tailed＜0.01)，與腿肌亞油酸含量顯著相關(guān)(2-tailed＜0.05)。由表5可以看出，飼糧α-亞麻酸含量與胸肌和腿肌α-亞麻酸含量均極顯著相關(guān)(2-tailed＜0.01)。

3 討論

研究業(yè)已表明，PUFA與體脂肪沉積、機(jī)體免疫，以及心血管疾病都有一定的關(guān)聯(lián)。因此，畜禽產(chǎn)品中脂肪酸合理的組成比例對(duì)機(jī)體的健康有著舉足輕重的意義。另外，脂肪酸組成比例還在一定程度上影響著肉的理化性質(zhì)和風(fēng)味。有研究表明，熱處理后肌肉脂肪酸可分解成揮發(fā)性物質(zhì)[14]，影響肉的風(fēng)味[15];同時(shí)，磷脂中富含不飽和脂肪酸，可自動(dòng)氧化產(chǎn)生肉味[16]，也是形成肉中風(fēng)味物質(zhì)的主要前體物[17-18]。由上述可見(jiàn)，脂肪酸組成的研究對(duì)于健康食品以及風(fēng)味食品的研發(fā)都有一定的意義。因而，脂肪酸組成比例也逐漸成為目前人們更為關(guān)注的熱點(diǎn)之一。

表2 飼糧n-6/n-3 PUFA比例對(duì)胸肌脂肪酸組成的影響Table2 Effects of dietary n-6/n-3 PUFA ratio on fatty acid profiles of breast muscle

表3 飼糧n-6/n-3 PUFA比例對(duì)腿肌脂肪酸組成的影響Table3 Effects of dietary n-6/n-3 PUFA ratio on fatty acid profiles of leg muscle

表4 飼糧亞油酸與肌肉亞油酸的相關(guān)性Table4 The correlation between dietary LA and muscle LA

表5 飼糧α-亞麻酸與肌肉α-亞麻酸的相關(guān)性Table5 The correlation between dietary ALA and muscle ALA

鵝肌肉中脂肪酸種類(lèi)有十幾種，油酸的含量最高，其次是亞油酸、棕櫚酸、硬脂酸、二十二碳四烯酸、α-亞麻酸和棕櫚油酸，這些脂肪酸含量都超過(guò)1%，而且其中大部分是不飽和脂肪酸。前人研究表明，畜禽產(chǎn)品的脂肪酸組成可能受到飼糧脂肪酸組成的影響[4-6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧不同n-6/n-3 PUFA比例組之間胸肌和腿肌中亞油酸和α-亞麻酸的含量有顯著差異。在胸肌中，亞油酸的含量 9∶1 組顯著高于 3∶1 組，而與 6∶1 和12∶1組沒(méi)有顯著差異;α-亞麻酸的含量3∶1組顯著高于9∶1和6∶1組，極顯著高于12∶1組。在腿肌中，亞油酸的含量12∶1 和6∶1 組均顯著高于3∶1 組，而與9∶1組沒(méi)有顯著差異;α-亞麻酸的含量3∶1組顯著高于6∶1 組，極顯著高于12∶1 和9∶1 組。這與飼糧中亞油酸和α-亞麻酸的比例有關(guān)，3∶1組飼糧α-亞麻酸的含量高，其胸肌和腿肌中α-亞麻酸的含量也相應(yīng)高;同樣，12∶1和9∶1組胸肌、腿肌中亞油酸的含量比3∶1組高。對(duì)飼糧脂肪酸與肌肉中相應(yīng)脂肪酸的相關(guān)性分析也表明，飼糧亞油酸、α-亞麻酸的含量與肌肉中亞油酸、α-亞麻酸的含量顯著相關(guān)。這也進(jìn)一步證實(shí)了Rymer等[9]提示的家禽可食部位的α-亞麻酸、EPA含量與飼糧中的相應(yīng)含量有相關(guān)關(guān)系的結(jié)果。同時(shí)，以上結(jié)果也體現(xiàn)了家禽對(duì)PUFA的利用和代謝與其他畜禽不同，如反芻動(dòng)物食入的PUFA可被瘤胃微生物氫化飽和，多以飽和脂肪酸的形式沉積于體脂[19]，而家禽食入的PUFA則可不經(jīng)氫化作用而直接合成體脂，這為生產(chǎn)研發(fā)健康的脂肪酸畜產(chǎn)品提供了依據(jù)。

4 結(jié)論

飼糧PUFA的結(jié)構(gòu)對(duì)肌肉中亞油酸和α-亞麻酸的含量有一定的影響，鵝肌肉中n-6/n-3 PUFA比例隨飼糧中該比例的下降而下降，并以3∶1組最低，但除12∶1組的腿肌n-6/n-3 PUFA比例較高外，其他各組比例均在世界衛(wèi)生組織推薦的適于人體健康的(6∶1)～(10∶1)的比例范圍內(nèi)。

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