黎睿君 劉 芳 王方華, 李安興

(1. 中山大學(xué)有害生物控制與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 水產(chǎn)品安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510275;2. 華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院, 廣州 510640)

黃斑藍(lán)子魚(yú)(Siganus oramin)屬于鱸形目(pereiformes)、藍(lán)子魚(yú)科(Siganidae), 是近海暖水性小型魚(yú)類(lèi)。它適宜生長(zhǎng)的水溫和鹽度范圍較廣, 是南海區(qū)域普遍養(yǎng)殖的魚(yú)類(lèi)之一。前期研究發(fā)現(xiàn), 黃斑藍(lán)子魚(yú)對(duì)刺激隱核蟲(chóng)(Cryptocaryon irritans)感染具有明顯抵抗力, 其血清中存在一種新奇的抗寄生蟲(chóng)蛋白(APP), 該蛋白對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)和滋養(yǎng)體具有強(qiáng)烈的殺滅作用[1]。魚(yú)類(lèi)的黏膜是抵御寄生蟲(chóng)感染的第一道重要屏障, 已知魚(yú)類(lèi)的黏液中含有諸多抑殺病原的活性物質(zhì)[2,3], 且魚(yú)類(lèi)表皮黏液的免疫學(xué)功能證實(shí)[4,5]。黃斑藍(lán)子魚(yú)體表黏液是否對(duì)刺激隱核蟲(chóng)同樣具有殺滅活性是本研究的出發(fā)點(diǎn)。前期研究發(fā)現(xiàn)APP在體外對(duì)多子小瓜蟲(chóng)(Ichthyophthirius multifiliis)和布氏錐蟲(chóng)(Trypanosoma brucei brucei)同樣具有較強(qiáng)的殺滅作用, 對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和海豚鏈球菌(Streptococcus iniae)等 3種革蘭氏陽(yáng)性菌以及大腸桿菌(Escherichia coli)、霍亂弧菌(Vibrio cholerae)、溫和氣單胞菌(Aeromonas sobria)、遲鈍愛(ài)德華氏菌(Edwardsiella tarda)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)和美人魚(yú)發(fā)光桿菌殺魚(yú)亞種(Photobacterium damselae subsp.)等6種革蘭氏陰性菌均有抑菌效果, 但對(duì)于黑曲霉(Aspergillus niger)和小麥赤霉菌(Gibberella saubinetii)兩種真菌則無(wú)抑菌作用[6]。因此, 在研究黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液是否對(duì)刺激隱核蟲(chóng)同樣具有殺滅活性的同時(shí), 開(kāi)展了黏液對(duì)上述病原殺滅活性的驗(yàn)證, 同時(shí)選取了南海區(qū)較為常見(jiàn)的四種海水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi), 即斜帶石斑魚(yú)(Epinephelus coioides)、美國(guó)紅魚(yú)(Sciaemops ocellatus)、花尾胡椒鯛(Plectorhinchus cinctus)、 卵形 鯧 鲹(Trachinotus ovatus)的皮膚黏液作為對(duì)照。探究黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液抗刺激隱核蟲(chóng)活性, 以及研究該黏液對(duì)APP相關(guān)抑殺病原的作用, 為進(jìn)一步研究黃斑藍(lán)子魚(yú)對(duì)刺激隱核蟲(chóng)的天然抗性提供了基礎(chǔ), 為深入開(kāi)展 APP蛋白的研究提供了新的路徑。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)用魚(yú)

1.2 實(shí)驗(yàn)蟲(chóng)株

刺激隱核蟲(chóng)(C. irritans)GD1株由本實(shí)驗(yàn)室保存,多子小瓜蟲(chóng)(I. multifiliis)由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院珠江水產(chǎn)研究所趙飛博士提供, 布氏錐蟲(chóng)(T. brucei brucei)由中山大學(xué)華南寄生生物研究中心倫照榮教授提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)菌株

金黃色葡萄球菌(S. aureus)ATCC25923 株、大腸桿菌(E. coli)、溫和氣單胞菌(A. sobria)、霍亂弧菌(V. cholerae)、副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus)、溶藻弧菌(V. alginolyticus)、海豚鏈球菌(S.iniae)、星形諾卡氏菌(Nocadia asteroides)、美人魚(yú)發(fā)光桿菌殺魚(yú)亞種(P. damselae subsp.)、小麥赤霉菌(G. saubinetii)、黑曲霉菌(A. niger)均為本實(shí)驗(yàn)室保存。

1.4 黏液樣品的制備

用玻片輕輕刮取實(shí)驗(yàn)魚(yú)背部黏液, 溶于 PBS(pH 7.4), 4000 r/min, 4℃離心20min, 取上清液, 冷凍干燥后?20℃保存。實(shí)驗(yàn)時(shí), 取凍干的樣品重溶于PBS, BCA法測(cè)定黏液樣品蛋白濃度。

1.5 對(duì)刺激隱核蟲(chóng)、多子小瓜蟲(chóng)和布氏錐蟲(chóng)的殺滅作用試驗(yàn)

參照但學(xué)明等阻動(dòng)實(shí)驗(yàn)方法[7], 在96孔培養(yǎng)板中, 每孔分別加入100 μL含有刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)(200個(gè)/100 μL)或刺激隱核蟲(chóng)滋養(yǎng)體(200 個(gè)/100 μL)的蟲(chóng)液, 同時(shí)向每孔中加入 20 μL(5.0 mg/mL)黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液, 輕輕混勻, 1h后統(tǒng)計(jì)各孔中寄生蟲(chóng)的死亡率, 以顯微鏡下觀察蟲(chóng)體纖毛或鞭毛不擺動(dòng)為死亡判定依據(jù)。同時(shí)從各孔取少量處理后的蟲(chóng)液于載玻片上, 用于顯微鏡觀察。以斜帶石斑魚(yú)、美國(guó)紅魚(yú)、卵形鯧 鲹和花尾胡椒鯛的黏液作為對(duì)比組, 滅菌海水作為空白對(duì)照組。黏液對(duì)多子小瓜蟲(chóng)幼蟲(chóng)及布氏錐蟲(chóng)的處理方法同上。

1.6 黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液最低殺蟲(chóng)濃度的測(cè)定

將黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液用 PBS(pH 7.4)稀釋到5.0、4.0、3.0、2.0、1.0和0.5 mg/mL, 其余處理方法同上, PBS作為空白對(duì)照, 1h 后統(tǒng)計(jì)各寄生蟲(chóng)死亡率。

1.7 對(duì)細(xì)菌的抑制作用試驗(yàn)

抑菌活性試驗(yàn) 參照Nagashima, et al.[8]方法,金黃色葡萄球菌和大腸桿菌在 37℃下培養(yǎng), 溫和氣單胞菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、海豚鏈球菌、星形諾卡氏菌、美人魚(yú)發(fā)光桿菌殺魚(yú)亞種在28℃下培養(yǎng), 18—48h后觀察抑菌圈的大小, 試驗(yàn)所用皮膚黏液均用PBS(pH 7.4)稀釋到5.0 mg/mL。

最小抑菌濃度的測(cè)定 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、海豚鏈球菌、溶藻弧菌、溫和氣單胞菌和副溶血弧菌分別稀釋至 105CFU/mL, 向96孔板中加入50 μL菌液。將黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液用 PBS(pH 7.4)稀釋至 5.0、2.5、1.25、0.63、0.32、0.16、0.08、0.04 mg/mL, 每孔加入 100 μL 黏液溶液, 放置各細(xì)菌于對(duì)應(yīng)培養(yǎng)溫度的生化培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng), 24h時(shí)測(cè)其A600值, 具有顯著性抑菌效果的最低黏液蛋白濃度為其最小抑菌濃度。

1.8 對(duì)真菌抑制作用試驗(yàn)

接種小麥赤霉菌和黑曲霉菌于斜面 PDA固體培養(yǎng)基, 30℃培養(yǎng) 48h, 去離子水沖洗, 收集孢子,將孢子濃度稀釋至104CFU/mL, 與等體積5 mg/mL的黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液混合, 30℃靜置培養(yǎng) 3h, 涂板計(jì)數(shù), 觀察其生長(zhǎng)情況。

1.9 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù)用 SPSS 16.0中 One-wayAnova法進(jìn)行平均值方差計(jì)算和顯著性差異分析(DUNCAN法), P值顯著性差異臨界水平為0.05。

2 結(jié)果

2.1 皮膚黏液對(duì)寄生蟲(chóng)的殺滅作用

黃斑藍(lán)子魚(yú)(S. oramin)皮膚黏液對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)的致死率與其他4種實(shí)驗(yàn)魚(yú)黏液相比存在顯著性差異(圖1)。共孵育60min后, 黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)的致死率為 100%, 而花尾胡椒鯛、美國(guó)紅魚(yú)、斜帶石斑魚(yú)和卵形鯧等4種魚(yú)的黏液對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)的致死率分別為(26.67±2.92)% 、 (25.00±3.27)% 、 (31.67±5.8)% 、(18.33±3.27)%, 均不及 50%, 其中卵形鯧 鲹黏液的作用效果與空白對(duì)照組相近。

在光學(xué)顯微鏡下觀察, 黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液作用于刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)5min后, 大部分幼蟲(chóng)出現(xiàn)停止運(yùn)動(dòng),形態(tài)由橢圓形變?yōu)閳A形(圖2B和D), 纖毛從蟲(chóng)體表面脫落(圖 2E), 蟲(chóng)體表層逐漸破裂, 并有大量?jī)?nèi)含物釋放(圖2C、F和G), 其他4種實(shí)驗(yàn)魚(yú)皮膚黏液與刺激隱核蟲(chóng)作用后, 大部分幼蟲(chóng)活動(dòng)正常, 死亡的幼蟲(chóng)沒(méi)有發(fā)生蟲(chóng)體形態(tài)變化(圖 2H), 空白對(duì)照組除少量自然死亡, 其他活動(dòng)正常。

黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液與刺激隱核蟲(chóng)滋養(yǎng)體共孵育5min后, 滋養(yǎng)體外膜出現(xiàn)分離(圖 3B), 細(xì)胞壁有孔洞形成, 并伴隨內(nèi)含物釋放(圖3C和D), 30min后,整個(gè)滋養(yǎng)體被破壞(圖3E)。其他4種實(shí)驗(yàn)魚(yú)皮膚黏液與滋養(yǎng)體作用后, 滋養(yǎng)體形態(tài)無(wú)明顯變化(圖3F)。

圖1 經(jīng)5種實(shí)驗(yàn)魚(yú)皮膚黏液作用60min后的刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)死亡率Fig. 1 Theronts mortality of C. irritans incubated with the skin mucus of five species fish for 60min

圖2 光學(xué)顯微鏡下黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)的作用觀察Fig. 2 Light microscopy analysis of the effect of rabbitfish skin mucus on C. irritans

圖3 光學(xué)顯微鏡下黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)刺激隱核蟲(chóng)滋養(yǎng)體的作用觀察Fig. 3 Light microscopy analysis of the effect of S. oramin skin mucus on C. irritans trophonts

黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液與多子小瓜蟲(chóng)共孵育60min后, 多子小瓜蟲(chóng)的死亡率達(dá)100%, 而花尾胡椒鯛、美國(guó)紅魚(yú)、斜帶石斑魚(yú)和卵形鯧 鲹皮膚黏液對(duì)多子小瓜蟲(chóng)幼蟲(chóng)的致死率分別達(dá)到(23.33±2.92)%、(30.50±3.27)%、(50.25±5.84)%和(26.67±3.27)%(圖4)。黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液作用于多子小瓜蟲(chóng)5min后, 光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn), 大部分幼蟲(chóng)蟲(chóng)體形態(tài)由橢圓形變圓形(圖 5B), 蟲(chóng)體纖毛脫落, 表層破裂, 伴隨內(nèi)含物泄漏(圖5 C、D和E), 其他四種魚(yú)皮膚黏液作用多子小瓜蟲(chóng)后, 大部分幼蟲(chóng)沒(méi)有死亡, 死亡的幼蟲(chóng)沒(méi)有發(fā)生蟲(chóng)體形態(tài)變化。

黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液與布氏錐蟲(chóng)共孵育 60min后, 布氏錐蟲(chóng)的死亡率達(dá)100%, 花尾胡椒鯛、美國(guó)紅魚(yú)、斜帶石斑魚(yú)和卵形鯧 鲹皮膚黏液對(duì)布氏錐蟲(chóng)的致死率分別達(dá)到(32.33±3.31)%、 (23.15±2.83)%、(18.50±2.66)%和(19.67±3.59)%(圖 6)。倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn), 死亡的錐蟲(chóng)停止運(yùn)動(dòng), 蟲(chóng)體變形破裂。

圖4 經(jīng)5種實(shí)驗(yàn)魚(yú)皮膚黏液作用60min后的多子小瓜蟲(chóng)幼蟲(chóng)死亡率Fig. 4 Theronts mortality of I. multifiliis incubated with the skin mucus of five species of fish for 60min

圖5 光學(xué)顯微鏡下觀察黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)多子小瓜蟲(chóng)的作用Fig. 5 Light microscopy analysis of the effect of S. oramin mucus on I. multifiliis

圖6 經(jīng)5種實(shí)驗(yàn)魚(yú)皮膚黏液作用60 min后的布氏錐蟲(chóng)死亡率Fig. 6 Theronts mortality of T. brucei brucei incubated with the skin mucus of five species fish for 60 min

黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液蛋白對(duì)3種寄生蟲(chóng)的最低殺蟲(chóng)濃度(Minimum Parasiticidal Concentration, MPC)測(cè)定結(jié)果顯示, 其對(duì)刺激隱核蟲(chóng)、多子小瓜蟲(chóng)和布氏錐蟲(chóng)的MPC分別為4.0、5.0和3.0 mg/mL。蛋白濃度為5.0 mg/mL的黏液在作用5min后, 對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)致死率達(dá)100%; 4.0 mg/mL蛋白濃度的黏液作用 5min后, 刺激隱核蟲(chóng)的死亡率達(dá)到(61.67±5.84)%, 60min后其死亡率接近100%; 3.0 mg/mL蛋白濃度的黏液作用 30min后, 刺激隱核蟲(chóng)死亡率達(dá)到(43.33±5.84)%(圖7)。對(duì)于4.0 mg/mL和3.0 mg/mL蛋白濃度的黏液在作用5min后, 多子小瓜蟲(chóng)的死亡率分別可達(dá)(64.00±2.92)%和(45.67±5.84)%, 在30min后死亡率分別上升到(84.33±5.84)%和(68.67±2.92)%(圖8)。同樣為4.0 mg/mL和3.0 mg/mL蛋白濃度的黏液在作用5min后, 對(duì)布氏錐蟲(chóng)的致死率分別為(86.86±2.26)%和(76.29±5.08)%, 60min 后致死率達(dá) 100%(圖 9)。

圖7 不同濃度黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)的作用Fig. 7 Effect of different concentrations of S. oramin skin mucus on C. irritans theronts

2.2 黏液對(duì)病原菌的抑制作用

圖8 不同濃度黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)多子小瓜蟲(chóng)幼蟲(chóng)的作用Fig. 8 Effect of different concentrations of S. oramin skin mucus on I. multifiliis theronts

圖9 不同濃度黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)布氏錐蟲(chóng)的作用Fig. 9 Effect of different concentrations of S. oramin skin mucus on T. brucei brucei theronts

黏液抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液除了對(duì)大腸桿菌沒(méi)有抑菌活性外, 對(duì)其他 8種實(shí)驗(yàn)細(xì)菌皆有明顯的抑菌活性, 對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC25923 株、霍亂弧菌和星形諾卡氏菌的抑菌活性較強(qiáng); 斜帶石斑魚(yú)皮膚黏液對(duì)所有實(shí)驗(yàn)細(xì)菌都有明顯的抑菌圈, 其中對(duì)霍亂弧菌抑菌活性較強(qiáng)(表1、圖 10)。 卵形鯧、花尾胡椒鯛和美國(guó)紅魚(yú)皮膚黏液在實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有表現(xiàn)出抑菌活性。

在最低抑菌濃度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)測(cè)定中, 黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、海豚鏈球菌、溶藻弧菌、溫和氣單胞菌和副溶血弧菌的 MIC分別為0.16、0.16、0.08、0.63、0.63和 0.63 mg/mL。

在黏液對(duì)真菌的抑菌實(shí)驗(yàn)中, 5種實(shí)驗(yàn)魚(yú)皮膚黏液對(duì)小麥赤霉菌和黑曲霉菌沒(méi)有明顯的抑菌活性,與空白對(duì)照相比, 無(wú)顯著性差異。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明, 相對(duì)于其他實(shí)驗(yàn)用魚(yú),黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液, 表現(xiàn)出顯著的殺滅刺激隱核蟲(chóng)活性。在魚(yú)類(lèi)寄生蟲(chóng)侵染宿主過(guò)程中, 寄生蟲(chóng)首先附著在皮膚或鰓等部位, 因此宿主在抵御寄生蟲(chóng)過(guò)程中, 黏液是第一道屏障, 在之前的研究中發(fā)現(xiàn), 黃斑藍(lán)子魚(yú)較其他實(shí)驗(yàn)中的 7種魚(yú), 對(duì)刺激隱核蟲(chóng)的感染強(qiáng)度最低[1]。黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液抗刺激隱核蟲(chóng)活性在一定程度解釋了該魚(yú)對(duì)刺激隱核蟲(chóng)的不敏感性。

黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液存在一種新的殺寄生蟲(chóng)機(jī)制。在以往的殺蟲(chóng)物質(zhì)研究中, piscidin2可以殺滅多子小瓜蟲(chóng)和刺激隱核蟲(chóng), 它會(huì)引起刺激隱核蟲(chóng)幼蟲(chóng)腫脹和空泡化, 但沒(méi)有引起蟲(chóng)體破裂, 對(duì)淡水小瓜蟲(chóng)的滋養(yǎng)體和包囊沒(méi)有作用[9]; 抗刺激隱核蟲(chóng)抗體可以使幼蟲(chóng)死亡, 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)減慢聚集成團(tuán), 同時(shí)幼蟲(chóng)會(huì)分泌一些黏性物質(zhì), 使纖毛纏繞在一起[7]。在本研究中, 刺激隱核蟲(chóng)和多子小瓜蟲(chóng)的幼蟲(chóng)在經(jīng)過(guò)黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液作用后, 均出現(xiàn)纖毛脫落、蟲(chóng)體腫脹、外膜破裂和內(nèi)容物泄漏等現(xiàn)象, 因此推測(cè)黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液存在一種新的殺蟲(chóng)機(jī)制。

表1 黃斑藍(lán)子魚(yú)和斜帶石斑魚(yú)皮膚黏液對(duì)9種細(xì)菌抑菌效果Tab. 1 Antibacterial activity of skin mucus from S. oramin and E. coioides

圖10 五種實(shí)驗(yàn)魚(yú)黏液對(duì)9種細(xì)菌的抗菌活性Fig. 10 Antibacterial activity of mucus of five species of fish

關(guān)于黏液抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果, 黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液除了對(duì)大腸桿菌沒(méi)有抑菌活性之外, 對(duì)其他 8種實(shí)驗(yàn)細(xì)菌皆表現(xiàn)出明顯的抑菌活性, 說(shuō)明黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液具有廣泛的抑菌譜。點(diǎn)藍(lán)子魚(yú)(Siganus guttatus)和褐藍(lán)子魚(yú)(Siganus fuscescens)的黏液對(duì)嗜水氣單胞菌、大腸桿菌、美人魚(yú)發(fā)光桿菌殺魚(yú)亞種、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、腐敗希瓦菌, 鰻弧菌和副溶血性弧菌具有抑菌活性[8], 該報(bào)道與本研究結(jié)果相似。在黏液抗真菌實(shí)驗(yàn)中, 黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)實(shí)驗(yàn)采用的2種真菌孢子沒(méi)有明顯的抗性。真菌孢子的細(xì)胞壁較厚, 對(duì)環(huán)境的耐受力強(qiáng), 抗菌活性物質(zhì)很難對(duì)真菌孢子造成破壞, 至于黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液對(duì)其他真菌是否有抗菌活性有待研究。再有, 不同的黏液粗提溶劑對(duì)黏液的抗菌活性可能會(huì)產(chǎn)生影響。分別用純水、乙醇和二氯甲烷對(duì)13種魚(yú)類(lèi)的黏液進(jìn)行粗提, 發(fā)現(xiàn)這三種溶劑所提取的抗菌活性物質(zhì)的抗菌效果表現(xiàn)出明顯差異[10]。

黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液抗寄生蟲(chóng)和抗菌活性物質(zhì)可能為同一物質(zhì)。Wang, et al.發(fā)現(xiàn)純化的APP不僅對(duì)刺激隱核蟲(chóng)具有殺滅活性, 同時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有殺滅活性[1,6]。據(jù)此推測(cè), 黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液中的抗寄生蟲(chóng)因子可能同樣具有抗菌活性。迄今為止, 所發(fā)現(xiàn)的抗菌活性物質(zhì)同時(shí)對(duì)寄生蟲(chóng)具有抗性的種類(lèi)較少。目前發(fā)現(xiàn)了一些抗菌肽對(duì)利什曼原蟲(chóng)、瘧原蟲(chóng)以及阿米蟲(chóng)等具有抗性[11—13]。而在魚(yú)類(lèi)中, 從虹鱒分離到的類(lèi)組蛋白(Histone-like protein, HLP)對(duì)卵圓鞭毛蟲(chóng)有致死作用[14], 從雜交條紋鱸分離到的piscidin2對(duì)刺激隱核蟲(chóng)、車(chē)輪蟲(chóng)和卵圓鞭毛蟲(chóng)有致死作用, 斑點(diǎn)叉尾中類(lèi)似 Hbβ蛋白可以殺死多子小瓜蟲(chóng)[15], 這些蛋白只具有抗寄生蟲(chóng)活性。若黃斑藍(lán)子魚(yú)皮膚黏液中的抗寄生蟲(chóng)因子兼具抗菌活性, 其殺微生物機(jī)制值得進(jìn)一步研究。

在本研究中, 黃斑藍(lán)子魚(yú)黏液無(wú)論是對(duì)海水魚(yú)類(lèi)寄生蟲(chóng)、淡水魚(yú)類(lèi)寄生蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物寄生蟲(chóng)均表現(xiàn)出明顯的抗蟲(chóng)效果, 說(shuō)明它沒(méi)有抗寄生蟲(chóng)特異性,它是否對(duì)其他的寄生蟲(chóng)還有明顯的作用需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明。