血細胞分析儀法和溫氏法測定紅細胞比容的比較

閆國慶，沈愛蓉，李宏偉，王桂祥

(1、北京市順義區(qū)空港醫(yī)院，北京101318；2、北京市延慶縣永寧社區(qū)衛(wèi)生服務中心，北京102104)

血細胞分析儀法和溫氏法測定紅細胞比容的比較

閆國慶1，沈愛蓉1，李宏偉2，王桂祥1

(1、北京市順義區(qū)空港醫(yī)院，北京101318；2、北京市延慶縣永寧社區(qū)衛(wèi)生服務中心，北京102104)

紅細胞壓積；血細胞分析儀；溫氏法；

紅細胞比容(HCT)是血液中紅細胞所占全血體積的百分比，是計算血液指數(shù)中的平均紅細胞體積(MCV)和平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)不可缺少的數(shù)值，也是臨床醫(yī)生計算血容量的核心數(shù)據(jù)之一[1-4]。所以在臨床上血細胞比容對貧血的診斷分類、脫水患者的補液、大出血中的輸血、患者的用藥、愈后判斷和血液黏度等多方面都有著重要的意義。隨著我國醫(yī)學事業(yè)的迅猛發(fā)展，測定紅細胞比容的溫氏法(Wintrobe)在臨床檢驗中，逐漸被操作簡單便捷的儀器測定法所取代。由于兩種方法的原理不同，通過統(tǒng)計學計算，測定結(jié)果存在差異。本文作者分別使用上述兩種實驗方法測定健康人群和貧血患者的紅細胞比容，對上述問題進行探討。

1 材料與方法

1.1 臨床資料在2012年5月至10月，我地區(qū)村民健康體檢中，選擇20歲至50歲無疾患的健康體檢者60例和同期門診住院的貧血患者(血紅蛋白小于110 g/L)30例，作為本文的實驗對象。

1.2 儀器與試劑日本SYSMEX XS-800i全自動血液分析儀及相配套的試劑。溫氏紅細胞比容管、細長毛細滴管，白楊醫(yī)用低速離心機。

1.3 紅細胞壓積測定方法清晨空腹抽取靜脈血2ml與EDTA-K20.2ml混勻。儀器法使用SYSMEX XS-800i全自動血液分析儀，所用試劑均為執(zhí)信醫(yī)療北京公司的配套產(chǎn)品，指控品為4oC Plus，按照儀器與試劑說明書規(guī)范操作，每份樣品重復測3次取平均值。溫氏法用細長毛細滴管吸取混勻抗凝血液，插入溫氏紅細胞比容管內(nèi)，慢慢將血液注入至10處，防止氣泡產(chǎn)生，3000r/min離心30 min讀取紅細胞層柱的高度，再離心10 min直到紅細胞不再沉降為止[5]。

1.4 參考區(qū)間男：0.40～0.50L/L(40%～50%)；女：0.37～0.45L/L(37%～45%)。

1.5 統(tǒng)計分析紅細胞壓積檢測的實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x±s)表示，采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，利用配對t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 健康人與貧血病人兩法檢測結(jié)果見表1。

表1 儀器法和溫氏法血HCT統(tǒng)計結(jié)果比較

健康人及貧血病人兩法均有顯著差異，P＜0.01。健康人兩法檢測結(jié)果：儀器法為0.44±0.03，溫氏法為0.46±0.04，貧血病人兩法檢測結(jié)果：儀器法0.35±0.03，溫氏法0.37±0.03，溫氏法比儀器法測定結(jié)果偏高。

3 討論

本實驗比較的兩法于兩個實驗組中均有顯著性差異，健康人兩法檢測結(jié)果均在男性0.40－0.50L/L(40%～50%)，女性0.37～0.45L/L(37%～45%)的正常范圍內(nèi)；貧血病人兩法檢測結(jié)果均在男性＜0.40L/L，女性＜0.37L/L，說明兩法在檢測方法上的差異不會影響貧血的診斷。儀器法比溫氏法的檢測結(jié)果偏低，此現(xiàn)象在貧血組中更明顯，在健康人儀器法比溫氏法平均低3.17%，在貧血組儀器法比溫氏法低5.75%，說明儀器法與溫氏法所測結(jié)果差值隨著HCT值降低而加大。溫氏法測定結(jié)果偏高的原因在于紅細胞對血漿的捕獲效應使血漿造成陷留，有實驗證明離心后紅細胞間仍有2%～3%血漿存在[6]，不能完全排除殘留血漿的影響。而當紅細胞變形能力下降時，血漿殘留會增多，因此健康

人用溫氏法測定紅細胞壓積時影響因素較小，差異程度較低。儀器法在測定HCT時，是根據(jù)平均紅細胞壓積(MCV)及紅細胞數(shù)量得出的計算值，因此凡是能影響質(zhì)量控制及平均紅細胞壓積測定的影響因素，均影響紅細胞壓積的測定[7]。同時為避免影響血細胞體積的測定，在選擇抗凝劑時，應選擇溶解度高、溶解快的EDTA-K2[8]，采用推薦濃度( 150g/L)的EDTA-K20.02ml干燥抗凝管嚴格抗凝2ml全血，充分混勻后再進行測定。冷凝集、嚴重紅白細胞增多、紅細胞碎片等等，也影響儀器法對紅細胞壓積的測定，但減少了紅細胞變形能力的影響。

其次測定紅細胞比容兩種實驗方法的原理是不同的，儀器法是紅細胞通過儀器細孔時，引起測定電壓變化，經(jīng)過紅細胞計數(shù)的累加計算，此地其紅細胞比容的數(shù)值。單個紅細胞體積的大小，也會影響到上述電壓的強弱，所以儀器法測定紅細胞比容也適用于不同類型貧血患者的血紅細胞比容測定。溫氏法測定紅細胞比容是長時間的(一般為40～50 min)離心，將紅細胞沉降到溫氏管的底部，形成紅細胞層，通過溫氏管的刻度，報告其紅細胞比容的測定數(shù)值。但由于紅細胞對血漿的捕捉效應，使血漿在紅細胞層中造成陷留，使溫氏法的紅細胞比容數(shù)值是真值加上紅細胞捕捉血漿量之和。所以本文的兩組實驗數(shù)據(jù)溫氏法的均值略高于儀器法的均值。統(tǒng)計學計算顯示有較大的差異。由于儀器法測定標本紅細胞比容的數(shù)值更接近于真值，且操作便捷，試驗耗時較小，故儀器法的測定在臨床得到了普遍應用。

[1]梁勤.SYSMEXXT-1800i全自動血細胞分析儀應用體會[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2010,28(5):533.

[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:128-129.

[3]許文榮,王建中.臨床血液學與檢驗[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:170-171.

[4]王永福,林桂青.妊高癥孕婦血脂水平和紅細胞壓積檢查的臨床意[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2012,30(3):284-285.

[5]李影林,盧椒文,劉雅琴.臨床醫(yī)學檢驗手冊[M].長春：吉林科學技術出版社,1978:71-72.

[6]王天佑.血液流變學[M].烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社,1992:52～53.

[7]陳淑紅,李淑霞.紅細胞比積測定方法及結(jié)果的比較[J].寧夏醫(yī)學雜志,2002,24(7):423.

[8]方蓉,黃宇烽,鄭鈞,等.抗凝劑濃度不同血液的血細胞計數(shù)儀分析結(jié)果[J].臨床檢驗雜志,2001,19(2):105.

R446.11+1

B

1674-1129(2013)02-0193-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.02.039