康愛梅，周 欣，胡 惠，仇正英

(1.武漢亞洲心臟病醫(yī)院，2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，武漢 430022)

動物醫(yī)學(xué)實驗的質(zhì)量關(guān)系人類健康和安全。尤其在外科手術(shù)動物模型的操作中，實踐中遇到的問題和采取的對策都可能對后期工作起到指導(dǎo)作用。2011年起我院心外科與華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院合作實施10例山羊植入式左心室輔助裝置(LVAD)手術(shù)，實驗過程遵循實驗動物管理法規(guī)和倫理準(zhǔn)則，針對手術(shù)動物的特性，制定了圍手術(shù)期環(huán)境控制和術(shù)后特殊維護的管理措施，有效提升實驗質(zhì)量和效率，減少工作失誤，穩(wěn)定手術(shù)實驗的成功率。

1 動物實驗環(huán)境管理

1.1 動物手術(shù)室規(guī)范化建設(shè)管理

動物手術(shù)實驗室占地面積300 m2。手術(shù)區(qū)實行潔污線管理:區(qū)域劃分明確，嚴格按照“三區(qū)二通道”的原則布局，即手術(shù)區(qū)、準(zhǔn)備區(qū)、輔助區(qū)(更衣室和刷手間)、兩條潔凈走道。內(nèi)走廊為手術(shù)人員、無菌敷料、器械的通道。外走廊，為實驗動物、手術(shù)后器械、敷料的運行通道［1］。重癥監(jiān)護室在手術(shù)區(qū)旁，便于實驗動物轉(zhuǎn)運與監(jiān)護。

由于實驗手術(shù)室利用度低于日常手術(shù)室，備用周期長。為了避免實驗動物術(shù)后感染，對術(shù)前手術(shù)室清潔、消毒和物品管理的要求更為嚴謹、細致:①動物實驗前兩日，手術(shù)室內(nèi)進行濕式清掃，用含氯消毒劑擦拭無影燈、手術(shù)臺及室內(nèi)所有物品。②術(shù)前1日，用臭氧消毒滅菌器對手術(shù)室進行密封式消毒。③手術(shù)當(dāng)日，用循環(huán)風(fēng)紫外線進行空氣消毒。④及時記錄紫外線消毒日期和持續(xù)時間，便于更換到期的紫外線燈管。⑤使用的清潔工具不宜用掉纖維的織物材料制作，拖把是細菌的滋生源和傳播細菌的載體，故不得“三區(qū)”混用。應(yīng)在拖把上做明顯標(biāo)志，在每次使用后，用流動的水反復(fù)沖洗，并用消毒液浸泡30min后懸掛于通風(fēng)干燥處［1］。⑥手術(shù)室的無菌物品、一次性用品及藥品進行分類，把必要與非必要的物品區(qū)分開來，把非必要物品及時退出手術(shù)區(qū)，將必要物品的儲存數(shù)量降到最適當(dāng)程度［2］。手術(shù)室設(shè)備和必要物品做好分類，固定放置的位置并好做標(biāo)記、術(shù)前按數(shù)量進行核查。以便于查缺補漏，避免一次性用品或藥品擠壓過期，也提高設(shè)備利用率降低投入成本。⑦因醫(yī)療垃圾含有大量的病菌和病毒，處理不當(dāng)不僅會給環(huán)境帶來嚴重污染，威脅人類健康［3］。因此嚴格按照醫(yī)療廢棄物的管理，將實驗垃圾分類放置、分類處理。

1.2 動物重癥監(jiān)護室管理

山羊動物重癥監(jiān)護室是術(shù)后裝置運行與觀察的重要實施地點，需要有足夠的空間便于實驗動物的轉(zhuǎn)運與籠欄的放置。重癥監(jiān)護室配備有心電監(jiān)護儀、微量注射泵、ACT監(jiān)測儀、血氣、血糖和血常規(guī)監(jiān)測儀，安裝空調(diào)、監(jiān)控攝像和遠程監(jiān)控系統(tǒng)。

1.3 環(huán)境的調(diào)控管理

溫度、濕度是動物體熱平衡的重要因素之一，過低或過高，不僅會使動物感到不舒適，同時也影響動物的代謝［4］。手術(shù)室和重癥監(jiān)護室均配裝5匹柜機空調(diào)，根據(jù)室內(nèi)溫濕度表調(diào)節(jié)溫濕度，保證溫度維持在12～24℃，濕度維持在40% ～70%。

光照強度和光照周期也可影響動物的生理和行為。監(jiān)護室安裝設(shè)備先進的紅外線攝像系統(tǒng)。術(shù)后看護實驗動物時，白天采用自然光源，晚上利用紅外線攝像，盡量避免強光對動物的照射。工作人員通過攝像系統(tǒng)實時觀察和記錄術(shù)后動物的情況，以保證動物實驗結(jié)果的科學(xué)性、可靠性和可重復(fù)性。

山羊?qū)俜雌c動物，在注意力分散的情況下不能很好的反芻，影響營養(yǎng)吸收與利用，所以醫(yī)護人員和工作者在操作過程中要做到四輕(說話輕、操作輕、關(guān)門輕、走路輕)，人員有序輪替，盡量避免嘈雜及儀器轉(zhuǎn)運時發(fā)出的尖銳金屬音。

2 人員配置管理

左心輔助裝置(LVAD)手術(shù)實驗配備有管理人員3名，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)人員7名，心臟外科手術(shù)人員3名、心臟重癥監(jiān)護醫(yī)護人員4名、體外循環(huán)和麻醉師7名、設(shè)備控制人員1名、檢驗科人員1名。實驗配備管理人員主要負責(zé)實驗的日常工作管理;執(zhí)業(yè)獸醫(yī)人員控制實驗動物的疾病防治、飼養(yǎng)和術(shù)后的護理工作。重癥監(jiān)護人員負責(zé)動物手術(shù)后的監(jiān)護工作。執(zhí)業(yè)獸醫(yī)人員需持有資格證書，其他工作人員需認真學(xué)習(xí)國家和相關(guān)部門頒發(fā)的有關(guān)實驗動物的法規(guī)，如實驗動物管理條例、實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)等［4］。

參與人員應(yīng)提高對動物實驗的重視度，培養(yǎng)良好工作習(xí)慣，完善工作內(nèi)容，協(xié)調(diào)合作，自發(fā)性維護術(shù)中秩序，遵守管理條例與制度，加強討論和交流，提高隊伍專業(yè)素質(zhì)的穩(wěn)定性。

3 實驗動物管理

3.1 飼養(yǎng)管理

實驗選用健康波爾系雜交山羊，術(shù)前做好驅(qū)蟲和環(huán)境熟悉訓(xùn)練工作，適度草場運動，標(biāo)準(zhǔn)日糧飼喂，自由飲水。

術(shù)后山羊采食量會下降，應(yīng)及時通過靜脈補充山羊能量損耗;早期飼喂適口且易于消化的青飼，以增強山羊的食欲。促進其消化道蠕動，降低瘤胃鼓氣的風(fēng)險和腸道阻塞癥狀的發(fā)生以提高消化率;實驗動物飲水來自生活飲用水，符合動物飼喂衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 術(shù)后動物轉(zhuǎn)運監(jiān)護管理

山羊在術(shù)后可以很快恢復(fù)意識，甚至可以自行站立，但術(shù)后山羊體外連接多種監(jiān)護補液導(dǎo)管，儀器連接也需要保護，山羊需要一定的限動措施。我院自主設(shè)計可拆卸組合式動物轉(zhuǎn)運監(jiān)護床(申請國家專利號:201210042605.8)。該飼養(yǎng)床由主體床、側(cè)欄、手搖式升降柄、車輪和輸液架組成。該床制作材質(zhì)光滑，不傷及動物，易于清理和消毒;四周安裝了可折疊圍欄并配有手搖式升降柄，便于適時調(diào)節(jié)圈欄的高度，簡化了動物手術(shù)的轉(zhuǎn)運和監(jiān)護程序、避免實驗動物因手術(shù)后多次搬運造成的痛苦、達到一定的限動目的［5］、保證了動物胸腔引流管的通暢;監(jiān)護飼養(yǎng)床四周均設(shè)有輸液掛鉤，便于輸液使用;動物實驗結(jié)束后，拆卸存放節(jié)省室內(nèi)空間。

4 手術(shù)圍術(shù)期的倫理管理

新的《實驗動物管理條例》出臺后，人們越來越關(guān)注“動物福利”，實驗手術(shù)動物是人類的替難者，應(yīng)該人道地管理和使用實驗動物。根據(jù)動物實驗管理制度和動物實驗福利倫理要求，慎重對待每次動物實驗。實驗前參與人員反復(fù)討論，嚴謹?shù)卦O(shè)計麻醉和手術(shù)方案。術(shù)前實驗動物(山羊)需備皮和禁食12 h，安排專人對動物進行監(jiān)護，根據(jù)山羊的生命體征和血檢結(jié)果及時做好保暖和補液工作。術(shù)中安排有經(jīng)驗的心臟外科專家和專職獸醫(yī)參與麻醉、手術(shù)，減輕實驗動物因術(shù)者對其解剖結(jié)構(gòu)的不熟悉所導(dǎo)致的不必要痛苦，保證動物實驗的成功率。術(shù)后安排專職獸醫(yī)人員和心臟重癥監(jiān)護醫(yī)護人員共同看護實驗動物，幫助動物維護正常的血流動力學(xué)并積極進行止痛、抗感染等處理，以期減輕動物的痛苦。實驗動物死亡后尸體裝入專用尸體袋中并在指定場地進行焚燒。

實驗過程中根據(jù)每次的實驗結(jié)果不斷改良儀器設(shè)備，以保證實驗的順利開展。該項實驗中“人工心臟泵”植入實驗山羊體內(nèi)時，需要在山羊心尖部打孔，心尖部打孔的操作要求極高，如不慎會出現(xiàn)心尖部大出血致動物死亡。為了避免大出血的并發(fā)癥，我們自行研制螺旋式心肌打孔器，術(shù)中打孔器成螺旋式慢慢旋轉(zhuǎn)在心尖部打孔，術(shù)中心肌出血較少，利于動物的術(shù)后恢復(fù)。

5 實驗管理結(jié)果

2011年11月起用于山羊植入式左心輔助裝置手術(shù)10例，其中前3例為預(yù)實驗，實驗過程依照管理措施得以改進。其余7例手術(shù)，左心輔助裝置成功安裝，術(shù)后有3例實驗山羊存活48 h以上。實驗期間，人員協(xié)調(diào)合作，手術(shù)順利進行，動物轉(zhuǎn)運順暢，術(shù)后監(jiān)護數(shù)據(jù)采集與計劃無異，管理措施安全可行。

6 小結(jié)

我國人工心臟研發(fā)剛剛起步，山羊植入式LVAD手術(shù)中遇到的問題和采取的對策對后期工作起到指導(dǎo)作用。在實驗過程中的管理工作還有待進一步提升，總結(jié)每次的實驗手術(shù)過程存在的問題，不斷地完善和改進是每個工作人員該有的態(tài)度，從而提升工作效率，減少工作失誤。

［1］翟青新，黃麗潔，哈惠馨，等.動物潔凈手術(shù)室的維護與管理［J］.實驗動物科學(xué)與管理，2007，24(2):43 －44.

［2］鄧麗，李曉玲，劉美燕，手術(shù)室管理中應(yīng)用“五常法”的探討［J］.實用全科醫(yī)學(xué)，2007，5(6):556.

［3］胡少芬，馬紅寶.醫(yī)療廢棄物管理分析與探討［J］.中華現(xiàn)代醫(yī)院管理雜志，2005，3(4):356－357.

［4］王寧，王蕭，王金林，等，基于動物福利的實驗動物管理［J］.動物醫(yī)學(xué)進展，2010，31(12):148－151.

［5］陶涼.可拆卸式山羊轉(zhuǎn)運和監(jiān)護飼養(yǎng)床.中國國家發(fā)明專利，專利號:201210042605.8 專批準(zhǔn)利時間:2012.2.24.