郭英

反相高效液相色譜法測定升麻藥材中升麻苷H-1的含量

郭英

目的 探討采取反相高效液相色譜法測定升麻藥材中升麻苷H-1的準(zhǔn)確性和臨床意義。方法 采取反相高效液相色譜法進(jìn)行測定升麻藥材中升麻苷H-1的含量, 色譜柱：HE XP ODS-A色譜柱(4.6mm×250.0mm, 5.0 μm)；流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸(35：65：0.4)；流速：1.0 ml/min；柱溫：26℃；波長：203nm。結(jié)果 升麻藥材中升麻苷H-1的線性回顧方程為Y=781023X-16783.3, r=0.9999,在0.99～28.6 μg/ml范圍內(nèi)與峰面積積分值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。結(jié)論 采取反相高效液相色譜法進(jìn)行測定升麻藥材中升麻苷H-1含量具有較高的應(yīng)用效果, 操作比較簡單, 而且準(zhǔn)確性較高, 是控制升麻藥材質(zhì)量的重要方法。

升麻；升麻苷H-1；反相高效液相色譜法升麻是臨床中常見的中藥, 而且升麻藥材的化學(xué)成主要是酚酸類化合物與三萜皂昔類化合物。如何進(jìn)行有效的控制升麻藥材質(zhì)量是臨床中常見的一個(gè)問題［1］。本文采取反相高效液相色譜法進(jìn)行測定升麻中升麻苷H-1含量, 具有一定的效果, 具體的分析如下。

1 材料與方法

1.1 研究材料 儀器：Water高效液相色譜儀、KQ5200B型超聲清洗儀、HAN-GPING FA1104型電子天平、VV2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。試劑：乙腈作為色譜純, 而其他試劑均為分析純。升麻苷H-1對照品(由中國藥品生物制品檢定所而提供), 升麻藥材均購于四川和云南以及安徽與河北等地, 且均鑒定為升麻。

1.2 方法 此次研究對于升麻中的升麻苷H-1的含量主要采取反相高效液相色譜法進(jìn)行測定, 其反應(yīng)條件為色譜柱：HE XP ODS-A色譜柱(4.6 mm×250.0 mm, 5.0 μm)；流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸(35：65：0.4)；流速：1.0 ml/min；柱溫：26℃；波長：203 nm。

2 結(jié)果

2.1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 在上述條件下選取供試品溶液和對照品溶液以及陰性空白樣品溶液均為20 μl, 而且采集時(shí)間為60 min。而且色譜圖中升麻苷H-1的保留時(shí)間主要為26 min,且被測峰與其他峰分離較好, 理論塔板數(shù)=17000。具體的圖像顯示如下圖1。

圖1 對照品與供試品反相高效液相色譜圖

2.2 線性關(guān)系考察 精密稱取升麻苷H-1對照品溶液0.5 μl、1.0 μl、2.0 μl、5.0 μl、10.0 μl, 并將其置入25 ml的量瓶中,并注入液相色譜儀, 并以峰面積對進(jìn)樣量濃度進(jìn)行回歸性分析, 回歸方程為Y=781023X-16783.3, r=0.9999,在0.99～28.6 μg/ ml范圍內(nèi)與峰面積積分值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

3 討論

升麻的質(zhì)量控制一直是藥品檢測中的一個(gè)難點(diǎn), 也是重點(diǎn)。而且臨床中有資料顯示, 不同的升麻品種中所含的升麻苷H-1含量也不相同［2］。

本次研究顯示, 在測定升麻藥材中的升麻苷H-1含量采取反相高效液相色譜法進(jìn)行測定具有較好的應(yīng)用效果。而且這種方法的測定重復(fù)性比較好, 而且可靠性比較強(qiáng)［3］。并且本次研究中測定升麻苷H-1在203 nm內(nèi)具有較好的吸收效果。因此, 本次研究波長選取為203 nm, 有效的提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。本次研究中對于溶液的制備依據(jù)《中國藥典》升麻藥材含量的測定方法而制備。并采取乙腈-水-磷酸(35：65：0.4)的流動(dòng)相, 而且這種方法也比較方便, 重現(xiàn)性也比較好, 有效的提高試驗(yàn)準(zhǔn)確性。

綜上所述, 臨床中采取反相高效液相色譜法進(jìn)行測定升麻藥材中的升麻苷H-1含量均具有較好的應(yīng)用效果。而且這種操作方法也比較簡單, 結(jié)果的準(zhǔn)確性也比較高, 重現(xiàn)性與回收率均比較高。是控制升麻藥材質(zhì)量的重要方法, 值得應(yīng)用。

［1］ 姚梅芬,王岳峰,李展,等.升麻飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.科技導(dǎo)報(bào), 2009, 22(17):223-224.

［2］ 潘瑞樂,陳迪華,斯建勇,等.反相高效液相色譜法測定不同品種升麻中27-脫氧升麻亭的含量.中南藥學(xué), 2007, 14(3): 202-203.

［3］ 郭珉,李珠華,張志勤,等.RP-HPLC法同時(shí)測定復(fù)方升麻顆粒中異阿魏酸、葛根素和芍藥苷.中成藥, 2012,21(6):455-456.

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