高位臂叢神經(jīng)撕脫傷大鼠血清及腦脊液中髓鞘堿性蛋白的動態(tài)變化

翟饒生，宋智奇

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江佳木斯154003)

臂叢神經(jīng)高位撕脫傷常見多發(fā)，預(yù)后不良，后果嚴(yán)重，是一種能夠嚴(yán)重致殘的外傷[2]。該類外傷又可分為根性撕脫傷和非根性撕脫傷。正確判斷這兩類損傷對疾病診斷和手術(shù)方法的選擇意義重大。但是，該類神經(jīng)損傷癥狀復(fù)雜多樣，癥狀和體征上的診斷方法尚不確切[3]。而影像學(xué)檢查受限于清晰度，分辨率，血腫干擾等各種局限性，仍不能應(yīng)用于這兩類損傷的鑒別診斷。本實驗擬通過模擬臂叢神經(jīng)高位撕脫傷，制造出根性撕脫傷和非根性撕脫傷兩類不同的動物模型，于傷后不同時間定量測定其血清和腦脊液中MBP的含量變化，探尋其變化規(guī)律，為探索一種非影像學(xué)的臂叢神經(jīng)高位撕脫傷的鑒別診斷方法提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗動物分組

健康Wistar大鼠，數(shù)量39只，體重170～230g，成年，雌性。隨機(jī)分為13組，每組3只，其中包括臂叢神經(jīng)撕脫傷6組，高位臂叢神經(jīng)非根性撕脫傷6組以及對照組1組。實驗12 組觀察時間為 12h，36h，3d，7d，14d，21d。實驗動物由佳木斯大學(xué)的動物實驗中心提供。

1.2 動物模型制備和標(biāo)本采集

大鼠用1%戊巴比妥鈉麻醉(30mg/kg，腹腔注射)。實驗大鼠俯臥[4]，取頸后正中切口，逐層分離，暴露臂叢神經(jīng)干部，逆行探查至臂叢神經(jīng)出椎間孔處。臂叢神經(jīng)撕脫傷6組用顯微止血鉗鉗夾撕脫造模;高位臂叢神經(jīng)非根性撕脫傷6組先用一把顯微止血鉗鉗夾神經(jīng)出椎間孔處，牢固把持，再用另一顯微止血鉗撕脫該神經(jīng)遠(yuǎn)側(cè)造模。逐層縫合，分籠喂養(yǎng)。于造模后不同時間點采集標(biāo)本。參照富宏[5]的經(jīng)皮穿刺延髓池抽取大鼠腦脊液的方法采集腦脊液;斷頸取血，離心，采集血清。取出標(biāo)本放－20℃冰箱保存待測。

1.3 MBP檢測及數(shù)據(jù)處理

用簡易的MBP酶聯(lián)免疫吸附定量測定法[6]分別測定腦脊液與血清中的MBP的含量，試劑盒來自于華西醫(yī)科大學(xué)重組DNA研究室。數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件包處理，組內(nèi)采用配對樣本t檢驗，組間用單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 各組臂叢神經(jīng)根性撕脫傷MBP含量變化

與損傷前(對照組)相比較，血液及腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);而在損傷后14d、12d比較各組血液及腦脊液的MBP含量變化未有明顯改變，方差分析不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)果見表1。

表1 臂叢神經(jīng)根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結(jié)果(±s，μg/L)

表1 臂叢神經(jīng)根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結(jié)果(±s，μg/L)

損傷時間 血液MBP含量 腦脊液MBP 含量損傷前12d 1.76±0.99 1.52±0.561.52±0.48 1.53±0.66損傷后12h 3.95±2.03 6.38±2.56損傷后36h 7.06±1.82 7.08±2.34損傷后3d 7.94±2.49 7.59±1.78損傷后7d 9.83±3.14 9.04±2.36損傷后14d 4.96±1.76 3.93±1.01損傷后

2.2 各組高位臂叢神經(jīng)非根性撕脫傷MBP含量變化

與損傷前(對照組)相比較，血液中的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01);而腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組未有顯著增高，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。在損傷后14d、12d相比較各組血液的MBP含量變化亦未有明顯改變，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)果見表2。

表2 臂叢神經(jīng)高位非根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結(jié)果(±s，μg/L)

表2 臂叢神經(jīng)高位非根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結(jié)果(±s，μg/L)

損傷時間 血液MBP含量 腦脊液MBP 含量損傷前12d 1.80±0.96 1.57±0.621.55±0.47 1.55±0.63損傷后12h 4.04±1.98 1.47±0.55損傷后36h 7.12±1.78 1.49±0.58損傷后3d 10.07±3.07 1.53±0.59損傷后7d 8.08±2.43 1.54±0.46損傷后14d 5.08±1.72 1.51±0.69損傷后

3 討論

MBP在正常髓鞘組織中大量表達(dá)，是髓鞘組織中的主要蛋白質(zhì)之一，正常情況下其特異性存在于神經(jīng)組織中。在各種類型中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷中，MBP可進(jìn)入腦脊液和血液，并且腦脊液和血清中MBP含量與髓鞘破壞程度和范圍呈正相關(guān)[7]。因此，MBP可作為判斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)實質(zhì)性損害程度的特異指標(biāo)。有文獻(xiàn)報道腦脊液中MBP水平高低可反映腦實質(zhì)損害的程度，血清中MBP水平則反映了血腦屏障損害的情況。臂叢神經(jīng)是上肢外周神經(jīng)的唯一總根系，是脊髓司上肢感覺運動的通路。臂叢神經(jīng)的各種損傷均可造成嚴(yán)重后果，致殘率很高。其中的臂叢神經(jīng)高位撕脫傷常見，治療棘手，諸多學(xué)者探索了各種治療方法[8]。臂叢神經(jīng)高位撕脫傷又可分為累及神經(jīng)根型和未累及神經(jīng)根型。這兩種類型的治療方法及預(yù)后有所差別。選擇正確的治療方案，其前提是明確診斷，因此早期鑒別這兩種損傷即具有確切的臨床實用價值。臂叢神經(jīng)具有交錯混雜，盤根錯節(jié)的解剖學(xué)特點[9]。累及高位臂叢神經(jīng)的撕脫傷，因其解剖學(xué)特點而致其癥狀復(fù)雜多樣。而現(xiàn)階段醫(yī)學(xué)影像學(xué)的發(fā)展尚不足以提供一種確切有效的影像學(xué)診斷參考。如核磁共振檢查，對脊髓組織的損傷，血腫，水腫有明確信號。但是，如果是臂叢神經(jīng)根性撕脫傷，因其損傷處的血腫，水腫干擾，早期的核磁共振檢查常出現(xiàn)假陰性結(jié)果。本實驗即通過對不同類型的實驗性臂叢神經(jīng)高位撕脫傷動物血液和腦脊液中特異性因子MBP的檢測，探尋在臂叢神經(jīng)根性撕脫和非根性撕脫中MBP的表達(dá)特點，進(jìn)而討論一種鑒別兩種臂叢神經(jīng)損傷的檢驗方法。大鼠臂叢神經(jīng)的諸多解剖和生理特征與人類相似，可用于制造臂叢神經(jīng)高位撕脫傷動物模型。CarlstedtT經(jīng)頸椎后入路臂叢神經(jīng)高位撕脫傷造模，該方法可靠確切，應(yīng)用廣泛。本實驗即將該方法略加改進(jìn)，造模大鼠分為兩組，即一組為常規(guī)臂叢神經(jīng)根性撕脫傷組，而另一組于椎間孔處鉗夾臂叢神經(jīng)予以保護(hù)，再造臂叢神經(jīng)非根性高位撕脫傷模型。如此即獲得有效可靠的動物模型。在取樣階段參考了富宏的經(jīng)皮穿刺延髓池抽取大鼠腦脊液的方法采集腦脊液，該方法對大鼠小腦延髓池進(jìn)行解剖定位，采集腦脊液的成功率較高。本實驗結(jié)果中:臂叢神經(jīng)根性撕脫傷組與損傷前(對照組)相比較，血液及腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統(tǒng)計學(xué)意義。而高位臂叢神經(jīng)非根性撕脫傷組與損傷前(對照組)相比較，血液中的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統(tǒng)計學(xué)意義;而腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組未有顯著增高，方差分析不具有統(tǒng)計學(xué)意義。作者分析認(rèn)為，出現(xiàn)這種差異的原因在于:①臂叢神經(jīng)根性撕脫傷可累及神經(jīng)根管，硬脊膜以內(nèi)，MBP可釋放進(jìn)入腦脊液;而高位臂叢神經(jīng)非根性撕脫傷則不會影響到硬脊膜。②該兩組損傷中的MBP皆可通過椎管靜脈系統(tǒng)吸收入血。因此，高位臂叢神經(jīng)撕脫傷后，腦脊液中MBP的含量可以作為鑒別該損傷是否累及神經(jīng)根的一項實驗室檢驗指標(biāo)。當(dāng)然，其確切的臨床實用價值尚待進(jìn)一步討論。

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