李 巖，徐雪松

（1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，北京100050；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院）

流式細(xì)胞術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)中的實(shí)踐

李 巖1，徐雪松2

（1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，北京100050；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院）

流式細(xì)胞術(shù)是以免疫熒光標(biāo)記技術(shù)為基礎(chǔ)，集光電檢測(cè)技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)與單克隆抗體等技術(shù)為一體的現(xiàn)代檢測(cè)手段。該技術(shù)以其分辨率高、敏感性與特異性強(qiáng)、應(yīng)用范圍廣泛、技術(shù)密集度高等特點(diǎn)，現(xiàn)已成為臨床診斷與科研領(lǐng)域廣受好評(píng)與不可或缺的一項(xiàng)新技術(shù)。

目前，在臨床實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作中，對(duì)于這項(xiàng)新型的重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)，仍較少被列入高等醫(yī)學(xué)院校的常規(guī)教學(xué)安排中，本單位針對(duì)此現(xiàn)象，對(duì)于2009－2010級(jí)首都醫(yī)科大學(xué)、北華大學(xué)醫(yī)學(xué)部與哈爾濱醫(yī)科大學(xué)的共21名臨床檢驗(yàn)專業(yè)本科生，在其生產(chǎn)實(shí)習(xí)過(guò)程中安排了此項(xiàng)教學(xué)實(shí)踐，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 課程設(shè)計(jì)思路

由于流式細(xì)胞術(shù)是綜合了光學(xué)、電子學(xué)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)以及激光和計(jì)算機(jī)等多門(mén)學(xué)科和技術(shù)，因此涉及的知識(shí)點(diǎn)與基礎(chǔ)知識(shí)較多，而授課對(duì)象則是科研經(jīng)歷與臨床知識(shí)相對(duì)比較薄弱的大學(xué)本科學(xué)生，因此需要有所取舍、突出重點(diǎn)進(jìn)行講解。教學(xué)中，既要對(duì)相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)與概念進(jìn)行理論介紹與闡述，同時(shí)也應(yīng)安排相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)與見(jiàn)習(xí)時(shí)間使學(xué)生對(duì)這項(xiàng)技術(shù)手段有更直觀了解與切身的體會(huì)，從而有助于其對(duì)所學(xué)理論知識(shí)的認(rèn)識(shí)與深化，同時(shí)也能在實(shí)踐中提高學(xué)生的動(dòng)手操作能力與科研意識(shí)。因此我們將課程設(shè)計(jì)為理論課以及實(shí)驗(yàn)操作與見(jiàn)習(xí)課兩部分進(jìn)行。其中理論課教學(xué)以流式細(xì)胞術(shù)的基本概念、檢測(cè)原理、應(yīng)用領(lǐng)域等方面為重點(diǎn)進(jìn)行講解。實(shí)驗(yàn)操作與見(jiàn)習(xí)課則分別安排實(shí)驗(yàn)操作部分與實(shí)驗(yàn)報(bào)告解讀部分等內(nèi)容。目的是通過(guò)這些課程設(shè)計(jì)，幫助學(xué)生直觀的了解和認(rèn)識(shí)流式細(xì)胞術(shù)分析的全過(guò)程，從而為學(xué)生拓展思路、未來(lái)從事臨床與科研工作奠定基礎(chǔ)。

2 課程安排與授課要點(diǎn)

2.1 理論課教學(xué)：3學(xué)時(shí)

內(nèi)容包括流式細(xì)胞術(shù)基本概念、檢測(cè)原理、實(shí)驗(yàn)操作、結(jié)果分析、應(yīng)用領(lǐng)域等方面。其中流式細(xì)胞術(shù)所用儀器的檢測(cè)機(jī)理與應(yīng)用領(lǐng)域被作為講述重點(diǎn)。同時(shí)針對(duì)涉及到的基本概念也需要予以介紹。

流式細(xì)胞術(shù)所用儀器采用激光與電子技術(shù)，以單克隆抗體和熒光標(biāo)記技術(shù)為反應(yīng)體系，并用計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)并進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，具有檢測(cè)速度快、測(cè)量指標(biāo)多、采集數(shù)據(jù)量大、分析全面、方法靈活等特點(diǎn)，具有分析的精確性、特異性和靈敏度高的特點(diǎn)。此儀器結(jié)構(gòu)與技術(shù)復(fù)雜、先進(jìn)，且不易掌握。因此，應(yīng)制作形象直觀的儀器的結(jié)構(gòu)圖與檢測(cè)的流程圖，結(jié)合動(dòng)畫(huà)幻燈課件進(jìn)行講解，以期使學(xué)生對(duì)于技術(shù)要點(diǎn)得到直觀與形象的了解與認(rèn)識(shí)。

流式細(xì)胞術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)分析數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的大量細(xì)胞，因此，如何對(duì)于海量數(shù)據(jù)進(jìn)行后期分析，以及如何充分的發(fā)揮這項(xiàng)技術(shù)在臨床與科研活動(dòng)中的價(jià)值，則是授課工作中的難點(diǎn)。在授課過(guò)程中，應(yīng)將數(shù)據(jù)分析時(shí)不同細(xì)胞群的確認(rèn)與設(shè)門(mén)原則作為講解重點(diǎn)，對(duì)于不同細(xì)胞群的抗原表型的特點(diǎn)與分化規(guī)律，則應(yīng)抓住重點(diǎn)，避免面面俱到，應(yīng)以特殊細(xì)胞群的最有代表性的抗原特點(diǎn)進(jìn)行介紹，并密切結(jié)合舉例、圖表加以講解，重點(diǎn)闡述結(jié)果分析時(shí)的分析思路與判定原則。從而在有限的時(shí)間內(nèi)將分析的原則與重點(diǎn)傳授給學(xué)生。

2.2 實(shí)驗(yàn)與見(jiàn)習(xí)教學(xué)：6學(xué)時(shí)

實(shí)驗(yàn)操作：4學(xué)時(shí)

淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：包括樣本處理、抗體標(biāo)記、細(xì)胞分離、上機(jī)檢測(cè)、細(xì)胞群設(shè)門(mén)、結(jié)果確認(rèn)、報(bào)告分析與實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫(xiě)等。

本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作安排，以血液標(biāo)本中的淋巴細(xì)胞亞群檢查為思路，設(shè)計(jì)“正常人”標(biāo)本、免疫缺陷病患者標(biāo)本與免疫增殖性疾病患者標(biāo)本各1組，共3組實(shí)驗(yàn)，在2009級(jí)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)21名學(xué)生中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)安排，實(shí)驗(yàn)3個(gè)人為1組，共分7組進(jìn)行。

本課程在此部分所安排的教學(xué)內(nèi)容具有操作相對(duì)簡(jiǎn)易、技術(shù)較為成熟以及代表性強(qiáng)的特點(diǎn)。通過(guò)此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作，有助于學(xué)生直觀的了解和認(rèn)識(shí)流式細(xì)胞術(shù)的樣本制備、免疫標(biāo)記、儀器檢測(cè)與結(jié)果分析的全過(guò)程。

首先，指導(dǎo)教師先向?qū)W生系統(tǒng)性講授相關(guān)的知識(shí)要點(diǎn)，基本實(shí)驗(yàn)技能，講清操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)，并做必要的操作演示。然后，在教師的指導(dǎo)下，學(xué)生根據(jù)已經(jīng)掌握的基礎(chǔ)知識(shí)，親自動(dòng)手進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。在上機(jī)檢測(cè)并采集數(shù)據(jù)后，由教師指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行設(shè)門(mén)，檢測(cè)目的細(xì)胞群，并分析檢測(cè)結(jié)果，從而使學(xué)生對(duì)淋巴細(xì)胞亞群的特點(diǎn)與分析思路有了更直觀、全面的認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的融會(huì)貫通。

病例報(bào)告解讀：1學(xué)時(shí)：

解讀急性粒細(xì)胞性白血病2例，急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病、淋巴瘤與多發(fā)性骨髓瘤的骨髓標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果各1例，共6例。

在此部分教學(xué)，由帶教老師根據(jù)典型臨床病例的檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合學(xué)生所學(xué)的臨床基礎(chǔ)知識(shí)進(jìn)行講解與分析，突出知識(shí)點(diǎn)與診斷要點(diǎn)，將患者標(biāo)本所表現(xiàn)出的細(xì)胞分化抗原的特征行異常變化作為重點(diǎn)，聯(lián)系臨床表現(xiàn)進(jìn)行闡述。

提問(wèn)與討論：1學(xué)時(shí)。

通過(guò)師生互動(dòng)與交流，誘導(dǎo)學(xué)生能夠主動(dòng)聯(lián)系所學(xué)知識(shí)，緊跟老師思路，啟發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣并拓展思路，以期取得良好的教學(xué)效果。

3 教學(xué)考核

3.1 考核內(nèi)容

理論部分：占40%，包括基本概念、檢測(cè)原理、結(jié)果分析原則、應(yīng)用領(lǐng)域等。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：占30%。

病例分析：占30%，內(nèi)容包括淋巴細(xì)胞亞群、急、慢性白血病的檢測(cè)結(jié)果分析原則與結(jié)論。

3.2 考核結(jié)果

參與考核人數(shù)21人，90分以上3人，81－90分10人，71－80分7人，61－70分1人。合格率：100%。

4 討論

培養(yǎng)學(xué)生的科研素質(zhì)及創(chuàng)新精神、創(chuàng)新能力是深化高等醫(yī)學(xué)教育教學(xué)改革根本性的指導(dǎo)思想［1］，在實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)本科生及研究生的教學(xué)工作中開(kāi)設(shè)流式細(xì)胞術(shù)課程，有利于拓寬學(xué)生的視野和改善學(xué)生的知識(shí)結(jié)構(gòu)，提高學(xué)生的綜合素養(yǎng)、創(chuàng)新能力與科研素質(zhì)，有利于培養(yǎng)更多的合格人才。同時(shí)可以培養(yǎng)學(xué)生的自學(xué)能力與科研能力，是提高學(xué)生綜合能力的有效方法。

本次教學(xué)工作將流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)方法、免疫學(xué)中的抗原抗體反應(yīng)的基本原理、光電檢測(cè)技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、細(xì)胞化學(xué)與生物學(xué)、病理生理學(xué)等多門(mén)課程中的知識(shí)點(diǎn)聯(lián)系起來(lái)，讓學(xué)生體會(huì)到了知識(shí)的協(xié)調(diào)性、聯(lián)系性。調(diào)動(dòng)了學(xué)生的主觀能動(dòng)性，訓(xùn)練了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作技能，同時(shí)加深了學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解和掌握。教學(xué)過(guò)程中，教師講理論知識(shí)與實(shí)踐活動(dòng)密切結(jié)合，既考察理論重點(diǎn)、知識(shí)點(diǎn)的掌握，也注重指導(dǎo)教學(xué)實(shí)踐活動(dòng)中的動(dòng)手能力、理論聯(lián)系實(shí)際的能力、實(shí)驗(yàn)習(xí)慣、分析與解釋試驗(yàn)結(jié)果的能力等。通過(guò)撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，訓(xùn)練學(xué)生的邏輯思維能力和歸納總結(jié)能力。

本次實(shí)驗(yàn)選擇的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目與臨床和科研的關(guān)系相對(duì)密切，提高了學(xué)習(xí)的趣味性，增加了學(xué)生動(dòng)手的機(jī)會(huì)，培養(yǎng)了學(xué)生獨(dú)立思維能力與科研協(xié)作能力，幫助學(xué)生把多種不同學(xué)科的知識(shí)有機(jī)地融為一體，為未來(lái)的科研實(shí)驗(yàn)活動(dòng)打下基礎(chǔ)。

［1］王曉楠，吳正升，劉 淼.綜合性實(shí)驗(yàn)在病原生物學(xué)與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中應(yīng)用初探［J］.安徽醫(yī)藥，2012，16（6）：865.

2013－08－16）

1007－4287（2014）10－1740－02