孟艷平 張生 曹興華

UF1000尿沉渣全自動流式細(xì)胞儀誤差研究

孟艷平 張生 曹興華

目的比對UF-1000尿沉渣全自動流式細(xì)胞儀、尿11A干化學(xué)法、尿顯微鏡鏡檢法三種方法檢測結(jié)果，總結(jié)影響因素。方法留取本院800例住院患者新鮮晨尿，同時(shí)用三種方法檢測。結(jié)果UF-1000尿沉渣全自動流式細(xì)胞儀檢測尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型方面均有誤差。結(jié)論三種方法聯(lián)合應(yīng)用，降低檢驗(yàn)誤差，提高尿液檢驗(yàn)質(zhì)量。

UF-1000尿沉渣全自動流式細(xì)胞儀；尿11A干化學(xué)法；顯微鏡鏡檢法

隨著醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,尿沉渣自動分析技術(shù)逐漸推廣。日本sysmex公司的UF-1000是采用流式細(xì)胞儀的工作原理,將一定量的尿液中各種有形成分用熒光染料染色后,進(jìn)入流式通道,測定激光照射下各種有形成分的前向散射光強(qiáng)度、側(cè)向散射光強(qiáng)度和脈沖幅度、熒光強(qiáng)度和熒光脈沖幅度和細(xì)胞電阻值的大小,由計(jì)算機(jī)根據(jù)特定分析軟件區(qū)別和計(jì)算各種有形成分。該儀器使用起來快速、簡便，具有很高的臨床價(jià)值。但是,任何儀器都有它的局限性。在我們的臨床工作中發(fā)現(xiàn)尿中的真菌、結(jié)晶、細(xì)菌等可能會影響UF-1000尿沉渣全自動流式細(xì)胞儀的檢測結(jié)果。為排除其誤、漏診因素,提高尿沉渣檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。本文就尿檢中使用UF-1000流式細(xì)胞儀、干化學(xué)法、顯微鏡法三種方法做一對比研究。現(xiàn)結(jié)果如下。

1 臨床資料

1.1儀器和試劑 日本sysmex公司UF-1000流式細(xì)胞儀及其原裝試劑，URIT-1500優(yōu)利特干化學(xué)分析儀，優(yōu)利特干化學(xué)試紙，Cχ21FS1光學(xué)顯微鏡。

1.2標(biāo)本來源和方法 收集河南省漯河市中心醫(yī)院患者新鮮中段晨尿800份，混勻后倒10 ml入潔凈玻璃管，先在URIT1500優(yōu)利特干化學(xué)分析儀上進(jìn)行干化學(xué)分析，再在UF-1000流式細(xì)胞儀上進(jìn)行尿沉渣自動分析，最后1500r/min離心5 min后棄去上清液做尿沉渣顯微鏡檢查。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn) UF-1000流式細(xì)胞儀紅細(xì)胞參考范圍為0-25/μl,白細(xì)胞參考范圍為0-25/μl，管型0-3/μl[1]；尿干化學(xué)陽性結(jié)果為異常，陰性結(jié)果為正常；尿沉渣鏡鏡檢紅細(xì)胞正常范圍0-3/HP,白細(xì)胞正常范圍0-5/HP，生理性管型偶見。超出正常范圍的為陽性結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對陽性結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)(P<0.05)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

UF-1000流式細(xì)胞儀紅細(xì)胞陽性例數(shù)126，陽性率15.8%，白細(xì)胞陽性例數(shù)192，陽性率24%，管型陽性率例數(shù)44，陽性率5.5%。干化學(xué)法紅細(xì)胞陽性例數(shù)108，陽性率13.5%，白細(xì)胞陽性例數(shù)163，陽性率20.3%。顯微鏡法紅細(xì)胞陽性例數(shù)94,陽性率11.8%，白細(xì)胞陽性例數(shù)154，陽性率19.2%。

3 結(jié)論

UF-1000流式細(xì)胞儀檢測陽性率偏高，與干化學(xué)法和顯微鏡法進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，(P<0.05)，提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4 討論

4.1紅細(xì)胞誤差原因 UF-1000流式細(xì)胞儀與其他兩種方法比較紅細(xì)胞結(jié)果不符標(biāo)本共26例，其中假陽性24例,假陰性2例.

4.1陽性 尿中有形成分是靠流式細(xì)胞儀的散射光和熒光區(qū)分的。尿液中成分復(fù)雜，其形態(tài)，大小，染色性只要與紅細(xì)胞相似，都可能被儀器誤認(rèn)為紅細(xì)胞。大致可分為以下幾種：①菌尿。尿中含有大量細(xì)菌時(shí)(主要為球菌和鏈球菌)，儀器會將較大細(xì)菌誤認(rèn)為是紅細(xì)胞而出現(xiàn)假陽性[2]。此時(shí)應(yīng)結(jié)合干化學(xué)潛血試驗(yàn)和顯微鏡檢查作出準(zhǔn)確判斷。在此研究中菌尿?qū)е碌募訇栃詷?biāo)本共2例。②尿中含有類酵母菌時(shí)，儀器會將類酵母菌誤認(rèn)為是紅細(xì)胞而做出假陽性結(jié)果[3]。此時(shí)應(yīng)結(jié)合干化學(xué)潛血試驗(yàn)和顯微鏡檢查。特別是插尿管的患者尿中易產(chǎn)生類酵母菌，有時(shí)干化學(xué)潛血陰性，但尿沉渣儀器檢測到的紅細(xì)胞數(shù)量非常多，所謂的紅細(xì)胞大部分都是類酵母菌，對這種患者盡量要做尿顯微鏡檢查。在這次試驗(yàn)中有6例假陽性結(jié)果就是由于患者尿中含大量酵母菌引起的。③尿中含有精子時(shí),其大小形態(tài)與紅細(xì)胞相似,熒光強(qiáng)度與散射光強(qiáng)度也與紅細(xì)胞相似,常被尿沉渣分析儀誤認(rèn)為紅細(xì)胞。在此研究中精子引起的紅細(xì)胞假陽性共3例。④尿中含有結(jié)晶時(shí)，主要是草酸鈣結(jié)晶和無定型鹽結(jié)晶，草酸鈣結(jié)晶形狀多為球形或啞鈴形,無定形鹽常凝集成團(tuán),這些結(jié)晶形狀類似紅細(xì)胞,經(jīng)常會被儀器誤認(rèn)為紅細(xì)胞而使結(jié)果出現(xiàn)假陽性。尿中含有結(jié)晶時(shí)顏色比較渾濁,所以遇到渾濁尿時(shí)應(yīng)盡量做顯微鏡檢查作出準(zhǔn)確判斷。結(jié)晶尿引起的紅細(xì)胞假陽性較高,在此研究中共占13例,所占比率為54%.

4.1.2假陰性 尿液中紅細(xì)胞如果破碎或數(shù)量很少,所產(chǎn)生的熒光很弱,處于低熒光區(qū), UF-1000流式細(xì)胞儀檢測不到,結(jié)果就會為陰性,此時(shí)干化學(xué)隱血試驗(yàn)非常有效的彌補(bǔ)這一不足.

4.2白細(xì)胞誤差原因 UF-1000流式細(xì)胞儀與其他兩種方法比較白細(xì)胞結(jié)果不符標(biāo)本共46例，其中假陽性38例,假陰性8例.

4.2.1假陽性 尿中含有小圓上皮細(xì)胞時(shí)，其形態(tài)大小與白細(xì)胞相似,尿沉渣儀器會將其誤認(rèn)為白細(xì)胞而出現(xiàn)假陽性結(jié)果，此時(shí)應(yīng)結(jié)合干化學(xué)法及顯微鏡檢查作出準(zhǔn)確判斷。在此研究中小圓上皮細(xì)胞引起的白細(xì)胞假陽性共30例。

4.2.2渾濁尿 尿中含非晶形結(jié)晶或大量細(xì)菌時(shí),這些物質(zhì)凝集成團(tuán),尿沉渣儀器會將其誤認(rèn)為白細(xì)胞而出現(xiàn)假陽性結(jié)果，在此研究中小圓上皮細(xì)胞引起的白細(xì)胞假陽性共18例。

4.2.3假陰性 干化學(xué)法檢測白細(xì)胞是通過白細(xì)胞中的白細(xì)胞酯酶與干化學(xué)試紙條上的化學(xué)試劑反應(yīng)檢測的，當(dāng)白細(xì)胞受各種外因發(fā)生破碎時(shí)，干化學(xué)試紙條可以檢測到白細(xì)胞但尿沉渣儀器卻不能測到。另外還有一種情況，即淋巴細(xì)胞中的白細(xì)胞酯酶含量很低，如果患者患有尿中以淋巴細(xì)胞為主的疾病，如腎結(jié)核，器官移植術(shù)后等，尿中白細(xì)胞多數(shù)是淋巴細(xì)胞，干化學(xué)檢測會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。而尿沉渣儀器此時(shí)卻可以檢測到，顯示陽性結(jié)果。所以當(dāng)干化學(xué)法與尿沉渣法兩者結(jié)果不相符時(shí)要仔細(xì)做尿顯微鏡檢查，仔細(xì)鑒別是哪種情況引起的白細(xì)胞假陰性。

4.3管型誤差原因 尿中含有粘液線時(shí)，由于其形狀與管型很相似,并易附著被熒光染料著色的物質(zhì)。尿沉渣儀器很容易將其誤認(rèn)為管型而作出假陽性結(jié)果。另外尿液中含有較多雜質(zhì)時(shí)，尿沉渣儀器也會誤認(rèn)為管型造成假陰性，與文獻(xiàn)報(bào)告一致[4]。

綜上所述，流式細(xì)胞儀速度快，重復(fù)性好，簡便易操作，可以精確計(jì)數(shù)，能節(jié)省大量人力物力，但其靈敏度太高，紅細(xì)胞和管型容易出現(xiàn)假陽性，適合做大批量的篩查。干化學(xué)法快速，簡便，對紅細(xì)胞和蛋白檢測靈敏度高。但不能定量檢測，也不能檢測出淋巴細(xì)胞。可見再先進(jìn)的儀器都有其不足之處，都代替不了人工的顯微鏡檢查，因此建議在平時(shí)工作時(shí)應(yīng)將三種方法結(jié)合起來，在減低工作量，提高工作效率的同時(shí)也要減少檢驗(yàn)誤差，提高檢驗(yàn)質(zhì)量。

[1] 叢玉隆，馬俊龍，李云蓮，等.尿沉渣測定四種方法的參考范圍調(diào)查.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1997，20：229-231.

[2] 吳教仁，林敏，李楊.UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測尿液紅細(xì)胞的應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2005，11(4)：421-422.

[3] 馬麗，袁漢堯，王小梅.酵母菌對UF-100全自動尿沉渣分析儀紅細(xì)胞檢測結(jié)果影響.上海醫(yī)學(xué)雜志，2001，16(3)：161-162.

[4] 鄭宇瓊，焦曉陽.流式尿沉渣全自動分析儀，尿干化學(xué)分析儀及顯微鏡的臨床意義探討.江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2001，19(1)：5-6.

462000 河南省漯河市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科