孟西娜 許飛

（江蘇省無錫市婦幼保健院 檢驗科，江蘇 無錫 214002）

目前我國將流產(chǎn)定義為妊娠在28周以前，胎兒在1000 g以下者，分為自然流產(chǎn)和人工流產(chǎn)。在所有臨床確認的妊娠中，自然流產(chǎn)的發(fā)生率約為15%，連續(xù)2次及2次以上自然流產(chǎn)的發(fā)生率為5%，連續(xù)3次及3次以上自然流產(chǎn)的發(fā)生率為0.5%～3%［1］。復發(fā)性流產(chǎn)（recurrent spontaneous abortion，RSA）指連續(xù)發(fā)生3次或者3次以上的自然流產(chǎn)，其中50%左右可以找到明確原因，包括遺傳因素、解剖因素、內(nèi)分泌因素、免疫因素、感染因素等。引起流產(chǎn)的遺傳因素包括染色體異常、單基因突變以及多因子遺傳。尤其是在前3個月的流產(chǎn)胚胎中，50%以上顯示出染色體異常，但仍有40%左右的流產(chǎn)原因不詳［2］。

1 資料和方法

1.1 病例介紹 ①病例1，女，29歲，停經(jīng)63天、45天、48天時自然流產(chǎn)；②病例2，女，26歲，停經(jīng)56天、64天、40天時自然流產(chǎn)；③病例3，女，27歲，停經(jīng)48天、51天、52天時自然流產(chǎn)。

3名患者及其配偶年齡在25～33歲之間，均身體健康，無不良生活習慣如吸煙、飲酒。查染色體、TORCH、抗精子抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體、抗心磷脂抗體、肝腎功能、血常規(guī)均正常，甲乙丙肝抗原、艾滋、梅毒均為陰性。3名配偶精液檢查正常。3名患者均無婦科疾病，內(nèi)分泌檢查正常，月經(jīng)規(guī)律，流產(chǎn)無明顯誘因。家族無遺傳病史，近親中無復發(fā)性流產(chǎn)者。標本收集均征得本人知情同意。

1.2 方法 采集患者外周血5 ml，EDTA抗凝，-80℃冷凍，在干冰冷凍運輸交北京博奧生物使用博奧生物染色體異常檢測基因芯片檢測。

2 結(jié) 果（表1）

表1 3例病例外周血的基因芯片檢測結(jié)果

3 討 論

對照博奧生物采用的3種國際主流數(shù)據(jù)庫：Decipher（database of chromosomal imbalance and phenotype in humans using ensembleresources）、ISCA（international standards for cytogeneticarrays），OMIM（online mendelianin-heritance in man）和中華民族健康與疾病遺傳資源共享平臺數(shù)據(jù) 庫 （genetic resource of chinesepopulation，GRCP），這3例患者檢測到的染色體擴增或缺失區(qū)域均位于染色體良性拷貝變異的區(qū)域內(nèi)，良性區(qū)域是目前的研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)在正常人群中也存在拷貝數(shù)擴增或缺失變異的染色體區(qū)域，說明這段染色體區(qū)域存在拷貝數(shù)多態(tài)性，一般多態(tài)性在不同的種族、人群中可能對表型產(chǎn)生不同的影響，所以就目前的醫(yī)學數(shù)據(jù)而言，該段染色體異常可能與疾病無關(guān)，但不排除將來擴大人群研究或者針對亞洲或者中國人群某一亞群進行研究時發(fā)現(xiàn)，該段染色體異常與習慣性流產(chǎn)有關(guān)。但從芯片原始結(jié)果來看，有2例患者有X染色體的LOH，雖然在已知的數(shù)據(jù)庫里沒有見到相關(guān)的報道，但是這個區(qū)域與X印記或流產(chǎn)有關(guān)。另外這3例患者均存在16p11.2缺失（2例缺失，1例LOH），有共同的地方，但是與疾病的關(guān)系未知，其臨床意義還需要大量研究數(shù)據(jù)的積累，很難有明確的指導意義。

傳統(tǒng)細胞遺傳學技術(shù)，如核型分析和染色體顯帶技術(shù)，只能發(fā)現(xiàn)大于5～10M的較大染色體異常，難以滿足檢測分辨率要求，而熒光原位雜交（FISH）技術(shù)雖然能夠以較高分辨率檢測，但通常只用于已確定目標區(qū)域DNA的檢測?；谛酒谋容^基因組雜交技術(shù)（array-based comparative genomic hybridization，aCGH）以其分辨率高，檢測時間短，自動化程度高的優(yōu)勢，正逐漸取代傳統(tǒng)核型分析和染色體顯帶技術(shù)成為分析染色體異常的細胞遺傳學研究的主流工具。而aCGH在一次雜交中就能檢測多種染色體異常，遠遠超過傳統(tǒng)檢測精度，有效地發(fā)現(xiàn)染色體微小缺失和微小擴增［4-6］。

盡管基因芯片相比于傳統(tǒng)的核型分析具有分辨率高和周期短的優(yōu)勢，但也有不能檢測平衡易位和低水平嵌合體的劣勢［7］。此外，一些異常結(jié)果的發(fā)現(xiàn)不能確定其是否有臨床價值。雖然經(jīng)過不斷的經(jīng)驗積累，很多檢測結(jié)果是良性的還是病理性的已被明確，但由于表達的不穩(wěn)定性和不完全的外顯率，很多檢測結(jié)果還是不能被很好地解釋。而且芯片標準化也是一個亟待解決的問題，包括產(chǎn)品質(zhì)量的標準化、數(shù)據(jù)處理及試驗操作的標準化，基因芯片要在臨床發(fā)揮重要作用，仍需要技術(shù)的不斷提高和完善［8］。

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［2］Rubio C，Simon C，Vidal F，et a1.Chromosomal abnormalities and embryo development in recurrent miscarriage couples［J］.Hum Reprod，2003，18（1）：182-188.

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［7］Hoang S，Ahn J，Mann K，et al.Detection of mosaicism for genome imbalance in a cohort of 3，042 clinical cases using an oligonucleotide array CGH platform ［J］.Eur J Med Genet，2010，54（2）：121-129.

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